НАРЕДБА № 1 ОТ 30 ОКТОМВРИ 2002 Г. ЗА ВЗЕМАНЕ НА ПРОБИ И МЕТОДИ ЗА АНАЛИЗ ЗА УСТАНОВЯВАНЕ НА СЪСТАВА НА ПРОДУКТИТЕ ПО ЗАКОНА ЗА ВИНОТО И СПИРТНИТЕ НАПИТКИ
НАРЕДБА № 1 ОТ 30 ОКТОМВРИ 2002 Г. ЗА ВЗЕМАНЕ НА ПРОБИ И МЕТОДИ ЗА АНАЛИЗ ЗА УСТАНОВЯВАНЕ НА СЪСТАВА НА ПРОДУКТИТЕ ПО ЗАКОНА ЗА ВИНОТО И СПИРТНИТЕ НАПИТКИ
Обн. ДВ. бр.11 от 5 Февруари 2003г., отм. ДВ. бр.99 от 9 Декември 2005г.
Отменена с параграф единствен от Постановление № 232 на Министерския съвет от 2 ноември 2005 г. за приемане на Наредба за контрола и координацията на контрола върху вината, спирта, дестилатите и спиртните напитки - ДВ, бр. 99 от 2005 г.
Глава първа.
ОБЩИ РАЗПОРЕДБИ
Чл. 1. (1) С тази наредба се уреждат:
1. редът и начинът за вземане на проби и за извършване на физико-химичен анализ;
2. методите за физико-химичен анализ на:
а) вина и продукти от грозде и вино;
б) спирт, дестилати и спиртни напитки.
(2) Редът и начинът за вземане на проби се прилагат и при извършване на органолептичен анализ.
Чл. 2. Физико-химичен анализ се извършва за:
1. установяване на състава на вино, продукти от грозде и вино, спирт, дестилати и спиртни напитки;
2. контролиране спазването на разрешените енологични практики и обработки и производствени манипулации.
Глава втора.
РЕД И НАЧИН ЗА ВЗЕМАНЕ НА ПРОБИ. МЕТОДИ ЗА АНАЛИЗ
Раздел I.
Ред и начин за вземане на проби
Чл. 3. За извършване на физико-химичен анализ на вина, продукти от грозде и вино, спирт, дестилати и спиртни напитки се взема проба.
Чл. 4. Приборите, инструментите и съдовете, които се използват за вземането на проби от напитките и продуктите по чл. 3, отговарят на следните условия:
1. изработени са или вътрешно са покрити с инертни в химическо отношение материали, разрешени за контакт с хранителни продукти, с антикорозионни свойства, устойчиви на въздействието на киселини, основи, дезинфекционни средства и други химически вещества;
2. не отделят вещества, влияещи върху химическия състав, които действат антисептично или променят органолептиката на продукта;
3. не създават условия за допълнително размножаване на бактерии, микроскопични гъбички и други и за образуване на техни токсини;
4. изолират продукта в достатъчна степен от възможности за вторично биологично или химично замърсяване;
5. чисти са, сухи, без механични замърсявания, здрави и осигуряват запазване целостта на пробата.
Чл. 5.(1) Проба от продукти или напитки, налети в съдове с вместимост до 5 литра, се оформя, като се вземат съдове от различни места на партидата. Броят на взетите съдове се определя от големината на производствената партида по приложение № 1.
(2) Проба от продукти или напитки, налети в съдове с вместимост над 5 литра, се оформя, като се вземат равни количества от горния, средния и долния слой на съдовете. Количествата се вземат с помощта на ливер, стъклена сонда с диаметър 15-25 mm или с бутилка, прикрепена на летва, чиято дължина е равна на дълбочината на съда. Ливерът, сондата или бутилката се изплакват със същия продукт или напитка непосредствено преди вземането на пробата.
(3) Количеството на пробата по ал. 2 не може да бъде по-малко от 7 литра.
Чл. 6. (1) Количеството от продукта или напитката, взето по реда на чл. 5, се смесва в общ, чист и сух съд с изключение на шумящите вина.
(2) Получената проба по ал. 1 се налива в не по-малко от 9 бутилки с вместимост 0,70/0,75 литра, изплакнати с продукта или напитката, от които е взета пробата. Бутилките по ал. 2 се затварят с тапа или друго повторно неизползваемо затварящо устройство съгласно приложение № 2 към чл. 9, ал. 2, т. 2 от Наредбата за придружителните документи при превоз на местни и вносни вина, продукти от грозде и вино, спирт, дестилати и спиртни напитки (ДВ, бр. 82 от 2001 г.).
(3) Бутилките по ал. 2 се разпределят по равен брой (не по-малко от 3 броя) в полиетиленови пликове съобразно предназначението им. Горният край на плика се сгъва под формата на хармоника, като сгънатата част се перфорира или прегъва. През перфорирания отвор или върху прегънатия край на плика се поставя пломба с етикет, която се стяга и захваща едновременно плика с етикета.
(4) Проба от шумящи вина се взема по реда на чл. 5, ал. 1, като бутилките се разпределят по реда на ал. 3.
(5) Пробата се маркира с етикет, на който се вписват следните означения:
1. наименование на напитката или продукта;
2. наименование, седалище и адрес на управление на производителя;
3. количество и номер на партидата;
4. дата и място на вземане на пробата;
5. подписи на лицата, взели пробата;
6. номер и дата на протокола за вземане на пробата.
Чл. 7. (1) Проба за извършване на физико-химичен анализ могат да вземат:
1. производителят;
2. упълномощени от министъра на икономиката длъжностни лица от дирекция "Регистрация, лицензиране и контрол";
3. упълномощени длъжностни лица от изпълнителния директор на Изпълнителната агенция по лозата и виното;
4. упълномощени длъжностни лица от изпълнителния директор на Комисията по търговия и защита на потребителите;
5. упълномощени длъжностни лица от министъра на здравеопазването;
6. упълномощени длъжностни лица от Агенция "Митници".
(2) Производителят взема проба от продуктите или напитките по чл. 3 преди пускането им на пазара за оформяне на партида с анализно свидетелство.
(3) Проба от продуктите или напитките по чл. 3 се взема в присъствието на лицето, което извършва производство и/или търговия, негов технолог или на упълномощено от него лице.
Чл. 8. (1) За всяка взета проба се съставя протокол. В протокола за вземане на пробата се вписват:
1. наименованието на фирмата, седалището и адресът на управление;
2. наименованието на контролния орган, седалището и адресът;
3. собственото, фамилното име, ЕГН и длъжността на лицата, взели пробата;
4. адресът на обекта, от който е взета пробата;
5. наименованието на напитката/продукта;
6. партидният номер и количеството на напитката/продукта;
7. анализното свидетелство на напитката/продукта, № и датата;
8. документът за заприходяване в склада на напитката/продукта, № и датата;
9. начинът на вземане на пробата;
10. предназначението и маркировката на пробата;
11. вместимостта и броят на съдовете от пробата по предназначение;
12. името, фамилията, ЕГН и длъжността на лицето, присъствало на вземането на пробата;
13. мястото и датата на вземане на пробата;
14. подписите на лицата, взели пробата;
15. декларацията на лицето, от което е взета пробата, по образец.
(2) Протоколът се съставя в три екземпляра по образец съгласно приложение № 2. Първият екземпляр от протокола остава в лицата по чл. 7, ал. 1, вторият екземпляр от протокола се изпраща в акредитирана лаборатория, в която ще се извършат изследванията. Третият екземпляр от протокола се съхранява от производителя или търговеца.
(3) В случай че лицето, присъствало при вземането на пробата, откаже да подпише протокола по ал. 1, това обстоятелство се отбелязва в него и се удостоверява с подпис на свидетел.
(4) Протоколът е официален документ. Вписаните в него обстоятелства се считат за верни до доказване на противното.
Чл. 9. Един от полиетиленовите пликове се изпраща за анализ в акредитираната лаборатория, към който се прилага екземпляр от протокола по чл. 8. Останалите два плика се разпределят между производителя и контролния орган, които се запазват за контролни цели и се съхраняват, добре затворени, в хоризонтално положение, в помещение при температура от 4 градуса С до 25 градуса С за срок 6 месеца.
Раздел II.
Методи за анализ
Чл. 10. (1) За извършване на физико-химичен анализ се използват методи за текущо определяне и сравнителни методи за анализ по приложение № 3 и/или приложение № 4.
(2) В случай че в приложение № 3 и приложение № 4 няма методи за анализ за откриване или определяне на съдържанието на вещество в даден продукт или напитка, се прилагат подходящи методи за анализ, признати от Генералната асамблея на Международната организация по лозата и виното.
(3) В случай че няма методи за анализ по ал. 2, се прилагат методи в съответствие с препоръките на Международната организация по стандартизация (ISO), а в случай на необходимост - и други подходящи методи.
(4) Автоматизирани методи за физико-химичен анализ се признават за еквивалентни на методите за анализ по приложение № 3 и приложение № 4, при условие че точността, повторяемостта и възпроизводимостта на резултатите са най-малко равни на резултатите, получени с методите за анализ по приложенията.
(5) Автоматизираните методи не се прилагат при оспорване на резултати от извършен физико-химичен анализ.
(6) Автоматизираните методи за измерване на плътност, които се основават на принципа на честотния осцилатор, се признават за еквивалентни на методите за анализ за измерване на плътност по приложение № 3.
Чл. 11. За вещества, при които е допустимо използване на сравнителни методи за анализ (арбитражни методи за анализ) и методи за текущо определяне (обикновени методи за анализ), определящи са резултатите, получени при използване на сравнителните методи за анализ.
Раздел III.
Условия за извършване на физико-химичен анализ
Чл. 12. Подготвената за анализ проба се съхранява при условия, които осигуряват предпазване от всякакво увреждане или разваляне.
Чл. 13. Преди извършване на физико-химичния анализ пробата се хомогенизира.
Чл. 14. При физико-химичния анализ за разреждане, за миене или за разтвори се използва дестилирана или деминерализирана вода със същата чистота.
Чл. 15. При физико-химичен анализ се използва воден разтвор, когато се извършва разтваряне или разреждане, без допълнително указание за употреба на реактив.
Чл. 16. За физико-химичен анализ се използват реактиви (вещества, препарати) с квалификация "чист за анализ" (ч.з.а.), освен ако не е предвидено друго.
Чл. 17. Техническите устройства, чрез които се извършва физико-химичен анализ, се състоят от апарати, предназначени за специфична употреба, и апарати, които отговарят на конкретни технически изисквания.
Чл. 18. При физико-химичния анализ се използва аналитична везна с минимална чувствителност от 0,1 mg.
Чл. 19. (1) Резултатите от физико-химичния анализ се изчисляват в грамове на хектолитър, освен ако не е предвидено друго.
(2) Всеки резултат се изразява с цифри, толкова на брой, колкото изисква точността на използвания метод за анализ.
(3) Крайният резултат от физико-химичния анализ представлява средна стойност от най-малко две определяния, които са били осъществени при посочената в приложение №3 и/или приложение № 4 повторяемост на съответния метод.
Раздел IV.
Анализно свидетелство
Чл. 20. Резултатите от физико-химичния анализ се отразяват в анализно свидетелство, издадено от акредитираната лаборатория, извършила анализа.
Чл. 21. (1) Анализното свидетелство съдържа:
1. наименование на акредитираната лаборатория; седалище, адрес на управление;
2. номер и дата на издаване на анализното свидетелство;
3. наименование на напитката/продукта за изпитване;
4. наименование на производителя/вносителя, седалище и адрес на управление;
5. описание на местонахождението на обекта, от който е взета пробата;
6. наименование на нормативния акт и/или № на техническата спецификация или стандарта, съгласно които се извършва производството;
7. номер и количество на партидата;
8. брой на изпитваните проби;
9. вид и вместимост на съда;
10. заприходителен документ от производство/внос, месец и година;
11. лице, заявило изпитването, номер и дата на протокола за вземане на проба;
12. начин на вземане на проба;
13. дата на получаване на пробите за изпитване;
14. наименование на показателите, физико-химични и/или микробиологични;
15. мерна единица на величината;
16. норма на показателя по действащ нормативен/стандартизационен документ;
17. резултати от изпитванията;
18. използван или използвани методи за анализ;
19. име и подпис на лицата, извършили анализа;
20. име и подпис на ръководителя на акредитираната лаборатория;
21. печат на акредитираната лаборатория, извършила анализа.
(2) Физико-химичните и микробиологичните показатели се попълват в зависимост от вида на анализирания продукт или напитка, от целите на анализа и използваните методи.
Допълнителни разпоредби
§ 1. По смисъла на тази наредба:
1. "Проба" е количеството вино, продукт от грозде и вино, спирт, дестилати и спиртна напитка, взета от оформена партида при условията на тази наредба.
2. "Повторяемост" е стойността, под която с определена вероятност може да се очаква, че попада абсолютната разлика между два единични резултата от изпитването на проби с един и същ метод, получени от идентични изследвани вещества, при еднакви условия (в същата лаборатория, от същото лице, при използване на същата апаратура, в рамките на кратки периоди от време).
3. "Възпроизводимост" е стойността, под която с определена вероятност може да се очаква, че попада абсолютната разлика между два единични резултата от изпитването на проби с един и същ метод, при различни условия (в различни лаборатории, от различни лица, при използване на различна апаратура, в различно време).
4. "Граница на повторяемост" е стойността, под която се намира с вероятност 95 % абсолютната стойност на разликата между два резултата от изпитване, получени при условията на повторяемост (в същата лаборатория, от същото лице, при използване на същата апаратура, в рамките на кратък интервал от време съгласно ISO 3534-1).
5. "Граница на възпроизводимост" е стойността, под която се намира с вероятност 95 % абсолютната стойност на разликата между два резултата от изпитване, получени при условията на възпроизводимост (в различни лаборатории, от различни лица, при използване на различна апаратура, в различно време съгласно ISO 3534-1).
6. "Единичен резултат от изследване на проби" е стойността, получена при пълното и еднократно прилагане на използвания метод за изследване върху единична проба.
7. "Определена вероятност" е вероятност, равна на 95%, освен когато е предвидено друго.
Заключителни разпоредби
§ 2. Изпълнението на наредбата се възлага на министъра на икономиката и министъра на земеделието и горите.
§ 3. Наредбата се приема на основание чл. 34, ал. 4 от Закона за виното и спиртните напитки и влиза в сила три месеца след обнародването й в "Държавен вестник".
Приложение № 1 към чл. 5, ал. 1
| Таблица за количествата на взетите проби от тихи вина, |
| продукти от грозде и вино и спиртни |
| напитки |
| Големина | Количество на взетите съдове |
| на партидата | (брой съдове) |
| (брой съдове) |
| за съдове | за съдове | за съдове | |
| с вместимост | с вместимост | с вместимост | |
| от 0,7 до 5 литра | от 0,5 до 0,7 литра | от 0,05 до 0,3 литра | |
| до 500 | до 5 %, но не по | до 5 %, но не по | до 10 %, но не по |
| малко от 10 | малко от 10 | малко от 30 | |
| до 1000 | до 2 %, но не по | до 2 %, но не по | до 5%, но не по |
| малко от 15 | малко от 15 | малко от 20 | |
| до 10 000 | до 1 %, но не | до 1 %, но не | до 1 %, но не |
| повече от 20 | повече от 20 | повече от 30 | |
| над 10 000 | до 30 | до 30 | до 40 |
| Таблица за количествата на взетите проби от шумящи вина |
| Големина на | ||
| партидата | Количество на взетите проби | Брой на анализираните |
| (брой бутилки) | (брой бутилки) | бутилки |
| до 500 | 6 | 3 |
| до 1000 | 7 | 3 |
| до 10 000 | 9 | 5 |
| над 10 000 | 11 | 7 |
Забележка. Проба за анализ не се оформя. Окачествяването се извършва на всяка бутилка поотделно, като средният резултат от анализите е валиден за партидата.
Приложение № 2 към чл. 8, ал. 2
| Вярното се задрасква с кръстче Х. Протоколът се съставя в три екземпляра |
| ПРОТОКОЛ ЗА ВЗЕМАНЕ НА ПРОБА |
| № ......../.............. г. |
| Производител/търговец | Лица, взели пробата: | |
| Седалище и адрес на управ- | (име, фамилия, ЕГН | |
| и длъжност) | ||
| Контролен орган | Наименование на контролния | |
| Седалище и адрес на контрол- | ||
| Партида № ................; бр. бут.: ...................; бр. съдове ............. по ............м3 |
| Анализно свидетелство № ....................................... дата: ......................................................... |
| 2. НАЧИН ЗА ВЗЕМАНЕ НА ПРОБАТА |
| а. използван уред: сонда (ливер); бутилка; чист, сух съд; |
| б. пробата взета от: цистерна; контейнер; потреб. опаковки; |
| в. пробата е предназначена за лабораторно изпитване |
| 3. ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ И МАРКИРОВКА НА ЛАБОРАТОРНАТА ПРОБА |
| ...... бр. бут. от 0,70/0,75 л за анализ в акредитирана лаборатория |
| ...... бр. бут. от 0,70/0,75 л за производителя/търговеца |
| ...... бр. бут. от 0,70/0,75 л за контролния орган |
| ...... пробата е маркирана с етикет съгласно чл. 6, ал. 5 от Наредбата за вземане на проби и методи за анализ |
| за установяване на състава на продуктите по Закона за виното и спиртните напитки |
| 4. ПРОБАТА Е ВЗЕТА В ПРИСЪСТВИЕТО НА: |
| производител/търговец упълномощено лице технолог(*) |
| 5. МЯСТО И ДАТА НА ВЗЕМАНЕ НА ПРОБАТА | Подписи на лицата, взели пробата: |
| ДЕКЛАРАЦИЯ |
| Присъствах при вземането на пробата и декларирам, че не възразявам срещу начина на вземане, количеството, |
| маркировката и осигуровката й. |
| Приемам контролната проба на подходящо съхранение. |
| Отказвам да подпиша протокола. |
| Място и дата Име и подпис на декларатора: |
(*) технолог - лицето, вписано в удостоверението/лицензията на производителя
Приложение № 3 към чл. 10, ал. 1
Методи за анализ на вина и продукти от грозде и вино
1. Определяне на плътността и относителната плътност при 20 градуса С
1. Определение
Плътността е масата на единица обем вино или мъст при 20 градуса C. Тя се изразява в грамове на милилитър и се обозначава със символа r20 градуса C.
Относителната плътност при 20 градуса C (или относителната плътност 20 градуса C/20 градуса C) е отношението на масата на определен обем вино или мъст при 20 градуса C към масата на същия обем вода при същата температура, изразено чрез десетично число. Обозначава се със символа d.
2. Принцип на метода
Плътността и относителната плътност при 20 градуса C се измерват на проба за анализ чрез:
• пикнометър-сравнителен метод;
• ареометрия с използване на хидростатични везни - обикновени методи.
Забележка. За много точно измерване плътността трябва да бъде коригирана с отчитане на ефекта на серния диоксид, като се използва формулата:
r20 градуса C = r"20 градуса C -0,0006 S,
където:
r20 градуса C - коригираната плътност;
r"20 градуса C - наблюдаваната плътност;
S - общото количество серен диоксид в грамове на литър.
3. Предварителна обработка на пробата
Ако виното или продуктът от грозде и вино съдържа значителни количества въглероден диоксид, по-голямата част от него се отстранява чрез разбъркване на 250 ml от пробата в 1000 ml колба или чрез филтриране под вакуум с 2 g памучна вата, поставена в тръба-удължител.
4. Сравнителен метод
4.1. Апаратура
Обикновено лабораторно оборудване, в частност:
4.1.1. Пикнометър Pyrex /Могат да бъдат използвани други еквивалентни пикнометри/ с вместимост приблизително 100 ml, с подвижен термометър, прикрепен чрез съединителен елемент от шлифовано стъкло, калибриран в десети от градуса в интервала от 10 до 30 градуса C. Термометърът трябва да бъде стандартизиран (фигурата).
Фиг. Пикнометърът и неговият тариран флакон
Пикнометърът има странична тръба с дължина 25 mm и максимален вътрешен диаметър 1 mm, завършваща с коничен шлифован съединителен елемент. На тази странична тръба може да бъде поставена резервоарна пробка, състояща се от конична тръба със съединителна част от шлифовано стъкло и завършваща с изтеглена навън част. Тази пробка служи за разширителна камера.
Двете съединения от шлифовано стъкло към апарата следва да бъдат изработени много прецизно.
4.1.2. Тарираният флакон се състои от съд със същия външен обем (с точност 1 ml) както пикнометъра и с маса, равна на масата на пикнометъра, напълнен с течност с относително тегло 1,01 [разтвор на натриев хлорид 2,0 % (m/v)].
Термоизолиран съд, който съответства точно на корпуса на пикнометъра.
4.1.3. Двублюдна везна с обхват поне 300 g и с чувствителност 0,1 mg или везни с едно блюдо с обхват поне 200 g и с чувствителност 0,1 mg.
4.2. Калибриране на пикнометъра
Калибрирането на пикнометъра включва определяне на:
- тарата на празния пикнометър;
- обема на пикнометъра при 20 градуса C;
- масата на запълнения с вода пикнометър при 20 градуса C.
4.2.1. Метод с използване на баланс на двублюдна везна
Тарираният флакон се поставя върху лявото блюдо на везните, а чистият и сух пикнометър с поставена резервоарна пробка-върху дясното блюдо. Към блюдото, в което се намира пикнометърът, се добавят тежести и се записва теглото p грама.
Пикнометърът с дестилирана вода с температура на околната среда се напълва и се поставя термометърът; пикнометърът се избърсва до сухо и се поставя в термично изолирания съд. Съдържанието му се разбърква чрез обръщане на съда, докато температурните показания на термометъра не станат постоянни. Наглася се точно нивото на горния ръб на страничната тръба. Страничната тръба се подсушава и се поставя резервоарната пробка; отчита се температурата t градуса C и ако е необходимо, се коригира неточността на температурната скала. Запълненият с вода пикнометър се претегля по отношение на тарата и се записва теглото p' (в грамове).
Изчисление (Пример за изчисления е даден в т. 6 на този раздел):
Тариране на празния пикнометър:
Тарата за празния пикнометър е: p+m, където
m е масата на съдържащия се в пикнометъра въздух; m = 0,0012 (p-p').
Обемът при 20 градуса C: V20 градуса C = (p + m-p') Ft , където:
Ft е коефициент, който се взема от таблица I за температура t градуса C.
V20 градуса C трябва да се знае с точност до ± 0,001 ml.
Масата на водата при 20 градуса C:
M20 градуса C = 0,998203 V20 градуса C, където:
0,998203 е плътността на водата при 20 градуса C.
4.2.2. Метод с използване на везни с едно блюдо
Определяне на:
• масата на чистия и сух пикнометър-P;
• масата на запълнения с вода пикнометър при t градуса C, следвайки процедурата, описана в т. 4.2.1-P1;
• масата на тарирания флакон-T0.
Изчисления (Пример за изчисления е даден в т. 6 на този раздел):
Отчитане на противотежестта за празния пикнометър:
Тарата на празния пикнометър е = P-m, където:
m е масата на съдържащия се в пикнометъра въздух;
m = 0,0012 (P1-P).
Обемът при 20 градуса C:
V20 градуса C = [P1-(P-m)]Ft, където:
F е коефициент, който се взема от таблица I за температура t градуса C.
Обемът при 20 градуса C трябва да се знае с точност до ±0,001 ml.
Масата на водата при 20 градуса C:
M20 градуса C = 0,998203 V20 градуса C , където:
0,998203 е плътността на водата при 20 градуса C.
4.3. Метод чрез измерване
4.3.1. Метод с използване на баланс на двублюдна везна
Пикнометърът с пробата, подготвена за анализ съгласно т.3, се претегля и се следва процедурата, описана в т. 4.2.1.
Ако p" е теглото в грамове, необходимо, за да се установи равновесие при t градуса C, масата на течността, която се съдържа в пикнометъра, e p + m-p".
Измерена плътност при t градуса C:
| p + m-p" | |
| rt градуса C = | ________________. |
| V20 градуса C |
Плътността при 20 градуса C се изчислява, като се използва една от дадените коригиращи таблици в съответствие с вида на измерваната течност: сухо вино (таблица II), естествена или концентрирана мъст (таблица III), сладко вино (таблица IV).
Oтносителната плътност на виното 20 градуса C/20 градуса C се изразява, като плътността на виното при 20 градуса C се раздели на 0,998203.
4.3.2. Метод с използване на везни с едно блюдо
Тарираният флакон се претегля и се приема, че масата му е равна на Т1.
dT се изчислява по формулата dT=Т1-Т0.
Масата на празния пикнометър по време на измерването e P-m' + dT.
Пикнометърът с пробата, подготвена за анализ съгласно т. 3, се претегля и се следва процедурата, описана в т. 4.2.1. Ако масата му при t градуса C е P2 - масата на течността, която се съдържа в пикнометъра при t градуса C, e = P2-(P-m + dT).
Плътността при t градуса C е:
| P2-(P-m + dT) | |
| rt градуса C = | _______________. |
| V20 градуса C |
Плътността на анализираната течност се изчислява при 20 градуса C: сухо вино, мъст - естествена или концентрирана, сладко вино, както е описано в т. 4.3.1.
Относителната плътност 20 градуса C/20 градуса C се изчислява, като плътността при 20 градуса C се раздели на 0,998203.
4.3.3. Повторяемостта на измерването на плътността:
при сухи и полусладки вина r = 0,00010,
а за сладки вина r = 0,00018.
4.3.4. Възпроизводимостта на измерването на плътността:
при сухи и полусладки вина R = 0,00037,
а за сладки вина R = 0,00045.
5. Обикновени методи
5.1. Ареометрия
5.1.1. Апаратура
5.1.1.1. Ареометър
По отношение на техните размери и градуиране ареометрите трябва да отговарят на стандартите на ISO.
Те трябва да имат цилиндричен резервоар и продълговата част с кръгло напречно сечение и с минимален диаметър 3 mm. За сухите вина те трябва да бъдат градуирани от 0,983 до 1,003, с маркировка на всеки 0,0010 и 0,0002. Всяка маркировка на 0,0010 трябва да бъде отдалечена от следващата съответна маркировка на минимум 5 mm. За измерване на плътността на обезалкохолени вина, сладки вина или мъст трябва да се използва набор от 5 ареометъра, градуирани от 1,000 до 1,030; 1,030 до 1,060; 1,060 до 1,090; 1,090 до 1,120 и 1,120 до 1,150. Тези ареометри трябва да бъдат градуирани по отношение на плътността при 20 градуса C с маркировка поне на всеки 0,0010 и 1,0005, като всяка маркировка на 0,0010 трябва да бъде отдалечена от следващата съответна маркировка на минимум 3 mm.
Тези ареометри трябва да са градуирани по такъв начин, че показанията да се отчитат на върха на минискуса. Върху градуираната скала или на хартиения цилиндър вътре в резервоара трябва да има указания за градуирането на плътността или на относителното тегло при 20 градуса C и за отчитането по горния край на минискуса. Ареометрите трябва да бъдат калибрирани от компетентен държавен орган, извършващ акредитация на лабораториите.
5.1.1.2. Калибриран термометър, градуиран на минимални интервали 0,5 градуса C.
5.1.1.3. Измервателен цилиндър с вътрешен диаметър 36 mm и височина 320 mm, поддържан вертикално от опорни нивелиращи винтове.
5.1.2. Начин на работа
Техника на измерване
В мерителния цилиндър се наливат 250 ml от пробата за анализ, приготвена съгласно т. 5.1.1.3, и в него се вкарват термометърът и ареометърът. Отчита се температурата една минута след старателно разбъркване на пробата, за да се получи изравняване на температурата. Термометърът се изважда и се отчита измерената от ареометъра плътност при t градуса С след интервал от още една минута.
След това измерената плътност при t градуса C се коригира за 20 градуса C с помощта на таблиците, приложими в случаите на сухи вина (таблица V), мъст (таблица VI) или вина, съдържащи захар (таблица VII).
Относителната плътност 20 градуса C/20 градуса C се получава, като плътността при 20 градуса C се раздели на 0,998203.
5.2. Измерване на плътността с помощта на хидростатични везни
5.2.1. Апаратура
Хидростатични везни
Хидростатични везни с максимален товар най-малко 100 g и с чувствителност 0,1 mg.
Под всяко плато се закрепва поплавък от стъкло Pyrex (огнеупорно стъкло), с обем най-малко 20 ml, чрез окачване с нишка с диаметър не по-голям от 0,1 mm. Окаченият под дясното блюдо поплавък трябва да може да влезе в мерителния цилиндър, който има маркировка, посочваща нивото. Вътрешният диаметър на мерителния цилиндър трябва да е с поне 6 mm по-голям от този на поплавъка. Поплавъкът трябва да може да попада изцяло в обема на мерителния цилиндър, намиращ се под маркировката. Повърхността на измерваната течност да се пресича само от поддържащата нишка. Температурата на течността в мерителния цилиндър се измерва с помощта на термометър, градуиран със стъпка 0,2 градуса C.
Могат да се използват и хидростатични везни с едно блюдо.
5.2.2. Начин на работа
5.2.2.1. Калибриране на хидростатичните везни
Двата поплавъка са във въздуха, везните се уравновесяват чрез поставяне на тежести в дясното блюдо. Записва се масата p.
Мерителният цилиндър се напълва с чиста вода до нивото на маркировката и се отчита температурата t градуса C след разклащане и престояване в продължение на две или три минути.
Равновесието на везните се възстановява чрез поставяне на тежести в дясното блюдо. Ако масата на тези тежести е p', обемът на поплавъка при 20 градуса C се изчислява по формулата: V20 градуса C = (p'-p)(F + 0,0012), където:
F е коефициентът, посочен в таблица I за температура t градуса C;
p и V20 градуса C са характеристиките на поплавъка.
5.2.2.2. Метод на измерване
Десният поплавък се потапя в мерителния цилиндър, който е напълнен с вино (или мъст) до нивото на маркировката. Отчита се температурата t градуса C на виното (или мъстта) и се записва.
p" е масата, необходима за установяване на равновесие на везните.
Измерената плътност rt градуса C се изчислява по формулата:
| (p"-p) | ||
| rt градуса C = | + 0,0012. | |
| V |
Тази плътност се коригира за 20 градуса C с помощта на таблици II, III или IV, ако поплавъкът е от стъкло Pyrex.
6. Пример за изчисляване на плътността при 20 градуса C и относителната плътност (20 градуса C/20 градуса C) (сравнителен метод)
6.1. Пикнометрия с използване на равновесие с двублюдна везна
6.1.1. Калибриране на пикнометъра:
1. Претегляне на чистия и сух пикнометър:
Тарата = пикнометър + p
p = 104,9454 g.
2. Претегляне на пикнометъра, напълнен с вода при t градуса C:
Тарата = пикнометър + вода + p'
p' = 1,2396 g при t 20,5 градуса C
3. Изчисляване масата на съдържащия се в пикнометъра въздух:
m= 0,0012 (p-p')
m = 0,0012 (104,9454-1,2396) = 0,1244 g.
4. Специфични стойности, които следва да бъдат записани:
Тарата на празния пикнометър, p + m:
p + m = 104,9454 + 0,1244 = 105,0698 g.
Обемът при 20 градуса C е = (p + m-p') F t градуса C
F 20,5 градуса C = 1,001900
V 20 градуса C= (105,0698-1,2396) 1,001900 = 104,0275 ml
Масата на водата при 20 градуса C е = 0,998203 V20 градуса C
M 20 градуса C = 103,8405 g.
6.1.2. Определяне на плътността и на относителната плътност при 20 градуса C/20 градуса C на сухо вино.
p" = 1,2622 при 17,80 градуса C
| 105,0698-1,2622 | ||
| r17,80 градуса C = | = 0,99788 g/ml. | |
| 104,0275 |
Таблица II позволява да се изчисли r20 градуса C, започвайки от rt градуса C, като се използва зависимостта:
| c | |
| r20 градуса C = rt градуса C ± | _____. |
| 1000 |
За t = 17,80 градуса C и за алкохолна концентрация 11 об.% от таблицата се отчита c = 0,54
| 0,54 | ||
| r20 градуса C = 0,99788 | = 0,99734 g/ml | |
| 1000 |
| 0,99734 | ||
| d = | = 0,99913. | |
| 0,998203 |
6.2. Пикнометрия с използване на везни с едно блюдо
6.2.1. Калибриране на пикнометъра:
1. Теглото на чистия и сух пикнометър:
P = 67,7913 g.
2. Теглото на пикнометъра, напълнен с вода при t градуса C:
P1 = 169,2715 при 21,65 градуса C
3. Масата на съдържащия се в пикнометъра въздух:
m = 0,0012 (P1-P)
m = 0,0012 • 101,4802 = 0,1218 g.
4. Специфични стойности, които следва да бъдат запомнени:
Tарата на празния пикнометър е P-m:
P-m = 67,7913-0,1218 = 67,6695 g.
Обемът при 20 градуса C = [P1-(P-m)]F t градуса C
F 21,65 градуса C = 1,002140
V 20 градуса C = (169,2715-67,6695) 1,002140
V 20 градуса C = 101,8194 ml
Масата на водата при 20 градуса C е M20 градуса C = 0,998203 V 20 градуса C
M20 градуса C = 101,6364 g
Масата на тарирания флакон - T0:
T0 = 171,9160 g.
6.2.2. Определяне на плътността и на относителното тегло при 20 градуса C/20 градуса C на сухо вино
T1 = 171,9178 g
dT = 171,9178-171,9160 = 0,0018 g
P-m + dT = 67,6695 + 0,0018 = 67,6713 g
P2 = 169,2799 при 18 градуса C
| 169,2799-67,6713 | ||
| r18 градуса C = | = 0,99793 g/ml. | |
| 101,8194 |
Таблица II позволява да се изчисли r20 градуса C от rt градуса C, като се използва зависимостта:
| c | |
| r20 градуса C = rt градуса C ± | ______ . |
| 1000 |
За t = 18 градуса C и за алкохолна концентрация 11 об.% от таблицата се отчита c = 0,49
| 0,49 | ||
| r20 градуса C = 0,99793 - | = 0,99744 g/ml | |
| 1000 |
| 0,99744 | ||
| d = | = 0,99923. | |
| 0,998203 |
| Таблица № I |
| Фактор F, с който се умножава масата на водата в пикнометъра, измерена при t °С, за да се |
| преизчисли обемът на пикнометъра при 20 °C |
| F | t °C | F | t °C | F | t °C | F | t °C | F | t °C | F | t °C | F | ||
| 10,0 | 1,000398 | 13,0 | 1,000691 | 16,0 | 1,001097 | 19,0 | 1,001608 | 22,0 | 1,002215 | 25,0 | 1,002916 | 28,0 | 1,003704 | |
| ,1 | 1,000406 | ,1 | 1,000703 | ,1 | 1,001113 | ,1 | 1,001627 | ,1 | 1,002238 | ,1 | 1,002941 | ,1 | 1,003731 | |
| ,2 | 1,000414 | ,2 | 1,000714 | ,2 | 1,001128 | ,2 | 1,001646 | ,2 | 1,002260 | ,2 | 1,002966 | ,2 | 1,003759 | |
| ,3 | 1,000422 | ,3 | 1,000726 | ,3 | 1,001144 | ,3 | 1,001665 | ,3 | 1,002282 | ,3 | 1,002990 | ,3 | 1,003787 | |
| ,4 | 1,000430 | ,4 | 1,000738 | ,4 | 1,001159 | ,4 | 1,001684 | ,4 | 1,002304 | ,4 | 1,003015 | ,4 | 1,003815 | |
| 10,5 | 1,000439 | 13,5 | 1,000752 | 16,5 | 1,001175 | 19,5 | 1,001703 | 22,5 | 1,002326 | 25,5 | 1,003041 | 28,5 | 1,003843 | |
| ,6 | 1,000447 | ,6 | 1,000764 | ,6 | 1,001191 | ,6 | 1.001722 | ,6 | 1,002349 | ,6 | 1,003066 | ,6 | 1,003871 | |
| Т | ,7 | 1,000456 | ,7 | 1,000777 | ,7 | 1,001207 | ,7 | 1,001741 | ,7 | 1,002372 | ,7 | 1,003092 | ,7 | 1,003899 |
| е | ,8 | 1,000465 | ,8 | 1,000789 | ,8 | 1,001223 | ,8 | 1,001761 | ,8 | 1,002394 | ,8 | 1,003117 | ,8 | 1,003928 |
| м | ,9 | 1,000474 | ,9 | 1,000803 | ,9 | 1,001239 | ,9 | 1,001780 | ,9 | 1,002417 | ,9 | 1,003143 | ,9 | 1,003956 |
| п | 11,0 | 1,000483 | 14,0 | 1,000816 | 17,0 | 1,001257 | 20,0 | 1,001800 | 23,0 | 1,002439 | 26,0 | 1,003168 | 29,0 | 1,003984 |
| е | ,1 | 1,000492 | ,1 | 1,000829 | ,1 | 1,001273 | ,1 | 1,001819 | ,1 | 1,002462 | ,1 | 1,003194 | ,1 | 1,004013 |
| р | ,2 | 1,000501 | ,2 | 1,000842 | ,2 | 1,001290 | ,2 | 1,001839 | ,2 | 1,002485 | ,2 | 1,003222 | ,2 | 1,004042 |
| а | ,3 | 1,000511 | ,3 | 1,000855 | ,3 | 1,001306 | ,3 | 1,001859 | ,3 | 1,002508 | ,3 | 1,003247 | ,3 | 1,004071 |
| т | ,4 | 1,000520 | ,4 | 1,000868 | ,4 | 1,001323 | ,4 | 1,001880 | ,4 | 1,002531 | ,4 | 1,003273 | ,4 | 1,004099 |
| у | 11,5 | 1,000530 | 14,5 | 1,000882 | 17,5 | 1,001340 | 20,5 | 1,001900 | 23,5 | 1,002555 | 26,5 | 1,003299 | 29,5 | 1,004128 |
| р | ,6 | 1,000540 | ,6 | 1,000895 | ,6 | 1,001357 | ,6 | 1,001920 | ,6 | 1,002578 | ,6 | 1,003326 | ,6 | 1,004158 |
| а | ,7 | 1,000550 | ,7 | 1,000909 | ,7 | 1,001374 | ,7 | 1,001941 | ,7 | 1,002602 | ,7 | 1,003352 | ,7 | 1,004187 |
| ,8 | 1,000560 | ,8 | 1,000923 | ,8 | 1,001391 | ,8 | 1,001961 | ,8 | 1,002625 | ,8 | 1,003379 | ,8 | 1,004216 | |
| в | ,9 | 1,000570 | ,9 | 1,000937 | ,9 | 1,001409 | ,9 | 1,001982 | ,9 | 1,002649 | ,9 | 1,003405 | ,9 | 1,004245 |
| 12,0 | 1,000580 | 15,0 | 1,000951 | 18,0 | 1,001427 | 21,0 | 1,002002 | 24,0 | 1,002672 | 27,0 | 1,003432 | 30,0 | 1,004275 | |
| °C | ,1 | 1,000591 | ,1 | 1,000965 | ,1 | 1,001445 | ,1 | 1,002023 | ,1 | 1,002696 | ,1 | 1,003458 | ||
| ,2 | 1,000601 | ,2 | 1,000979 | ,2 | 1,001462 | ,2 | 1,002044 | ,2 | 1,002720 | ,2 | 1,003485 | |||
| ,3 | 1,000612 | ,3 | 1,000993 | ,3 | 1,001480 | ,3 | 1,002065 | ,3 | 1,002745 | ,3 | 1,003513 | |||
| ,4 | 1,000623 | ,4 | 1,001008 | ,4 | 1,001498 | ,4 | 1,002086 | ,4 | 1,002769 | ,4 | 1,003540 | |||
| 12,5 | 1,000634 | 15,5 | 1,001022 | 18,5 | 1,001516 | 21,5 | 1,002107 | 24,5 | 1,002793 | 27,5 | 1,003567 | |||
| ,6 | 1,000645 | ,6 | 1,001037 | ,6 | 1,001534 | ,6 | 1,002129 | ,6 | 1,002817 | ,6 | 1,003594 | |||
| ,7 | 1,000656 | ,7 | 1,001052 | ,7 | 1,001552 | ,7 | 1,002151 | ,7 | 1,002842 | ,7 | 1,003621 | |||
| ,8 | 1,000668 | ,8 | 1,001067 | ,8 | 1,001570 | ,8 | 1,002172 | ,8 | 1,002866 | ,8 | 1,003649 | |||
| ,9 | 1,000679 | ,9 | 1,001082 | ,9 | 1,001589 | ,9 | 1,002194 | ,9 | 1,002891 | ,9 | 1,003676 |
Таблица № II
Температурна корекция (с) на плътността на сухо вино и обезалкохолено вино, измерена с пикнометър от Pyrex при t градуса С, за да се отнесе резултатът към 20 градуса C
| c | |
| r20 = rt ± | ---- , |
| 1000 |
- изважда се, ако t градуса C е по-ниска от 20 градуса С
- добавя се, ако t градуса С е по-висока от 20 градуса С
| Алкохол в об.% |
| 0 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | ||
| 10 | 1,59 | 1,64 | 1,67 | 1,71 | 1,77 | 1,84 | 1,91 | 2,01 | 2,11 | 2,22 | 2,34 | 2,46 | 2,60 | 2,73 | 2,88 | 3,03 | 3,19 | 3,35 | 3,52 | 3,70 | 3,87 | 4,06 | 4,25 | 4,44 | |
| 11 | 1,48 | 1,53 | 1,56 | 1,60 | 1,64 | 1,70 | 1,77 | 1,86 | 1,95 | 2,05 | 2,16 | 2,27 | 2,38 | 2,51 | 2,63 | 2,77 | 2,91 | 3,06 | 3,21 | 3,36 | 3,53 | 3,69 | 3,86 | 4,03 | |
| 12 | 1,36 | 1,40 | 1,43 | 1,46 | 1,50 | 1,56 | 1,62 | 1,69 | 1,78 | 1,86 | 1,96 | 2,05 | 2,16 | 2,27 | 2,38 | 2,50 | 2,62 | 2,75 | 2,88 | 3,02 | 3,16 | 3,31 | 3,46 | 3,61 | |
| Т | 13 | 1,22 | 1,26 | 1,28 | 1,32 | 1,35 | 1,40 | 1,45 | 1,52 | 1,59 | 1,67 | 1,75 | 1,83 | 1,92 | 2,01 | 2,11 | 2,22 | 2,32 | 2,44 | 2,55 | 2,67 | 2,79 | 2,92 | 3,05 | 3,18 |
| е | 14 | 1,08 | 1,11 | 1,13 | 1,16 | 1,19 | 1,23 | 1,27 | 1,33 | 1,39 | 1,46 | 1,52 | 1,60 | 1,67 | 1,75 | 1,84 | 1,93 | 2,03 | 2,11 | 2,21 | 2,31 | 2,42 | 2,52 | 2,63 | 2,74 |
| м | 15 | 0,92 | 0,96 | 0,97 | 0,99 | 1,02 | 1,05 | 1,09 | 1,13 | 1,19 | 1,24 | 1,30 | 1,36 | 1,42 | 1,48 | 1,55 | 1,63 | 1,70 | 1,78 | 1,86 | 1,95 | 2,03 | 2,12 | 2,21 | 2,30 |
| п | 16 | 0,76 | 0,79 | 0,80 | 0,81 | 0,84 | 0,86 | 0,89 | 0,93 | 0,97 | 1,01 | 1,06 | 1,10 | 1,16 | 1,21 | 1,26 | 1,32 | 1,38 | 1,44 | 1,51 | 1,57 | 1,64 | 1,71 | 1,78 | 1,85 |
| е | 17 | 0,59 | 0,61 | 0,62 | 0,63 | 0,65 | 0,67 | 0,69 | 0,72 | 0,75 | 0,78 | 0,81 | 0,85 | 0,88 | 0,95 | 0,96 | 1,01 | 1,05 | 1,11 | 1,15 | 1,20 | 1,25 | 1,30 | 1,35 | 1,40 |
| р | 18 | 0,40 | 0,42 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | 0,47 | 0,49 | 0,51 | 0,53 | 0,55 | 0,57 | 0,60 | 0,63 | 0,65 | 0,68 | 0,71 | 0,74 | 0,77 | 0,81 | 0,84 | 0,87 | 0,91 | 0,94 |
| а | 19 | 0,21 | 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,23 | 0,23 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,32 | 0,33 | 0,34 | 0,36 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,46 | 0,47 |
| т | 20 | ||||||||||||||||||||||||
| у | 21 | 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,23 | 0,23 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,40 | 0,41 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | 0,48 |
| р | 22 | 0,44 | 0,45 | 0,46 | 0,47 | 0,48 | 0,49 | 0,51 | 0,52 | 0,54 | 0,56 | 0,59 | 0,61 | 0,63 | 0,66 | 0,69 | 0,71 | 0,74 | 0,77 | 0,80 | 0,83 | 0,87 | 0,90 | 0,93 | 0,97 |
| а | 23 | 0,68 | 0,70 | 0,71 | 0,72 | 0,74 | 0,76 | 0,78 | 0,80 | 0,83 | 0,86 | 0,90 | 0,93 | 0,96 | 1,00 | 1,03 | 1,08 | 1,13 | 1,17 | 1,22 | 1,26 | 1,31 | 1,37 | 1,41 | 1,46 |
| 24 | 0,93 | 0,96 | 0,97 | 0,99 | 1,01 | 1,03 | 1,06 | 1,10 | 1,13 | 1,18 | 1,22 | 1,26 | 1,31 | 1,36 | 1,41 | 1,47 | 1,52 | 1,58 | 1,64 | 1,71 | 1,77 | 1,84 | 1,90 | 1,97 | |
| в | 25 | 1,19 | 1,23 | 1,25 | 1,27 | 1,29 | 1,32 | 1,36 | 1,40 | 1,45 | 1,50 | 1,55 | 1,61 | 1,67 | 1,73 | 1,80 | 1,86 | 1,93 | 2,00 | 2,08 | 2,16 | 2,24 | 2,32 | 2,40 | 2,48 |
| 26 | 1,47 | 1,51 | 1,53 | 1,56 | 1,59 | 1,62 | 1,67 | 1,72 | 1,77 | 1,83 | 1,90 | 1,96 | 2,03 | 2,11 | 2,19 | 2,27 | 2,35 | 2,44 | 2,53 | 2,62 | 2,72 | 2,81 | 2,91 | 3,01 | |
| ° C | 27 | 1,75 | 1,80 | 1,82 | 1,85 | 1,89 | 1,93 | 1,98 | 2,04 | 2,11 | 2,18 | 2,25 | 2,33 | 2,41 | 2,50 | 2,59 | 2,68 | 2,78 | 2,88 | 2,98 | 3,09 | 3,20 | 3,31 | 3,42 | 3,53 |
| 28 | 2,04 | 2,10 | 2,13 | 2,16 | 2,20 | 2,25 | 2,31 | 2,38 | 2,45 | 2,53 | 2,62 | 2,70 | 2,80 | 2,89 | 3,00 | 3,10 | 3,21 | 3,32 | 3,45 | 3,57 | 3,69 | 3,82 | 3,94 | 4,07 | |
| 29 | 2,34 | 2,41 | 2,44 | 2,48 | 2,53 | 2,58 | 2,65 | 2,72 | 2,81 | 2,89 | 2,99 | 3,09 | 3,19 | 3,30 | 3,42 | 3,53 | 3,65 | 3,78 | 3,92 | 4,05 | 4,19 | 4,33 | 4,47 | 4,61 | |
| 30 | 2,66 | 2,73 | 2,77 | 2,81 | 2,86 | 2,92 | 3,00 | 3,08 | 3,17 | 3,27 | 3,37 | 3,48 | 3,59 | 3,72 | 3,84 | 3,97 | 4,11 | 4,25 | 4,40 | 4,55 | 4,70 | 4,85 | 4,92 | 5,17 |
Забележка. Тази таблица може да се използва за преизчисляване на относителната плътност d'20 в d.
Таблица № III
Температурна корекция (с) на плътността на мъст и концентрирана мъст, измерена с пикнометър от Pyrex при t градуса С, за да се отнесе резултатът към 20 градуса C
| c | |
| r20 = rt ± | ______, |
| 1000 |
- изважда се, ако t градуса C е по-ниска от 20 градуса C
- добавя се, ако t градуса C е по-висока от 20 градуса С.
| Плътност |
| 1,05 | 1,06 | 1,07 | 1,08 | 1,09 | 1,10 | 1,11 | 1,12 | 1,13 | 1,14 | 1,15 | 1,16 | 1,18 | 1,20 | 1,22 | 1,24 | 1,26 | 1,28 | 1,30 | 1,32 | 1,34 | 1,36 | ||
| 10 ° | 2,31 | 2,48 | 2,66 | 2,82 | 2,99 | 3,13 | 3,30 | 3,44 | 3,59 | 3,73 | 3,88 | 4,01 | 4,28 | 4,52 | 4,76 | 4,98 | 5,18 | 5,42 | 5,56 | 5,73 | 5,90 | 6,05 | |
| Т | 11 ° | 2,12 | 2,28 | 2,42 | 2,57 | 2,72 | 2,86 | 2,99 | 3,12 | 3,25 | 3,37 | 3,50 | 3,62 | 3,85 | 4,08 | 4,29 | 4,48 | 4,67 | 4,84 | 5,00 | 5,16 | 5,31 | 5,45 |
| е | 12 ° | 1,92 | 2,06 | 2,19 | 2,32 | 2,45 | 2,58 | 2,70 | 2,82 | 2,94 | 3,04 | 3,15 | 3,26 | 3,47 | 3,67 | 3,85 | 4,03 | 4,20 | 4,36 | 4,51 | 4,65 | 4,78 | 4,91 |
| м | 13 ° | 1,72 | 1,84 | 1,95 | 2,06 | 2,17 | 2,27 | 2,38 | 2,48 | 2,58 | 2,69 | 2,78 | 2,88 | 3,05 | 3,22 | 3,39 | 3,55 | 3,65 | 3,84 | 3,98 | 4,11 | 4,24 | 4,36 |
| п | 14 ° | 1,52 | 1,62 | 1,72 | 1,81 | 1,90 | 2,00 | 2,09 | 2,17 | 2,26 | 2,34 | 2,43 | 2,51 | 2,66 | 2,82 | 2,96 | 3,09 | 3,22 | 3,34 | 3,45 | 3,56 | 3,67 | 3,76 |
| е | 15 ° | 1,28 | 1,36 | 1,44 | 1,52 | 1,60 | 1,67 | 1,75 | 1,82 | 1,89 | 1,96 | 2,04 | 2,11 | 2,24 | 2,36 | 2,48 | 2,59 | 2,69 | 2,79 | 2,88 | 2,97 | 3,03 | 3,10 |
| р | 16 ° | 1,05 | 1,12 | 1.18 | 1,25 | 1,31 | 1,37 | 1,43 | 1,49 | 1,55 | 1,60 | 1,66 | 1,71 | 1,81 | 1,90 | 2,00 | 2,08 | 2,16 | 2,24 | 2,30 | 2,37 | 2,43 | 2,49 |
| а | 17 ° | 0,80 | 0,86 | 0,90 | 0,95 | 1,00 | 1,04 | 1,09 | 1,13 | 1,18 | 1,22 | 1,26 | 1,30 | 1,37 | 1,44 | 1,51 | 1,57 | 1,62 | 1,68 | 1,72 | 1,76 | 1,80 | 1,84 |
| т | 18 ° | 0,56 | 0,59 | 0,62 | 0,66 | 0,68 | 0,72 | 0,75 | 0,77 | 0,80 | 0,83 | 0,85 | 0,88 | 0,93 | 0,98 | 1,02 | 1,05 | 1,09 | 1,12 | 1,16 | 1,19 | 1,21 | 1,24 |
| у | 19 ° | 0,29 | 0,31 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,37 | 0.39 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,45 | 0,48 | 0,50 | 0,52 | 0,54 | 0,56 | 0,57 | 0,59 | 0,60 | 0,61 | 0,62 |
| р | 20 ° | ||||||||||||||||||||||
| а | 21 ° | 0,29 | 0,30 | 0,32 | 0,34 | 0,35 | 0,37 | 0,38 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,46 | 0,48 | 0,50 | 0,53 | 0,56 | 0,58 | 0,59 | 0,60 | 0,61 | 0,62 | 0,62 |
| 22 ° | 0,58 | 0,61 | 0,64 | 0,67 | 0,70 | 0,73 | 0,76 | 0,79 | 0,81 | 0,84 | 0,87 | 0,90 | 0,96 | 1,00 | 1,05 | 1,09 | 1,12 | 1,15 | 1,18 | 1,20 | 1,22 | 1,23 | |
| в | 23 ° | 0,89 | 0,94 | 0,99 | 1,03 | 1,08 | 1,12 | 1,16 | 1,20 | 1,25 | 1,29 | 1,33 | 1,37 | 1,44 | 1,51 | 1,57 | 1,63 | 1,67 | 1,73 | 1,77 | 1,80 | 1,82 | 1,84 |
| 24 ° | 1,20 | 1,25 | 1,31 | 1,37 | 1,43 | 1,49 | 1,54 | 1,60 | 1,66 | 1,71 | 1,77 | 1,82 | 1,92 | 2,01 | 2,10 | 2,17 | 2,24 | 2,30 | 2,36 | 2,40 | 2,42 | 2,44 | |
| ° C | 25 ° | 1,51 | 1,59 | 1,66 | 1,74 | 1,81 | 1,88 | 1,95 | 2,02 | 2,09 | 2,16 | 2,23 | 2,30 | 2,42 | 2,53 | 2,63 | 2,72 | 2,82 | 2,89 | 2,95 | 2,99 | 3,01 | 3,05 |
| 26 ° | 1,84 | 1,92 | 2,01 | 2,10 | 2,18 | 2,26 | 2,34 | 2,42 | 2,50 | 2,58 | 2,65 | 2,73 | 2,87 | 3,00 | 3,13 | 3,25 | 3,36 | 3,47 | 3,57 | 3,65 | 3,72 | 3,79 | |
| 27 ° | 2,17 | 2,26 | 2,36 | 2,46 | 2,56 | 2,66 | 2,75 | 2,84 | 2,93 | 3,01 | 3,10 | 3,18 | 3,35 | 3,50 | 3,66 | 3,80 | 3,93 | 4,06 | 4,16 | 4,26 | 4,35 | 4,42 | |
| 28 ° | 2,50 | 2,62 | 2,74 | 2,85 | 2,96 | 3,07 | 3,18 | 3,28 | 3,40 | 3,50 | 3,60 | 3,69 | 3,87 | 4,04 | 4,21 | 4,36 | 4,50 | 4,64 | 4,75 | 4,86 | 4,94 | 5,00 | |
| 29 ° | 2,86 | 2,98 | 3,10 | 3,22 | 3,35 | 3,47 | 3,59 | 3,70 | 3,82 | 3,93 | 4,03 | 4,14 | 4,34 | 4,53 | 4,72 | 4,89 | 5,05 | 5,20 | 5,34 | 5,46 | 5,56 | 5,64 | |
| 30 ° | 3,20 | 3,35 | 3,49 | 3,64 | 3,77 | 3,91 | 4,05 | 4,17 | 4,30 | 4,43 | 4,55 | 4,67 | 4,90 | 5,12 | 5,39 | 5,51 | 5,68 | 5,84 | 5,96 | 6,08 | 6,16 | 6,22 |
Забележка. Тази таблица може да се използва за преизчисляване на относителната плътност d'20 в d.
Таблица IV
Температурна корекция (с) на плътността на вина с остатъчна захар, с алкохолно съдържание над 13 об.%, измерена с пикнометър от Pyrex при t градуса С, за да се отнесе резултатът към 20 градуса C
| c | |
| r20 = rt ± | ______, |
| 1000 |
- изважда се, ако t градуса C е по-ниска от 20 градуса С
- добавя се, ако t градуса C е по-висока от 20 градуса С.
| Алкохол 13 об.% | Алкохол 15 об.% | Алкохол 17 об.% | |
| плътност | плътност | плътност |
| 1,000 | 1,020 | 1,040 | 1,060 | 1,080 | 1,100 | 1,120 | 1,000 | 1,020 | 1,040 | 1,060 | 1,080 | 1,100 | 1,120 | 1,000 | 1,020 | 1,040 | 1,060 | 1,080 | 1,100 | 1,120 | ||
| 10 | 2,36 | 2,71 | 3,06 | 3,42 | 3,72 | 3,96 | 4,32 | 2,64 | 2,99 | 3,36 | 3,68 | 3,99 | 4,30 | 4,59 | 2,94 | 3,29 | 3,64 | 3,98 | 4,29 | 4,60 | 4,89 | |
| 11 | 2,17 | 2,49 | 2,80 | 2,99 | 3,39 | 3,65 | 3,90 | 2,42 | 2,73 | 3,05 | 3,34 | 3,63 | 3,89 | 4,15 | 2,69 | 3,00 | 3,32 | 3,61 | 3,90 | 4,16 | 4,41 | |
| Т | 12 | 1,97 | 2,25 | 2,53 | 2,79 | 3,05 | 3,29 | 3,52 | 2,19 | 2,47 | 2,75 | 3,01 | 3,27 | 3,51 | 3,73 | 2,42 | 2,70 | 2,98 | 3,24 | 3,50 | 3,74 | 3,96 |
| е | 13 | 1,78 | 2,02 | 2,25 | 2,47 | 2,69 | 2,89 | 3,09 | 1,97 | 2,21 | 2,44 | 2,66 | 2,87 | 3,08 | 3,29 | 2,18 | 2,42 | 2,64 | 2,87 | 3,08 | 3,29 | 3,49 |
| м | 14 | 1,57 | 1,78 | 1,98 | 2,16 | 2,35 | 2,53 | 2,70 | 1,74 | 1,94 | 2,14 | 2,32 | 2,52 | 2,69 | 2,86 | 1,91 | 2,11 | 2,31 | 2,50 | 2,69 | 2,86 | 3,03 |
| п | 15 | 1,32 | 1,49 | 1,66 | 1,82 | 1,97 | 2,12 | 2,26 | 1,46 | 1,63 | 1,79 | 1,95 | 2,10 | 2,25 | 2,39 | 1,60 | 1,77 | 1,93 | 2,09 | 2,24 | 2,39 | 2,53 |
| е | 16 | 1,08 | 1,22 | 1,36 | 1,48 | 1,61 | 1,73 | 1,84 | 1,18 | 1,32 | 1,46 | 1,59 | 1,71 | 1,83 | 1,94 | 1,30 | 1,44 | 1,58 | 1,71 | 1,83 | 1,95 | 2,06 |
| р | 17 | 0,83 | 0,94 | 1,04 | 1,13 | 1,22 | 1,31 | 1,40 | 0,91 | 1,02 | 1,12 | 1,21 | 1,30 | 1,39 | 1,48 | 1,00 | 1,10 | 1,20 | 1,30 | 1,39 | 1,48 | 1,56 |
| а | 18 | 0,58 | 0,64 | 0,71 | 0,78 | 0,84 | 0,89 | 0,95 | 0,63 | 0,69 | 0,76 | 0,83 | 0,89 | 0,94 | 1,00 | 0,69 | 0,75 | 0,82 | 0,89 | 0,95 | 1,00 | 1,06 |
| т | 19 | 0,30 | 0,34 | 0,37 | 0,40 | 0,43 | 0,46 | 0,49 | 0,33 | 0,37 | 0,40 | 0,43 | 0,46 | 0,49 | 0,52 | 0,36 | 0,39 | 0,42 | 0,46 | 0,49 | 0,52 | 0,54 |
| у | 20 | |||||||||||||||||||||
| р | 21 | 0,30 | 0,33 | 0,36 | 0,40 | 0,43 | 0,46 | 0,49 | 0,33 | 0,36 | 0,39 | 0,43 | 0,46 | 0,49 | 0,51 | 0,35 | 0,39 | 0,42 | 0,45 | 0,48 | 0,51 | 0,54 |
| а | 22 | 0,60 | 0,67 | 0,73 | 0,80 | 0,85 | 0,91 | 0,98 | 0,65 | 0,72 | 0,78 | 0,84 | 0,90 | 0,96 | 1,01 | 0,71 | 0,78 | 0,84 | 0,90 | 0,96 | 1,01 | 1,07 |
| 23 | 0,93 | 1,02 | 1,12 | 1,22 | 1,30 | 1,39 | 1,49 | 1,01 | 1,10 | 1,20 | 1,29 | 1,38 | 1,46 | 1,55 | 1,10 | 1,19 | 1,29 | 1,38 | 1,46 | 1,55 | 1,63 | |
| в | 24 | 1,27 | 1,39 | 1,50 | 1,61 | 1,74 | 1,84 | 1,95 | 1,37 | 1,49 | 1,59 | 1,72 | 1,84 | 1,95 | 2,06 | 1,48 | 1,60 | 1,71 | 1,83 | 1,95 | 2,06 | 2,17 |
| 25 | 1,61 | 1,75 | 1,90 | 2,05 | 2,19 | 2,33 | 2,47 | 1,73 | 1,87 | 2,02 | 2,17 | 2,31 | 2,45 | 2,59 | 1,87 | 2,01 | 2,16 | 2,31 | 2,45 | 2,59 | 2,73 | |
| °C | 26 | 1,94 | 2,12 | 2,29 | 2,47 | 2,63 | 2,79 | 2,95 | 2,09 | 2,27 | 2,44 | 2,62 | 2,78 | 2,94 | 3,10 | 2,26 | 2,44 | 2,61 | 2,79 | 2,95 | 3,11 | 3,26 |
| 27 | 2,30 | 2,51 | 2,70 | 2,90 | 3,09 | 3,27 | 3,44 | 2,48 | 2,68 | 2,87 | 3,07 | 3,27 | 3,45 | 3,62 | 2,67 | 2,88 | 3,07 | 3,27 | 3,46 | 3,64 | 3,81 | |
| 28 | 2,66 | 2,90 | 3,13 | 3,35 | 3,57 | 3,86 | 4,00 | 2,86 | 3,10 | 3,23 | 3,55 | 3,77 | 3,99 | 4,20 | 3,08 | 3,31 | 3,55 | 3,76 | 3,99 | 4,21 | 4,41 | |
| 29 | 3,05 | 3,31 | 3,56 | 3,79 | 4,04 | 4,27 | 4,49 | 3,28 | 3,53 | 3,77 | 4,02 | 4,26 | 4,49 | 4,71 | 3,52 | 3,77 | 4,01 | 4,26 | 4,50 | 4,73 | 4,95 | |
| 30 | 3,44 | 3,70 | 3,99 | 4,28 | 4,54 | 4,80 | 5,06 | 3,68 | 3,94 | 4,23 | 4,52 | 4,79 | 5,05 | 5,30 | 3,95 | 4,22 | 4,51 | 4,79 | 5,07 | 5,32 | 5,57 |
| Алкохол 19 об.% | Алкохол 21 об.% | |
| плътност | плътност |
| 1,000 | 1,020 | 1,040 | 1,060 | 1,080 | 1,100 | 1,120 | 1,000 | 1,020 | 1,040 | 1,060 | 1,080 | 1,100 | 1,120 | ||
| 10 | 3,27 | 3,62 | 3,97 | 4,30 | 4,62 | 4,92 | 5,21 | 3,62 | 3,97 | 4,32 | 4,66 | 4,97 | 5,27 | 5,56 | |
| 11 | 2,99 | 3,30 | 3,61 | 3,90 | 4,19 | 4,45 | 4,70 | 3,28 | 3,61 | 3,92 | 4,22 | 4,50 | 4,76 | 5,01 | |
| Т | 12 | 2,68 | 2,96 | 3,24 | 3,50 | 3,76 | 4,00 | 4,21 | 2,96 | 3,24 | 3,52 | 3,78 | 4,03 | 4,27 | 4,49 |
| е | 13 | 2,40 | 2,64 | 2,87 | 3,09 | 3,30 | 3,51 | 3,71 | 2,64 | 2,88 | 3,11 | 3,33 | 3,54 | 3,74 | 3,95 |
| м | 14 | 2,11 | 2,31 | 2,51 | 2,69 | 2,88 | 3,05 | 3,22 | 2,31 | 2,51 | 2,71 | 2,89 | 3,08 | 3,25 | 3,43 |
| п | 15 | 1,76 | 1,93 | 2,09 | 2,25 | 2,40 | 2,55 | 2,69 | 1,93 | 2,10 | 2,26 | 2,42 | 2,57 | 2,72 | 2,86 |
| е | 16 | 1,43 | 1,57 | 1,70 | 1,83 | 1,95 | 2,08 | 2,18 | 1,56 | 1,70 | 1,84 | 1,97 | 2,09 | 2,21 | 2,32 |
| р | 17 | 1,09 | 1,20 | 1,30 | 1,39 | 1,48 | 1,57 | 1,65 | 1,20 | 1,31 | 1,41 | 1,50 | 1,59 | 1,68 | 1,77 |
| а | 18 | 0,76 | 0,82 | 0,88 | 0,95 | 1,01 | 1,06 | 1,12 | 0,82 | 0,88 | 0,95 | 1,01 | 1,08 | 1,13 | 1,18 |
| т | 19 | 0,39 | 0,42 | 0,45 | 0,49 | 0,52 | 0,55 | 0,57 | 0,42 | 0,46 | 0,49 | 0,52 | 0,55 | 0,58 | 0,61 |
| у | 20 | ||||||||||||||
| р | 21 | 0,38 | 0,42 | 0,45 | 0,48 | 0,51 | 0,54 | 0,57 | 0,41 | 0,45 | 0,48 | 0,51 | 0,54 | 0,57 | 0,60 |
| а | 22 | 0,78 | 0,84 | 0,90 | 0,96 | 1,02 | 1,07 | 1,13 | 0,84 | 0,90 | 0,96 | 1,02 | 1,08 | 1,14 | 1,19 |
| 23 | 1,19 | 1,28 | 1,38 | 1,47 | 1,55 | 1,64 | 1,72 | 1,29 | 1,39 | 1,48 | 1,57 | 1,65 | 1,74 | 1,82 | |
| в | 24 | 1,60 | 1,72 | 1,83 | 1,95 | 2,06 | 2,18 | 2,29 | 1,73 | 1,85 | 1,96 | 2,08 | 2,19 | 2,31 | 2,42 |
| 25 | 2,02 | 2,16 | 2,31 | 2,46 | 2,60 | 2,74 | 2,88 | 2,18 | 2,32 | 2,47 | 2,62 | 2,76 | 2,90 | 3,04 | |
| °C | 26 | 2,44 | 2,62 | 2,79 | 2,96 | 3,12 | 3,28 | 3,43 | 2,53 | 2,81 | 2,97 | 3,15 | 3,31 | 3,47 | 3,62 |
| 27 | 2,88 | 3,08 | 3,27 | 3,42 | 3,66 | 3,84 | 4,01 | 3,10 | 3,30 | 3,47 | 3,69 | 3,88 | 4,06 | 4,23 | |
| 28 | 3,31 | 3,54 | 3,78 | 4,00 | 4,22 | 4,44 | 4,64 | 3,56 | 3,79 | 4,03 | 4,25 | 4,47 | 4,69 | 4,89 | |
| 29 | 3,78 | 4,03 | 4,27 | 4,52 | 4,76 | 4,99 | 5,21 | 4,06 | 4,31 | 4,55 | 4,80 | 5,04 | 5,27 | 5,48 | |
| 30 | 4,24 | 4,51 | 4,80 | 5,08 | 5,36 | 5,61 | 5,86 | 4,54 | 4,82 | 5,11 | 5,39 | 5,66 | 5,91 | 6,16 |
Таблица V
Температурна корекция (с) на плътността на сухо вино и обезалкохолено вино, измерена с пикнометър или ареометър от обикновено стъкло при t градуса С, за да се отнесе резултатът към 20 градуса C
| c | |
| r20 = rt ± | _____, |
| 1000 |
- изважда се, ако t градуса C е по-ниска от 20 градуса С
- добавя се, ако t градуса C е по-висока от 20 градуса С.
| Алкохол в об.% |
| 0 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | ||
| 10 | 1,45 | 1,51 | 1,55 | 1,58 | 1,64 | 1,70 | 1,78 | 1,88 | 1,98 | 2,09 | 2,21 | 2,34 | 2,47 | 2,60 | 2,75 | 2,90 | 3,06 | 3,22 | 3,39 | 3,57 | 3,75 | 3,93 | 4,12 | 4,31 | |
| 11 | 1,35 | 1,40 | 1,43 | 1,47 | 1,52 | 1,58 | 1,65 | 1,73 | 1,83 | 1,93 | 2,03 | 2,15 | 2,26 | 2,38 | 2,51 | 2,65 | 2,78 | 2,93 | 3,08 | 3,24 | 3,40 | 3,57 | 3,73 | 3,90 | |
| Т | 12 | 1,24 | 1,28 | 1,31 | 1,34 | 1,39 | 1,44 | 1,50 | 1,58 | 1,66 | 1,75 | 1,84 | 1,94 | 2,04 | 2,15 | 2,26 | 2,38 | 2,51 | 2,63 | 2,77 | 2,91 | 3,05 | 3,19 | 3,34 | 3,49 |
| е | 13 | 1,12 | 1,16 | 1,18 | 1,21 | 1,25 | 1,30 | 1,35 | 1,42 | 1,49 | 1,56 | 1,64 | 1,73 | 1,82 | 1,91 | 2,01 | 2,11 | 2,22 | 2,33 | 2,45 | 2,57 | 2,69 | 2,81 | 2,95 | 3,07 |
| м | 14 | 0,99 | 1,03 | 1,05 | 1,07 | 1,11 | 1,14 | 1,19 | 1,24 | 1,31 | 1,37 | 1,44 | 1,52 | 1,59 | 1,67 | 1,75 | 1,84 | 1,93 | 2,03 | 2,13 | 2,23 | 2,33 | 2,44 | 2,55 | 2,66 |
| п | 15 | 0,86 | 0,89 | 0,90 | 0,92 | 0,95 | 0,98 | 1,02 | 1,07 | 1,12 | 1,17 | 1,23 | 1,29 | 1,35 | 1,42 | 1,49 | 1,56 | 1,63 | 1,71 | 1,80 | 1,88 | 1,96 | 2,05 | 2,14 | 2,23 |
| е | 16 | 0,71 | 0,73 | 0,74 | 0,76 | 0,78 | 0,81 | 0,84 | 0,87 | 0,91 | 0,96 | 0,99 | 1,05 | 1,10 | 1,15 | 1,21 | 1,27 | 1,33 | 1,39 | 1,45 | 1,52 | 1,59 | 1,66 | 1,73 | 1,80 |
| р | 17 | 0,55 | 0,57 | 0,57 | 0,59 | 0,60 | 0,62 | 0,65 | 0,67 | 0,70 | 0,74 | 0,77 | 0,81 | 0,84 | 0,88 | 0,92 | 0,96 | 1,01 | 1,05 | 1,11 | 1,15 | 1,20 | 1,26 | 1,31 | 1,36 |
| а | 18 | 0,38 | 0,39 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | 0,48 | 0,50 | 0,52 | 0,55 | 0,57 | 0,60 | 0,62 | 0,65 | 0,68 | 0,71 | 0,74 | 0,78 | 0,81 | 0,85 | 0,88 | 0,91 |
| т | 19 | 0,19 | 0,20 | 0,20 | 0,21 | 0,21 | 0,22 | 0,23 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,32 | 0,33 | 0,35 | 0,36 | 0,38 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,44 | 0,46 |
| у | 20 | ||||||||||||||||||||||||
| р | 21 | 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,23 | 0,23 | 0,24 | 0,25 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,29 | 0,29 | 0,31 | 0,32 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,38 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | 0,48 |
| а | 22 | 0,43 | 0,45 | 0,45 | 0,46 | 0,47 | 0,49 | 0,50 | 0,52 | 0,54 | 0,56 | 0,58 | 0,60 | 0,63 | 0,65 | 0,68 | 0,71 | 0,73 | 0,77 | 0,80 | 0,83 | 0,86 | 0,89 | 0,93 | 0,96 |
| 23 | 0,67 | 0,69 | 0,70 | 0,71 | 0,72 | 0,74 | 0,77 | 0,79 | 0,82 | 0,85 | 0,88 | 0,91 | 0,95 | 0,99 | 1,03 | 1,07 | 1,12 | 1,16 | 1,21 | 1,25 | 1,30 | 1,35 | 1,40 | 1,45 | |
| в | 24 | 0,91 | 0,93 | 0,95 | 0,97 | 0,99 | 1,01 | 1,04 | 1,07 | 1,11 | 1,15 | 1,20 | 1,24 | 1,29 | 1,34 | 1,39 | 1,45 | 1,50 | 1,56 | 1,62 | 1,69 | 1,76 | 1,82 | 1,88 | 1,95 |
| 25 | 1,16 | 1,19 | 1,21 | 1,23 | 1,26 | 1,29 | 1,33 | 1,37 | 1,42 | 1,47 | 1,52 | 1,57 | 1,63 | 1,70 | 1,76 | 1,83 | 1,90 | 1,97 | 2,05 | 2,13 | 2,21 | 2,29 | 2,37 | 2,45 | |
| °C | 26 | 1,42 | 1,46 | 1,49 | 1,51 | 1,54 | 1,58 | 1,62 | 1,67 | 1,73 | 1,79 | 1,85 | 1,92 | 1,99 | 2,07 | 2,14 | 2,22 | 2,31 | 2,40 | 2,49 | 2,58 | 2,67 | 2,77 | 2,86 | 2,96 |
| 27 | 1,69 | 1,74 | 1,77 | 1,80 | 1,83 | 1,88 | 193 | 1,98 | 2,05 | 2,12 | 2,20 | 2,27 | 2,35 | 2,44 | 2,53 | 2,63 | 2,72 | 2,82 | 2,93 | 3,04 | 3,14 | 3,25 | 3,37 | 3,48 | |
| 28 | 1,97 | 2,03 | 2,06 | 2,09 | 2,14 | 2,19 | 2,24 | 2,31 | 2,38 | 2,46 | 2,55 | 2,63 | 2,73 | 2,83 | 2,93 | 3,03 | 3,14 | 3,26 | 3,38 | 3,50 | 3,62 | 3,75 | 3,85 | 4,00 | |
| 29 | 2,26 | 2,33 | 2,37 | 2,40 | 2,45 | 2,50 | 2,57 | 2,64 | 2,73 | 2,82 | 2,91 | 2,99 | 3,11 | 3,22 | 3,34 | 3,45 | 3,58 | 3,70 | 3,84 | 3,97 | 4,11 | 4,25 | 4,39 | 4,54 | |
| 30 | 2,56 | 2,64 | 2,67 | 2,72 | 2,77 | 2,83 | 2,90 | 2,98 | 3,08 | 3,18 | 3,28 | 3,38 | 3,50 | 3,62 | 3,75 | 3,88 | 4,02 | 4,16 | 4,30 | 4,46 | 4,61 | 4,76 | 4,92 | 5,07 |
Забележка. Тази таблица може да се използва за преизчисляване на относителната плътност d'20 в d.
Таблица VI
Температурна корекция (с) на плътността на мъст и концентрирана мъст, измерена с пикнометър или ареометър от обикновено стъкло при t градуса C, за да се отнесе резултатът към 20 градуса C
| c | |
| r20 = rt ± | |
| 1000 |
- изважда се, ако t градуса C е по-ниска от 20 градуса С
- добавя се, ако t градуса C е по-висока от 20 градуса С
| Плътност |
| 1,05 | 1,06 | 1,07 | 1,08 | 1,09 | 1,10 | 1,11 | 1,12 | 1,13 | 1,14 | 1,15 | 1,16 | 1,18 | 1,20 | 1,22 | 1,24 | 1,26 | 1,28 | 1,30 | 1,32 | 1,34 | 1,36 | ||
| 10 | 2,17 | 2,34 | 2,52 | 2,68 | 2,85 | 2,99 | 3,16 | 3,29 | 3,44 | 3,58 | 3,73 | 3,86 | 4,13 | 4,36 | 4,60 | 4,82 | 5,02 | 5,25 | 5,39 | 5,56 | 5,73 | 5,87 | |
| 11 | 2,00 | 2,16 | 2,29 | 2,44 | 2,59 | 2,73 | 2,86 | 2,99 | 3,12 | 3,24 | 3,37 | 3,48 | 3,71 | 3,94 | 4,15 | 4,33 | 4,52 | 4,69 | 4,85 | 5,01 | 5,15 | 5,29 | |
| 12 | 1,81 | 1,95 | 2,08 | 2,21 | 2,34 | 2,47 | 2,58 | 2,70 | 2,82 | 2,92 | 3,03 | 3,14 | 3,35 | 3,55 | 3,72 | 3,90 | 4,07 | 4,23 | 4,37 | 4,52 | 4,64 | 4,77 | |
| Т | 13 | 1,62 | 1,74 | 1,85 | 1,96 | 2,07 | 2,17 | 2,28 | 2,38 | 2,48 | 2,59 | 2,68 | 2,77 | 2,94 | 3,11 | 3,28 | 3,44 | 3,54 | 3,72 | 3,86 | 3,99 | 4,12 | 4,24 |
| е | 14 | 1,44 | 1,54 | 1,64 | 1,73 | 1,82 | 1,92 | 2,00 | 2,08 | 2,17 | 2,25 | 2,34 | 2,42 | 2,57 | 2,73 | 2,86 | 2,99 | 3,12 | 3,24 | 3,35 | 3,46 | 3,57 | 3,65 |
| м | 15 | 1,21 | 1,29 | 1,37 | 1,45 | 1,53 | 1,60 | 1,68 | 1,75 | 1,82 | 1,89 | 1,97 | 2,03 | 2,16 | 2,28 | 2,40 | 2,51 | 2,61 | 2,71 | 2,80 | 2,89 | 2,94 | 3,01 |
| п | 16 | 1,00 | 1,06 | 1,12 | 1,19 | 1,25 | 1,31 | 1,37 | 1,43 | 1,49 | 1,54 | 1,60 | 1,65 | 1,75 | 1,84 | 1,94 | 2,02 | 2,09 | 2,17 | 2,23 | 2,30 | 2,36 | 2,42 |
| е | 17 | 0,76 | 0,82 | 0,86 | 0,91 | 0,96 | 1,00 | 1,05 | 1,09 | 1,14 | 1,18 | 1,22 | 1,25 | 1,32 | 1,39 | 1,46 | 1,52 | 1,57 | 1,63 | 1,67 | 1,71 | 1,75 | 1,79 |
| р | 18 | 0,53 | 0,56 | 0,59 | 0,63 | 0,65 | 0,69 | 0,72 | 0,74 | 0,77 | 0,80 | 0,82 | 0,85 | 0,90 | 0,95 | 0,99 | 1,02 | 1,06 | 1,09 | 1,13 | 1,16 | 1,18 | 1,20 |
| а | 19 | 0,28 | 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,36 | 0,38 | 0,39 | 0,41 | 0,42 | 0,43 | 0,43 | 0,46 | 0,48 | 0,50 | 0,52 | 0,54 | 0,55 | 0,57 | 0,58 | 0,59 | 0,60 |
| т | 20 | ||||||||||||||||||||||
| у | 21 | 0,28 | 0,29 | 0,31 | 0,33 | 0,34 | 0,36 | 0,37 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | 0,48 | 0,51 | 0,54 | 0,56 | 0,57 | 0,58 | 0,59 | 0,60 | 0,60 |
| р | 22 | 0,55 | 0,58 | 0,61 | 0,64 | 0,67 | 0,70 | 0,73 | 0,76 | 0,78 | 0,81 | 0,84 | 0,87 | 0,93 | 0,97 | 1,02 | 1,06 | 1,09 | 1,12 | 1,15 | 1,17 | 1,19 | 1,19 |
| а | 23 | 0,85 | 0,90 | 0,95 | 0,99 | 1,04 | 1,08 | 1,12 | 1,16 | 1,21 | 1,25 | 1,29 | 1,32 | 1,39 | 1,46 | 1,52 | 1,58 | 1,62 | 1,68 | 1,72 | 1,75 | 1,77 | 1,79 |
| 24 | 1,15 | 1,19 | 1,25 | 1,31 | 1,37 | 1,43 | 1,48 | 1,54 | 1,60 | 1,65 | 1,71 | 1,76 | 1,86 | 1,95 | 2,04 | 2,11 | 2,17 | 2,23 | 2,29 | 2,33 | 2,35 | 2,37 | |
| в | 25 | 1,44 | 1,52 | 1,59 | 1,67 | 1,74 | 1,81 | 1,88 | 1,95 | 2,02 | 2,09 | 2,16 | 2,22 | 2,34 | 2,45 | 2,55 | 2,64 | 2,74 | 2,81 | 2,87 | 2,90 | 2,92 | 2,96 |
| 26 | 1,76 | 1,84 | 1,93 | 2,02 | 2,10 | 2,18 | 2,25 | 2,33 | 2,41 | 2,49 | 2,56 | 2,64 | 2,78 | 2,91 | 3,03 | 3,15 | 3,26 | 3,37 | 3,47 | 3,55 | 3,62 | 3,60 | |
| °C | 27 | 2,07 | 2,16 | 2,26 | 2,36 | 2,46 | 2,56 | 2,65 | 2,74 | 2,83 | 2,91 | 3,00 | 3,07 | 3,24 | 3,39 | 3,55 | 3,69 | 3,82 | 3,94 | 4,04 | 4,14 | 4,23 | 4,30 |
| 28 | 2,39 | 2,51 | 2,63 | 2,74 | 2,85 | 2,96 | 3,06 | 3,16 | 3,28 | 3,38 | 3,48 | 3,57 | 3,75 | 3,92 | 4,08 | 4,23 | 4,37 | 4,51 | 4,62 | 4,73 | 4,80 | 4,86 | |
| 29 | 2,74 | 2,86 | 2,97 | 3,09 | 3,22 | 3,34 | 3,46 | 3,57 | 3,69 | 3,80 | 3,90 | 4,00 | 4,20 | 4,39 | 4,58 | 4,74 | 4,90 | 5,05 | 5,19 | 5,31 | 5,40 | 5,48 | |
| 30 | 3,06 | 3,21 | 3,35 | 3,50 | 3,63 | 3,77 | 3,91 | 4,02 | 4,15 | 4,28 | 4,40 | 4,52 | 4,75 | 4,96 | 5,16 | 5,35 | 5,52 | 5,67 | 5,79 | 5,91 | 5,99 | 6,04 |
Забележка. Тази таблица може да се използва за преизчисляване на относителната плътност d'20 в d.
Таблица VII
Температурна корекция (с) на плътността на вина с остатъчна захар, с алкохолно съдържание 13 или повече об.%, измерена с пикнометър или ареометър от обикновено стъкло при t градуса С, за да се отнесе резултатът към 20 градуса C
| c | |
| r20 = rt ± | _____, |
| 1000 |
- изважда се, ако t градуса C е по ниска от 20 градуса С
- добавя се, ако t градуса C е по-висока от 20 градуса С.
| Алкохол 13 об.% | Алкохол 15 об.% | Алкохол 17 об.% | |
| плътност | плътност | плътност |
| 1,000 | 1,020 | 1,040 | 1,060 | 1,080 | 1,100 | 1,120 | 1,000 | 1,020 | 1,040 | 1,060 | 1,080 | 1,100 | 1,120 | 1,000 | 1,020 | 1,040 | 1,060 | 1,080 | 1,100 | 1,120 | ||
| 10 | 2,24 | 2,58 | 2,93 | 3,27 | 3,59 | 3,89 | 4,18 | 2,51 | 2,85 | 3,20 | 3,54 | 3,85 | 4,02 | 4,46 | 2,81 | 3,15 | 3,50 | 3,84 | 4,15 | 4,45 | 4,74 | |
| 11 | 2,06 | 2,37 | 2,69 | 2,97 | 3,26 | 3,53 | 3,78 | 2,31 | 2,61 | 2,93 | 3,21 | 3,51 | 3,64 | 4,02 | 2,57 | 2,89 | 3,20 | 3,49 | 3,77 | 4,03 | 4,28 | |
| 12 | 1,87 | 2,14 | 2,42 | 2,67 | 2,94 | 3,17 | 3,40 | 2,09 | 2,36 | 2,64 | 2,90 | 3,16 | 3,27 | 3,61 | 2,32 | 2,60 | 2,87 | 3,13 | 3,39 | 3,63 | 3,84 | |
| Т | 13 | 1,69 | 1,93 | 2,14 | 2,37 | 2,59 | 2,80 | 3,00 | 1,88 | 2,12 | 2,34 | 2,56 | 2,78 | 2,88 | 3,19 | 2,09 | 2,33 | 2,55 | 2,77 | 2,98 | 3,19 | 3,39 |
| е | 14 | 1,49 | 1,70 | 1,90 | 2,09 | 2,27 | 2,44 | 2,61 | 1,67 | 1,86 | 2,06 | 2,25 | 2,45 | 2,51 | 2,77 | 1,83 | 2,03 | 2,23 | 2,42 | 2,61 | 2,77 | 2,94 |
| м | 15 | 1,25 | 1,42 | 1,59 | 1,75 | 1,90 | 2,05 | 2,19 | 1,39 | 1,56 | 1,72 | 1,88 | 2,03 | 2,11 | 2,32 | 1,54 | 1,71 | 1,87 | 2,03 | 2,18 | 2,32 | 2,47 |
| п | 16 | 1,03 | 1,17 | 1,30 | 1,43 | 1,55 | 1,67 | 1,78 | 1,06 | 1,27 | 1,40 | 1,53 | 1,65 | 1,77 | 1,88 | 1,25 | 1,39 | 1,52 | 1,65 | 1,77 | 1,89 | 2,00 |
| е | 17 | 0,80 | 0,90 | 1,00 | 1,09 | 1,17 | 1,27 | 1,36 | 0,87 | 0,98 | 1,08 | 1,17 | 1,26 | 1,35 | 1,44 | 0,96 | 1,06 | 1,16 | 1,26 | 1,35 | 1,44 | 1,52 |
| р | 18 | 0,54 | 0,61 | 0,68 | 0,75 | 0,81 | 0,86 | 0,92 | 0,60 | 0,66 | 0,73 | 0,80 | 0,85 | 0,91 | 0,97 | 0,66 | 0,72 | 0,79 | 0,86 | 0,92 | 0,97 | 1,03 |
| а | 19 | 0,29 | 0,33 | 0,36 | 0,39 | 0,42 | 0,45 | 0,48 | 0,32 | 0,36 | 0,39 | 0,42 | 0,45 | 0,48 | 0,51 | 0,35 | 0,38 | 0,41 | 0,45 | 0,48 | 0,51 | 0,53 |
| т | 20 | |||||||||||||||||||||
| у | 21 | 0,29 | 0,32 | 0,35 | 0,39 | 0,42 | 0,45 | 0,47 | 0,32 | 0,35 | 0,38 | 0,42 | 0,45 | 0,48 | 0,50 | 0,34 | 0,38 | 0,41 | 0,44 | 0,47 | 0,50 | 0,53 |
| р | 22 | 0,57 | 0,64 | 0,70 | 0,76 | 0,82 | 0,88 | 0,93 | 0,63 | 0,69 | 0,75 | 0,81 | 0,87 | 0,93 | 0,98 | 0,68 | 0,75 | 0,81 | 0,87 | 0,93 | 0,99 | 1,04 |
| а | 23 | 0,89 | 0,98 | 1,08 | 1,17 | 1,26 | 1,34 | 1,43 | 0,97 | 1,06 | 1,16 | 1,25 | 1,34 | 1,42 | 1,51 | 1,06 | 1,15 | 1,25 | 1,34 | 1,42 | 1,51 | 1,59 |
| 24 | 1,22 | 1,34 | 1,44 | 1,56 | 1,68 | 1,79 | 1,90 | 1,32 | 1,44 | 1,54 | 1,66 | 1,78 | 1,89 | 2,00 | 1,43 | 1,56 | 1,65 | 1,77 | 1,89 | 2,00 | 2,11 | |
| в | 25 | 1,61 | 1,68 | 1,83 | 1,98 | 2,12 | 2,26 | 2,40 | 1,66 | 1,81 | 1,96 | 2,11 | 2,25 | 2,39 | 2,52 | 1,80 | 1,94 | 2,09 | 2,24 | 2,39 | 2,52 | 2,66 |
| 26 | 1,87 | 2,05 | 2,22 | 2,40 | 2,56 | 2,71 | 2,87 | 2,02 | 2,20 | 2,37 | 2,54 | 2,70 | 2,85 | 3,01 | 2,18 | 2,36 | 2,53 | 2,71 | 2,86 | 3,02 | 3,17 | |
| °C | 27 | 2,21 | 2,42 | 2,60 | 2,80 | 3,00 | 3,18 | 3,35 | 2,39 | 2,59 | 2,78 | 2,98 | 3,17 | 3,35 | 3,52 | 2,58 | 2,78 | 2,97 | 3,17 | 3,36 | 3,54 | 3,71 |
| 28 | 2,56 | 2,80 | 3,02 | 3,25 | 3,47 | 3,67 | 3,89 | 2,75 | 2,89 | 3,22 | 3,44 | 3,66 | 3,86 | 4,07 | 2,97 | 3,21 | 3,44 | 3,66 | 3,88 | 4,09 | 4,30 | |
| 29 | 2,93 | 3,19 | 3,43 | 3,66 | 3,91 | 4,14 | 4,37 | 3,16 | 3,41 | 3,65 | 3,89 | 4,13 | 4,36 | 4,59 | 3,40 | 3,66 | 3,89 | 4,13 | 4,38 | 4,61 | 4,82 | |
| 30 | 3,31 | 3,57 | 3,86 | 4,15 | 4,41 | 4,66 | 4,92 | 3,55 | 3,81 | 4,10 | 4,38 | 4,66 | 4,90 | 5,16 | 3,82 | 4,08 | 4,37 | 4,65 | 4,93 | 5,17 | 5,42 |
| Алкохол 19 об.% | Алкохол 21 об.% | |
| плътност | плътност |
| 1,000 | 1,020 | 1,040 | 1,060 | 1,080 | 1,100 | 1,120 | 1,000 | 1,020 | 1,040 | 1,060 | 1,080 | 1,100 | 1,120 | ||
| 10 | 3,14 | 3,48 | 3,83 | 4,17 | 4,48 | 4,78 | 5,07 | 3,50 | 3,84 | 4,19 | 4,52 | 4,83 | 5,12 | 5,41 | |
| Т | 11 | 2,87 | 3,18 | 3,49 | 3,78 | 4,06 | 4,32 | 4,57 | 3,18 | 3,49 | 3,80 | 4,09 | 4,34 | 4,63 | 4,88 |
| е | 12 | 2,58 | 2,86 | 3,13 | 3,39 | 3,65 | 3,88 | 4,10 | 2,86 | 3,13 | 3,41 | 3,67 | 3,92 | 4,15 | 4,37 |
| м | 13 | 2,31 | 2,55 | 2,77 | 2,99 | 3,20 | 3,41 | 3,61 | 2,56 | 2,79 | 3,01 | 3,23 | 3,44 | 3,65 | 3,85 |
| п | 14 | 2,03 | 2,23 | 2,43 | 2,61 | 2,80 | 2,96 | 3,13 | 2,23 | 2,43 | 2,63 | 2,81 | 3,00 | 3,16 | 3,33 |
| е | 15 | 1,69 | 1,86 | 2,02 | 2,18 | 2,33 | 2,48 | 2,62 | 1,86 | 2,03 | 2,19 | 2,35 | 2,50 | 2,65 | 2,80 |
| р | 16 | 1,38 | 1,52 | 1,65 | 1,78 | 1,90 | 2,02 | 2,13 | 1,51 | 1,65 | 1,78 | 1,91 | 2,03 | 2,15 | 2,26 |
| а | 17 | 1,06 | 1,16 | 1,26 | 1,35 | 1,44 | 1,53 | 1,62 | 1,15 | 1,25 | 1,35 | 1,45 | 1,54 | 1,63 | 1,71 |
| т | 18 | 0,73 | 0,79 | 0,85 | 0,92 | 0,98 | 1,03 | 1,09 | 0,79 | 0,85 | 0,92 | 0,98 | 1,05 | 1,10 | 1,15 |
| у | 19 | 0,38 | 0,41 | 0,44 | 0,48 | 0,51 | 0,52 | 0,56 | 0,41 | 0,44 | 0,47 | 0,51 | 0,54 | 0,57 | 0,59 |
| р | 20 | ||||||||||||||
| а | 21 | 0,37 | 0,41 | 0,44 | 0,47 | 0,50 | 0,53 | 0,56 | 0,41 | 0,44 | 0,47 | 0,51 | 0,54 | 0,57 | 0,59 |
| 22 | 0,75 | 0,81 | 0,87 | 0,93 | 0,99 | 1,04 | 1,10 | 0,81 | 0,88 | 0,94 | 1,00 | 1,06 | 1,10 | 1,17 | |
| в | 23 | 1,15 | 1,30 | 1,34 | 1,43 | 1,51 | 1,60 | 1,68 | 1,25 | 1,34 | 1,44 | 1,63 | 1,61 | 1,70 | 1,78 |
| 24 | 1,55 | 1,67 | 1,77 | 1,89 | 2,00 | 2,11 | 2,23 | 1,68 | 1,80 | 1,90 | 2,02 | 2,13 | 2,25 | 2,36 | |
| °С | 25 | 1,95 | 2,09 | 2,24 | 2,39 | 2,53 | 2,67 | 2,71 | 2,11 | 2,25 | 2,40 | 2,55 | 2,69 | 2,83 | 2,97 |
| 26 | 2,36 | 2,54 | 2,71 | 2,89 | 3,04 | 3,20 | 3,35 | 2,55 | 2,73 | 2,90 | 3,07 | 3,22 | 3,38 | 3,54 | |
| 27 | 2,79 | 2,99 | 3,18 | 3,38 | 3,57 | 3,75 | 3,92 | 3,01 | 3,20 | 3,40 | 3,59 | 3,78 | 3,96 | 4,13 | |
| 28 | 3,20 | 3,44 | 3,66 | 3,89 | 4,11 | 4,32 | 4,53 | 3,46 | 3,69 | 3,93 | 4,15 | 4,36 | 4,58 | 4,77 | |
| 29 | 3,66 | 3,92 | 4,15 | 4,40 | 4,64 | 4,87 | 5,08 | 3,95 | 4,20 | 4,43 | 4,68 | 4,92 | 5,15 | 5,36 | |
| 30 | 4,11 | 4,37 | 4,66 | 4,94 | 5,22 | 5,46 | 5,71 | 4,42 | 4,68 | 4,97 | 5,25 | 5,53 | 5,77 | 6,02 |
2. Определяне захарното съдържание на мъст, концентрирана мъст и концентрирана и ректифицирана гроздова мъст с рефрактометър
1. Принцип на метода
Коефициентът на пречупване при 20 градуса C, изразен като абсолютна стойност или като процент по отношение на масата на захарозата, е даден в съответната таблица с цел да може да бъде определена концентрацията на захарта в грамове на литър и в грамове на килограм за мъст, концентрирана и концентрирана и ректифицирана гроздова мъст.
2. Апаратура
2.1. Рефрактометър на ABBE
Използваният рефрактометър трябва да има скала, по която да се отчитат:
• процентът по отношение на масата на захарозата за 0,1%, или
• коефициентите на пречупване с точност до четвъртия десетичен знак.
Рефрактометърът трябва да е снабден с термометър, чиято скала трябва да обхваща поне интервала от +15 градуса C до +25 градуса C, както и с приспособление за циркулираща вода, което да дава възможност да се правят измервания при температура 20 ± 5 градуса C.
Трябва строго да се спазва инструкцията за работа с този апарат, особено по отношение на калибровката и на светлинния източник.
3. Подготовка на пробата за анализ
3.1. Мъст и концентрирана мъст
Mъстта се прекарва през суха марля, прегъната на четири, и след като се изхвърлят първите капки на филтрата, определението се извършва върху филтрувания продукт.
3.2. Ректифицирана и концентрирана мъст
В зависимост от концентрацията се използва или самата ректифицирана концентрирана мъст, или разтвор, получен чрез разреждане с вода на 200 g ректифицирана концентрирана мъст до 500 g, като всички измервания на теглото трябва да са точни.
4. Начин на работа
Температурата на пробата се довежда до около 20 градуса C. Поставя се малка проба за анализ върху долната призма на рефрактометъра (тъй като призмите са притиснати плътно една към друга), така че да покрие равномерно повърхността на стъклото. Прави се измерването съгласно работните указания за използвания уред.
Отчита се процентът по отношение на масата на захарозата с точност до 0,1% или коефициентът на рефракция с точност до четвъртия десетичен знак.
Правят се поне две измервания на всяка подготвена проба. Отбелязва се температурата, t градуса C.
5. Изчисления
5.1. Температурна корекция
5.1.1. Уреди, градуирани в проценти по отношение на масата на захарозата - за температурна корекция се използва таблица I.
5.1.2. Уреди, градуирани в коефициент на пречупва-не-от таблица II се намира коефициентът, измерен при t градуса C, за да се получи (колона 1) съответната стойност на масовия процент на захарозата при t градуса C. Тази стойност се коригира в зависимост от температурата и се изразява като концентрация при 20 градуса C с помощта на таблица I.
5.2. Концентрация на захари в мъст и в концентрирана мъст
От таблица II се определя процентът по отношение на масата на захарозата при 20 градуса C и от същия ред се определя концентрацията на захарите в грамове на литър и в грамове на килограм. Концентрацията на захарите се изразява в инвертна захар с точност до първия десетичен знак.
5.3. Концентрация на захарите в ректифицирана концентрирана мъст
От таблица III се определя процентът по отношение на масата на захарозата при 20 градуса C и от същия ред се определя концентрацията на захарите в грамове на литър и в грамове на килограм. Концентрацията на захарите се изразява в инвертна захар с точност до първия десетичен знак.
Ако измерването е направено върху разредена ректифицирана концентрирана мъст, резултатът се умножава с коефициента на разреждане.
5.4. Коефициент на пречупване на мъст, концентрирана мъст и ректифицирана концентрирана мъст
От таблица II се определя масата на захарозата при 20 градуса C и от същия ред се определя коефициентът на пречупване при 20 градуса C. Този коефициент се изразява с точност до четвъртия десетичен знак.
Таблица № I
Корекция, която следва да се направи в случаите, когато съдържанието на захарозата е определено при температура, различна от 20 градуса C
| Температура в °С | Захароза в g в 100 g от продукта |
| 5 | 10 | 15 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 | 70 | 75 |
| Изважда се |
| 15 | 0,25 | 0,27 | 0,31 | 0,31 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,36 | 0,36 |
| 16 | 0,21 | 0,23 | 0,27 | 0,27 | 0,29 | 0,31 | 0,31 | 0,32 | 0,31 | 0,23 |
| 17 | 0,16 | 0,18 | 0,20 | 0,20 | 0,22 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,20 | 0,17 |
| 18 | 0,11 | 0,12 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | 0,16 | 0,15 | 0,12 | 0,12 | 0,09 |
| 19 | 0,06 | 0,07 | 0,08 | 0,08 | 0,08 | 0,09 | 0,09 | 0,08 | 0,07 | 0,05 |
| Добавя се |
| 21 | 0,06 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,07 |
| 22 | 0,12 | 0,14 | 0,14 | 0,14 | 0,14 | 0,14 | 0,14 | 0,14 | 0,14 | 0,14 |
| 23 | 0,18 | 0,20 | 0,20 | 0,21 | 0,21 | 0,21 | 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,22 |
| 24 | 0,24 | 0,26 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,28 | 0,28 | 0,28 | 0,29 | 0,29 |
| 25 | 0,30 | 0,32 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,36 | 0,36 | 0,36 | 0,36 | 0,37 |
Варирането на температура спрямо 20градуса C не трябва да превишава ± 5градуса C.
Таблица II
Съдържание на захари (Съдържанието на захари е изразено като инвертна захар) в мъст и концентрирана мъст в грамове на литър и грамове за килограм, определени с рефрактометър, разграфен в масови % захароза, при 20 градуса C или в индекс на рефракция, при 20 градуса C. Плътността е определена при 20 градуса C
| Захароза, | Индекс | Плътност, | Захари, | Захари, | Алкохол, |
| в % | на ре- | при 20 градуса C | в g/l | в g/kg | |
| (m/m) | фрак- | при | |||
| ция, при | 20 градуса C | ||||
| 20 градуса C | |||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 10.0 | 1.34781 | 1.0390 | 82.3 | 79.2 | 4,89 |
| 10.1 | 1.34798 | 1.0394 | 83.4 | 80.2 | 4,95 |
| 10.2 | 1.34814 | 1.0398 | 84.5 | 81.3 | 5,02 |
| 10.3 | 1.34830 | 1.0402 | 85.6 | 82.2 | 5,09 |
| 10.4 | 1.34845 | 1.0406 | 86.6 | 83.2 | 5,14 |
| 10.5 | 1.34860 | 1.0410 | 87.6 | 84.1 | 5,20 |
| 10.6 | 1.34875 | 1.0414 | 88.6 | 85.1 | 5,26 |
| 10.7 | 1.34890 | 1.0419 | 89.7 | 86.1 | 5,33 |
| 10.8 | 1.34906 | 1.0423 | 90.8 | 87.1 | 5,39 |
| 10.9 | 1.34921 | 1.0427 | 91.8 | 88.1 | 5,45 |
| 11.0 | 1.34936 | 1.0431 | 92.9 | 89.1 | 5,52 |
| 11.1 | 1.34952 | 1.0435 | 94.0 | 90.0 | 5,58 |
| 11.2 | 1.34968 | 1.0439 | 95.0 | 91.0 | 5,64 |
| 11.3 | 1.34984 | 1.0443 | 96.1 | 92.0 | 5,71 |
| 11.4 | 1.34999 | 1.0447 | 97.1 | 92.9 | 5,77 |
| 11.5 | 1.35015 | 1.0452 | 98.2 | 94.0 | 5,83 |
| 11.6 | 1.35031 | 1.0456 | 99.3 | 95.0 | 5,90 |
| 11.7 | 1.35046 | 1.0460 | 100.3 | 95.9 | 5,96 |
| 11.8 | 1.35062 | 1.0464 | 101.4 | 96.9 | 6,02 |
| 11.9 | 1.35077 | 1.0468 | 102.5 | 97.9 | 6,09 |
| 12.0 | 1.35092 | 1.0473 | 103.6 | 98.9 | 6,15 |
| 12.1 | 1.35108 | 1.0477 | 104.7 | 99.9 | 6,22 |
| 12.2 | 1.35124 | 1.0481 | 105.7 | 100.8 | 6,28 |
| 12.3 | 1.35140 | 1.0485 | 106.8 | 101.9 | 6,35 |
| 12.4 | 1.35156 | 1.0489 | 107.9 | 102.9 | 6,41 |
| 12.5 | 1.35172 | 1.0494 | 109.0 | 103.8 | 6,47 |
| 12.6 | 1.35187 | 1.0498 | 110.0 | 104.8 | 6,53 |
| 12.7 | 1.35203 | 1.0502 | 111.1 | 105.8 | 6,60 |
| 12.8 | 1.35219 | 1.0506 | 112.2 | 106.8 | 6,66 |
| 12.9 | 1.35234 | 1.0510 | 113.2 | 107.8 | 6,73 |
| 13.0 | 1.35249 | 1.0514 | 114.3 | 108.7 | 6,79 |
| 13.1 | 1.35266 | 1.0519 | 115.4 | 109.7 | 6,86 |
| 13.2 | 1.35282 | 1.0523 | 116.5 | 110.7 | 6,92 |
| 13.3 | 1.35298 | 1.0527 | 117.6 | 111.7 | 6,99 |
| 13.4 | 1.35313 | 1.0531 | 118.6 | 112.6 | 7,05 |
| 13.5 | 1.35329 | 1.0536 | 119.7 | 113.6 | 7,11 |
| 13.6 | 1.35345 | 1.0540 | 120.8 | 114.6 | 7,18 |
| 13.7 | 1.35360 | 1.0544 | 121.8 | 115.6 | 7,24 |
| 13.8 | 1.35376 | 1.0548 | 122.9 | 116.5 | 7,30 |
| 13.9 | 1.35391 | 1.0552 | 124.0 | 117.5 | 7,37 |
| 14.0 | 1.35407 | 1.0557 | 125.1 | 118.5 | 7,43 |
| 14.1 | 1.35424 | 1.0561 | 126.2 | 119.5 | 7,50 |
| 14.2 | 1.35440 | 1.0565 | 127.3 | 120.5 | 7,56 |
| 14.3 | 1.35456 | 1.0569 | 128.4 | 121.5 | 7,63 |
| 14.4 | 1.35472 | 1.0574 | 129.5 | 122.5 | 7,69 |
| 14.5 | 1.35488 | 1.0578 | 130.6 | 123.4 | 7,76 |
| 14.6 | 1.35503 | 1.0582 | 131.6 | 124.4 | 7,82 |
| 14.7 | 1.35519 | 1.0586 | 132.7 | 125.4 | 7,88 |
| 14.8 | 1.35535 | 1.0591 | 133.8 | 126.3 | 7,95 |
| 14.9 | 1.35551 | 1.0595 | 134.9 | 127.3 | 8,01 |
| 15.0 | 1.35567 | 1.0599 | 136.0 | 128.3 | 8,08 |
| 15.1 | 1.35583 | 1.0603 | 137.1 | 129.3 | 8,15 |
| 15.2 | 1.35599 | 1.0608 | 138.2 | 130.3 | 8,21 |
| 15.3 | 1.35615 | 1.0612 | 139.3 | 131.3 | 8,27 |
| 15.4 | 1.35631 | 1.0616 | 140.4 | 132.3 | 8,34 |
| 15.5 | 1.35648 | 1.0621 | 141.5 | 133.2 | 8,41 |
| 15.6 | 1.35664 | 1.0625 | 142.6 | 134.2 | 8,47 |
| 15.7 | 1.35680 | 1.0629 | 143.7 | 135.2 | 8,54 |
| 15.8 | 1.35696 | 1.0633 | 144.8 | 136.2 | 8,60 |
| 15.9 | 1.35712 | 1.0638 | 145.9 | 137.2 | 8,67 |
| 16.0 | 1.35728 | 1.0642 | 147.0 | 138.1 | 8,73 |
| 16.1 | 1.35744 | 1.0646 | 148.1 | 139.1 | 8,80 |
| 16.2 | 1.35760 | 1.0651 | 149.2 | 140.1 | 8,86 |
| 16.3 | 1.35776 | 1.0655 | 150.3 | 141.1 | 8,93 |
| 16.4 | 1.35793 | 1.0660 | 151.5 | 142.1 | 9,00 |
| 16.5 | 1.35809 | 1.0664 | 152.6 | 143.1 | 9,06 |
| 16.6 | 1.35825 | 1.0668 | 153.7 | 144.1 | 9,13 |
| 16.7 | 1.35842 | 1.0672 | 154.8 | 145.0 | 9,20 |
| 16.8 | 1.35858 | 1.0677 | 155.9 | 146.0 | 9,26 |
| 16.9 | 1.35874 | 1.0681 | 157.0 | 147.0 | 9,33 |
| 17.0 | 1.35890 | 1.0685 | 158.1 | 148.0 | 9.39 |
| 17.1 | 1.35907 | 1.0690 | 159.3 | 149.0 | 9,46 |
| 17.2 | 1.35923 | 1.0694 | 160.4 | 150.0 | 9,53 |
| 17.3 | 1.35939 | 1.0699 | 161.5 | 151.0 | 9,59 |
| 17.4 | 1.35955 | 1.0703 | 162.6 | 151.9 | 9,66 |
| 17.5 | 1.35972 | 1.0707 | 163.7 | 152.9 | 9,73 |
| 17.6 | 1.35988 | 1.0711 | 164.8 | 153.9 | 9,79 |
| 17.7 | 1.36004 | 1.0716 | 165.9 | 154.8 | 9,86 |
| 17.8 | 1.36020 | 1.0720 | 167.0 | 155.8 | 9,92 |
| 17.9 | 1.36036 | 1.0724 | 168.1 | 156.8 | 9,99 |
| 18.0 | 1.36053 | 1.0729 | 169.3 | 157.8 | 10,06 |
| 18.1 | 1.36070 | 1.0733 | 170.4 | 158.8 | 10,12 |
| 18.2 | 1.36086 | 1.0738 | 171.5 | 159.7 | 10,19 |
| 18.3 | 1.36102 | 1.0742 | 172.6 | 160.7 | 10,25 |
| 18.4 | 1.36119 | 1.0746 | 173.7 | 161.6 | 10,32 |
| 18.5 | 1.36136 | 1.0751 | 174.9 | 162.6 | 10,39 |
| 18.6 | 1.36152 | 1.0755 | 176.0 | 163.6 | 10,46 |
| 18.7 | 1.36169 | 1.0760 | 177.2 | 164.6 | 10,53 |
| 18.8 | 1.36185 | 1.0764 | 178.3 | 165.6 | 10,59 |
| 18.9 | 1.36201 | 1.0768 | 179.4 | 166.6 | 10,66 |
| 19.0 | 1.36217 | 1.0773 | 180.5 | 167.6 | 10,72 |
| 19.1 | 1.36234 | 1.0777 | 181.7 | 168.6 | 10,80 |
| 19.2 | 1.36251 | 1.0782 | 182.8 | 169.5 | 10,86 |
| 19.3 | 1.36267 | 1.0786 | 183.9 | 170.5 | 10,93 |
| 19.4 | 1.36284 | 1.0791 | 185.1 | 171.5 | 11,00 |
| 19.5 | 1.36301 | 1.0795 | 186.3 | 172.5 | 11,07 |
| 19.6 | 1.36318 | 1.0800 | 187.4 | 173.5 | 11,13 |
| 19.7 | 1.36335 | 1.0804 | 188.6 | 174.5 | 11,21 |
| 19.8 | 1.36351 | 1.0809 | 189.7 | 175.5 | 11,27 |
| 19.9 | 1.36367 | 1.0813 | 190.8 | 176.5 | 11,34 |
| 20.0 | 1.36383 | 1.0817 | 191.9 | 177.4 | 11,40 |
| 20.1 | 1.36400 | 1.0822 | 193.1 | 178.4 | 11,47 |
| 20.2 | 1.36417 | 1.0826 | 194.2 | 179.4 | 11,54 |
| 20.3 | 1.36434 | 1.0831 | 195.3 | 180.4 | 11,60 |
| 20.4 | 1.36451 | 1.0835 | 196.5 | 181.4 | 11,67 |
| 20.5 | 1.36468 | 1.0840 | 197.7 | 182.3 | 11,75 |
| 20.6 | 1.36484 | 1.0844 | 198.8 | 183.3 | 11,81 |
| 20.7 | 1.36501 | 1.0849 | 200.0 | 184.3 | 11,88 |
| 20.8 | 1.36518 | 1.0853 | 201.1 | 185.3 | 11,96 |
| 20.9 | 1.36534 | 1.0857 | 202.2 | 186.2 | 12,01 |
| 21.0 | 1.36550 | 1.0862 | 203.3 | 187.2 | 12,08 |
| 21.1 | 1.36568 | 1.0866 | 204.5 | 188.2 | 12,15 |
| 21.2 | 1.36585 | 1.0871 | 205.7 | 189.2 | 12,22 |
| 21.3 | 1.36601 | 1.0875 | 206.8 | 190.2 | 12,29 |
| 21.4 | 1.36618 | 1.0880 | 207.9 | 191.1 | 12,35 |
| 21.5 | 1.36635 | 1.0884 | 209.1 | 192.1 | 12,42 |
| 21.6 | 1.36652 | 1.0889 | 210.3 | 193.1 | 12,49 |
| 21.7 | 1.36669 | 1.0893 | 211.4 | 194.1 | 12,56 |
| 21.8 | 1.36685 | 1.0897 | 212.5 | 195.0 | 12,63 |
| 21.9 | 1.36702 | 1.0902 | 213.6 | 196.0 | 12,69 |
| 22.0 | 1.36719 | 1.0906 | 214.8 | 196.9 | 12,76 |
| 22.1 | 1.36736 | 1.0911 | 216.0 | 198.0 | 12,83 |
| 22.2 | 1.36753 | 1.0916 | 217.2 | 199.0 | 12,90 |
| 22.3 | 1.36770 | 1.0920 | 218.3 | 199.9 | 12,97 |
| 22.4 | 1.36787 | 1.0925 | 219.5 | 200.9 | 13,04 |
| 22.5 | 1.36804 | 1.0929 | 220.6 | 201.8 | 13,11 |
| 22.6 | 1.36820 | 1.0933 | 221.7 | 202.8 | 13,17 |
| 22.7 | 1.36837 | 1.0938 | 222.9 | 203.8 | 13,24 |
| 22.8 | 1.36854 | 1.0943 | 224.1 | 204.8 | 13,31 |
| 22.9 | 1.36871 | 1.0947 | 225.2 | 205.8 | 13,38 |
| 23.0 | 1.36888 | 1.0952 | 226.4 | 206.7 | 13,45 |
| 23.1 | 1.36905 | 1.0956 | 227.6 | 207.7 | 13,52 |
| 23.2 | 1.36922 | 1.0961 | 228.7 | 208.7 | 13,59 |
| 23.3 | 1.36939 | 1.0965 | 229.9 | 209.7 | 13,66 |
| 23.4 | 1.36956 | 1.0970 | 231.1 | 210.7 | 13,73 |
| 23.5 | 1.36973 | 1.0975 | 232.3 | 211.6 | 13,80 |
| 23.6 | 1.36991 | 1.0975 | 233.4 | 212.6 | 13,87 |
| 23.7 | 1.37008 | 1.0984 | 234.6 | 213.6 | 13,94 |
| 23.8 | 1.37025 | 1.0988 | 235.8 | 214.6 | 14,01 |
| 23.9 | 1.37042 | 1.0993 | 237.0 | 215.6 | 14,08 |
| 24.0 | 1.37059 | 1.0998 | 238.2 | 216.6 | 14,15 |
| 24.1 | 1.37076 | 1.1007 | 239.3 | 217.4 | 14,22 |
| 24.2 | 1.37093 | 1.1011 | 240.3 | 218.2 | 14,28 |
| 24.3 | 1.37110 | 1.1016 | 241.5 | 219.4 | 14,35 |
| 24.4 | 1.37128 | 1.1022 | 243.0 | 219.5 | 14,44 |
| 24.5 | 1.37145 | 1.1026 | 244.0 | 221.3 | 14,50 |
| 24.6 | 1.37162 | 1.1030 | 245.0 | 222.1 | 14,56 |
| 24.7 | 1.37180 | 1.1035 | 246.4 | 223.2 | 14,64 |
| 24.8 | 1.37197 | 1.1041 | 247.7 | 224.4 | 14,72 |
| 24.9 | 1.37214 | 1.1045 | 248.7 | 225.2 | 14,78 |
| 25.0 | 1.37232 | 1.1049 | 249.7 | 226.0 | 14,84 |
| 25.1 | 1.37249 | 1.1053 | 250.7 | 226.8 | 14,90 |
| 25.2 | 1.37266 | 1.1057 | 251.7 | 227.6 | 14,96 |
| 25.3 | 1.37283 | 1.1062 | 253.0 | 228.7 | 15,03 |
| 25.4 | 1.37300 | 1.1068 | 254.4 | 229.9 | 15,11 |
| 25.5 | 1.37317 | 1.1072 | 255.4 | 230.7 | 15,17 |
| 25.6 | 1.37335 | 1.1076 | 256.4 | 231.5 | 15,23 |
| 25.7 | 1.37353 | 1.1081 | 257.8 | 232.6 | 15,32 |
| 25.8 | 1.37370 | 1.1087 | 259.1 | 233.7 | 15,39 |
| 25.9 | 1.37387 | 1.1091 | 260.1 | 234.5 | 15,45 |
| 26.0 | 1.37405 | 1.1095 | 261.1 | 235.3 | 15,51 |
| 26.1 | 1.37423 | 1.1100 | 262.5 | 236.4 | 15,60 |
| 26.2 | 1.37440 | 1.1106 | 263.8 | 237.5 | 15,67 |
| 26.3 | 1.37457 | 1.1110 | 264.8 | 238.3 | 15,73 |
| 26.4 | 1.37475 | 1.1114 | 265.8 | 239.2 | 15,79 |
| 26.5 | 1.37493 | 1.1119 | 267.2 | 240.3 | 15,88 |
| 26.6 | 1.37510 | 1.1125 | 268.5 | 241.4 | 15,95 |
| 26.7 | 1.37528 | 1.1129 | 269.5 | 242.2 | 16,01 |
| 26.8 | 1.37545 | 1.1133 | 270.5 | 243.0 | 16,07 |
| 26.9 | 1.37562 | 1.1138 | 271.8 | 244.1 | 16,15 |
| 27.0 | 1.37580 | 1.1144 | 273.2 | 245.2 | 16,23 |
| 27.1 | 1.37598 | 1.1148 | 274.2 | 246.0 | 16,29 |
| 27.2 | 1.37615 | 1.1152 | 275.2 | 246.8 | 16,35 |
| 27.3 | 1.37632 | 1.1157 | 276.5 | 247.9 | 16,43 |
| 27.4 | 1.37650 | 1.1163 | 277.9 | 249.0 | 16,51 |
| 27.5 | 1.37667 | 1.1167 | 278.9 | 249.8 | 16,57 |
| 27.6 | 1.37685 | 1.1171 | 279.9 | 250.6 | 16,63 |
| 27.7 | 1.37703 | 1.1176 | 281.3 | 251.6 | 16,71 |
| 27.8 | 1.37721 | 1.1182 | 282.6 | 252.7 | 16,79 |
| 27.9 | 1.37739 | 1.1186 | 283.6 | 253.5 | 16,85 |
| 28.0 | 1.37757 | 1.1190 | 284.6 | 254.3 | 16,91 |
| 28.1 | 1.37775 | 1.1195 | 286.0 | 255.4 | 16,99 |
| 28.2 | 1.37793 | 1.1201 | 287.3 | 256.5 | 17,07 |
| 28.3 | 1.37810 | 1.1205 | 288.3 | 257.3 | 17,13 |
| 28.4 | 1.37828 | 1.1209 | 289.3 | 258.1 | 17,19 |
| 28.5 | 1.37846 | 1.1214 | 290.7 | 259.2 | 17,27 |
| 28.6 | 1.37863 | 1.1220 | 292.0 | 260.3 | 17,35 |
| 28.7 | 1.37881 | 1.1224 | 293.0 | 261.0 | 17,41 |
| 28.8 | 1.37899 | 1.1228 | 294.0 | 261.8 | 17,47 |
| 28.9 | 1.37917 | 1.1233 | 295.3 | 262.9 | 17,55 |
| 29.0 | 1.37935 | 1.1239 | 296.7 | 264.0 | 17,63 |
| 29.1 | 1.37953 | 1.1244 | 298.1 | 265.1 | 17,71 |
| 29.2 | 1.37971 | 1.1250 | 299.4 | 266.1 | 17,79 |
| 29.3 | 1.37988 | 1.1254 | 300.4 | 266.9 | 17,85 |
| 29.4 | 1.38006 | 1.1258 | 301.4 | 267.7 | 17,91 |
| 29.5 | 1.38024 | 1.1263 | 302.8 | 268.8 | 17,99 |
| 29.6 | 1.38042 | 1.1269 | 304.1 | 269.9 | 18,07 |
| 29.7 | 1.38060 | 1.1273 | 305.1 | 270.6 | 18,13 |
| 29.8 | 1.38078 | 1.1277 | 306.1 | 271.4 | 18,19 |
| 29.9 | 1.38096 | 1.1282 | 307.4 | 272.5 | 18,26 |
| 30.0 | 1.38114 | 1.1288 | 308.8 | 273.6 | 18,35 |
| 30.1 | 1.38132 | 1.1293 | 310.0 | 274.5 | 18,42 |
| 30.2 | 1.38150 | 1.1298 | 311.2 | 275.5 | 18,49 |
| 30.3 | 1.38168 | 1.1302 | 312.4 | 276.4 | 18,56 |
| 30.4 | 1.38186 | 1.1307 | 313.6 | 277.3 | 18,63 |
| 30.5 | 1.38204 | 1.1312 | 314.8 | 278.3 | 18,70 |
| 30.6 | 1.38222 | 1.1317 | 316.0 | 279.2 | 18,77 |
| 30.7 | 1.38240 | 1.1322 | 317.2 | 280.2 | 18,85 |
| 30.8 | 1.38258 | 1.1327 | 318.4 | 281.1 | 18,92 |
| 30.9 | 1.38276 | 1.1332 | 319.6 | 282.0 | 18,99 |
| 31.0 | 1.38294 | 1.1336 | 320.8 | 283.0 | 19,06 |
| 31.1 | 1.38312 | 1.1341 | 322.0 | 283.9 | 19,13 |
| 31.2 | 1.38330 | 1.1346 | 323.2 | 284.9 | 19,20 |
| 31.3 | 1.38349 | 1.1351 | 324.4 | 285.8 | 19,27 |
| 31.4 | 1.38367 | 1.1356 | 325.6 | 286.8 | 19,35 |
| 31.5 | 1.38385 | 1.1361 | 326.8 | 287.7 | 19,42 |
| 31.6 | 1.38403 | 1.1366 | 328.1 | 288.6 | 19,49 |
| 31.7 | 1.38421 | 1.1371 | 329.3 | 289.6 | 19,56 |
| 31.8 | 1.38440 | 1.1376 | 330.5 | 290.5 | 19,64 |
| 31.9 | 1.38458 | 1.1380 | 331.7 | 291.5 | 19,71 |
| 32.0 | 1.38476 | 1.1385 | 332.9 | 292.4 | 19,78 |
| 32.1 | 1.38494 | 1.1391 | 334.2 | 293.4 | 19,86 |
| 32.2 | 1.38513 | 1.1396 | 335.5 | 294.4 | 19,93 |
| 32.3 | 1.38531 | 1.1401 | 336.7 | 295.4 | 20,00 |
| 32.4 | 1.38550 | 1.1406 | 338.0 | 296.4 | 20,08 |
| 32.5 | 1.38568 | 1.1411 | 339.3 | 297.3 | 20,16 |
| 32.6 | 1.38586 | 1.1416 | 340.6 | 298.3 | 20,24 |
| 32.7 | 1.38605 | 1.1422 | 341.9 | 299.3 | 20,31 |
| 32.8 | 1.38623 | 1.1427 | 343.1 | 300.3 | 20,38 |
| 32.9 | 1.38642 | 1.1432 | 344.4 | 301.3 | 20,46 |
| 33.0 | 1.38660 | 1.1437 | 345.7 | 302.3 | 20,54 |
| 33.1 | 1.38678 | 1.1442 | 346.9 | 303.2 | 20,61 |
| 33.2 | 1.38697 | 1.1447 | 348.1 | 304.1 | 20,68 |
| 33.3 | 1.38715 | 1.1452 | 349.3 | 305.0 | 20,75 |
| 33.4 | 1.38734 | 1.1457 | 350.5 | 305.9 | 20,82 |
| 33.5 | 1.38753 | 1.1461 | 351.7 | 306.9 | 20,90 |
| 33.6 | 1.38771 | 1.1466 | 352.9 | 307.8 | 20,97 |
| 33.7 | 1.38790 | 1.1471 | 354.1 | 308.7 | 21,04 |
| 33.8 | 1.38808 | 1.1476 | 355.3 | 309.6 | 21,11 |
| 33.9 | 1.38827 | 1.1481 | 356.5 | 310.5 | 21,18 |
| 34.0 | 1.38845 | 1.1486 | 357.7 | 311.4 | 21,25 |
| 34.1 | 1.38864 | 1.1491 | 359.0 | 312.4 | 21,33 |
| 34.2 | 1.38882 | 1.1496 | 360.3 | 313.4 | 21,41 |
| 34.3 | 1.38901 | 1.1501 | 361.5 | 314.3 | 21,48 |
| 34.4 | 1.38919 | 1.1506 | 362.8 | 315.3 | 21,55 |
| 34.5 | 1.38938 | 1.1512 | 364.1 | 316.3 | 21,63 |
| 34.6 | 1.38957 | 1.1517 | 365.4 | 317.3 | 21,71 |
| 34.7 | 1.38975 | 1.1522 | 366.7 | 318.2 | 21,79 |
| 34.8 | 1.38994 | 1.1527 | 367.9 | 319.2 | 21,86 |
| 34.9 | 1.39012 | 1.1532 | 369.2 | 320.2 | 21,94 |
| 35.0 | 1.39031 | 1.1537 | 370.5 | 321.1 | 22,01 |
| 35.1 | 1.39050 | 1.1543 | 371.8 | 322.1 | 22,09 |
| 35.2 | 1.39069 | 1.1548 | 373.0 | 323.0 | 22,16 |
| 35.3 | 1.39087 | 1.1553 | 374.3 | 324.0 | 22,24 |
| 35.4 | 1.39106 | 1.1558 | 375.6 | 325.0 | 22,32 |
| 35.5 | 1.39125 | 1.1563 | 376.9 | 325.9 | 22,39 |
| 35.6 | 1.39144 | 1.1568 | 378.1 | 326.9 | 22,45 |
| 35.7 | 1.39163 | 1.1573 | 379.4 | 327.8 | 22,54 |
| 35.8 | 1.39181 | 1.1579 | 380.7 | 328.8 | 22,62 |
| 35.9 | 1.39200 | 1.1584 | 381.9 | 329.7 | 22,69 |
| 36.0 | 1.39219 | 1.1589 | 383.2 | 330.7 | 22,77 |
| 36.1 | 1.39238 | 1.1594 | 384.5 | 331.6 | 22,85 |
| 36.2 | 1.39257 | 1.1599 | 385.8 | 332.6 | 22,92 |
| 36.3 | 1.39276 | 1.1604 | 387.0 | 333.5 | 22,99 |
| 36.4 | 1.39295 | 1.1610 | 388.3 | 334.5 | 23,07 |
| 36.5 | 1.39314 | 1.1615 | 389.6 | 335.4 | 23,15 |
| 36.6 | 1.39332 | 1.1620 | 390.9 | 336.4 | 23,22 |
| 36.7 | 1.39351 | 1.1625 | 392.2 | 337.3 | 23,30 |
| 36.8 | 1.39370 | 1.1630 | 393.4 | 338.3 | 23,37 |
| 36.9 | 1.39389 | 1.1635 | 394.7 | 339.2 | 23,45 |
| 37.0 | 1.39408 | 1.1641 | 396.0 | 340.2 | 23,53 |
| 37.1 | 1.39427 | 1.1646 | 397.3 | 341.1 | 23,60 |
| 37.2 | 1.39446 | 1.1651 | 398.6 | 342.1 | 23,68 |
| 37.3 | 1.39465 | 1.1656 | 399.8 | 343.0 | 23,75 |
| 37.4 | 1.39484 | 1.1661 | 401.1 | 344.0 | 23,83 |
| 37.5 | 1.39504 | 1.1666 | 402.4 | 344.9 | 23,91 |
| 37.6 | 1.39523 | 1.1672 | 403.7 | 345.9 | 23,99 |
| 37.7 | 1.39542 | 1.1677 | 405.0 | 346.8 | 24,06 |
| 37.8 | 1.39561 | 1.1682 | 406.2 | 347.7 | 24,13 |
| 37.9 | 1.39580 | 1.1687 | 407.5 | 348.7 | 24,21 |
| 38.0 | 1.39599 | 1.1692 | 408.8 | 349.6 | 24,29 |
| 38.1 | 1.39618 | 1.1698 | 410.1 | 350.6 | 24,37 |
| 38.2 | 1.39637 | 1.1703 | 411.3 | 351.5 | 24,44 |
| 38.3 | 1.39657 | 1.1708 | 412.6 | 352.4 | 24,51 |
| 38.4 | 1.39676 | 1.1713 | 413.9 | 353.4 | 24,59 |
| 38.5 | 1.39695 | 1.1718 | 415.2 | 354.3 | 24,67 |
| 38.6 | 1.39714 | 1.1723 | 416.4 | 355.2 | 24,74 |
| 38.7 | 1.39733 | 1.1728 | 417.7 | 356.1 | 24,82 |
| 38.8 | 1.39753 | 1.1733 | 419.0 | 357.1 | 24,90 |
| 38.9 | 1.39772 | 1.1739 | 420.2 | 358.0 | 24,97 |
| 39.0 | 1.39791 | 1.1744 | 421.5 | 358.9 | 25,04 |
| 39.1 | 1.39810 | 1.1749 | 422.8 | 359.8 | 25,12 |
| 39.2 | 1.39830 | 1.1754 | 424.1 | 360.8 | 25,20 |
| 39.3 | 1.39849 | 1.1759 | 425.3 | 361.7 | 25,27 |
| 39.4 | 1.39869 | 1.1764 | 426.6 | 362.6 | 25,35 |
| 39.5 | 1.39888 | 1.1770 | 427.9 | 363.6 | 25,42 |
| 39.6 | 1.39907 | 1.1775 | 429.2 | 364.5 | 25,50 |
| 39.7 | 1.39927 | 1.1780 | 430.5 | 365.4 | 25,58 |
| 39.8 | 1.39946 | 1.1785 | 431.7 | 366.3 | 25,65 |
| 39.9 | 1.39966 | 1.1790 | 433.0 | 367.3 | 25,73 |
| 40.0 | 1.39985 | 1.1796 | 434.3 | 368.2 | 25,80 |
| 40.1 | 1.40004 | 1.1801 | 435.6 | 369.2 | 25,88 |
| 40.2 | 1.40024 | 1.1806 | 437.0 | 370.1 | 25,96 |
| 40.3 | 1.40043 | 1.1812 | 438.3 | 371.1 | 26,04 |
| 40.4 | 1.40063 | 1.1817 | 439.7 | 372.1 | 26,12 |
| 40.5 | 1.40083 | 1.1823 | 441.0 | 373.0 | 26,20 |
| 40.6 | 1.40102 | 1.1828 | 442.3 | 374.0 | 26,28 |
| 40.7 | 1.40122 | 1.1833 | 443.7 | 374.9 | 26,36 |
| 40.8 | 1.40141 | 1.1839 | 445.0 | 375.9 | 26,44 |
| 40.9 | 1.40161 | 1.1844 | 446.4 | 376.9 | 26,52 |
| 41.0 | 1.40180 | 1.1850 | 447.7 | 377.8 | 26,60 |
| 41.1 | 1.40200 | 1.1855 | 449.0 | 378.7 | 26,68 |
| 41.2 | 1.40219 | 1.1860 | 450.2 | 379.6 | 26,75 |
| 41.3 | 1.40239 | 1.1865 | 451.5 | 380.5 | 26,83 |
| 41.4 | 1.40259 | 1.1870 | 452.8 | 381.4 | 26,90 |
| 41.5 | 1.40279 | 1.1875 | 454.1 | 382.3 | 26,98 |
| 41.6 | 1.40298 | 1.1881 | 455.3 | 383.2 | 27,05 |
| 41.7 | 1.40318 | 1.1886 | 456.6 | 384.2 | 27,13 |
| 41.8 | 1.40338 | 1.1891 | 457.9 | 385.1 | 27,21 |
| 41.9 | 1.40357 | 1.1896 | 459.1 | 386.0 | 27,28 |
| 42.0 | 1.40377 | 1.1901 | 460.4 | 386.9 | 27,35 |
| 42.1 | 1.40397 | 1.1907 | 461.7 | 387.8 | 27,43 |
| 42.2 | 1.40417 | 1.1912 | 463.1 | 388.8 | 27,52 |
| 42.3 | 1.40436 | 1.1917 | 464.4 | 389.7 | 27,59 |
| 42.4 | 1.40456 | 1.1923 | 465.8 | 390.7 | 27,68 |
| 42.5 | 1.40476 | 1.1928 | 467.2 | 391.6 | 27,76 |
| 42.6 | 1.40496 | 1.1934 | 468.5 | 392.6 | 27,84 |
| 42.7 | 1.40516 | 1.1939 | 469.9 | 393.5 | 27,92 |
| 42.8 | 1.40535 | 1.1945 | 471.2 | 394.5 | 28,00 |
| 42.9 | 1.40555 | 1.1950 | 472.6 | 395.4 | 28,08 |
| 43.0 | 1.40575 | 1.1956 | 473.9 | 396.4 | 28,16 |
| 43.1 | 1.40595 | 1.1961 | 475.2 | 397.3 | 28,23 |
| 43.2 | 1.40615 | 1.1967 | 476.6 | 398.3 | 28,32 |
| 43.3 | 1.40635 | 1.1972 | 477.9 | 399.2 | 28,40 |
| 43.4 | 1.40655 | 1.1977 | 479.3 | 400.1 | 28,48 |
| 43.5 | 1.40675 | 1.1983 | 480.6 | 401.1 | 28,56 |
| 43.6 | 1.40695 | 1.1988 | 481.9 | 402.0 | 28,63 |
| 43.7 | 1.40715 | 1.1994 | 483.3 | 402.9 | 28,72 |
| 43.8 | 1.40735 | 1.1999 | 484.6 | 403.9 | 28,79 |
| 43.9 | 1.40755 | 1.2005 | 486.0 | 404.8 | 28,88 |
| 44.0 | 1.40775 | 1.2010 | 487.3 | 405.7 | 28,95 |
| 44.1 | 1.40795 | 1.2015 | 488.6 | 406.7 | 29,03 |
| 44.2 | 1.40815 | 1.2021 | 490.0 | 407.6 | 29,11 |
| 44.3 | 1.40836 | 1.2026 | 491.3 | 408.5 | 29,19 |
| 44.4 | 1.40856 | 1.2032 | 492.7 | 409.5 | 29,27 |
| 44.5 | 1.40876 | 1.2037 | 494.0 | 410.4 | 29,35 |
| 44.6 | 1.40896 | 1.2042 | 495.3 | 411.3 | 29,43 |
| 44.7 | 1.40916 | 1.2048 | 496.7 | 412.3 | 29,51 |
| 44.8 | 1.40937 | 1.2053 | 498.0 | 413.2 | 29,59 |
| 44.9 | 1.40957 | 1.2059 | 499.4 | 414.1 | 29,67 |
| 45.0 | 1.40977 | 1.2064 | 500.7 | 415.0 | 29,75 |
| 45.1 | 1.40997 | 1.2070 | 502.1 | 416.0 | 29,83 |
| 45.2 | 1.41018 | 1.2076 | 503.5 | 417.0 | 29,92 |
| 45.3 | 1.41038 | 1.2081 | 504.9 | 417.9 | 30,00 |
| 45.4 | 1.41058 | 1.2087 | 506.3 | 418.9 | 30,08 |
| 45.5 | 1.41079 | 1.2093 | 507.8 | 419.9 | 30,17 |
| 45.6 | 1.41099 | 1.2098 | 509.2 | 420.9 | 30,25 |
| 45.7 | 1.41119 | 1.2104 | 510.6 | 421.8 | 30,34 |
| 45.8 | 1.41139 | 1.2110 | 512.0 | 422.8 | 30,42 |
| 45.9 | 1.41160 | 1.2115 | 513.4 | 423.7 | 30,50 |
| 46.0 | 1.41180 | 1.2121 | 514.8 | 424.7 | 30,59 |
| 46.1 | 1.41200 | 1.2127 | 516.1 | 425.6 | 30,66 |
| 46.2 | 1.41221 | 1.2132 | 517.5 | 426.5 | 30,75 |
| 46.3 | 1.41241 | 1.2137 | 518.8 | 427.5 | 30,82 |
| 46.4 | 1.41262 | 1.2143 | 520.2 | 428.4 | 30,91 |
| 46.5 | 1.41282 | 1.2148 | 521.5 | 429.3 | 30,99 |
| 46.6 | 1.41302 | 1.2154 | 522.8 | 430.2 | 31,06 |
| 46.7 | 1.41323 | 1.2159 | 524.2 | 431.1 | 31,15 |
| 46.8 | 1.41343 | 1.2165 | 525.5 | 432.0 | 31,22 |
| 46.9 | 1.41364 | 1.2170 | 526.9 | 432.9 | 31,31 |
| 47.0 | 1.41384 | 1.2175 | 528.2 | 433.8 | 31,38 |
| 47.1 | 1.41405 | 1.2181 | 529.6 | 434.8 | 31,47 |
| 47.2 | 1.41425 | 1.2187 | 531.0 | 435.7 | 31,55 |
| 47.3 | 1.41446 | 1.2192 | 532.4 | 436.7 | 31,63 |
| 47.4 | 1.41466 | 1.2198 | 533.8 | 437.6 | 31,72 |
| 47.5 | 1.41487 | 1.2204 | 535.3 | 438.6 | 31,81 |
| 47.6 | 1.41508 | 1.2210 | 536.7 | 439.5 | 31.89 |
| 47.7 | 1.41528 | 1.2215 | 538.1 | 440.5 | 31,97 |
| 47.8 | 1.41549 | 1.2221 | 539.5 | 441.4 | 32,05 |
| 47.9 | 1.41569 | 1.2227 | 540.9 | 442.4 | 32,14 |
| 48.0 | 1.41590 | 1.2232 | 542.3 | 443.3 | 32,22 |
| 48.1 | 1.41611 | 1.2238 | 543.6 | 444.2 | 32,30 |
| 48.2 | 1.41632 | 1.2243 | 545.0 | 445.1 | 32,38 |
| 48.3 | 1.41652 | 1.2249 | 546.3 | 446.0 | 32,46 |
| 48.4 | 1.41673 | 1.2254 | 547.7 | 446.9 | 32,59 |
| 48.5 | 1.41694 | 1.2260 | 549.1 | 447.8 | 32,63 |
| 48.6 | 1.41715 | 1.2265 | 550.4 | 448.7 | 32,70 |
| 48.7 | 1.41736 | 1.2271 | 551.8 | 449.7 | 32,79 |
| 48.8 | 1.41756 | 1.2276 | 553.1 | 450.6 | 32,86 |
| 48.9 | 1.41777 | 1.2282 | 554.5 | 451.4 | 32,95 |
| 49.0 | 1.41798 | 1.2287 | 555.8 | 452.3 | 33,02 |
| 49.1 | 1.41819 | 1.2293 | 557.2 | 453.3 | 33,11 |
| 49.2 | 1.41840 | 1.2298 | 558.6 | 454.2 | 33,19 |
| 49.3 | 1.41861 | 1.2304 | 560.0 | 455.1 | 33,27 |
| 49.4 | 1.41882 | 1.2310 | 561.4 | 456.1 | 33,36 |
| 49.5 | 1.41903 | 1.2315 | 562.8 | 457.0 | 33,44 |
| 49.6 | 1.41924 | 1.2321 | 564.2 | 457.9 | 33,52 |
| 49.7 | 1.41945 | 1.2327 | 565.6 | 458.8 | 33,61 |
| 49.8 | 1.41966 | 1.2332 | 567.0 | 459.8 | 33,69 |
| 49.9 | 1.41987 | 1.2338 | 568.4 | 460.7 | 33,77 |
| 50.0 | 1.42008 | 1.2344 | 569.8 | 461.6 | 33,86 |
| 50.1 | 1.42029 | 1.2349 | 571.2 | 462.5 | 11,94 |
| 50.2 | 1.42050 | 1.2355 | 572.6 | 463.5 | 34,02 |
| 50.3 | 1.42071 | 1.2361 | 574.0 | 464.4 | 34,10 |
| 50.4 | 1.42092 | 1.2366 | 575.4 | 465.1 | 14,19 |
| 50.5 | 1.42114 | 1.2372 | 576.9 | 466.2 | 34,28 |
| 50.6 | 1.42135 | 1.2378 | 578.3 | 467.2 | 34,36 |
| 50.7 | 1.42156 | 1.2384 | 579.7 | 468.1 | 34,44 |
| 50.8 | 1.42177 | 1.2389 | 581.1 | 469.0 | 34,53 |
| 50.9 | 1.42198 | 1.2395 | 582.5 | 469.9 | 34,61 |
| 51.0 | 1.42219 | 1.2401 | 583.9 | 470.9 | 34,69 |
| 51.1 | 1.42240 | 1.2407 | 585.4 | 471.8 | 34,78 |
| 51.2 | 1.42261 | 1.2413 | 586.9 | 472.8 | 34,87 |
| 51.3 | 1.42283 | 1.2419 | 588.3 | 473.8 | 34,95 |
| 51.4 | 1.42304 | 1.2425 | 589.8 | 474.7 | 35,04 |
| 51.5 | 1.42325 | 1.2431 | 591.3 | 475.7 | 35,13 |
| 51.6 | 1.42346 | 1.2437 | 592.8 | 476.6 | 35,22 |
| 51.7 | 1.42367 | 1.2443 | 594.3 | 4776 | 35,31 |
| 51.8 | 1.42389 | 1.2449 | 595.7 | 478.6 | 15,39 |
| 51.9 | 1.42410 | 1.2455 | 597.2 | 479.5 | 35,48 |
| 52.0 | 1.42431 | 1.2461 | 598.7 | 480.5 | 35,57 |
| 52.1 | 1.42452 | 1.2466 | 600.1 | 481.4 | 35,65 |
| 52.2 | 1.42474 | 1.2472 | 601.5 | 482.3 | 35,74 |
| 52.3 | 1.42495 | 1.2478 | 602.9 | 483.2 | 35,82 |
| 52.4 | 1.42517 | 1.2483 | 604.3 | 484.1 | 35,91 |
| 52.5 | 1.42538 | 1.2489 | 605.8 | 485.0 | 35,99 |
| 52.6 | 1.42559 | 1.2495 | 607.2 | 485.9 | 16,08 |
| 52.7 | 1.42581 | 1.2500 | 608.6 | 486.8 | 36,16 |
| 52.8 | 1.42602 | 1.2506 | 610.0 | 487.7 | 36,24 |
| 52.9 | 1.42624 | 1.2512 | 611.4 | 488.6 | 36,33 |
| 53.0 | 1.42645 | 1.2518 | 612.8 | 489.6 | 36,41 |
| 53.1 | 1.42666 | 1.2524 | 614.3 | 490.5 | 36,50 |
| 51 2 | 1.42686 | 1.2530 | 615.8 | 491.4 | 36,59 |
| 53.3 | 1.42707 | 1.2536 | 617.2 | 492.4 | 36,67 |
| 53.4 | 1.42727 | 1.2542 | 618.7 | 493.3 | 36,76 |
| 53.5 | 1.42748 | 1.2548 | 620.2 | 494.3 | 36,85 |
| 53.6 | 1.42769 | 1.2554 | 621.7 | 495.2 | 36,94 |
| 53.7 | 1.42789 | 1.2560 | 623.2 | 496.2 | 37,03 |
| 53.8 | 1.42810 | 1.2566 | 624.6 | 497.1 | 37,11 |
| 53.9 | 1.42830 | 1.2571 | 626.1 | 498.0 | 37,20 |
| 54.0 | 1.42851 | 1.2577 | 627.6 | 499.0 | 37,29 |
| 54.1 | 1.42874 | 1.2583 | 629.0 | 499.9 | 37,37 |
| 54 2 | 1.42897 | 1.2589 | 630.4 | 500.8 | 37,45 |
| 54.3 | 1.42919 | 1.2595 | 631.8 | 501.7 | 37,54 |
| 54.4 | 1.42942 | 1.2600 | 633.2 | 502.6 | 37,62 |
| 54.5 | 1.42965 | 1.2606 | 634.7 | 503.5 | 37,71 |
| 54.6 | 1.42988 | 1.2612 | 636.1 | 504.3 | 37,79 |
| 54.7 | 1.43011 | 1.2617 | 637.5 | 505.2 | 37,88 |
| 54.8 | 1.43033 | 1.2623 | 638.9 | 506.1 | 37,96 |
| 54.9 | 1.43056 | 1.2629 | 640.3 | 507.0 | 38,04 |
| 55.0 | 1.43079 | 1.2635 | 641.7 | 507.9 | 38,11 |
| 55.1 | 1.43101 | 1.2640 | 643.2 | 508.8 | 38,22 |
| 55.2 | 1.43123 | 1.2646 | 644.6 | 509.7 | 38,30 |
| 55.3 | 1.43145 | 1.2652 | 646.1 | 510.7 | 38,39 |
| 55.4 | 1.43167 | 1.2658 | 647.6 | 511.6 | 38,48 |
| 55.5 | 1.43189 | 1.2664 | 649.1 | 512.5 | 38,57 |
| 55.6 | 1.43210 | 1.2670 | 650.5 | 513.4 | 38,65 |
| 55.7 | 1.43232 | 1.2676 | 652.0 | 514.3 | 38,74 |
| 55.8 | 1.43254 | 1.2682 | 653.5 | 515.3 | 38,83 |
| 55.9 | 1.43276 | 1.2688 | 654.9 | 516.2 | 38,91 |
| 56.0 | 1.43298 | 1.2694 | 656.4 | 517.1 | 39,00 |
| 56.1 | 1.43320 | 1.2700 | 657.9 | 518.0 | 39,09 |
| 56.2 | 1.43342 | 1.2706 | 659.4 | 518.9 | 39,18 |
| 56.3 | 1.43364 | 1.2712 | 660.8 | 519.9 | 39,26 |
| 56.4 | 1.43386 | 1.2718 | 662.3 | 520.8 | 39,35 |
| 56.5 | 1.43409 | 1.2724 | 663.8 | 521.7 | 39,44 |
| 56.6 | 1.43431 | 1.2730 | 665.3 | 522.6 | 39,53 |
| 56.7 | 1.43453 | 1.2736 | 666.8 | 523.5 | 39,62 |
| 56.8 | 1.43475 | 1.2742 | 668.2 | 524.4 | 39,70 |
| 56.9 | 1.43497 | 1.2748 | 669.7 | 525.4 | 39,79 |
| 57.0 | 1.43519 | 1.2754 | 671.2 | 526.3 | 39,88 |
| 57.1 | 1.43541 | 1.2760 | 672.7 | 527.2 | 39,97 |
| 57.2 | 1.43563 | 1.2766 | 674.3 | 528.2 | 40,06 |
| 57.3 | 1.43586 | 1.2773 | 675.8 | 529.1 | 40,15 |
| 57.4 | 1.43608 | 1.2779 | 677.4 | 530.1 | 40,25 |
| 57.5 | 1.43630 | 1.2785 | 678.9 | 531.0 | 40,34 |
| 57.6 | 1.43652 | 1.2791 | 680.4 | 532.0 | 40,43 |
| 57.7 | 1.43674 | 1.2797 | 682.0 | 532.9 | 40,52 |
| 57.8 | 1.43697 | 1.2804 | 683.5 | 533.8 | 40,61 |
| 57.9 | 1.43719 | 1.2810 | 685.1 | 534.8 | 40,70 |
| 58.0 | 1.43741 | 1.2816 | 686.6 | 535.7 | 40,80 |
| 58.1 | 1.43763 | 1.2822 | 688.1 | 536.6 | 40,88 |
| 58.2 | 1.43786 | 1.2828 | 689.6 | 537.5 | 40,97 |
| 58.3 | 1.43808 | 1.2834 | 691.0 | 538.4 | 41,06 |
| 58.4 | 1.43831 | 1.2840 | 692.5 | 539.3 | 41,14 |
| 58.5 | 1.43854 | 1.2846 | 694.0 | 540.2 | 41,23 |
| 58.6 | 1.43876 | 1.2852 | 695.5 | 541.1 | 41,32 |
| 58.7 | 1.43899 | 1.2858 | 697.0 | 542.0 | 41,41 |
| 58.8 | 1.43921 | 1.2864 | 698.4 | 542.9 | 41,50 |
| 58.9 | 1.43944 | 1.2870 | 699.9 | 543.8 | 41,58 |
| 59.0 | 1.43966 | 1.2876 | 701.4 | 544.7 | 41,67 |
| 59.1 | 1.43989 | 1.2882 | 702.9 | 545.7 | 41,76 |
| 59.2 | 1.44011 | 1.2888 | 704.5 | 546.6 | 41,86 |
| 59.3 | 1.44034 | 1.2895 | 706.0 | 547.5 | 41,95 |
| 59.4 | 1.44056 | 1.2901 | 707.6 | 548.5 | 42,04 |
| 59.5 | 1.44079 | 1.2907 | 709.1 | 549.4 | 42,13 |
| 59.6 | 1.44102 | 1.2913 | 710.6 | 550.3 | 42,22 |
| 59.7 | 1.44124 | 1.2920 | 712.2 | 551.2 | 42,32 |
| 59.8 | 1.44147 | 1.2926 | 713.7 | 552.2 | 42,41 |
| 59 9 | 1.44169 | 1.2932 | 715.3 | 553.1 | 42,50 |
| 60.0 | 1.44192 | 1.2938 | 716.8 | 554.0 | 42,59 |
| 60.1 | 1.44215 | 1.2944 | 718.3 | 554.9 | 42,68 |
| 60.2 | 1.44237 | 1.2950 | 719.8 | 555.8 | 42,77 |
| 60.3 | 1.44260 | 1.2956 | 721.2 | 556.7 | 42,85 |
| 60.4 | 1.44283 | 1.2962 | 722.7 | 557.6 | 42,94 |
| 60.5 | 1.44306 | 1.2968 | 724.2 | 558.4 | 43,03 |
| 60.6 | 1.44328 | 1.2974 | 725.7 | 559.3 | 43,12 |
| 60.7 | 1.44351 | 1.2980 | 727.2 | 560.2 | 43,21 |
| 60.8 | 1.44374 | 1.2986 | 728.6 | 561.1 | 43,29 |
| 60.9 | 1.44396 | 1.2992 | 730.1 | 562.0 | 43,38 |
| 61.0 | 1.44419 | 1.2998 | 731.6 | 562.8 | 43,47 |
| 61.1 | 1.44442 | 1.3004 | 733.1 | 563.8 | 43,56 |
| 61.2 | 1.44465 | 1.3011 | 734.7 | 564.7 | 43,65 |
| 61.3 | 1.44488 | 1.3017 | 736.2 | 565.6 | 43,74 |
| 61.4 | 1.44511 | 1.3023 | 737.8 | 566.5 | 43,84 |
| 61.5 | 1.44533 | 1.3030 | 739.4 | 567.4 | 43,93 |
| 61.6 | 1.44556 | 1.3036 | 740.9 | 568.4 | 44,02 |
| 61.7 | 1.44579 | 1.3042 | 742.5 | 569.3 | 44,12 |
| 61.8 | 1.44602 | 1.3048 | 744.0 | 570.2 | 44,21 |
| 61.9 | 1.44625 | 1.3055 | 745.6 | 571.1 | 44,30 |
| 62.0 | 1.44648 | 1.3061 | 747.1 | 572.0 | 44,39 |
| 62.1 | 1.44671 | 1.3067 | 748.6 | 572.9 | 44,48 |
| 62.2 | 1.44694 | 1.3073 | 750.2 | 573.8 | 44,57 |
| 62.3 | 1.44717 | 1.3080 | 751.7 | 574.7 | 44,66 |
| 62.4 | 1.44740 | 1.3086 | 753.3 | 575.6 | 44,76 |
| 62.5 | 1.44764 | 1.3092 | 754.8 | 576.5 | 44,85 |
| 62.6 | 1.44787 | 1.3098 | 756.3 | 577.4 | 44,94 |
| 62.7 | 1.44810 | 1.3104 | 757.9 | 578.3 | 45,03 |
| 62.8 | 1.44833 | 1.3111 | 759.4 | 579.2 | 45,12 |
| 62.9 | 1.44856 | 1.3117 | 761.0 | 580.1 | 45,21 |
| 63.0 | 1.44879 | 1.3123 | 762.5 | 581.0 | 45,31 |
| 63.1 | 1.44902 | 1.3130 | 764.1 | 582.0 | 45,40 |
| 63.2 | 1.44926 | 1.3136 | 765.7 | 582.9 | 45,49 |
| 63.3 | 1.44949 | 1.3143 | 767.3 | 583.8 | 45,59 |
| 63.4 | 1.44972 | 1.3149 | 768.9 | 584.8 | 45,69 |
| 63.5 | 1.44996 | 1.3156 | 770.6 | 585.7 | 45,79 |
| 63.6 | 1.45019 | 1.3162 | 772.2 | 586.6 | 45,88 |
| 63.7 | 1.45042 | 1.3169 | 773.8 | 587.6 | 45,98 |
| 63.8 | 1.45065 | 1.3175 | 775.4 | 588.5 | 46,07 |
| 63.9 | 1.45089 | 1.3182 | 777.0 | 589.4 | 46,17 |
| 64.0 | 1.45112 | 1.3188 | 778.6 | 590.4 | 46,26 |
| 64.1 | 1.45135 | 1.3195 | 780.1 | 591.3 | 46,35 |
| 64.2 | 1.45159 | 1.3201 | 781.7 | 592.1 | 46,45 |
| 64.3 | 1.45183 | 1.3207 | 783.2 | 593.0 | 46,53 |
| 64.4 | 1.45206 | 1.3213 | 784.8 | 593.9 | 46,63 |
| 64.5 | 1.45230 | 1.3219 | 786.3 | 594.8 | 46,72 |
| 64.6 | 1.45253 | 1.3226 | 787.8 | 595.7 | 46,81 |
| 64.7 | 1.45276 | 1.3232 | 789.4 | 596.6 | 46,90 |
| 64.8 | 1.45300 | 1.3238 | 790.9 | 597.5 | 46,99 |
| 64.9 | 1.45324 | 1.3244 | 792.5 | 598.3 | 47,09 |
| 65.0 | 1.45347 | 1.3251 | 794.0 | 599.2 | 47,18 |
| 65.1 | 1.45371 | 1.3257 | 795.6 | 600.1 | 47,27 |
| 65.2 | 1.45394 | 1.3264 | 797.2 | 601.1 | 47,37 |
| 65.3 | 1.45418 | 1.3270 | 798.8 | 602.0 | 47,46 |
| 65.4 | 1.45441 | 1.3277 | 800.4 | 602.9 | 47,56 |
| 65.5 | 1.45465 | 1.3283 | 802.1 | 603.8 | 47,66 |
| 65.6 | 1.45489 | 1.3290 | 803.7 | 604.7 | 47,75 |
| 65.7 | 1.45512 | 1.3296 | 805.3 | 605.6 | 47,85 |
| 65.8 | 1.45536 | 1.3303 | 806.9 | 606.6 | 47,94 |
| 65.9 | 1.45559 | 1.3309 | 808.5 | 607.5 | 48,04 |
| 66.0 | 1.45583 | 1.3316 | 810.1 | 608.4 | 48,13 |
| 66.1 | 1.45607 | 1.3322 | 811.6 | 609.3 | 48,22 |
| 66.2 | 1.45630 | 1.3328 | 813.2 | 610.1 | 48,32 |
| 66.3 | 1.45654 | 1.3335 | 814.8 | 611.0 | 48,41 |
| 66.4 | 1.45678 | 1.3341 | 816.3 | 611.9 | 48,50 |
| 66.5 | 1.45702 | 1.3347 | 817.9 | 612.8 | 48,60 |
| 66.6 | 1.45725 | 1.3353 | 819.4 | 613.6 | 48,69 |
| 66.7 | 1.45749 | 1.3360 | 820.9 | 614.5 | 48,77 |
| 66.8 | 1.45773 | 1.3366 | 822.5 | 615.4 | 48,87 |
| 66.9 | 1.45796 | 1.3372 | 824.1 | 616.2 | 48,97 |
| 67.0 | 1.45820 | 1.3378 | 825.6 | 617.1 | 49,05 |
| 67.1 | 1.45844 | 1.3385 | 827.2 | 618.0 | 49,15 |
| 67.2 | 1.45868 | 1.3391 | 828.8 | 618.9 | 49,24 |
| 67.3 | 1.45892 | 1.3398 | 830.4 | 619.8 | 49,34 |
| 67.4 | 1.45916 | 1.3404 | 832.0 | 620.7 | 49,43 |
| 67.5 | 1.45940 | 1.3411 | 833.7 | 621.6 | 49,53 |
| 67.6 | 1.45964 | 1.3418 | 835.3 | 622.5 | 49,63 |
| 67.7 | 1.45988 | 1.3424 | 836.9 | 623.4 | 49,73 |
| 67.8 | 1.46012 | 1.3431 | 838.5 | 624.3 | 49,82 |
| 67.9 | 1.46036 | 1.3437 | 840.1 | 625.2 | 49,92 |
| 68.0 | 1.46060 | 1.3444 | 841.7 | 626.1 | 50,01 |
| 68.1 | 1.46084 | 1.3450 | 843.4 | 627.0 | 50,11 |
| 68.2 | 1.46108 | 1.3457 | 845.1 | 628.0 | 50,21 |
| 68.3 | 1.46132 | 1.3464 | 846.7 | 628.9 | 50,31 |
| 68.4 | 1.46156 | 1.3471 | 848.4 | 629.8 | 50,41 |
| 68.5 | 1.46181 | 1.3478 | 850.1 | 630.8 | 50,51 |
| 68.6 | 1.46205 | 1.3484 | 851.8 | 631.7 | 50,61 |
| 68.7 | 1.46229 | 1.3491 | 853.5 | 632.6 | 50,71 |
| 68.8 | 1.46253 | 1.3498 | 855.1 | 633.5 | 50,81 |
| 68.9 | 1.46277 | 1.3505 | 856.8 | 634.5 | 50,91 |
| 69.0 | 1.46301 | 1.3512 | 858.5 | 635.4 | 51,01 |
| 69.1 | 1.46325 | 1.3518 | 860.1 | 636.3 | 51,10 |
| 69.2 | 1.46350 | 1.3525 | 861.7 | 637.2 | 51,20 |
| 69.3 | 1.46374 | 1.3531 | 863.3 | 638.0 | 51,29 |
| 69.4 | 1.46398 | 1.3538 | 864.9 | 638.9 | 51,39 |
| 69.5 | 1.46423 | 1.3544 | 866.6 | 639.8 | 51,49 |
| 69.6 | 1.46447 | 1.3551 | 868.2 | 640.7 | 51,58 |
| 69.7 | 1.46471 | 1.3557 | 869.8 | 641.6 | 51,68 |
| 69.8 | 1.46495 | 1.3564 | 871.4 | 642.4 | 51,78 |
| 69.9 | 1.46520 | 1.3570 | 873.0 | 643.3 | 51,87 |
| 70.0 | 1.46544 | 1.3577 | 874.6 | 644.2 | 51,97 |
| 70.1 | 1.46568 | 1.3583 | 876.2 | 645.1 | 52,06 |
| 70.2 | 1.46593 | 1.3590 | 877.8 | 645.9 | 52,15 |
| 70.3 | 1.46618 | 1.3596 | 879.4 | 646.8 | 52,25 |
| 70.4 | 1.46642 | 1.3603 | 881.0 | 647.7 | 52,35 |
| 70.5 | 1.46667 | 1.3609 | 882.7 | 648.6 | 52,45 |
| 70.6 | 1.46691 | 1.3616 | 884.3 | 649.4 | 52,54 |
| 70.7 | 1.46715 | 1.2622 | 885.9 | 650.3 | 52,64 |
| 70.8 | 1.46740 | 1.3629 | 887.5 | 651.2 | 52,73 |
| 70.9 | 1.46765 | 1.3635 | 889.1 | 652.1 | 52,83 |
| 71.0 | 1.46789 | 1.3642 | 890.7 | 652.9 | 52,92 |
| 71.1 | 1.46814 | 1.3649 | 892.4 | 653.8 | 53,02 |
| 71.2 | 1.46838 | 1.3655 | 894.1 | 654.7 | 53,12 |
| 71.3 | 1.46863 | 1.3662 | 895.7 | 655.6 | 53,22 |
| 71.4 | 1.46888 | 1.3669 | 897.4 | 656.5 | 53,32 |
| 71.5 | 1.46913 | 1.3676 | 899.1 | 657.4 | 53,42 |
| 71.6 | 1.46937 | 1.3683 | 900.8 | 658.3 | 53,52 |
| 71.7 | 1.46962 | 1.3689 | 902.5 | 659.2 | 53,62 |
| 71.8 | 1.46987 | 1.3696 | 904.1 | 660.1 | 53,72 |
| 71.9 | 1.47011 | 1.3703 | 905.8 | 661.0 | 53,82 |
| 72.0 | 1.47036 | 1.3710 | 907.5 | 661.9 | 53,92 |
| 72.1 | 1.47061 | 1.3717 | 909.2 | 662.8 | 54,02 |
| 72.2 | 1.47086 | 1.3723 | 910.8 | 663.7 | 54,12 |
| 72.3 | 1.47110 | 1.3730 | 912.5 | 664.6 | 54,22 |
| 72.4 | 1.47135 | 1.3737 | 914.2 | 665.5 | 54,32 |
| 72.5 | 1.47160 | 1.3744 | 915.9 | 666.4 | 54,42 |
| 72.6 | 1.47185 | 1.3750 | 917.5 | 667.3 | 54,51 |
| 72.7 | 1.47210 | 1.3757 | 919.2 | 668.2 | 54,62 |
| 72.8 | 1.47234 | 1.3764 | 920.9 | 669.0 | 54,72 |
| 72.9 | 1.47259 | 1.3771 | 922.5 | 669.9 | 54,81 |
| 73.0 | 1.47284 | 1.3777 | 924.2 | 670.8 | 54,91 |
| 73.1 | 1.47309 | 1.3784 | 925.9 | 671.7 | 55,01 |
| 73.2 | 1.47334 | 1.3791 | 927.6 | 672.6 | 55,11 |
| 73.3 | 1.47359 | 1.3798 | 929.2 | 673.5 | 55,21 |
| 73.4 | 1.47384 | 1.3804 | 930.9 | 674.4 | 55,31 |
| 73.5 | 1.47409 | 1.3811 | 932.6 | 675.2 | 55,41 |
| 73.6 | 1.47434 | 1.3818 | 934.3 | 676.1 | 55,51 |
| 73.7 | 1.47459 | 1.3825 | 936.0 | 677.0 | 55,61 |
| 73.8 | 1.47484 | 1.3832 | 937.6 | 677.9 | 55,71 |
| 73.9 | 1.47509 | 1.3838 | 939.3 | 678.8 | 55,81 |
| 74.0 | 1.47534 | 1.3845 | 941.0 | 679.7 | 55,91 |
| 74.1 | 1.47559 | 1.3852 | 942.7 | 680.5 | 56,01 |
| 74.2 | 1.47584 | 1.3859 | 944.4 | 681.4 | 56,11 |
| 74.3 | 1.47609 | 1.3866 | 946.0 | 682.3 | 56,21 |
| 74.4 | 1.47634 | 1.3872 | 947.7 | 683.2 | 56,31 |
| 74.5 | 1.47660 | 1.3879 | 949.4 | 684.0 | 56,41 |
| 74.6 | 1.47685 | 1.3886 | 951.1 | 684.9 | 56,51 |
| 74.7 | 1.47710 | 1.3893 | 952.8 | 685.8 | 56,61 |
| 74.8 | 1.47735 | 1.3900 | 954.4 | 686.7 | 56,71 |
| 74.9 | 1.47760 | 1.3906 | 956.1 | 687.5 | 56,81 |
Таблица III
Съдържание на захари (Съдържанието на захари е изразено като инвертна захар) в концентрирана и ректифицирана мъст в грамове на литър и грамове за килограм, определени с рефрактометър, разграфен в масови % захароза, при 20 градуса C или в индекс на рефракция, при 20 градуса C. Плътността е определена при 20 градуса C
| Захароза, | Индекс | Плътност, | Захари, | Захари, | Алкохол, |
| в % | на ре- | при 20 градуса C | в g/l | в g/kg | |
| (m/m) | фрак- | при | |||
| ция, при | 20 градуса C | ||||
| 20 градуса C | |||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 50.0 | 1.42008 | 1.2342 | 627.6 | 508.5 | 37,28 |
| 50.1 | 1.42029 | 1.2348 | 629.3 | 509.6 | 37,38 |
| 50.2 | 1.42050 | 1.2355 | 630.9 | 510.6 | 37,48 |
| 50.3 | 1.42071 | 1.2362 | 632.4 | 511.6 | 37,56 |
| 50.4 | 1.42092 | 1.2367 | 634.1 | 512.7 | 37,66 |
| 50.5 | 1.42113 | 1.2374 | 635.7 | 513.7 | 37,76 |
| 50.6 | 1.42135 | 1.2381 | 637.3 | 514.7 | 37,85 |
| 50.7 | 1.42156 | 1.2386 | 638.7 | 515.7 | 37,94 |
| 50.8 | 1.42177 | 1.2391 | 640.4 | 516.8 | 38,04 |
| 50.9 | 1.42198 | 1.2396 | 641.9 | 517.8 | 38,13 |
| 51.0 | 1.42219 | 1.2401 | 643.4 | 518.8 | 38,22 |
| 51.1 | 1.42240 | 1.2406 | 645.0 | 519.9 | 38,31 |
| 51.2 | 1.42261 | 1.2411 | 646.5 | 520.9 | 38,40 |
| 51.3 | 1.42282 | 1.2416 | 648.1 | 522.0 | 38,50 |
| 51.4 | 1.42304 | 1.2421 | 649.6 | 523.0 | 38,59 |
| 51.5 | 1.42325 | 1.2427 | 651.2 | 524.0 | 38,68 |
| 51.6 | 1.42347 | 1.2434 | 652.9 | 525.1 | 38,78 |
| 51.7 | 1.42368 | 1.2441 | 654.5 | 526.1 | 38,88 |
| 51.8 | 1.42389 | 1.2447 | 656.1 | 527.1 | 38,97 |
| 51.9 | 1.42410 | 1.2454 | 657.8 | 528.2 | 39,07 |
| 52.0 | 1.42432 | 1.2461 | 659.4 | 529.2 | 39,17 |
| 52.1 | 1.42453 | 1.2466 | 661.0 | 530.2 | 39,26 |
| 52.2 | 1.42475 | 1.2470 | 662.5 | 531.3 | 39,35 |
| 52.3 | 1.42496 | 1.2475 | 664.1 | 532.3 | 39,45 |
| 52.4 | 1.42517 | 1.2480 | 665.6 | 533.3 | 39,54 |
| 52.5 | 1.42538 | 1.2486 | 667.2 | 534.4 | 39,63 |
| 52.6 | 1.42560 | 1.2493 | 668.9 | 535.4 | 39,73 |
| 52.7 | 1.42581 | 1.2500 | 670.5 | 536.4 | 39,83 |
| 52.8 | 1.42603 | 1.2506 | 672.2 | 537.5 | 39,93 |
| 52.9 | 1.42624 | 1.2513 | 673.8 | 538.5 | 40,02 |
| 53.0 | 1.42645 | 1.2520 | 675.5 | 539.5 | 40,12 |
| 53.1 | 1.42667 | 1.2525 | 677.1 | 540.6 | 40,22 |
| 53.2 | 1.42689 | 1.2530 | 678.5 | 541.5 | 40,30 |
| 53.3 | 1.42711 | 1.2535 | 680.2 | 542.6 | 40,40 |
| 53.4 | 1.42733 | 1.2540 | 681.8 | 543.7 | 40,50 |
| 53.5 | 1.42754 | 1.2546 | 683.4 | 544.7 | 40,59 |
| 53.6 | 1.42776 | 1.2553 | 685.1 | 545.8 | 40,69 |
| 53.7 | 1.42797 | 1.2560 | 686.7 | 546.7 | 40,79 |
| 53.8 | 1.42819 | 1.2566 | 688.4 | 547.8 | 40,89 |
| 53.9 | 1.42840 | 1.2573 | 690.1 | 548.9 | 40,99 |
| 54.0 | 1.42861 | 1.2580 | 691.7 | 549.8 | 41,09 |
| 54.1 | 1.42884 | 1.2585 | 693.3 | 550.9 | 41,18 |
| 54.2 | 1.42906 | 1.2590 | 694.9 | 551.9 | 41,28 |
| 54.3 | 1.42927 | 1.2595 | 696.5 | 553.0 | 41,37 |
| 54.4 | 1.42949 | 1.2600 | 698.1 | 554.0 | 41,47 |
| 54.5 | 1.42971 | 1.2606 | 699.7 | 555.1 | 41,56 |
| 54.6 | 1.42993 | 1.2613 | 701.4 | 556.1 | 41,66 |
| 54.7 | 1.43014 | 1.2620 | 703.1 | 557.1 | 41,76 |
| 54.8 | 1.43036 | 1.2625 | 704.7 | 558.2 | 41,86 |
| 54.9 | 1.43058 | 1.2630 | 706.2 | 559.1 | 41,95 |
| 55.0 | 1.43079 | 1.2635 | 707.8 | 560.2 | 42,04 |
| 55.1 | 1.43102 | 1.2639 | 709.4 | 561.3 | 42,14 |
| 55.2 | 1.43124 | 1.2645 | 711.0 | 562.3 | 42,23 |
| 55.3 | 1.43146 | 1.2652 | 712.7 | 563.3 | 42,33 |
| 55.4 | 1.43168 | 1.2659 | 714.4 | 564.3 | 42,44 |
| 55.5 | 1.43189 | 1.2665 | 716.1 | 565.4 | 42,54 |
| 55.6 | 1.43211 | 1.2672 | 717.8 | 566.4 | 42,64 |
| 55.7 | 1.43233 | 1.2679 | 719.5 | 567.5 | 42,74 |
| 55.8 | 1.43255 | 1.2685 | 721.1 | 568.5 | 42,83 |
| 55.9 | 1.43277 | 1.2692 | 722.8 | 569.5 | 42,93 |
| 56.0 | 1.43298 | 1.2699 | 724.5 | 570.5 | 43,04 |
| 56.1 | 1.43321 | 1.2703 | 726.1 | 571.6 | 43,13 |
| 56.2 | 1.43343 | 1.2708 | 727.7 | 572.6 | 43,23 |
| 56.3 | 1.43365 | 1.2713 | 729.3 | 573.7 | 43,32 |
| 56.4 | 1.43387 | 1.2718 | 730.9 | 574.7 | 43,42 |
| 56.5 | 1.43409 | 1.2724 | 732.6 | 575.8 | 43,52 |
| 56.6 | 1.43431 | 1.2731 | 734.3 | 576.8 | 43,62 |
| 56.7 | 1.43454 | 1.2738 | 736.0 | 577.8 | 43,72 |
| 56.8 | 1.43476 | 1.2744 | 737.6 | 578.8 | 43,81 |
| 56.9 | 1.43498 | 1.2751 | 739.4 | 579.9 | 43,92 |
| 57.0 | 1.43519 | 1.2758 | 741.1 | 580.9 | 44,02 |
| 57.1 | 1.43542 | 1.2763 | 742.8 | 582.0 | 44,12 |
| 57.2 | 1.43564 | 1.2768 | 744.4 | 583.0 | 44,22 |
| 57.3 | 1.43586 | 1.2773 | 745.9 | 584.0 | 44,31 |
| 57.4 | 1.43609 | 1.2778 | 747.6 | 585.1 | 44,41 |
| 57.5 | 1.43631 | 1.2784 | 749.3 | 586.1 | 44,51 |
| 57.6 | 1.43653 | 1.2791 | 751.0 | 587.1 | 44,61 |
| 57.7 | 1.43675 | 1.2798 | 752.7 | 588.1 | 44,71 |
| 57.8 | 1.43698 | 1.2804 | 754.4 | 589.2 | 44,81 |
| 57.9 | 1.43720 | 1.2810 | 756.1 | 590.2 | 44,91 |
| 58.0 | 1.43741 | 1.2818 | 757.8 | 591.2 | 45,01 |
| 58.1 | 1.43764 | 1.2822 | 759.5 | 592.3 | 45,11 |
| 58.2 | 1.43784 | 1.2827 | 761.1 | 593.4 | 45,21 |
| 58.3 | 1.43809 | 1.2832 | 762.6 | 594.3 | 45,30 |
| 58.4 | 1.43832 | 1.2837 | 764.3 | 595.4 | 45,40 |
| 58.5 | 1.43854 | 1.2843 | 766.0 | 596.4 | 45,50 |
| 58.6 | 1.43877 | 1.2850 | 767.8 | 597.5 | 45,61 |
| 58.7 | 1.43899 | 1.2857 | 769.5 | 598.5 | 45,71 |
| 58.8 | 1.43922 | 1.2863 | 771.1 | 599.5 | 45,80 |
| 58.9 | 1.43944 | 1.2869 | 772.9 | 600.6 | 45,91 |
| 59.0 | 1.43966 | 1.2876 | 774.6 | 601.6 | 46,01 |
| 59.1 | 1.43988 | 1.2882 | 776.3 | 602.6 | 46,11 |
| 59.2 | 1.44011 | 1.2889 | 778.1 | 603.7 | 46,22 |
| 59.3 | 1.44034 | 1.2896 | 779.8 | 604.7 | 46,32 |
| 59.4 | 1.44057 | 1.2902 | 781.6 | 605.8 | 46,43 |
| 59.5 | 1.44079 | 1.2909 | 783.3 | 606.8 | 46,53 |
| 59.6 | 1.44102 | 1.2916 | 785.2 | 607.9 | 46,64 |
| 59.7 | 1.44124 | 1.2921 | 786.8 | 608.9 | 46,74 |
| 59.8 | 1.44147 | 1.2926 | 788.4 | 609.9 | 46,83 |
| 59.9 | 1.44169 | 1.2931 | 790.0 | 610.9 | 46,93 |
| 60.0 | 1.44192 | 1.2936 | 791.7 | 612.0 | 47,03 |
| 60.1 | 1.44215 | 1.2942 | 793.3 | 613.0 | 47,12 |
| 60.2 | 1.44238 | 1.2949 | 795.2 | 614.1 | 47,23 |
| 60.3 | 1.44260 | 1.2956 | 796.9 | 615.1 | 47,34 |
| 60.4 | 1.44283 | 1.2962 | 798.6 | 616.1 | 47,44 |
| 60.5 | 1.44305 | 1.2969 | 800.5 | 617.2 | 47,55 |
| 60.6 | 1.44328 | 1.2976 | 802.2 | 618.2 | 47,65 |
| 60.7 | 1.44351 | 1.2981 | 803.9 | 619.3 | 47,75 |
| 60.8 | 1.44374 | 1.2986 | 805.5 | 620.3 | 47,85 |
| 60.9 | 1.44397 | 1.2991 | 807.1 | 621.3 | 47,94 |
| 61.0 | 1.44419 | 1.2996 | 808.7 | 622.3 | 48,04 |
| 61.1 | 1.44442 | 1.3002 | 810.5 | 623.4 | 48,14 |
| 61.2 | 1.44465 | 1.3009 | 812.3 | 624.4 | 48,25 |
| 61.3 | 1.44488 | 1.3016 | 814.2 | 625.5 | 48,36 |
| 61.4 | 1.44511 | 1.3022 | 815.8 | 626.5 | 48,46 |
| 61.5 | 1.44534 | 1.3029 | 817.7 | 627.6 | 48,57 |
| 61.6 | 1.44557 | 1.3036 | 819.4 | 628.6 | 48,67 |
| 61.7 | 1.44580 | 1.3042 | 821.3 | 629.7 | 48,79 |
| 61.8 | 1.44603 | 1.3049 | 823.0 | 630.7 | 48,89 |
| 61.9 | 1.44626 | 1.3056 | 824.8 | 631.7 | 48,99 |
| 62.0 | 1.44648 | 1.3062 | 826.6 | 632.8 | 49,10 |
| 62.1 | 1.44672 | 1.3068 | 828.3 | 633.8 | 49,20 |
| 62.2 | 1.44695 | 1.3075 | 830.0 | 634.8 | 49,30 |
| 62.3 | 1.44718 | 1.3080 | 831.8 | 635.9 | 49,40 |
| 62.4 | 1.44741 | 1.3085 | 833.4 | 636.9 | 49,50 |
| 62.5 | 1.44764 | 1.3090 | 835.1 | 638.0 | 49,60 |
| 62.6 | 1.44787 | 1.3095 | 836.8 | 639.0 | 49,71 |
| 62.7 | 1.44810 | 1.3101 | 838.5 | 640.0 | 49,81 |
| 62.8 | 1.44833 | 1.3108 | 840.2 | 641.0 | 49,91 |
| 62.9 | 1.44856 | 1.3115 | 842.1 | 642.1 | 50,02 |
| 63.0 | 1.44879 | 1.3121 | 843.8 | 643.1 | 50,12 |
| 63.1 | 1.44902 | 1.3128 | 845.7 | 644.2 | 50,23 |
| 63.2 | 1.44926 | 1.3135 | 847.5 | 645.2 | 50,34 |
| 63.3 | 1.44949 | 1.3141 | 849.3 | 646.3 | 50,45 |
| 63.4 | 1.44972 | 1.3148 | 851.1 | 647.3 | 50,56 |
| 63.5 | 1.44995 | 1.3155 | 853.0 | 648.4 | 50,67 |
| 63.6 | 1.45019 | 1.3161 | 854.7 | 649.4 | 50,77 |
| 63.7 | 1.45042 | 1.3168 | 856.5 | 650.4 | 50,88 |
| 63.8 | 1.45065 | 1.3175 | 858.4 | 651.5 | 50,99 |
| 63.9 | 1.45088 | 1.3180 | 860.0 | 652.5 | 51,08 |
| 64.0 | 1.45112 | 1.3185 | 861.6 | 653.5 | 51,18 |
| 64.1 | 1.45135 | 1.3190 | 863.4 | 654.6 | 51,29 |
| 64.2 | 1.45158 | 1.3195 | 865.1 | 655.6 | 51,39 |
| 64.3 | 1.45181 | 1.3201 | 866.9 | 656.7 | 51,49 |
| 64.4 | 1.45205 | 1.3208 | 868.7 | 657.7 | 51,60 |
| 64.5 | 1.45228 | 1.3215 | 870.6 | 658.8 | 51,71 |
| 64.6 | 1.45252 | 1.3221 | 872.3 | 659.8 | 51,81 |
| 64.7 | 1.45275 | 1.3228 | 874.1 | 660.8 | 51,92 |
| 64.8 | 1.45299 | 1.3235 | 876.0 | 661.9 | 52,03 |
| 64.9 | 1.45322 | 1.3241 | 877.8 | 662.9 | 52,14 |
| 65.0 | 1.45347 | 1.3248 | 879.7 | 664.0 | 52,25 |
| 65.1 | 1.45369 | 1.3255 | 881.5 | 665.0 | 52,36 |
| 65.2 | 1.45393 | 1.3261 | 883.2 | 666.0 | 52,46 |
| 65.3 | 1.45416 | 1.3268 | 885.0 | 667.0 | 52,57 |
| 65.4 | 1.45440 | 1.3275 | 886.9 | 668.1 | 52,68 |
| 65.5 | 1.45463 | 1.3281 | 888.8 | 669.2 | 52,79 |
| 65.6 | 1.45487 | 1.3288 | 890.6 | 670.2 | 52,90 |
| 65.7 | 1.45510 | 1.3295 | 892.4 | 671.2 | 53,01 |
| 65.8 | 1.45534 | 1.3301 | 894.2 | 672.3 | 53,12 |
| 65.9 | 1.45557 | 1.3308 | 896.0 | 673.3 | 53,22 |
| 66.0 | 1.45583 | 1.3315 | 898.0 | 674.4 | 53,34 |
| 66.1 | 1.45605 | 1.3320 | 899.6 | 675.4 | 53,44 |
| 66.2 | 1.45629 | 1.3325 | 901.3 | 676.4 | 53,54 |
| 66.3 | 1.45652 | 1.3330 | 903.1 | 677.5 | 53,64 |
| 66.4 | 1.45676 | 1.3335 | 904.8 | 678.5 | 53,75 |
| 66.5 | 1.45700 | 1.3341 | 906.7 | 679.6 | 53,86 |
| 66.6 | 1.45724 | 1.3348 | 908.5 | 680.6 | 53,96 |
| 66.7 | 1.45747 | 1.3355 | 910.4 | 681.7 | 54,08 |
| 66.8 | 1.45771 | 1.3361 | 912.2 | 682.7 | 54,18 |
| 66.9 | 1.45795 | 1.3367 | 913.9 | 683.7 | 54,29 |
| 67.0 | 1.45820 | 1.3374 | 915.9 | 684.8 | 54,40 |
| 67.1 | 1.45843 | 1.3380 | 917.6 | 685.8 | 54,51 |
| 67.2 | 1.45867 | 1.3387 | 919.6 | 686.9 | 54,62 |
| 67.3 | 1.45890 | 1.3395 | 921.4 | 687.9 | 54,73 |
| 67.4 | 1.45914 | 1.3400 | 923.1 | 688.9 | 54,83 |
| 67.5 | 1.45938 | 1.3407 | 925.1 | 690.0 | 54,95 |
| 67.6 | 1.45962 | 1.3415 | 927.0 | 691. 0 | 55,06 |
| 67.7 | 1.45986 | 1.3420 | 928.8 | 692.1 | 55,17 |
| 67.8 | 1.46010 | 1.3427 | 930.6 | 693.1 | 55,28 |
| 67.9 | 1.46034 | 1.3434 | 932.6 | 694.2 | 55,40 |
| 68.0 | 1.46060 | 1.3440 | 934.4 | 695.2 | 55,50 |
| 68.1 | 1.46082 | 1.3447 | 936.2 | 696.2 | 55,61 |
| 68.2 | 1.46106 | 1.3454 | 938.0 | 697.2 | 55,72 |
| 68.3 | 1.46130 | 1.3460 | 939.9 | 698.3 | 55,83 |
| 68.4 | 1.46154 | 1.3466 | 941.8 | 699.4 | 55,94 |
| 68.5 | 1.46178 | 1.3473 | 943.7 | 700.4 | 56,06 |
| 68.6 | 1.46202 | 1.3479 | 945.4 | 701.4 | 56,16 |
| 68.7 | 1.46226 | 1.3486 | 947.4 | 702.5 | 56,28 |
| 68.8 | 1.46251 | 1.3493 | 949.2 | 703.5 | 56,38 |
| 68.9 | 1.46275 | 1.3499 | 951.1 | 704.6 | 56,50 |
| 69.0 | 1.46301 | 1.3506 | 953.0 | 705.6 | 56,61 |
| 69.1 | 1.46323 | 1.3513 | 954.8 | 706.6 | 56,72 |
| 69.2 | 1.46347 | 1.3519 | 956.7 | 707.7 | 56,81 |
| 69.1 | 1.46371 | 1.3526 | 958.6 | 708.7 | 56,94 |
| 69.4 | 1.46396 | 1.3533 | 960.6 | 709.8 | 57,06 |
| 69.5 | 1.46420 | 1.3539 | 962.4 | 710.8 | 57,17 |
| 69.6 | 1.46444 | 1.3546 | 964.3 | 711.9 | 57,28 |
| 69.7 | 1.46468 | 1.3553 | 966.2 | 712.9 | 57,39 |
| 69.8 | 1.46493 | 1.3560 | 968.2 | 714.0 | 57,51 |
| 69.9 | 1.46517 | 1.3566 | 970.0 | 715.0 | 57,62 |
| 70.0 | 1.46544 | 1.3573 | 971.8 | 716.0 | 57,72 |
| 70.1 | 1.46565 | 1.3579 | 973.8 | 717.1 | 57,84 |
| 70.2 | 1.46590 | 1.3586 | 975.6 | 718.1 | 57,95 |
| 70.3 | 1.466614 | 1.3593 | 977.6 | 719.2 | 58,07 |
| 70.4 | 1.46639 | 1.3599 | 979.4 | 720.2 | 58,18 |
| 70.5 | 1.46663 | 1.3606 | 981.3 | 721.2 | 58,29 |
| 70.6 | 1.46688 | 1.3613 | 983.3 | 722.3 | 58,41 |
| 70.7 | 1.46712 | 1.3619 | 985.2 | 723.4 | 58,52 |
| 70.8 | 1.46737 | 1.3626 | 987.1 | 724.4 | 58,63 |
| 70.9 | 1.46761 | 1.3633 | 988.9 | 725.4 | 58,74 |
| 71.0 | 1.46789 | 1.3639 | 990.9 | 726.5 | 58,86 |
| 71.1 | 1.46810 | 1.3646 | 992.8 | 727.5 | 58,97 |
| 71.2 | 1.46835 | 1.3653 | 994.8 | 728.6 | 59,09 |
| 71.3 | 1.46859 | 1.3659 | 996.6 | 729.6 | 59,20 |
| 71.4 | 1.46884 | 1.3665 | 998.5 | 730.7 | 59,31 |
| 71.5 | 1.46908 | 1.3672 | 1000.4 | 731.7 | 59,42 |
| 71.6 | 1.46933 | 1.3678 | 1002.2 | 732.7 | 59,53 |
| 71.7 | 1.46957 | 1.3685 | 1004.2 | 733.8 | 59,65 |
| 71.8 | 1.46982 | 1.3692 | 1006.1 | 734.8 | 59,76 |
| 71.9 | 1.47007 | 1.3698 | 1008.0 | 735.9 | 59,88 |
| 72.0 | 1.47036 | 1.3705 | 1009.9 | 736.9 | 59,99 |
| 72.1 | 1.47056 | 1.3712 | 1012.0 | 738.0 | 60,11 |
| 72.2 | 1.47081 | 1.3718 | 1013.8 | 739.0 | 60,22 |
| 72.3 | 1.47106 | 1.3725 | 1015.7 | 740.0 | 60,33 |
| 72.4 | 1.47131 | 1.3732 | 1017.7 | 741.1 | 60,45 |
| 72.5 | 1.47155 | 1.3738 | 1019.5 | 742.1 | 60,56 |
| 72.6 | 1.47180 | 1.3745 | 1021.5 | 743.2 | 60,68 |
| 72.7 | 1.47205 | 1.3752 | 1023.4 | 744.2 | 60,79 |
| 72.8 | 1.47230 | 1.3758 | 1025.4 | 745.3 | 60,91 |
| 72.9 | 1.47254 | 1.3765 | 1027.3 | 746.3 | 61,02 |
| 73.0 | 1.47284 | 1.3772 | 1029.3 | 747.4 | 61,14 |
| 73.1 | 1.47304 | 1.3778 | 1031.2 | 748.4 | 61,25 |
| 73.2 | 1.47329 | 1.3785 | 1033.2 | 749.5 | 61,37 |
| 73.3 | 1.47354 | 1.3792 | 1035.1 | 750.5 | 61,48 |
| 73.4 | 1.47379 | 1.3798 | 1037.1 | 751.6 | 61,60 |
| 73.5 | 1.47404 | 1.3805 | 1039.0 | 752.6 | 61,72 |
| 73.6 | 1.47429 | 1.3812 | 1040.0 | 753.6 | 61,83 |
| 73.7 | 1.47454 | 1.3818 | 1042.8 | 754.7 | 61,94 |
| 73.8 | 1.47479 | 1.3825 | 1044.8 | 755.7 | 62,06 |
| 73.9 | 1.47504 | 1.3832 | 1046.8 | 756.8 | 62,18 |
| 74.0 | 1.47534 | 1.3838 | 1048.6 | 757.8 | 62,28 |
| 74.1 | 1.47554 | 1.3845 | 1050.7 | 758.9 | 62,41 |
| 74.2 | 1.47579 | 1.3852 | 1052.6 | 759.9 | 62,52 |
| 74.1 | 1.47606 | 1.3858 | 1054.6 | 761.0 | 62,64 |
| 74.4 | 1.47629 | 1.3865 | 1056.5 | 762.0 | 62,76 |
| 74.5 | 1.47654 | 1.3871 | 1058.5 | 763.1 | 62,87 |
| 74.6 | 1.47679 | 1.3878 | 1060.4 | 764.1 | 62,99 |
| 74.7 | 1.47704 | 1.3885 | 1062.3 | 765.1 | 63,10 |
| 74.8 | 1.47730 | 1.3892 | 1064.4 | 766.2 | 63,23 |
| 74.9 | 1.47755 | 1.3898 | 1066.3 | 767.2 | 63,33 |
| 75.0 | 1.47785 | 1.3905 | 1068.3 | 768.3 | 63,46 |
3. Определяне алкохолното съдържание
1. Определение
Алкохолното съдържание e равно на литрите етилов алкохол, съдържащи се в 100 литра вино, измерени при 20 градуса C. Обозначава се със символа "об. %".
Забележка. Хомолозите на етиловия алкохол заедно с производните му като етилови естери, включени в алкохолното съдържание, остават, тъй като преминават в дестилата.
2. Принцип на метода
2.1. Методът се основава на дестилация на вино, алкализирано с калциев хидроксид, и измерване на алкохолното съдържание на дестилата.
2.2. Сравнителен метод - измерване плътността на дестилата с помощта на пикнометър.
2.3. Обикновени методи:
2.3.1. Измерване на алкохолното съдържание на дестилата с помощта на ареометър.
2.3.2. Измерване на алкохолното съдържание на дестилата чрез денсиметрия с използване на хидростатични везни.
2.3.3. Измерване на алкохолното съдържание на дестилата чрез рефрактометрия.
Забележка. За да се изчисли алкохолното съдържание от плътността на дестилата, се използват таблици I, II и III, приети от OIV (Обща асамблея, 1974 г.).
Таблица I дава общата формула, изразяваща връзката между алкохолното съдържание спрямо обема и плътността на смеси на алкохол и вода като функция от температурата.
3. Получаване на дестилат
3.1. Апаратура
3.1.1. Дестилираща апаратура, състояща се от:
- колба от един литър с кръгло дъно, със съединителни елементи от шлифовано стъкло;
- ректификационна колона с височина около 20 cm или друго устройство, предотвратяващо загубите;
- източник на топлина; чрез подходяща конструкция трябва да се предотврати възникването на пиролиза на извлеченото вещество;
- хладник с изтеглен край, който отвежда дестилата до дъното на мерителна колба, съдържаща няколко милилитра вода.
3.1.2. Устройство за парна дестилация, състоящо се от:
• парогенератор;
• парна тръба;
• капкоуловител;
• хладник.
Може да бъде използвано устройство за дестилация или за парна дестилация от всякакъв тип, при условие че то изпълнява следните изисквания: дестилират се пет пъти последователно смес от етилов алкохол и вода с алкохолно съдържание 10 об.%; след петата дестилация дестилатът да има алкохолно съдържание поне 9,9 об.%, т.е. загубата на алкохол при всяка отделна дестилация да не надхвърля 0,02 об.%.
3.2. Реактиви
3.2.1. Суспензия на 2M калциев хидроксид.
Получава се чрез внимателно заливане на 120 g негасена вар (CaO) с един литър вода с температура 60 градуса C-70 градуса C.
3.3. Подготовка на пробата
Основната част от въглеродния диоксид от младите и газирани вина се отстранява чрез разбъркване на 250-300 ml вино в колба от 500 ml.
3.4. Процедура
В мерителна колба от 200 ml се отмерват 200 ml вино. Записва се температурата на виното.
Прелива се виното в дестилационната колба и се поставя парната тръба на устройството за дестилация с водна пара. Изплаква се градуираната колба четири пъти с последователни 5-милилитрови промивки с вода, които се добавят към колбата или към барбутьора. Добавят се 10 ml калциев хидроксид (3.2.1) и няколко стъклени перли.
Дестилатът се събира в колба от 200 ml, която се използва за измерване на виното.
Ако се използва дестилация, се събира количество, съответстващо на около три четвърти от първоначалния обем, или обем между 198 и 199 ml - ако се използва парна дестилация. Разрежда се до 200 ml с дестилирана вода, като трябва да се поддържа температура на дестилата в границите на ± 2градуса C от първоначалните температури.
Разбърква се много внимателно с кръгови движения.
Забележка. В случаите, когато вината съдържат изключително големи концентрации на амониеви йони, дестилатът може да бъде повторно дестилиран при посочените условия, като суспензията на калциев хидроксид се заменя с един милилитър сярна киселина, разредена в съотношение 10 части в 100 части (v:v).
4. Сравнителен метод
Измерване на алкохолното съдържание на дестилата с използване на пикнометър
4.1. Апаратура
4.1.1. Използва се еталониран пикнометър, както е описано в метод "1. Определяне на плътността и относителната плътност при 20 градуса С".
4.2. Процедура
Измерва се наблюдаваната плътност rt на дестилата (3.4) при t градуса C,. както е описано в метод "1. Определяне на плътността и относителната плътност при 20 градуса С", т. 4.3.1 и 4.3.2.
4.3. Изразяване на резултатите
4.3.1. Начин на изчисляване
С помощта на таблица I се определя алкохолното съдържание при 20 градуса C. В хоризонталния ред на тази таблица, съответстващ на температурата T (изразена като цяло число), непосредствено под t градуса C се намира най-малката плътност, която е по-голяма от rt. Отчита се табличната разлика непосредствено под тази плътност за изчисляване на плътността r при тази температура T.
В реда за температурата T се намира плътността r', непосредствено по-висока от r', и се изчислява разликата между плътностите r и r'. Тази разлика се разделя на табличната разлика, вдясно от плътността r'. Частното дава десетичната част на алкохолното съдържание, а цялата част на алкохолното съдържание е посочено отгоре на колоната, в която се намира плътността r'.
Примерът за изчисление на алкохолното съдържание e даден в края на метода.
Забележка. Температурната корекция се влага в компютърна програма и може да се извършва автоматично.
4.3.2. Повторяемост, r:
r = 0,10 об. %.
4.3.3. Възпроизводимост, R
R = 0,19 об. %.
5. Обикновени методи
5.1. Ареометрия
5.1.1. Апаратура
5.1.1.1. Спиртомер
Спиртомерът трябва да отговаря на изискванията за оборудване клас I или клас II и да е еталониран от акредитиращата организация( в съотвествие с изискванията за "Спиртомери и алкохолни ареометри" на OIML - Международната организация по законодателна метрология).
5.1.1.2. Термометър, разграфен в десети от градуса между 0-40 градуса C, калибриран до 1/20 от градуса.
5.1.1.3. Измервателен цилиндър с диаметър 36 mm и височина 320 mm, поддържан вертикално от опорни нивелиращи винтове.
5.1.2. Начин на работа
Дестилатът (3.4) се налива в мерителния цилиндър, който трябва да бъде във вертикално положение. Вкарват се термометърът и спиртомерът. Отчита се температурата по термометъра една минута след разбъркване на пробата, за да се получи равновесие на температурите на мерителния цилиндър, термометъра, спиртомера и дестилата. Изважда се термометърът и се отчита след интервал една минута измереното алкохолно съдържание. Правят се поне три отчитания, използвайки лупа. С помощта на таблица II се коригира измерената при t градуса C концентрация, като се отчита ефектът на температурата.
Температурата на течността трябва да се различава от температурата на околната среда (с не повече от 5 градуса C).
5.2. Определяне на плътността с използване на хидростатични везни
5.2.1. Апаратура
5.2.1.1. Хидростатичните везни се използват по начина, описан в метод "1. Определяне на плътността и относителната плътност при 20 градуса С".
5.2.2. Начин на работа
Наблюдаваната плътност на дестилата при tградуса C се измерва по начина, описан в метод "1. Определяне на плътността и относителната плътност при 20 градуса С", т. 5.2.2.
5.2.3. Изразяване на резултатите
Алкохолното съдържание при 20 градуса C се определя, следвайки метода, описан в 4.3.1, като се използва таблица I, ако поплавъкът е изработен от стъкло Pyrex, или таблица III, ако е изработен от обикновено стъкло.
5.3. Рефрактометрия
5.3.1. Апаратура
5.3.1.1. Рефрактометър, който позволява да се измерва коефициентът на пречупване в диапазона от 1,330 до 1,346.
В зависимост от вида на оборудването измерванията се извършват:
- при 20 градуса C с подходящ уред;
- при температура t градуса C на околната среда с уред, който е снабден с термометър, позволяващ определяне на температурата с точност поне до 0,05 градуса C; заедно с уреда се предоставя и таблица за температурна корекция.
5.3.2. Начин на работа
Коефициентът на пречупване на винения дестилат, получен съгласно т. 3.4, се измерва, като се следва процедурата, предписана за използвания тип устройство.
5.3.3. Изразяване на резултатите
Таблица IV се използва за определяне на алкохолното съдържание, съответстващо на индекса на рефракция при 20 градуса C.
Забележка. Таблица IV съдържа алкохолното съдържание, съответстващо на коефициентите на пречупване както за чисти смеси на алкохол и вода, така и за винени дестилати. В случая на винени дестилати в таблицата е отчетено наличието на примеси в дестилата (предимно висши алкохоли). Присъствието на метилов алкохол намалява коефициента на пречупване, следователно се намалява и алкохолното съдържание.
6. Пример за изчисляване на алкохолното съдържание на вино
6.1. Измерване чрез пикнометър на везни с две еднакви блюда
6.1.1. Константите на пикнометъра са определени и изчислени по начина, описан в метод "1. Определяне на плътността и относителната плътност при 20 градуса С", т. 6.1.1.
6.1.2. Претегляне на пикнометър, който е пълен с дестилат
Числен пример:
Тара = пикнометър + дестилат при t градуса C + p"
p + m-p' = масата на дестилата при t градуса C
105,0698-2,8074 = 102,2624 g.
Измерена плътност при t градуса C
6.1.3. Изчисляване на алкохолното съдържание
| Използва се таблицата | На ред 18 градуса С на таблица I за |
| за плътностите на во- | измерените плътности най- |
| доалкохолните смеси, | малката плътност, която е по- |
| измерени при различни | голяма от наблюдаваната плът- |
| температури, както е | ност от 0,983076, е 0,98398 в |
| посочено в т. 6.1.1. | колона 11 об.%. |
| Плътността при 18 градуса С е: | |
| (98307,6 + 0,7•22) 10-5 = 0,98323 | |
| 0,98398-0,98323 = 0,00075. | |
| Десетичната част на алкохолно- | |
| то съдържание в об.% е = 0,65. | |
| Алкохолното съдържание е 11,65 об.%. |
6.2. Измерване чрез пикнометър на везни с едно блюдо
6.2.1. Константите на пикнометъра са определени и изчислени по начина, описан в метод "1. Определяне на плътността и относителната плътност при 20 градуса С" в т. 6.2.1.
6.2.2. Претегляне на пикнометър, който е пълен с дестилат
Тегло на тарата по време на измерването (в грамове):
T1 = 171,9178.
Пикнометърът, напълнен с дестилат при 20,50 градуса C (в грамове):
P2 = 167,8438.
Корекция от теглото на въздушния стълб:
dT = 171,9178-171,9160 = + 0,0018.
Маса на дестилата при 20,50 градуса C:
Lt = 167,8438-(67,6695 + 0,0018) = 100,1725.
Наблюдавана плътност на дестилата:
| 100,1725 | ||
| r20,50 градуса C = | = 0,983825. | |
| 101,8194 |
6.2.3. Изчисляване на алкохолното съдържание
| Използва се таблицата | На ред 20 градуса С на таблица I за |
| за плътностите на водо- | измерените плътности най- |
| алкохолните смеси, из- | малката плътност, която е по- |
| мерени при различни | голяма от наблюдаваната плът- |
| температури, както е | ност от 0,983825, е 0,98471 в ко- |
| посочено в т.6.2.1. | лона 10 об.%. |
| Плътността при 20 градуса С е: | |
| (98382,5 + 0,50 • 24) 10-5 = 0,983945 | |
| 0,98471-0,983945 = 0,000765. | |
| Десетичната част на алкохол- | |
| ното съдържание в об.% е = 0,64. | |
| Алкохолното съдържание е 10,64 об.%. |
Формула за изчисляване на алкохолното съдържание от таблиците на смесите на етилов алкохол и вода
Плътността "r", изразена в килограми на кубически метър (kg/m3), за смес от етилов алкохол и вода при температура t, в градуси по Целзий (градуса C), се изразява със следната формула като функция на:
- тегловното съдържание (p), изразено като десетично число (Пример: за 12 тегловни части алкохол в 100 тегловни части смес алкохол-вода: р = 0,12.);
- температурата t, в градуси Целзий;
- посочените числени коефициенти.
Формулата е валидна за температури между-20 и +40 градуса C.
n = 5, m3 = 9, m1 = 11, m4 = 4, m2 = 10, m5 = 2.
| Числени коефициенти на формулата |
| k | Ak | Bk | |
| kg/m3 | |||
| 1 | 9,982 012 300 • 102 | -2,061 851 3 • 10-1 kg/(m3 • градуса C) | |
| 2 | -1,929 769 495 • 102 | -5,268 254 2 • 10-3 кg/(m3 • градуса C2) | |
| 3 | 3,891 238 958 • 102 | 3,613 001 3 • 10-5 кg/(m3 • градуса C3) | |
| 4 | -1,668 103 923 • 103 | -3,895 770 2 • 10-7 кg/(m3 • градуса C4) | |
| 5 | 1,352 215 441 • 104 | 7,169 354 0 • 10- 9 кg/(m3 • градуса C5) | |
| 6 | -8,829 278 388 • 104 | -9,973 923 1 • 10-11 кg/(m3 • градуса C6) | |
| 7 | 3,062 874 042 • 105 | ||
| 8 | -6,138 381 234 • 105 | ||
| 9 | 7,470 172 998 • 105 | ||
| 10 | -5,478 461 354 • 105 | ||
| 11 | 2,234 460 334 • 105 | ||
| 12 | -3,903 285 426 • 104 | ||
| k | C1,k | C2,k | |
| кg/(m3 • градуса C) | кg(m3 • градуса C 2) | ||
| 1 | 1,693 443 461 530 087 • 10-1 | -1,193 013 005 057 010 • 10-2 | |
| 2 | -1,046 914 743 455 169 • 101 | 2,517 399 633 803 461 • 10 -1 | |
| 3 | 7,196 353 469 546 523 • 101 | -2,170 575 700 536 993 | |
| 4 | -7,047 478 054 272 792 • 102 | 1,353 034 988 843 029 • 101 | |
| 5 | 3,924 090 430 035 045 • 103 | -5,029 988 758 547 014 • 101 | |
| 6 | -1,210 164 659 068 747 • 104 | 1,096 355 666 577 570 • 102 | |
| 7 | 2,248 646 550 400 788 • 104 | -1,422 753 946 421 155 • 102 | |
| 8 | -2,605 562 982 188 164 • 104 | 1,080 435 942 856 230 • 102 | |
| 9 | 1,852 373 922 069 467 • 104 | -4,414 153 236 817 392 • 101 | |
| 10 | -7,420 201 433 430 137 • 103 | 7,442 971 530 188 783 | |
| 11 | 1,285 617 841 998 974 • 103 | ||
| k | C3,k | C4,k | C5,k |
| кg/(m3 • градуса C3) | kg/(m3 • градуса C4) | кg/(m3 • градуса C5) | |
| 1 | -6,802 995 733 503 803 • 10-4 | 4,075 376 675 622 027 • 10-6 | -2,788 074 354 782 409 • 10-8 |
| 2 | 1,876 837 790 289 664 • 10-2 | -8,763 058 573 471 110 • 10-6 | 1,345 612 883 493 354 • 10-8 |
| 3 | -2,002 561 813 734 156 • 10-l | 6,515 031 360 099 368 • 10-6 | |
| 4 | 1,022 992 966 719 220 | -1,515 784 836 987 210 • 10-6 | |
| 5 | -2,895 696 483 903 638 | ||
| 6 | 4,810 060 584 300 675 | ||
| 7 | -4,672 147 440 794 683 | ||
| 8 | 2,458 043 105 903 461 | ||
| 9 | -5,411 227 621 436 812 • 10-1 |
Таблица I
Международна таблица за отчитане на алкохолното съдържание при 20 градуса С. Таблица на плътността на водоалкохолни смеси, измерени с пикнометър от стъкло Pyrex. Плътностите при t градуса C, коригирани с отчитане на теглото на въздушния стълб
| t °C | Алкохол в об.% |
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 |
| 0 | 999,64 | 1,50 | 998,14 | 1,44 | 996,70 | 1,40 | 995,30 | 1,35 | 993,95 | 1,30 | 992,65 | 1,24 | 991,41 | 1,19 | 990,22 | 1,14 | 989,08 | 1,10 | 987,98 | 1,05 | 986,93 | 1,00 | 985,93 | 0,95 |
| -0,07 | -0,06 | -0,06 | -0,06 | -0,06 | -0,06 | -0,06 | -0,05 | -0,04 | -0,03 | -0,02 | -0,01 | |||||||||||||
| 1 | 999,71 | 1,51 | 998,20 | 1,44 | 996,76 | 1,40 | 995,36 | 1,35 | 994,01 | 1,30 | 992,71 | 1,24 | 991,47 | 1,20 | 990,27 | 1,15 | 989,12 | 1,11 | 988,01 | 1,06 | 986,95 | 1,01 | 985,94 | 0,97 |
| -0,05 | -0,05 | -0,04 | -0,04 | -0,04 | -0,04 | -0,03 | -0,03 | -0,02 | -0,02 | -0,01 | 0,00 | |||||||||||||
| 2 | 999,76 | 1,51 | 998,25 | 1,45 | 996,80 | 140 | 995,40 | 1,35 | 994,05 | 1,30 | 992,75 | 1,25 | 991,50 | 1,20 | 990,30 | 1,16 | 989,14 | 1,11 | 988,03 | 1,07 | 986,96 | 1,02 | 985,94 | 0,98 |
| -0,03 | -003 | -0,03 | -0,02 | -0,02 | -0,02 | -0,02 | -0,01 | -0,01 | 0,00 | 0,01 | 0,02 | |||||||||||||
| 3 | 999,79 | 1,51 | 998,28 | 1,45 | 996,83 | 1,41 | 995,42 | 1,35 | 994,07 | 1,30 | 992,77 | 1,25 | 991,52 | 1,21 | 990,31 | 1,16 | 989,15 | 1,12 | 988,03 | 1,08 | 986,95 | 1,03 | 985,92 | 1,00 |
| -0,02 | -0,02 | -0,01 | -0,02 | -0,01 | -0,01 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,02 | 0,03 | 0,04 | |||||||||||||
| 4 | 999,81 | 1,51 | 948,30 | 1,46 | 996,84 | 1,40 | 995,44 | 1,36 | 994,08 | 1,30 | 992,78 | 1,26 | 991,52 | 1,21 | 990,31 | 1,17 | 989,14 | 1,13 | 988,01 | 1,09 | 986,92 | 1,04 | 985,88 | 1,00 |
| 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,03 | 0,04 | 0,05 | |||||||||||||
| 5 | 999,81 | 1,51 | 998,30 | 1,46 | 996,84 | 1,40 | 995,44 | 1,37 | 994,07 | 1,31 | 992,76 | 1,26 | 991,50 | 1,21 | 990,29 | 1,17 | 989,12 | 1,14 | 987,98 | 1,10 | 986,88 | 1,05 | 985,83 | 1,01 |
| 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,02 | 0,01 | 0,02 | 0,03 | 0,04 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,06 | |||||||||||||
| 6 | 999,80 | 1,51 | 998,29 | 1,46 | 996,83 | 1,41 | 995,42 | 1,36 | 994,06 | 1,32 | 992,74 | 1,27 | 991,47 | 1,22 | 990,25 | 1,18 | 989,07 | 1,14 | 987,93 | 1,10 | 986,83 | 1,06 | 985,77 | 1,03 |
| 0,03 | 0,03 | 0,03 | 0,03 | 0,04 | 0,04 | 0,04 | 0,05 | 0,06 | 0,07 | 0,08 | 0,09 | |||||||||||||
| 7 | 999,77 | 1,51 | 998,26 | 1,46 | 996,80 | 1,41 | 995,39 | 1,37 | 994,02 | 1,32 | 992,70 | 1,27 | 991,43 | 1,23 | 990,20 | 1,19 | 989,01 | 1,15 | 987,86 | 1,11 | 986,75 | 1,07 | 985,68 | 1,03 |
| 0,05 | 0,04 | 0,04 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,06 | 0,06 | 0,07 | 0,08 | 0,09 | |||||||||||||
| 8 | 999,72 | 1,50 | 998,22 | 1,46 | 996,76 | 1,42 | 995,34 | 1,37 | 993,97 | 1,32 | 992,65 | 1,27 | 991,38 | 1,24 | 990,14 | 1,19 | 988,95 | 1,16 | 987,79 | 1,12 | 986,67 | 1,08 | 985,59 | 1,05 |
| 0,05 | 0,06 | 0,06 | 0,06 | 0,06 | 0,06 | 0,07 | 0,07 | 0,08 | 0,09 | 0,10 | 0,11 | |||||||||||||
| 9 | 999,67 | 1,51 | 998,16 | 1,46 | 996,70 | 1,42 | 995,28 | 1,37 | 993,91 | 1,32 | 992,59 | 1,28 | 991,31 | 1,24 | 990,07 | 1,20 | 988,87 | 1,17 | 987,70 | 1,13 | 986,57 | 1,09 | 985,48 | 1,06 |
| 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,08 | 0,08 | 0,09 | 0,09 | 0,10 | 0,11 | 0,12 | |||||||||||||
| 10 | 999,60 | 1,51 | 948,04 | 1,46 | 996,63 | 1,42 | 995,21 | 1,37 | 993,84 | 1,33 | 992,51 | 1,28 | 991,23 | 1,25 | 989,98 | 1,20 | 988,78 | 1,17 | 987,60 | 1,14 | 986,46 | 1,10 | 485,36 | 1,06 |
| 0,09 | 0,09 | 0,09 | 0,08 | 0,09 | 0,09 | 0,10 | 0,10 | 0,11 | 0,11 | 0,12 | 0,13 | |||||||||||||
| 11 | 999,51 | 1,51 | 998,09 | 1,46 | 996,54 | 1,41 | 995,13 | 1,38 | 993,75 | 1,33 | 992,42 | 1,29 | 991,13 | 1,25 | 989,88 | 1,21 | 988,67 | 1,18 | 987,49 | 1,15 | 986,34 | 1,11 | 985,23 | 1,07 |
| 0,10 | 0,09 | 009 | 0,10 | 0,10 | 0,11 | 0,11 | 0,11 | 0,12 | 0,13 | 0,13 | 0,14 | |||||||||||||
| 12 | 999,41 | 1,50 | 997,91 | 1,46 | 996,45 | 1,42 | 995,03 | 1,38 | 993,65 | 1,34 | 992,31 | 1,29 | 991,02 | 1,25 | 989,77 | 1,22 | 988,55 | 1,19 | 987,36 | 1,15 | 986,21 | 1,12 | 985,09 | 1,09 |
| 0,11 | 0,11 | 0,11 | 0,11 | 0,11 | 0,11 | 0,12 | 0,12 | 0,13 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | |||||||||||||
| 13 | 999,30 | 1,50 | 997,80 | 1,46 | 996,34 | 1,42 | 994,92 | 1,38 | 993,54 | 1,34 | 992,20 | 1,30 | 990,90 | 1,25 | 989,65 | 1,23 | 988,42 | 1,20 | 987,22 | 1,16 | 986,06 | 1,13 | 984,93 | 1,09 |
| 0,12 | 0,12 | 0,12 | 0,13 | 0,13 | 0,13 | 0,13 | 0,14 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | 0,16 | |||||||||||||
| 14 | 999,18 | 1,50 | 997,68 | 1,46 | 996,22 | 1,43 | 994,79 | 1,38 | 993,41 | 1,34 | 942,07 | 1,30 | 990,77 | 1,26 | 989,51 | 1,23 | 988,28 | 1,21 | 987,07 | 1,17 | 985,90 | 1,13 | 984,77 | 1,10 |
| 0,13 | 0,14 | 0,14 | 0,13 | 0,13 | 0,14 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | 0,16 | 0,17 | 0,18 | |||||||||||||
| 15 | 999,05 | 1,51 | 997,54 | 1,46 | 996,08 | 1,42 | 994,66 | 1,38 | 993,28 | 1,35 | 991,93 | 1,30 | 990,63 | 1,27 | 989,36 | 1,24 | 988,12 | 1,21 | 986,91 | 1,18 | 985,73 | 1,14 | 984,59 | 1,12 |
| 0,15 | 0,14 | 0,14 | 0,15 | 0,15 | 0,15 | 0,16 | 0,16 | 0,17 | 0,17 | 0,18 | 0,19 | |||||||||||||
| 16 | 998,90 | 1,50 | 997,40 | 1,46 | 995,94 | 1,43 | 994,51 | 1,38 | 993,13 | 1,35 | 991,78 | 1,31 | 990,47 | 1,27 | 989,20 | 1,25 | 987,95 | 1,21 | 986,74 | 1,19 | 985,55 | 1,15 | 984,40 | 1,13 |
| 0,16 | 0,16 | 0,10 | 0,16 | 0,16 | 0,17 | 0,17 | 0,18 | 0,18 | 0,19 | 0,19 | 0,20 | |||||||||||||
| 17 | 998,74 | 1,50 | 997,24 | 1,46 | 995,78 | 1,43 | 994,35 | 1,38 | 942,47 | 1,36 | 991,61 | 1,31 | 990,30 | 1,28 | 989,02 | 1,25 | 987,77 | 1,22 | 986,55 | 1,19 | 985,36 | 1,16 | 985,20 | 1,14 |
| 0,17 | 0,17 | 0,17 | 0,16 | 0,17 | 0,17 | 0,18 | 0,18 | 0,19 | 0,20 | 0,21 | 0,22 | |||||||||||||
| 18 | 998,57 | 1,50 | 947,07 | 1,46 | 995,61 | 1,42 | 994,19 | 1,39 | 992,80 | 1,36 | 991,44 | 1,32 | 990,12 | 1,28 | 988,84 | 1,26 | 987,58 | 1,23 | 986,35 | 1,20 | 985,15 | 1,17 | 983,98 | 1,14 |
| 0,18 | 0,18 | 0,18 | 0,19 | 0,19 | 0,19 | 0,19 | 0,20 | 0,20 | 0,20 | 0,21 | 0,22 | |||||||||||||
| 19 | 998,39 | 1,50 | 996,89 | 1,46 | 995,43 | 1,43 | 994,00 | 1,39 | 992,61 | 1,36 | 991,25 | 1,32 | 989,93 | 1,29 | 988,64 | 1,26 | 987,38 | 1,23 | 986,15 | 1,21 | 984,94 | 1,10 | 983,76 | 1,16 |
| 0,19 | 0,19 | 0,19 | 0,19 | 0,19 | 0,19 | 0,20 | 0,20 | 0,21 | 0,22 | 0,23 | 0,24 | |||||||||||||
| 20 | 998,20 | 1,50 | 996,70 | 1,46 | 995,24 | 1,43 | 993,81 | 1,39 | 992,42 | 1,36 | 991,06 | 1,33 | 989,73 | 1,29 | 988,44 | 1,27 | 987,17 | 1,24 | 985,93 | 1,22 | 984,71 | 1,19 | 983,52 | 1,16 |
| 0,20 | 0,20 | 0,20 | 0,20 | 0,21 | 0,21 | 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,23 | 0,24 | 0,24 | |||||||||||||
| 21 | 998,00 | 1,50 | 996,50 | 1,46 | 995,04 | 1,43 | 993,61 | 1,40 | 992,21 | 1,36 | 990,85 | 1,33 | 989,52 | 1,30 | 988,22 | 1,27 | 986,95 | 1,25 | 985,70 | 1,23 | 984,47 | 1,19 | 983,28 | 1,18 |
| 0,21 | 0,21 | 0,21 | 0,21 | 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,23 | 0,24 | 0,24 | 0,24 | 0,26 | |||||||||||||
| 22 | 997,79 | 1,50 | 996,29 | 1,46 | 994,83 | 1,4,3 | 993,40 | 1,40 | 992,00 | 1,37 | 990,63 | 1,33 | 989,30 | 1,31 | 987,99 | 1,28 | 986,71 | 1,25 | 985,46 | 1,23 | 984,23 | 1,21 | 983,02 | 1,22 |
| 0,22 | 0,22 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,24 | 0,24 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,25 | |||||||||||||
| 23 | 997,57 | 1,50 | 946,07 | 1,47 | 994,60 | 1,43 | 993,17 | 1,40 | 991,77 | 1,37 | 990,40 | 1,34 | 989,06 | 1,31 | 987,75 | 1,28 | 986,47 | 1,26 | 985,21 | 1,24 | 983,97 | 1,20 | 982,77 | 1,20 |
| 0,24 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,24 | 0,24 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,26 | 0,27 | 0,29 | |||||||||||||
| 24 | 997,33 | 1,49 | 995,84 | 1,47 | 994,37 | 1,43 | 992,94 | 1,41 | 991,53 | 1,37 | 990,16 | 1,34 | 988,82 | 1,32 | 987,50 | 1,29 | 986,21 | 1,26 | 984,95 | 1,25 | 983,70 | 1,22 | 982,48 | 1,20 |
| 0,24 | 0,25 | 0,24 | 0,25 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,26 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,28 | |||||||||||||
| 25 | 997,09 | 1,50 | 995,59 | 1,46 | 994,13 | 1,44 | 992,69 | 1,40 | 991,29 | 1,38 | 989,91 | 1,35 | 988,56 | 1,32 | 987,24 | 1,29 | 985,95 | 1,27 | 984,68 | 1,26 | 983,42 | 1,22 | 982,20 | 1,21 |
| 0,25 | 0,25 | 0,26 | 0,25 | 0,26 | 0,26 | 0,26 | 0,26 | 0,28 | 0,28 | 0,28 | 0,30 | |||||||||||||
| 26 | 996,84 | 1,50 | 995,34 | 1,47 | 993,87 | 1,43 | 992,44 | 1,41 | 991,03 | 1,38 | 989,65 | 1,35 | 988,30 | 1,32 | 986,98 | 1,31 | 985,67 | 1,27 | 484,40 | 1,26 | 983,14 | 1,24 | 981,90 | 1,22 |
| 0,26 | 0,26 | 0,26 | 0,27 | 0,27 | 0,27 | 0,27 | 0,28 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,30 | |||||||||||||
| 27 | 996,58 | 1,50 | 995,08 | 1,47 | 993,61 | 1,44 | 992,17 | 1,41 | 990,76 | 1,38 | 989,38 | 1,35 | 988,03 | 1,33 | 986,70 | 1,31 | 985,39 | 1,28 | 984,11 | 1,27 | 982,84 | 1,24 | 981,60 | 1,23 |
| 0,27 | 0,27 | 0,27 | 0,27 | 0,28 | 0,28 | 0,29 | 0,29 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,32 | |||||||||||||
| 28 | 996,31 | 1,50 | 994,81 | 1,47 | 993,34 | 1,44 | 991,90 | 1,42 | 990,48 | 1,38 | 989,10 | 1,36 | 987,74 | 1,33 | 986,41 | 1,31 | 985,10 | 1,29 | 983,81 | 1,28 | 982,53 | 1,25 | 981,28 | 1,23 |
| 0,28 | 0,28 | 0,28 | 0,29 | 0,28 | 0,29 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,32 | |||||||||||||
| 29 | 996,03 | 1,50 | 994,53 | 1,47 | 993,06 | 1,45 | 991,61 | 1,41 | 990,20 | 1,39 | 988,81 | 1,36 | 987,45 | 1,34 | 986,11 | 1,32 | 984,79 | 1,29 | 983,50 | 1,28 | 982,22 | 1,26 | 980,96 | 1,24 |
| 0,28 | 0,29 | 0,29 | 0,29 | 0,30 | 0,30 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,32 | 0,32 | 0,33 | |||||||||||||
| 30 | 995,75 | 1,51 | 994,24 | 1,47 | 992,77 | 1,45 | 991,32 | 1,42 | 989,90 | 1,39 | 988,51 | 1,37 | 987,14 | 1,34 | 985,80 | 1,32 | 984,48 | 1,30 | 983,18 | 1,28 | 981,90 | 1,27 | 980,63 | 1,25 |
| 0,30 | 0,30 | 0,30 | 0,30 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,34 | 0,34 | |||||||||||||
| 31 | 995,45 | 1,51 | 993,94 | 1,47 | 992,47 | 1,45 | 991,02 | 1,43 | 989,59 | 1,39 | 988,20 | 1,37 | 986,83 | 1,34 | 985,49 | 1,33 | 984,16 | 1,31 | 982,85 | 1,29 | 981,56 | 1,27 | 980,29 | 1,26 |
| 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,32 | 0,31 | 0,32 | 0,32 | 0,33 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | |||||||||||||
| 32 | 995,14 | 1,51 | 993,63 | 1,47 | 992,16 | 1,46 | 990,70 | 1,42 | 989,28 | 1,40 | 987,88 | 1,37 | 986,51 | 1,35 | 985,16 | 1,33 | 983,83 | 1,32 | 982,51 | 1,30 | 981,21 | 1,28 | 979,93 | 1,26 |
| 0,31 | 0,31 | 0,32 | 0,32 | 0,32 | 0,33 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,35 | 0,35 | 0,35 | |||||||||||||
| 33 | 994,83 | 1,51 | 993,32 | 1,48 | 991,84 | 1,46 | 990,38 | 1,42 | 988,96 | 1,41 | 987,55 | 1,37 | 986,18 | 1,36 | 984,82 | 1,34 | 983,48 | 1,32 | 982,16 | 1,30 | 980,86 | 1,28 | 979,58 | 1,28 |
| 0,32 | 0,33 | 0,33 | 0,33 | 0,35 | 0,34 | 0,35 | 0,35 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | |||||||||||||
| 34 | 994,51 | 1,52 | 992,99 | 1,48 | 991,51 | 1,46 | 990,05 | 1,44 | 988,61 | 1,40 | 487,21 | 1,38 | 985,83 | 1,36 | 984,47 | 1,33 | 983,14 | 1,33 | 981,81 | 1,31 | 980,50 | 1,29 | 979,21 | 1,28 |
| 0,33 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,34 | 0,35 | 0,35 | 0,35 | 0,36 | 0,36 | 0,36 | 0,37 | |||||||||||||
| 35 | 994,18 | 1,52 | 992,66 | 1,49 | 991,17 | 1,47 | 989,70 | 1,43 | 988,27 | 1,41 | 986,86 | 1,38 | 985,48 | 1,36 | 984,12 | 1,34 | 982,78 | 1,33 | 981,45 | 1,31 | 980,14 | 1,30 | 978,84 | 1,29 |
| 0,34 | 0,35 | 0,35 | 0,35 | 0,36 | 0,36 | 0,37 | 0,37 | 0,38 | 0,37 | 0,37 | 0,38 | |||||||||||||
| 36 | 993,84 | 1,53 | 992,31 | 1,49 | 990,82 | 1,47 | 989,35 | 1,43 | 987,92 | 1,41 | 986,51 | 1,38 | 985,13 | 1,37 | 983,76 | 1,34 | 982,42 | 1,34 | 981,08 | 1,31 | 979,77 | 1,31 | 978,46 | 1,29 |
| 0,35 | 0,35 | 0,36 | 0,35 | 0,36 | 0,36 | 0,37 | 0,37 | 0,38 | 0,37 | 0,39 | 0,39 | |||||||||||||
| 37 | 993,49 | 1,53 | 991,96 | 1,50 | 990,46 | 1,46 | 989,00 | 1,44 | 987,56 | 1,41 | 986,15 | 1,39 | 984,76 | 1,37 | 983,39 | 1,35 | 982,04 | 1,33 | 980,71 | 1,33 | 979,38 | 1,31 | 978,07 | 1,30 |
| 0,36 | 0,36 | 0,36 | 0,37 | 0,37 | 0,37 | 0,37 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,38 | 0,39 | |||||||||||||
| 38 | 993,13 | 1,53 | 991,60 | 1,50 | 990,10 | 1,47 | 988,63 | 1,44 | 987,19 | 1,41 | 985,78 | 1,39 | 984,39 | 1,37 | 983,02 | 1,36 | 981,66 | 1,34 | 980,32 | 1,32 | 979,00 | 1,32 | 977,68 | 1,31 |
| 0,36 | 0,37 | 0,37 | 0,37 | 0,38 | 0,38 | 0,38 | 0,39 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,40 | |||||||||||||
| 39 | 992,77 | 1,54 | 991,23 | 1,50 | 989,73 | 1,47 | 988,26 | 1,45 | 986,81 | 1,41 | 985,40 | 1,39 | 984,01 | 1,38 | 982,63 | 1,35 | 981,28 | 1,35 | 979,93 | 1,33 | 978,60 | 1,32 | 977,28 | 1,32 |
| 0,37 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,38 | 0,39 | 0,39 | 0,39 | 0,40 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | |||||||||||||
| 40 | 992,40 | 1,54 | 990,86 | 1,51 | 989,35 | 1,48 | 987,87 | 1,44 | 986,43 | 1,42 | 985,01 | 1,39 | 983,62 | 1,38 | 983,24 | 1,36 | 980,88 | 1,34 | 979,54 | 1,34 | 978,20 | 1,33 | 976,87 | 1,32 |
| 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 |
| 0 | 986,93 | 1,00 | 985,93 | 0,95 | 984,98 | 0,92 | 984,06 | 0,88 | 983,18 | 0,84 | 982,34 | 0,80 | 981,54 | 0,78 | 980,76 | 0,75 | 980,01 | 0,73 | 979,28 | 0,72 | 978,56 | 0,70 | 977,86 | 0,70 |
| -0,02 | -0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,03 | 0,04 | 0,07 | 0,08 | 0,10 | 0,12 | 0,14 | 0,17 | |||||||||||||
| 1 | 986,95 | 1,01 | 985,94 | 0,97 | 984,97 | 0,92 | 984,05 | 0,90 | 983,15 | 0,85 | 982,30 | 0,83 | 981,47 | 0,79 | 980,68 | 0,77 | 979,91 | 0,75 | 979,16 | 0,74 | 978,42 | 0,73 | 977,69 | 0,72 |
| -0,01 | 0,00 | 0,01 | 0,03 | 0,04 | 0,07 | 0,08 | 0,10 | 0,12 | 0,14 | 0,16 | 0,18 | |||||||||||||
| 2 | 986,96 | 1,02 | 985,94 | 0,98 | 984,96 | 0,94 | 984,02 | 0,91 | 983,11 | 0,88 | 982,23 | 0,84 | 981,39 | 0,81 | 980,58 | 0,79 | 979,79 | 0,77 | 979,02 | 0,76 | 978,2 | 0,75 | 977,51 | 0,74 |
| 0,01 | 0,02 | 0,04 | 0,05 | 0,06 | 0,07 | 0,09 | 0,11 | 0,13 | 0,15 | 0,17 | 0,19 | |||||||||||||
| 3 | 986,95 | 1,03 | 985,92 | 1,00 | 984,92 | 0,95 | 983,97 | 0,92 | 983,05 | 0,89 | 982,16 | 0,86 | 981,30 | 0,83 | 980,47 | 0,81 | 979,66 | 0,79 | 978,87 | 0,78 | 978,09 | 0,77 | 977,32 | 0,77 |
| 0,03 | 0,04 | 0,04 | 0,06 | 0,07 | 0,09 | 0,10 | 0,12 | 0,14 | 0,16 | 0,18 | 0,20 | |||||||||||||
| 4 | 986,92 | 1,04 | 985,88 | 1,00 | 984,88 | 0,97 | 983,91 | 0,93 | 982,98 | 0,91 | 982,07 | 0,87 | 981,20 | 0,85 | 980,35 | 0,83 | 979,52 | 0,81 | 978,71 | 0,80 | 977,91 | 0,79 | 977,12 | 0,79 |
| 0,04 | 0,05 | 0,06 | 0,07 | 0,09 | 0,10 | 0,12 | 0,14 | 0,15 | 0,17 | 0,19 | 0,22 | |||||||||||||
| 5 | 986,88 | 1,05 | 985,83 | 1,01 | 984,82 | 0,98 | 983,84 | 0,95 | 982,89 | 0,92 | 981,97 | 0,89 | 981,08 | 0,87 | 980,21 | 0,84 | 979,37 | 0,83 | 978,54 | 0,82 | 977,72 | 0,82 | 976,90 | 0,80 |
| 0,05 | 0,06 | 0,08 | 0,09 | 0,10 | 0,12 | 0,13 | 0,14 | 0,17 | 0,19 | 0,21 | 0,22 | |||||||||||||
| 6 | 986,83 | 1,06 | 985,77 | 1,03 | 984,74 | 0,99 | 983,75 | 0,96 | 982,79 | 0,94 | 981,85 | 0,90 | 980,95 | 0,88 | 980,07 | 0,87 | 979,20 | 0,85 | 978,35 | 0,84 | 977,51 | 0,83 | 976,68 | 0,83 |
| 0,08 | 0,09 | 0,09 | 0,10 | 0,12 | 0,13 | 0,15 | 0,16 | 0,18 | 0,19 | 0,21 | 0,23 | |||||||||||||
| 7 | 986,75 | 1,07 | 985,68 | 1,03 | 984,65 | 1,00 | 983,65 | 0,98 | 982,67 | 0,95 | 981,72 | 0,92 | 980,80 | 0,89 | 979,91 | 0,89 | 979,02 | 0,86 | 978,16 | 0,86 | 977,30 | 0,85 | 976,45 | 0,85 |
| 0,08 | 0,09 | 0,11 | 0,13 | 0,13 | 0,14 | 0,15 | 0,18 | 0,19 | 0,21 | 0,23 | 0,25 | |||||||||||||
| 8 | 986,67 | 1,08 | 985,59 | 1,05 | 984,54 | 1,02 | 983,52 | 0,98 | 982,54 | 0,96 | 981,58 | 0,93 | 980,65 | 0,92 | 979,73 | 0,90 | 978,83 | 0,88 | 977,95 | 0,88 | 977,07 | 0,87 | 976,20 | 0,87 |
| 0,10 | 0,11 | 0,12 | 0,12 | 0,14 | 0,16 | 0,18 | 0,19 | 0,21 | 0,22 | 0,24 | 0,26 | |||||||||||||
| 9 | 986,57 | 1,09 | 985,48 | 1,06 | 984,42 | 1,02 | 983,40 | 1,00 | 982,40 | 0,98 | 981,42 | 0,95 | 980,47 | 0,93 | 979,54 | 0,92 | 978,62 | 0,89 | 977,73 | 0,90 | 976,83 | 0,89 | 975,94 | 0,89 |
| 0,11 | 0,12 | 0,12 | 0,14 | 0,16 | 0,17 | 0,18 | 0,20 | 0,20 | 0,23 | 0,24 | 0,26 | |||||||||||||
| 10 | 986,46 | 1,10 | 985,36 | 1,06 | 984,30 | 1,04 | 983,26 | 1,02 | 982,24 | 0,99 | 981,25 | 0,96 | 980,29 | 0,95 | 979,34 | 092 | 978,42 | 0,92 | 977,50 | 0,91 | 976,59 | 0,91 | 975,63 | 0,91 |
| 0,12 | 0,13 | 0,14 | 0,16 | 0,16 | 0,17 | 0,19 | 0,20 | 0,23 | 0,25 | 0,27 | 0,29 | |||||||||||||
| 11 | 986,34 | 1,11 | 985,23 | 1,08 | 984,16 | 1,06 | 983,10 | 1,02 | 982,08 | 1,00 | 981,08 | 0,98 | 980,10 | 0,96 | 979,14 | 0,95 | 978,19 | 0,94 | 977,25 | 0,93 | 976,32 | 0,93 | 975,39 | 0,92 |
| 0,13 | 0,14 | 0,16 | 0,16 | 0,18 | 0,19 | 0,21 | 0,22 | 0,24 | 0,25 | 0,27 | 0,28 | |||||||||||||
| 12 | 986,21 | 1,12 | 985,09 | 1,09 | 984,00 | 1,06 | 982,94 | 1,04 | 981,90 | 1,01 | 980,89 | 1,00 | 979,89 | 0,97 | 978,92 | 0,97 | 977,95 | 0,95 | 977,00 | 0,95 | 976,05 | 0,94 | 975,11 | 0,95 |
| 0,15 | 0,16 | 0,16 | 0,18 | 0,19 | 0,20 | 0,21 | 0,23 | 0,24 | 0,26 | 0,28 | 0,30 | |||||||||||||
| 13 | 986,06 | 1,13 | 984,93 | 1,09 | 983,84 | 1,08 | 982,76 | 1,05 | 981,71 | 1,02 | 980,69 | 1,01 | 979,68 | 0,99 | 978,69 | 0,98 | 977,71 | 0,97 | 976,74 | 0,97 | 975,77 | 0,96 | 974,81 | 0,96 |
| 0,16 | 0,16 | 0,18 | 0,18 | 0,20 | 0,22 | 0,23 | 0,24 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,30 | |||||||||||||
| 14 | 985,90 | 1,13 | 984,77 | 1,11 | 983,66 | 1,08 | 982,58 | 1,07 | 981,51 | 1,04 | 980,47 | 1,02 | 979,45 | 1,00 | 978,45 | 1,00 | 977,45 | 0,98 | 976,47 | 0,98 | 975,49 | 0,98 | 975,51 | 0,98 |
| 0,17 | 0,18 | 0,19 | 0,20 | 0,21 | 0,22 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,28 | 0,30 | 0,32 | |||||||||||||
| 15 | 985,73 | 1,14 | 984,59 | 1,12 | 983,47 | 1,09 | 982,38 | 1,08 | 981,30 | 1,05 | 960,25 | 1,04 | 979,21 | 1,01 | 978,20 | 1,01 | 977,19 | 1,00 | 976,19 | 1,00 | 975,19 | 1,00 | 974,19 | 1,00 |
| 0,18 | 0,19 | 0,20 | 0,22 | 0,22 | 0,24 | 0,24 | 0,27 | 0,28 | 0,30 | 0,31 | 0,32 | |||||||||||||
| 16 | 985,55 | 1,15 | 984,40 | 1,13 | 983,27 | 1,11 | 982,16 | 1,08 | 981,08 | 1,07 | 980,01 | 1,04 | 978,97 | 1,04 | 977,93 | 1,02 | 976,91 | 1,02 | 975,89 | 1,01 | 974,88 | 1,01 | 973,87 | 1,02 |
| 0,19 | 0,20 | 0,21 | 0,22 | 0,23 | 0,24 | 0,26 | 0,27 | 0,29 | 0,30 | 0,32 | 0,33 | |||||||||||||
| 17 | 985,36 | 1,16 | 984,20 | 1,14 | 983,06 | 1,12 | 981,94 | 1,09 | 980,85 | 1,08 | 979,77 | 1,06 | 978,71 | 1,05 | 977,66 | 1,04 | 976,62 | 1,03 | 975,59 | 1,03 | 974,56 | 1,02 | 973,54 | 1,04 |
| 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,23 | 0,25 | 0,26 | 0:27 | 0,28 | 0,29 | 0,31 | 0,32 | 0,35 | |||||||||||||
| 18 | 985,15 | 1,17 | 983,98 | 1,14 | 982,84 | 1,13 | 981,71 | 1,11 | 980,60 | 1,09 | 979,51 | 1,07 | 978,44 | 1,06 | 977,38 | 1,05 | 976,33 | 1,05 | 975,28 | 1,04 | 974,21 | 1,05 | 973,19 | 1,05 |
| 0,21 | 0,22 | 0,24 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,28 | 0,29 | 0,31 | 0,32 | 0,34 | 0,35 | |||||||||||||
| 19 | 984,94 | 1,18 | 983,76 | 1,16 | 982,60 | 1,13 | 981,47 | 1,12 | 980,35 | 1,10 | 979,25 | 1,09 | 978,16 | 1,07 | 977,09 | 1,07 | 976,02 | 1,06 | 974,96 | 1,06 | 973,90 | 1,06 | 972,84 | 1,06 |
| 0,23 | 0,24 | 0,24 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,34 | 0,36 | |||||||||||||
| 20 | 984,71 | 1,19 | 983,52 | 1,16 | 982,36 | 1,15 | 981,21 | 1,13 | 980,08 | 1,11 | 978,97 | 1,10 | 977,87 | 1,08 | 976,79 | 1,08 | 975,71 | 1,08 | 974,63 | 1,07 | 973,56 | 1,08 | 972,48 | 1,08 |
| 0,24 | 0,24 | 0,26 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,31 | 0,33 | 0,34 | 0,36 | 0,37 | |||||||||||||
| 21 | 984,47 | 1,19 | 983,28 | 1,18 | 982,10 | 1,15 | 980,95 | 1,14 | 978,81 | 1,12 | 978,69 | 1,11 | 977,58 | 1,10 | 976,48 | 1,10 | 975,38 | 1,09 | 974,29 | 1,09 | 973,20 | 1,09 | 972,11 | 1,09 |
| 0,24 | 0,26 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,33 | 0,35 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | |||||||||||||
| 22 | 984,23 | 1,21 | 983,02 | 1,18 | 981,84 | 1,17 | 980,67 | 1,15 | 979,52 | 1,13 | 978,39 | 1,12 | 977,27 | 1,12 | 976,15 | 1,10 | 975,05 | 1,11 | 973,94 | 1,10 | 972,84 | 1,10 | 971,74 | 1,12 |
| 0,26 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,35 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | |||||||||||||
| 23 | 983,97 | 1,20 | 982,77 | 1,20 | 981,57 | 1,18 | 980,39 | 1,16 | 979,23 | 1,15 | 978,08 | 1,13 | 976,95 | 1,13 | 975,82 | 1,12 | 974,70 | 1,11 | 973,59 | 1,12 | 972,47 | 1,12 | 972,47 | 1,12 |
| 0,27 | 0,29 | 0,29 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,38 | 0,40 | |||||||||||||
| 24 | 983,70 | 1,22 | 982,48 | 1,20 | 981,28 | 1,18 | 980,10 | 1,17 | 978,93 | 1,16 | 977,77 | 1,15 | 976,62 | 1,13 | 975,49 | 1,14 | 974,35 | 1,13 | 973,22 | 1,13 | 972,09 | 1,14 | 970,95 | 1,14 |
| 0,28 | 0,28 | 0,29 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,33 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,39 | 0,40 | |||||||||||||
| 25 | 983,42 | 1,22 | 982,20 | 1,21 | 980,99 | 1,20 | 979,79 | 1,18 | 978,61 | 1,17 | 977,44 | 1,15 | 976,29 | 1,15 | 975,14 | 1,15 | 973,99 | 1,14 | 972,85 | 1,15 | 971,70 | 1,15 | 970,55 | 1,16 |
| 0,28 | 0,30 | 0,31 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | |||||||||||||
| 26 | 983,14 | 1,24 | 981,90 | 1,22 | 980,68 | 1,20 | 979,48 | 1,19 | 978,29 | 1,18 | 977,11 | 1,17 | 975,94 | 1,16 | 974,78 | 1,16 | 973,62 | 1,16 | 972,46 | 1,16 | 971,30 | 1,16 | 970,14 | 1,17 |
| 0,30 | 0,30 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | |||||||||||||
| 27 | 982,84 | 1,24 | 981,60 | 1,23 | 980,37 | 1,21 | 979,16 | 1,20 | 977,96 | 1,19 | 976,77 | 1,18 | 975,59 | 1,17 | 974,42 | 1,18 | 973,24 | 1,17 | 972,07 | 1,17 | 970,90 | 1,18 | 969,72 | 1,18 |
| 0,31 | 0,32 | 0,32 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,38 | 0,38 | 0,40 | 0,41 | 0,43 | |||||||||||||
| 28 | 982,53 | 1,25 | 981,28 | 1,23 | 980,05 | 1,22 | 978,83 | 1,21 | 977,62 | 1,20 | 976,42 | 1,19 | 975,23 | 1,19 | 974,04 | 1,18 | 972,86 | 1,19 | 971,67 | 1,18 | 970,49 | 1,20 | 969,29 | 1,20 |
| 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,40 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | |||||||||||||
| 29 | 982,22 | 1,26 | 980,96 | 1,24 | 979,72 | 1,23 | 978,49 | 1,22 | 977,27 | 1,21 | 976,06 | 1,20 | 974,86 | 1,20 | 973,66 | 1,20 | 972,46 | 1,19 | 971,27 | 1,20 | 970,07 | 1,21 | 968,86 | 1,22 |
| 0,32 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,40 | 0,41 | 0,43 | 0,44 | 0,48 | |||||||||||||
| 30 | 981,90 | 1,27 | 980,63 | 1,25 | 979,38 | 1,24 | 978,14 | 1,23 | 976,91 | 1,22 | 975,69 | 1,21 | 974,48 | 1,22 | 973,36 | 1,21 | 972,05 | 1,21 | 970,84 | 1,21 | 969,63 | 1,22 | 968,41 | 1,23 |
| 0,34 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,40 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | |||||||||||||
| 31 | 981,56 | 1,27 | 980,29 | 1,26 | 979,03 | 1,25 | 977,78 | 1,24 | 976,54 | 1,23 | 975,31 | 1,23 | 974,08 | 1,22 | 972,86 | 1,22 | 971,64 | 1,22 | 970,42 | 1,23 | 969,19 | 1,23 | 968,11 | 1,24 |
| 0,35 | 0,36 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | |||||||||||||
| 32 | 981,21 | 1,38 | 979,93 | 1,26 | 978,67 | 1,26 | 977,41 | 1,25 | 976,16 | 1,24 | 974,92 | 1,23 | 973,69 | 1,33 | 972,46 | 1,24 | 971,22 | 1,23 | 969,99 | 1,24 | 968,75 | 1,25 | 967,50 | 1,25 |
| 0,35 | 0,35 | 0,37 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,46 | |||||||||||||
| 33 | 980,86 | 1,28 | 979,58 | 1,28 | 978,30 | 1,26 | 977,04 | 1,26 | 975,78 | 1,25 | 974,53 | 1,24 | 973,29 | 1,25 | 972,04 | 1,24 | 970,80 | 1,25 | 969,55 | 1,25 | 968,30 | 1,26 | 967,04 | 1,27 |
| 0,36 | 0,37 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | 0,47 | |||||||||||||
| 34 | 980,50 | 1,29 | 979,21 | 1,28 | 977,93 | 1,27 | 976,66 | 1,27 | 975,39 | 1,26 | 974,13 | 1,25 | 972,88 | 1,26 | 971,62 | 1,25 | 970,37 | 1,26 | 969,11 | 1,27 | 967,78 | 1,27 | 966,57 | 1,29 |
| 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,42 | 0,44 | 0,46 | 0,46 | 0,48 | |||||||||||||
| 35 | 980,14 | 1,30 | 978,84 | 1,29 | 977,55 | 1,28 | 976,27 | 1,27 | 975,00 | 1,27 | 973,73 | 1,27 | 972,46 | 1,26 | 971,20 | 1,27 | 969,93 | 1,28 | 968,65 | 1,27 | 967,38 | 1,29 | 966,09 | 1,30 |
| 0,37 | 0,38 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,45 | 0,47 | 0,48 | |||||||||||||
| 36 | 979,77 | 1,31 | 978,46 | 1,29 | 977,17 | 1,29 | 975,88 | 1,28 | 974,60 | 1,28 | 973,32 | 1,28 | 972,04 | 1,28 | 970,76 | 1,28 | 969,48 | 1,28 | 968,20 | 1,29 | 966,91 | 1,30 | 965,61 | 1,32 |
| 0,39 | 0,39 | 0,40 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,49 | |||||||||||||
| 37 | 978,38 | 1,31 | 978,07 | 1,30 | 976,77 | 1,29 | 975,48 | 1,29 | 974,19 | 1,29 | 972,90 | 1,29 | 971,61 | 1,29 | 970,32 | 1,29 | 969,03 | 1,30 | 967,73 | 1,30 | 966,43 | 1,31 | 965,12 | 1,33 |
| 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,45 | 0,46 | 0,47 | 0,49 | 0,50 | |||||||||||||
| 38 | 979,00 | 1,32 | 977,68 | 1,31 | 976,37 | 1,30 | 975,07 | 1,30 | 973,77 | 1,30 | 972,47 | 1,30 | 971,17 | 1,30 | 969,87 | 1,30 | 968,57 | 1,31 | 967,26 | 1,32 | 965,94 | 1,32 | 964,62 | 1,34 |
| 0,40 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,49 | 0,50 | |||||||||||||
| 39 | 978,60 | 1,32 | 977,28 | 1,32 | 975,96 | 1,31 | 974,65 | 1,30 | 973,35 | 1,31 | 972,04 | 1,31 | 970,73 | 1,31 | 969,42 | 1,32 | 968,10 | 1,32 | 966,78 | 1,33 | 965,45 | 1,33 | 964,12 | 1,36 |
| 0,40 | 0,41 | 0,41 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,45 | 0,46 | 0,47 | 0,48 | 0,50 | 0,51 | |||||||||||||
| 40 | 978,20 | 1,33 | 976,87 | 1,32 | 975,55 | 1,32 | 974,23 | 1,31 | 972,92 | 1,32 | 971,60 | 1,32 | 970,28 | 1,32 | 968,96 | 1,33 | 967,63 | 1,33 | 966,30 | 1,34 | 964,96 | 1,35 | 963,61 | 1,37 |
| t °C | Алкохол в об.% |
| 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 |
| 0 | 978,56 | 0,70 | 977,86 | 0,70 | 977,16 | 0,69 | 976,47 | 0,71 | 975,76 | 0,71 | 975,05 | 0,72 | 974,33 | 0,75 | 973,58 | 0,77 | 972,81 | 0,80 | 972,01 | 0,83 | 971,18 | 0,87 | 970,31 | 0,90 |
| 0,14 | 0,17 | 0,19 | 0,22 | 0,24 | 0,26 | 0,29 | 0,31 | 0,34 | 0,36 | 0,39 | 0,41 | |||||||||||||
| 1 | 978,42 | 0,73 | 977,69 | 0,72 | 976,97 | 0,72 | 976,25 | 0,73 | 975,52 | 0,73 | 974,79 | 0,75 | 974,04 | 0,77 | 973,27 | 0,80 | 972,47 | 0,82 | 971,65 | 0,86 | 970,79 | 0,89 | 969,90 | 0,92 |
| 0,16 | 0,18 | 0,20 | 0,23 | 0,25 | 0,28 | 0,30 | 0,32 | 0,34 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | |||||||||||||
| 2 | 978,26 | 0,75 | 977,51 | 0,74 | 976,77 | 0,75 | 976,02 | 0,75 | 975,27 | 0,76 | 974,51 | 0,77 | 973,74 | 0,79 | 972,95 | 0,82 | 972,13 | 0,85 | 971,28 | 0,88 | 970,40 | 0,91 | 969,49 | 0,95 |
| 0,17 | 0,19 | 0,22 | 0,23 | 0,26 | 0,28 | 0,3О | 0,33 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | |||||||||||||
| 3 | 978,09 | 0,77 | 977,32 | 0,77 | 976,55 | 0,76 | 975,79 | 0,78 | 975,01 | 0,78 | 974,23 | 0,80 | 973,43 | 0,81 | 972,62 | 0,85 | 971,77 | 0,87 | 970,90 | 0,90 | 970,00 | 0,93 | 969,07 | 0,98 |
| 0,18 | 0,20 | 0,22 | 0,25 | 0,27 | 0,29 | 0,31 | 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | 0,43 | |||||||||||||
| 4 | 977,91 | 0,79 | 977,12 | 0,79 | 976,33 | 0,79 | 975,54 | 0,80 | 974,94 | 0,80 | 973,94 | 0,82 | 973,12 | 0,84 | 972,28 | 0,87 | 971,41 | 0,89 | 970,52 | 0,92 | 969,60 | 0,96 | 968,64 | 1,00 |
| 0,19 | 0,22 | 0,23 | 0,26 | 0,27 | 0,30 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,42 | 0,44 | |||||||||||||
| 5 | 977,72 | 0,82 | 976,90 | 0,80 | 976,10 | 0,82 | 975,28 | 0,81 | 974,47 | 0,83 | 973,64 | 0,85 | 972,79 | 0,86 | 971,93 | 0,89 | 971,04 | 0,91 | 970,13 | 0,95 | 969,18 | 0,98 | 968,20 | 1,01 |
| 0,21 | 0,22 | 0,25 | 0,26 | 0,29 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | |||||||||||||
| 6 | 977,51 | 0,83 | 976,68 | 0,83 | 975,85 | 0,83 | 975,02 | 0,84 | 974,18 | 0,85 | 973,33 | 0,87 | 972,46 | 0,86 | 971,58 | 0,91 | 970,67 | 0,94 | 969,73 | 0,97 | 968,76 | 1,00 | 967,76 | 1,03 |
| 0,21 | 0,23 | 0,25 | 0,28 | 0,30 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | |||||||||||||
| 7 | 977,30 | 0,85 | 976,45 | 0,85 | 975,60 | 0,86 | 974,74 | 0,86 | 973,88 | 0,87 | 973,01 | 0,89 | 972,12 | 0,90 | 971,22 | 0,93 | 970,29 | 0,96 | 969,33 | 0,99 | 968,34 | 1,02 | 967,32 | 1,06 |
| 0,23 | 0,25 | 0,27 | 0,28 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,46 | |||||||||||||
| 8 | 977,07 | 0,87 | 976,20 | 0,87 | 975,33 | 0,87 | 974,46 | 0,89 | 973,57 | 0,89 | 972,68 | 0,91 | 971,77 | 0,92 | 970,85 | 0,96 | 969,89 | 0,98 | 968,91 | 1,00 | 967,91 | 1,05 | 966,86 | 1,07 |
| 0,24 | 0,26 | 0,28 | 0,30 | 0,31 | 0,34 | 0,35 | 0,38 | 0,39 | 0,41 | 0,44 | 0,46 | |||||||||||||
| 9 | 976,83 | 0,89 | 975,94 | 0,89 | 975,05 | 0,89 | 974,16 | 0,90 | 973,26 | 0,92 | 972,34 | 0,92 | 971,42 | 0,95 | 970,47 | 0,97 | 969,50 | 1,00 | 968,50 | 1,03 | 967,47 | 1,07 | 966,40 | 1,09 |
| 0,24 | 0,26 | 0,28 | 0,30 | 0,33 | 0,34 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,45 | 0,46 | |||||||||||||
| 10 | 976,59 | 0,91 | 975,68 | 0,91 | 974,77 | 0,91 | 973,86 | 0,93 | 972,93 | 0,93 | 972,00 | 0,95 | 971,05 | 0,97 | 970,08 | 0,99 | 969,09 | 1,02 | 968,07 | 1,05 | 967,02 | 1,08 | 965,94 | 1,12 |
| 0,27 | 0,29 | 0,30 | 0,33 | 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,46 | 0,47 | |||||||||||||
| 11 | 976,32 | 0,93 | 975,39 | 0,92 | 974,47 | 0,94 | 971,53 | 0,94 | 972,59 | 0,95 | 971,64 | 0,97 | 970,67 | 0,99 | 969,68 | 1,01 | 968,67 | 1,04 | 967,63 | 1,07 | 966,56 | 1,09 | 965,47 | 1,13 |
| 0,27 | 0,28 | 0,31 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,48 | |||||||||||||
| 12 | 976,05 | 0,91 | 975,11 | 0,95 | 974,16 | 0,95 | 973,21 | 0,96 | 972,25 | 0,97 | 971,28 | 0,99 | 970,29 | 1,01 | 969,28 | 1,03 | 968,25 | 1,06 | 967,19 | 1,08 | 966,11 | 1,12 | 964,99 | 1,15 |
| 0,28 | 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,45 | 0,47 | 0,49 | |||||||||||||
| 13 | 975,77 | 0,96 | 974,81 | 0,96 | 971,85 | 0,97 | 972,88 | 0,98 | 971,90 | 0,99 | 970,91 | 1,01 | 969,90 | 1,03 | 968,87 | 1,05 | 967,82 | 1,08 | 966,74 | 1,10 | 965,64 | 1,14 | 964,50 | 1,17 |
| 0,28 | 0,30 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | 0,41 | 0,43 | 0,45 | 0,47 | 0,49 | |||||||||||||
| 14 | 975,49 | 0,98 | 974,51 | 0,98 | 973,53 | 0,99 | 972,54 | 1,00 | 971,54 | 1,01 | 970,53 | 1,03 | 969,50 | 1,04 | 968,46 | 1,07 | 967,39 | 1,10 | 966,29 | 1,12 | 965,17 | 1,16 | 964,01 | 1,19 |
| 0,30 | 0,32 | 0,34 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,46 | 0,48 | 0,49 | |||||||||||||
| 15 | 975,19 | 1,00 | 974,19 | 1,00 | 971,19 | 1,00 | 972,19 | 1,02 | 971,17 | 1,03 | 970,14 | 1,04 | 969,10 | 1,06 | 968,04 | 1,09 | 966,95 | 1,12 | 965,83 | 1,14 | 964,69 | 1,17 | 963,52 | 1,21 |
| 0,31 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,51 | |||||||||||||
| 16 | 974,88 | 1,01 | 973,87 | 1,02 | 972,85 | 1,02 | 971,83 | 1,03 | 970,80 | 1,05 | 969,75 | 1,06 | 968,69 | 1,08 | 967,61 | 1,11 | 966,50 | 1,13 | 965,37 | 1,16 | 964,21 | 1,20 | 963,01 | 1,22 |
| 0,32 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,48 | 0,50 | 0,50 | |||||||||||||
| 17 | 974,56 | 1,02 | 973,54 | 1,04 | 972,50 | 1,04 | 971,46 | 1,05 | 970,41 | 1,06 | 969,35 | 1,08 | 968,27 | 1,10 | 967,17 | 1,12 | 966,05 | 1,16 | 964,89 | 1,18 | 963,71 | 1,20 | 962,51 | 1,24 |
| 0,32 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,49 | 0,52 | |||||||||||||
| 18 | 974,24 | 1,05 | 971,19 | 1,05 | 972,14 | 1,05 | 971,09 | 1,07 | 970,02 | 1,08 | 968,94 | 1,10 | 967,84 | 1,12 | 966,72 | 1,14 | 965,58 | 1,17 | 964,41 | 1,19 | 963,22 | 1,23 | 961,99 | 1,25 |
| 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,50 | 0,52 | |||||||||||||
| 19 | 973,90 | 1,06 | 972,84 | 1,06 | 971,78 | 1,08 | 970,70 | 1,08 | 969,62 | 1,10 | 968,52 | 1,11 | 967,41 | 1,14 | 966,27 | 1,16 | 965,11 | 1,18 | 963,93 | 1,21 | 962,72 | 1,25 | 961,47 | 1,27 |
| 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,39 | 0,41 | 0,42 | 0,45 | 0,46 | 0,47 | 0,49 | 0,51 | 0,52 | |||||||||||||
| 20 | 973,56 | 1,08 | 972,48 | 1,08 | 971,40 | 1,09 | 970,31 | 1,10 | 969,21 | 1,11 | 968,10 | 1,14 | 966,96 | 1,15 | 965,81 | 1,17 | 964,64 | 1,20 | 963,44 | 1,23 | 962,21 | 1,26 | 960,95 | 1,29 |
| 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,46 | 0,49 | 0,50 | 0,52 | 0,53 | |||||||||||||
| 21 | 973,20 | 1,09 | 972,11 | 1,09 | 971,02 | 1,11 | 969,91 | 1,12 | 968,79 | 1,13 | 967,66 | 1,15 | 966,51 | 1,16 | 965,15 | 1,20 | 964,15 | 1,21 | 962,94 | 1,25 | 961,69 | 1,27 | 960,42 | 1,31 |
| 0,36 | 0,37 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,48 | 0,49 | 0,51 | 0,52 | 0,54 | |||||||||||||
| 22 | 972,84 | 1,10 | 971,74 | 1,12 | 970,62 | 1,12 | 969,50 | 1,13 | 968,37 | 1,15 | 967,22 | 1,16 | 966,06 | 1,19 | 964,87 | 1,21 | 963,66 | 1,23 | 962,43 | 1,26 | 961,17 | 1,29 | 959,88 | 1,32 |
| 0,37 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,41 | 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,49 | 0,51 | 0,51 | 0,55 | |||||||||||||
| 23 | 972,47 | 1,12 | 971,38 | 1,13 | 970,22 | 1,14 | 969,08 | 1,14 | 967,94 | 1,17 | 966,77 | 1,18 | 965,59 | 1,20 | 964,39 | 1,22 | 963,17 | 1,25 | 964,92 | 1,28 | 960,64 | 1,31 | 959,13 | 1,33 |
| 0,38 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,47 | 0,49 | 0,51 | 0,52 | 0,54 | 0,55 | |||||||||||||
| 24 | 972,09 | 1,14 | 970,95 | 1,14 | 969,81 | 1,15 | 968,66 | 1,16 | 967,50 | 1,18 | 966,32 | 1,20 | 965,12 | 1,22 | 961,90 | 1,24 | 962,66 | 1,26 | 961,40 | 1,30 | 960,10 | 1,32 | 958,78 | 1,35 |
| 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,49 | 0,51 | 0,53 | 0,54 | 0,55 | |||||||||||||
| 25 | 971,70 | 1,15 | 970,5 | 1,16 | 969,39 | 1,16 | 968,23 | 1,18 | 967,05 | 1,20 | 965,85 | 1,21 | 964,64 | 1,23 | 963,41 | 1,26 | 962,15 | 1,28 | 960,87 | 1,31 | 959,56 | 1,33 | 958,23 | 1,37 |
| 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,46 | 0,47 | 0,49 | 0,50 | 0,51 | 0,53 | 0,54 | 0,57 | |||||||||||||
| 26 | 971,30 | 1,16 | 970,14 | 1,17 | 968,97 | 1,18 | 967,79 | 1,20 | 966,59 | 1,21 | 965,38 | 1,23 | 964,15 | 1,24 | 962,91 | 1,27 | 961,64 | 1,30 | 960,34 | 1,32 | 959,02 | 1,36 | 957,66 | 1,38 |
| 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,49 | 0,51 | 0,53 | 0,54 | 0,56 | 0,56 | |||||||||||||
| 27 | 970,90 | 1,18 | 969,72 | 1,18 | 968,54 | 1,20 | 967,34 | 1,21 | 966,13 | 1,23 | 964,90 | 1,24 | 963,66 | 1,26 | 962,40 | 1,29 | 961,11 | 1,31 | 959,80 | 1,34 | 958,46 | 1,36 | 957,10 | 1,40 |
| 0,41 | 0,43 | 0,45 | 0,46 | 0,47 | 0,48 | 0,50 | 0,52 | 0,54 | 0,56 | 0,57 | 0,59 | |||||||||||||
| 28 | 970,49 | 1,20 | 969,29 | 1,20 | 968,09 | 1,21 | 966,88 | 1,22 | 965,66 | 1,24 | 964,42 | 1,26 | 963,16 | 1,28 | 961,88 | 1,31 | 960,57 | 1,33 | 959,24 | 1,35 | 957,89 | 1,38 | 956,51 | 1,41 |
| 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,47 | 0,49 | 0,50 | 0,52 | 0,53 | 0,53 | 0,55 | 0,56 | 0,58 | |||||||||||||
| 29 | 970,07 | 1,21 | 968,86 | 1,22 | 967,64 | 1,23 | 966,41 | 1,24 | 965,17 | 1,25 | 963,92 | 1,28 | 962,64 | 1,29 | 961,35 | 1,31 | 960,04 | 1,35 | 958,69 | 1,36 | 957,33 | 1,40 | 955,93 | 1,42 |
| 0,44 | 0,45 | 0,46 | 0,47 | 0,49 | 0,50 | 0,51 | 0,53 | 0,55 | 0,55 | 0,58 | 0,58 | |||||||||||||
| 30 | 969,63 | 1,22 | 968,41 | 1,23 | 967,18 | 1,24 | 965,94 | 1,26 | 964,68 | 1,26 | 963,42 | 1,29 | 962,13 | 1,31 | 960,82 | 1,33 | 959,49 | 1,35 | 958,14 | 1,39 | 956,75 | 1,40 | 955,35 | 1,44 |
| 0,44 | 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,49 | 0,51 | 0,52 | 0,53 | 0,55 | 0,57 | 0,58 | 0,60 | |||||||||||||
| 31 | 969,19 | 1,23 | 967,96 | 1,24 | 966,72 | 1,26 | 965,46 | 1,27 | 964,19 | 1,28 | 962,91 | 1,30 | 961,61 | 1,32 | 960,29 | 1,35 | 958,94 | 1,37 | 957,57 | 1,40 | 956,17 | 1,42 | 954,75 | 1,44 |
| 0,44 | 0,46 | 0,47 | 0,48 | 0,50 | 0,51 | 0,53 | 0,54 | 0,55 | 0,57 | 0,58 | 0,59 | |||||||||||||
| 32 | 968,75 | 1,25 | 967,50 | 1,25 | 966,25 | 1,27 | 964,98 | 1,29 | 963,69 | 1,29 | 962,40 | 1,32 | 961,08 | 1,33 | 959,75 | 1,36 | 958,39 | 1,39 | 957,00 | 1,41 | 955,59 | 1,43 | 954,16 | 1,46 |
| 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,49 | 0,50 | 0,52 | 0,53 | 0,55 | 0,57 | 0,57 | 0,59 | 0,61 | |||||||||||||
| 33 | 968,30 | 1,26 | 967,04 | 1,27 | 965,77 | 1,28 | 964,49 | 1,30 | 963,19 | 1,31 | 961,88 | 1,33 | 960,55 | 1,35 | 959,20 | 1,38 | 957,82 | 1,39 | 956,43 | 1,43 | 955,00 | 1,45 | 953,55 | 1,47 |
| 0,46 | 0,47 | 0,49 | 0,50 | 0,51 | 0,53 | 0,54 | 0,56 | 0,56 | 0,59 | 0,59 | 0,60 | |||||||||||||
| 34 | 967,84 | 1,27 | 966,57 | 1,29 | 965,28 | 1,29 | 963,99 | 1,31 | 962,68 | 1,33 | 961,35 | 1,34 | 960,01 | 1,37 | 958,64 | 1,38 | 957,26 | 1,42 | 955,84 | 1,43 | 954,41 | 1,46 | 952,95 | 1,49 |
| 0,46 | 0,48 | 0,49 | 0,51 | 0,52 | 0,53 | 0,55 | 0,56 | 0,58 | 0,58 | 0,60 | 0,62 | |||||||||||||
| 35 | 967,38 | 1,29 | 966,09 | 1,30 | 964,79 | 1,31 | 963,48 | 1,32 | 962,16 | 1,34 | 960,82 | 1,36 | 959,46 | 1,38 | 958,08 | 1,40 | 956,68 | 1,42 | 955,26 | 1,45 | 953,81 | 1,48 | 952,33 | 1,50 |
| 0,47 | 0,48 | 0,50 | 0,51 | 0,53 | 0,54 | 0,55 | 0,57 | 0,58 | 0,60 | 0,61 | 0,62 | |||||||||||||
| 36 | 966,91 | 1,30 | 965,61 | 1,32 | 964,29 | 1,32 | 962,97 | 1,34 | 961,63 | 1,35 | 960,28 | 1,37 | 958,91 | 1,40 | 957,51 | 1,41 | 956,10 | 1,44 | 954,66 | 1,46 | 953,20 | 1,49 | 951,71 | 1,51 |
| 0,48 | 0,49 | 0,50 | 0,52 | 0,53 | 0,55 | 0,56 | 0,57 | 0,59 | 0,60 | 0,61 | 0,62 | |||||||||||||
| 37 | 966,43 | 1,31 | 965,12 | 1,33 | 963,79 | 1,34 | 962,45 | 1,35 | 961,10 | 1,37 | 959,73 | 1,38 | 958,35 | 1,41 | 956,94 | 1,43 | 955,51 | 1,45 | 954,06 | 1,47 | 952,59 | 1,50 | 951,09 | 1,53 |
| 0,49 | 0,50 | 0,51 | 0,52 | 0,54 | 0,55 | 0,57 | 0,58 | 0,59 | 0,60 | 0,62 | 0,63 | |||||||||||||
| 38 | 965,94 | 1,32 | 964,62 | 1,34 | 963,28 | 1,35 | 961,93 | 1,37 | 960,56 | 1,38 | 959,18 | 1,40 | 957,78 | 1,42 | 956,36 | 1,44 | 954,92 | 1,46 | 953,46 | 1,49 | 951,97 | 1,51 | 950,46 | 1,54 |
| 0,49 | 0,50 | 0,52 | 0,53 | 0,54 | 0,56 | 0,57 | 0,58 | 0,60 | 0,61 | 0,62 | 0,64 | |||||||||||||
| 39 | 965,45 | 1,33 | 964,12 | 1,36 | 962,76 | 1,36 | 961,40 | 1,38 | 960,02 | 1,40 | 958,62 | 1,41 | 957,21 | 1,43 | 955,78 | 1,46 | 954,32 | 1,47 | 952,85 | 1,50 | 951,35 | 1,53 | 949,82 | 1,55 |
| 0,49 | 0,51 | 0,52 | 0,54 | 0,55 | 0,56 | 0,58 | 0,59 | 0,60 | 0,62 | 0,63 | 0,64 | |||||||||||||
| 40 | 964,96 | 1,35 | 963,61 | 1,37 | 962,24 | 1,38 | 960,86 | 1,39 | 959,47 | 1,41 | 958,06 | 1,43 | 956,63 | 1,44 | 955,19 | 1,47 | 953,72 | 1,49 | 952,23 | 1,51 | 950,72 | 1,54 | 949,18 | 1,57 |
Таблица II
Международна таблица за отчитане на алкохолното съдържание при 20 градуса С
Корекция на алкохолното съдържание в зависимост от температурата
Добавя се или се изважда от алкохолното съдържание корекцията, посочена по-долу (спиртомер от обикновено стъкло)
| Алкохол, отчетен при t °C |
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 |
| 0 ° | 0,76 | 0,77 | 0,82 | 0,87 | 0,95 | 1,04 | 1,16 | 1,31 | 1,49 | 1,70 | 1,95 | 2,26 | 2,62 | 3,03 | 3,49 | 4,02 | 4,56 | ||
| 1 ° | 0,81 | 0,83 | 0,87 | 0,92 | 1,00 | 1,09 | 1,20 | 1,35 | 1,52 | 1,73 | 1,97 | 2,26 | 2,59 | 2,97 | 3,40 | 3,87 | 4,36 | ||
| 2 ° | 0,85 | 0,87 | 0,92 | 0,97 | 1,04 | 1,13 | 1,24 | 1,38 | 1,54 | 1,74 | 1,97 | 2,24 | 2,54 | 2,89 | 3,29 | 3,72 | 4,17 | ||
| Т | 3 ° | Д | 0,88 | 0,91 | 0,95 | 1,00 | 1,07 | 1,15 | 1,26 | 1,39 | 1,55 | 1,73 | 1,95 | 2,20 | 2,48 | 2,80 | 3,16 | 3,55 | 3,95 |
| е | 4 ° | о | 0,90 | 0,92 | 0,97 | 1,02 | 1,09 | 1,17 | 1,27 | 1,40 | 1,55 | 1,72 | 1,92 | 2,15 | 2,41 | 2,71 | 3,03 | 3,38 | 3,75 |
| м | 5 ° | б | 0,91 | 0,93 | 0,98 | 1,03 | 1,10 | 1,17 | 1,27 | 1,39 | 1,53 | 1,69 | 1,87 | 2,08 | 2,33 | 2,60 | 2,89 | 3,21 | 3,54 |
| п | 6 ° | а | 0,92 | 0,94 | 0,98 | 1,02 | 1,09 | 1,16 | 1,25 | 1,37 | 1,50 | 1,65 | 1,82 | 2,01 | 2,23 | 2,47 | 2,74 | 3,02 | 3,32 |
| е | 7 ° | в | 0,91 | 0,93 | 0,97 | 1,01 | 1,07 | 1,14 | 1,23 | 1,33 | 1,45 | 1,59 | 1,75 | 1,92 | 2,12 | 2,34 | 2,58 | 2,83 | 3,10 |
| р | 8 ° | я | 0,89 | 0,91 | 0,94 | 0,98 | 1,04 | 1,11 | 1,19 | 1,28 | 1,39 | 1,52 | 1,66 | 1,82 | 2,00 | 2,20 | 2,42 | 2,65 | 2,88 |
| а | 9 ° | 0,86 | 0,88 | 0,91 | 0,95 | 1,01 | 1,07 | 1,14 | 1,23 | 1,33 | 1,44 | 1,57 | 1,71 | 1,87 | 2,05 | 2,24 | 2,44 | 2,65 | |
| т | 10 ° | с | 0,82 | 0,84 | 0,87 | 0,91 | 0,96 | 1,01 | 1,08 | 1,16 | 1,25 | 1,35 | 1,47 | 1,60 | 1,74 | 1,89 | 2,06 | 2,24 | 2,43 |
| у | 11 ° | е | 0,78 | 0,79 | 0,82 | 0,86 | 0,90 | 0,95 | 1,01 | 1,08 | 1,16 | 1,25 | 1,36 | 1,47 | 1,60 | 1,73 | 1,88 | 2,03 | 2,20 |
| р | 12 ° | 0,72 | 0,74 | 0,76 | 0,79 | 0,83 | 0,88 | 0,93 | 0,99 | 1,07 | 1,15 | 1,24 | 1,34 | 1,44 | 1,56 | 1,69 | 1,82 | 1,96 | |
| а | 13 ° | 0,66 | 0,67 | 0,69 | 0,72 | 0,76 | 0,80 | 0,84 | 0,90 | 0,96 | 1,03 | 1,11 | 1,19 | 1,28 | 1,38 | 1,49 | 1,61 | 1,73 | |
| 14 ° | 0,59 | 0,60 | 0,62 | 0,64 | 0,67 | 0,71 | 0,74 | 0,79 | 0,85 | 0,91 | 0,97 | 1,04 | 1,12 | 1,20 | 1,29 | 1,39 | 1,49 | ||
| 15 ° | 0,51 | 0,52 | 0,53 | 0,55 | 0,58 | 0,61 | 0,64 | 0,68 | 0,73 | 0,77 | 0,83 | 0,89 | 0,95 | 1,02 | 1,09 | 1,16 | 1,24 | ||
| 16 ° | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | 0,48 | 0,50 | 0,53 | 0,56 | 0,60 | 0,63 | 0,67 | 0,72 | 0,77 | 0,82 | 0,88 | 0,94 | 1,00 | ||
| 17 ° | 0,33 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,46 | 0,48 | 0,51 | 0,55 | 0,59 | 0,62 | 0,67 | 0,71 | 0,75 | ||
| 18 ° | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,29 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,40 | 0,42 | 0,45 | 0,48 | 0,51 | ||
| 19 ° | 0,12 | 0,12 | 0,12 | 0,12 | 0,13 | 0,13 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | 0,17 | 0,18 | 0,19 | 0,20 | 0,21 | 0,23 | 0,24 | 0,25 |
| Алкохол, отчетен при t °C |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | |||
| 21 ° | 0,13 | 0,13 | 0,13 | 0,14 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | 0,17 | 0,18 | 0,19 | 0,19 | 0,20 | 0,22 | 0,23 | 0,25 | 0,26 | ||
| 22 ° | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,44 | 0,47 | 0,49 | 0,52 | ||
| 23 ° | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,47 | 0,49 | 0,51 | 0,54 | 0,57 | 0,60 | 0,63 | 0,66 | 0,70 | 0,74 | 0,78 | ||
| 24 ° | 0,55 | 0,56 | 0,58 | 0,60 | 0,62 | 0,64 | 0,67 | 0,70 | 0,73 | 0,77 | 0,81 | 0,85 | 0,89 | 0,94 | 0,99 | 1,04 | ||
| T | 25 ° | И | 0,69 | 0,71 | 0,73 | 0,76 | 0,79 | 0,82 | 0,85 | 0,89 | 0,93 | 0,97 | 1,02 | 1,07 | 1,13 | 1,19 | 1,25 | 1,31 |
| е | 26 ° | з | 0,85 | 0,87 | 0,90 | 0,93 | 0,96 | 1,00 | 1,04 | 1,08 | 1,13 | 1,18 | 1,24 | 1,30 | 1,36 | 1,43 | 1,50 | 1,57 |
| м | 27 ° | в | 1,03 | 1,07 | 1,11 | 1,15 | 1,19 | 1,23 | 1,28 | 1,34 | 1,40 | 1,46 | 1,53 | 1,60 | 1,68 | 1,76 | 1,84 | |
| п | 28 ° | а | 1,21 | 1,25 | 1,29 | 1,33 | 1,38 | 1,43 | 1,49 | 1,55 | 1,62 | 1,69 | 1,77 | 1,85 | 1,93 | 2,02 | 2,11 | |
| е | 29 ° | ж | 1,39 | 1,43 | 1,47 | 1,52 | 1,58 | 1,63 | 1,70 | 1,76 | 1,84 | 1,92 | 2,01 | 2,10 | 2,19 | 2,29 | 2,39 | |
| р | 30 ° | д | 1,57 | 1,61 | 1,66 | 1,72 | 1,78 | 1,84 | 1,91 | 1,98 | 2,07 | 2,15 | 2,25 | 2,35 | 2,45 | 2,56 | 2,67 | |
| а | 31 ° | а | 1,75 | 1,80 | 1,86 | 1,92 | 1,98 | 2,05 | 2,13 | 2,21 | 2,30 | 2,39 | 2,49 | 2,60 | 2,71 | 2,83 | 2,94 | |
| т | 32 ° | 1,94 | 2,00 | 2,06 | 2,13 | 2,20 | 2,27 | 2,35 | 2,44 | 2,53 | 2,63 | 2,74 | 2,86 | 2,97 | 3,09 | 3,22 | ||
| у | 33 ° | с | 2,20 | 2,27 | 2,34 | 2,42 | 2,50 | 2,58 | 2,67 | 2,77 | 2,88 | 2,99 | 3,12 | 3,24 | 3,37 | 3,51 | ||
| р | 34 ° | е | 2,41 | 2,48 | 2,56 | 2,64 | 2,72 | 2,81 | 2,91 | 3,02 | 3,13 | 3,25 | 3,38 | 3,51 | 3,65 | 3,79 | ||
| а | 35 ° | 2,62 | 2,70 | 2,78 | 2,86 | 2,95 | 3,05 | 3,16 | 3,27 | 3,39 | 3,51 | 3,64 | 3,78 | 3,93 | 4,08 | |||
| 36 ° | 2,83 | 2,91 | 3,00 | 3,09 | 3,19 | 3,29 | 3,41 | 3,53 | 3,65 | 3,78 | 3,91 | 4,05 | 4,21 | 4,37 | ||||
| 37 ° | 3,13 | 3,23 | 3,33 | 3,43 | 3,54 | 3,65 | 3,78 | 3,91 | 4,04 | 4,18 | 4,33 | 4,49 | 4,65 | |||||
| 38 ° | 3,36 | 3,47 | 3,57 | 3,68 | 3,79 | 3,91 | 4,03 | 4,17 | 4,31 | 4,46 | 4,61 | 4,77 | 4,94 | |||||
| 39 ° | 3,59 | 3,70 | 3,81 | 3,93 | 4,05 | 4,17 | 4,30 | 4,44 | 4,58 | 4,74 | 4,90 | 5,06 | 5,23 | |||||
| 40 ° | 3,82 | 3,94 | 4,06 | 4,18 | 4,31 | 4,44 | 4,57 | 4,71 | 4,86 | 5,02 | 5,19 | 5,36 | 5,53 |
| Алкохол, отчетен при t °C |
| 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 |
| 0 ° | 3,49 | 4,02 | 4,56 | 5,11 | 5,65 | 6,16 | 6,63 | 7,05 | 7,39 | 7,67 | 7,91 | 8,07 | 8,20 | 8,30 | 8,36 | 8,39 | 8,40 | ||
| 1 ° | 3,40 | 3,87 | 4,36 | 4,86 | 5,35 | 5,82 | 6,26 | 6,64 | 6,96 | 7,23 | 7,45 | 7,62 | 7,75 | 7,85 | 7,91 | 7,95 | 7,96 | ||
| 2 ° | 3,29 | 3,72 | 4,17 | 4,61 | 5,05 | 5,49 | 5,89 | 6,25 | 6,55 | 6,81 | 7,02 | 7,18 | 7,31 | 7,40 | 7,47 | 7,51 | 7,53 | ||
| 3 ° | 3,16 | 3,55 | 3,95 | 4,36 | 4,77 | 5,17 | 5,53 | 5,85 | 6,14 | 6,39 | 6,59 | 6,74 | 6,86 | 6,97 | 7,03 | 7,07 | 7,09 | ||
| 4 ° | 3,03 | 3,38 | 3,75 | 4,11 | 4,48 | 4,84 | 5,17 | 5,48 | 5,74 | 5,97 | 6,16 | 6,31 | 6,43 | 6,53 | 6,59 | 6,63 | 6,66 | ||
| Т | 5 ° | Д | 2,89 | 3,21 | 3,54 | 3,86 | 4,20 | 4,52 | 4,83 | 5,11 | 5,35 | 5,56 | 5,74 | 5,89 | 6,00 | 6,10 | 6,16 | 6,20 | 6,23 |
| е | 6 ° | о | 2,74 | 3,02 | 3,32 | 3,61 | 3,91 | 4,21 | 4,49 | 4,74 | 4,96 | 5,16 | 5,33 | 5,47 | 5,58 | 5,67 | 5,73 | 5,77 | 5,80 |
| м | 7 ° | б | 2,58 | 2,83 | 3,10 | 3,36 | 3,63 | 3,90 | 4,15 | 4,38 | 4,58 | 4,77 | 4,92 | 5,05 | 5,15 | 5,24 | 5,30 | 5,34 | 5,37 |
| п | 8 ° | а | 2,42 | 2,65 | 2,88 | 3,11 | 3,35 | 3,59 | 3,81 | 4,02 | 4,21 | 4,38 | 4,52 | 4,64 | 4,74 | 4,81 | 4,87 | 4,92 | 4,95 |
| е | 9 ° | в | 2,24 | 2,44 | 2,65 | 2,86 | 3,07 | 3,28 | 3,48 | 3,67 | 3,84 | 3,99 | 4,12 | 4,23 | 4,32 | 4,39 | 4,45 | 4,50 | 4,53 |
| р | 10 ° | я | 2,06 | 2,24 | 2,43 | 2,61 | 2,80 | 2,98 | 3,16 | 3,33 | 3,48 | 3,61 | 3,73 | 3,83 | 3,91 | 3,98 | 4,03 | 4,08 | 4,11 |
| а | 11 ° | 1,88 | 2,03 | 2,20 | 2,36 | 2,52 | 2,68 | 2,83 | 2,98 | 3,12 | 3,24 | 3,34 | 3,43 | 3,50 | 3,57 | 3,62 | 3,66 | 3,69 | |
| т | 12 ° | с | 1,69 | 1,82 | 1,96 | 2,10 | 2,24 | 2,38 | 2,51 | 2,64 | 2,76 | 2,87 | 2,96 | 3,04 | 3,10 | 3,16 | 3,21 | 3,25 | 3,27 |
| у | 13 ° | е | 1,49 | 1,61 | 1,73 | 1,84 | 1,96 | 2,08 | 2,20 | 2,31 | 2,41 | 2,50 | 2,58 | 2,65 | 2,71 | 2,76 | 2,80 | 2,83 | 2,85 |
| р | 14 ° | 1,29 | 1,39 | 1,49 | 1,58 | 1,68 | 1,78 | 1,88 | 1,97 | 2,06 | 2,13 | 2,20 | 2,26 | 2,31 | 2,36 | 2,39 | 2,42 | 2,44 | |
| а | 15 ° | 1,09 | 1,16 | 1,24 | 1,32 | 1,40 | 1,48 | 1,56 | 1,64 | 1,71 | 1,77 | 1,83 | 1,88 | 1,92 | 1,96 | 1,98 | 2,01 | 2,03 | |
| 16 ° | 0,88 | 0,94 | 1,00 | 1,06 | 1,12 | 1,19 | 1,25 | 1,31 | 1,36 | 1,41 | 1,46 | 1,50 | 1,53 | 1,56 | 1,58 | 1,60 | 1,62 | ||
| 17 ° | 0,67 | 0,71 | 0,75 | 0,80 | 0,84 | 0,89 | 0,94 | 0,98 | 1,02 | 1,05 | 1,09 | 1,12 | 1,14 | 1,17 | 1,18 | 1,20 | 1,21 | ||
| 18 ° | 0,45 | 0,48 | 0,51 | 0,53 | 0,56 | 0,59 | 0,62 | 0,65 | 0,68 | 0,70 | 0,72 | 0,74 | 0,76 | 0,78 | 0,79 | 0,80 | 0,81 | ||
| 19 ° | 0,23 | 0,24 | 0,25 | 0,27 | 0,28 | 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,40 | 0,41 | ||
| 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | |||
| 21 ° | 0,23 | 0,25 | 0,26 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 6,31 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,35 | 0,37 | 0,38 | 0,38 | 0,39 | 0,39 | 0,40 | ||
| 22 ° | 0,47 | 0,49 | 0,52 | 0,55 | 0,57 | 0,60 | 0,62 | 0,65 | 0,67 | 0,70 | 0,72 | 0,74 | 0,75 | 0,76 | 0,78 | 0,79 | 0,80 | ||
| 23 ° | 0,70 | 0,74 | 0,78 | 0,82 | 0,86 | 0,90 | 0,93 | 0,97 | 1,01 | 1,04 | 1,07 | 1,10 | 1,12 | 1,15 | 1,17 | 1,18 | 1,19 | ||
| Т | 24 ° | И | 0,94 | 0,99 | 1,04 | 1,10 | 1,15 | 1,20 | 1,25 | 1,29 | 1,34 | 1,39 | 1,43 | 1,46 | 1,50 | 1,53 | 1,55 | 1,57 | 1,59 |
| е | 25 ° | з | 1,19 | 1,25 | 1,31 | 1,37 | 1,43 | 1,49 | 1,56 | 1,62 | 1,68 | 1,73 | 1,78 | 1,83 | 1,87 | 1,90 | 1,94 | 1,97 | 1,99 |
| м | 26 ° | в | 1,43 | 1,50 | 1,57 | 1,65 | 1,73 | 1,80 | 1,87 | 1,94 | 2,01 | 2,07 | 2,13 | 2,19 | 2,24 | 2,28 | 2,32 | 2,35 | 2,38 |
| п | 27 ° | а | 1,68 | 1,76 | 1,84 | 1,93 | 2,01 | 2,10 | 2,18 | 2,26 | 2,34 | 2,41 | 2,48 | 2,55 | 2,61 | 2,66 | 2,70 | 2,74 | 2,77 |
| е | 28 ° | ж | 1,93 | 2,02 | 2,11 | 2,21 | 2,31 | 2,40 | 2,49 | 2,58 | 2,67 | 2,76 | 2,83 | 2,90 | 2,98 | 3,03 | 3,08 | 3,13 | 3,17 |
| р | 29 ° | д | 2,19 | 2,29 | 2,39 | 2,50 | 2,60 | 2,70 | 2,81 | 2,91 | 3,00 | 3,09 | 3,18 | 3,26 | 3,34 | 3,40 | 3,46 | 3,51 | 3,55 |
| а | 30 ° | а | 2,45 | 2,56 | 2,67 | 2,78 | 2,90 | 3,01 | 3,12 | 3,23 | 3,34 | 3,44 | 3,53 | 3,62 | 3,70 | 3,77 | 3,84 | 3,90 | 3,95 |
| т | 31 ° | 2,71 | 2,83 | 2,94 | 3,07 | 3,19 | 3,31 | 3,43 | 3,55 | 3,67 | 3,78 | 3,88 | 3,98 | 4,07 | 4,15 | 4,22 | 4,28 | 4,33 | |
| у | 32 ° | с | 2,97 | 3,09 | 3,22 | 3,36 | 3,49 | 3,62 | 3,74 | 3,87 | 4,00 | 4,11 | 4,22 | 4,33 | 4,43 | 4,51 | 4,59 | 4,66 | 4,72 |
| р | 33 ° | е | 3,24 | 3,37 | 3,51 | 3,65 | 3,79 | 3,92 | 4,06 | 4,20 | 4,33 | 4,45 | 4,57 | 4,68 | 4,79 | 4,88 | 4,97 | 5,04 | 5,10 |
| а | 34 ° | 3,51 | 3,65 | 3,79 | 3,94 | 4,09 | 4,23 | 4,37 | 4,52 | 4,66 | 4,79 | 4,91 | 5,03 | 5,15 | 5,25 | 5,34 | 5,42 | 5,49 | |
| 35 ° | 3,78 | 3,93 | 4,08 | 4,23 | 4,38 | 4,53 | 4,69 | 4,84 | 4,98 | 5,12 | 5,26 | 5,38 | 5,50 | 5,61 | 5,71 | 5,80 | 5,87 | ||
| 36 ° | 4,05 | 4,21 | 4,37 | 4,52 | 4,68 | 4,84 | 5,00 | 5,16 | 5,31 | 5,46 | 5,60 | 5,73 | 5,86 | 5,97 | 6,08 | 6,17 | 6,25 | ||
| 37 ° | 4,33 | 4,49 | 4,65 | 4,82 | 4,98 | 5,15 | 5,31 | 5,48 | 5,64 | 5,80 | 5,95 | 6,09 | 6,22 | 6,33 | 6,44 | 6,54 | 6,63 | ||
| 38 ° | 4,61 | 4,77 | 4,94 | 5,12 | 5,29 | 5,46 | 5,63 | 5,80 | 5,97 | 6,13 | 6,29 | 6,43 | 6,57 | 6,69 | 6,81 | 6,92 | 7,01 | ||
| 39 ° | 4,90 | 5,06 | 5,23 | 5,41 | 5,59 | 5,77 | 5,94 | 6,12 | 6,30 | 6,47 | 6,63 | 6,78 | 6,93 | 7,06 | 7,18 | 7,29 | 7,39 | ||
| 40 ° | 5,19 | 5,36 | 5,53 | 5,71 | 5,90 | 6,08 | 6,26 | 6,44 | 6,62 | 6,80 | 6,97 | 7,13 | 7,28 | 7,41 | 7,54 | 7,66 | 7,76 |
Таблица III
Международна таблица за отчитане на алкохолното съдържание при 20 градуса С
Таблица за плътността на водоалкохолни смеси, измерена с апарати от обикновено стъкло
Плътностите при t градуса C са коригирани с отчитане на подемната сила на въздуха
| t °C | Алкохол в об.% |
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 |
| 0 | 999,34 | 1,52 | 997,82 | 1,45 | 996,37 | 1,39 | 994,98 | 1,35 | 993,63 | 1,29 | 992,34 | 1,24 | 991,10 | 1,18 | 989,92 | 1,15 | 988,77 | 1,09 | 987,68 | 1,05 | 986,63 | 1,00 | 985,63 | 0,96 |
| -0,09 | -0,09 | -0,09 | -0,08 | -0,08 | -0,08 | -0,07 | -0,05 | -0,05 | -0,04 | -0,03 | -0,02 | |||||||||||||
| 1 | 999,43 | 1,52 | 997,91 | 1,45 | 996,46 | 1,40 | 995,06 | 1,35 | 993,71 | 1,29 | 992,42 | 1,25 | 991,17 | 1,20 | 989,97 | 1,15 | 988,82 | 1,10 | 987,72 | 1,06 | 986,66 | 1,01 | 985,65 | 0,97 |
| -0,06 | -0,06 | -0,06 | -0,06 | -0,06 | -0,05 | -0,05 | -0,04 | -0,03 | -0,02 | -0,02 | -0,01 | |||||||||||||
| 2 | 999,49 | 1,52 | 997,97 | 1,40 | 996,52 | 1,40 | 995,12 | 1,35 | 993,77 | 1,30 | 992,47 | 1,25 | 991,22 | 1,21 | 99001 | 1,16 | 988,85 | 1,11 | 987,74 | 1,06 | 986,68 | 1,02 | 985,66 | 0,98 |
| -0,05 | -0,05 | -0,04 | -0,04 | -0,04 | -0,04 | -0,03 | -0,03 | -0,03 | -0,02 | 0,00 | 0,01 | |||||||||||||
| 3 | 999,54 | 1,52 | 998,02 | 1,46 | 99656 | 1,40 | 995,16 | 1,35 | 993,81 | 1,30 | 992,51 | 1,26 | 991,25 | 1,21 | 990,04 | 1,16 | 988,88 | 1,12 | 987,76 | 1,08 | 986,68 | 1,03 | 985,65 | 0,99 |
| -0,03 | -0,03 | -0,03 | -0,03 | -0,02 | -0,02 | -0,02 | -0,01 | 0,00 | 0,01 | 0,01 | 0,02 | |||||||||||||
| 4 | 999,57 | 1,52 | 998,05 | 1,46 | 996,59 | 1,40 | 995,19 | 1,36 | 993,83 | 1,30 | 992,53 | 1,26 | 991,27 | 1,22 | 990,05 | 1,17 | 988,88 | 1,13 | 987,75 | 1,08 | 986,67 | 1,04 | 985,63 | 1,00 |
| -0,02 | -0,02 | -0,02 | -0,02 | -0,02 | -0,01 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,02 | 0,03 | |||||||||||||
| 5 | 999,59 | 1,52 | 998,07 | 1,46 | 996,61 | 1,40 | 995,21 | 1,36 | 993,85 | 1,31 | 992,54 | 1,27 | 991,27 | 1,22 | 990,05 | 1,17 | 988,88 | 1,14 | 987,74 | 1,09 | 986,65 | 1,05 | 985,60 | 1,02 |
| 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,02 | 0,03 | 0,03 | 0,04 | 0,06 | |||||||||||||
| 6 | 999,59 | 1,5 | 998,07 | 1,46 | 996,61 | 1,41 | 995,20 | 1,36 | 993,84 | 1,31 | 992,53 | 1,27 | 991,26 | 1,23 | 990,03 | 1,18 | 988,85 | 1,14 | 987,71 | 1,10 | 986,61 | 1,07 | 985,54 | 1,02 |
| 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,03 | 0,04 | 0,05 | 0,06 | |||||||||||||
| 7 | 999,58 | 1,52 | 998,06 | 1,46 | 996,60 | 1,41 | 995,19 | 1,36 | 993,83 | 1,32 | 992,51 | 1,27 | 991,24 | 1,23 | 990,01 | 1,19 | 988,82 | 1,15 | 987,67 | 1,11 | 986,56 | 1,08 | 985,48 | 1,04 |
| 0,03 | 0,03 | 0,03 | 0,03 | 0,04 | 0,04 | 0,05 | 0,05 | 0,06 | 0,07 | 0,07 | 0,08 | |||||||||||||
| 8 | 999,55 | 1,52 | 998,03 | 1,46 | 996,57 | 1,41 | 995,16 | 1,37 | 993,79 | 1,32 | 992,47 | 1,28 | 991,19 | 1,23 | 989,96 | 1,20 | 988,76 | 1,16 | 987,60 | 1,11 | 986,49 | 1,09 | 985,40 | 1,05 |
| 0,04 | 0,04 | 0,04 | 0,04 | 0,04 | 0,04 | 0,05 | 0,06 | 0,06 | 0,06 | 0,08 | 0,08 | |||||||||||||
| 9 | 999,51 | 1,52 | 997,99 | 1,46 | 996,53 | 1,41 | 995,12 | 1,37 | 993,75 | 1,32 | 992,43 | 1,29 | 991,14 | 1,24 | 989,90 | 1,20 | 988,70 | 1,16 | 087,54 | 1,13 | 986,41 | 1,09 | 985,32 | 1,06 |
| 0,06 | 0,06 | 0,06 | 0,06 | 0,06 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,08 | 0,09 | 0,10 | 0,11 | |||||||||||||
| 10 | 999,45 | 1,52 | 997,93 | 1,46 | 996,47 | 1,41 | 995,06 | 1,37 | 993,69 | 1,33 | 992,36 | 1,29 | 991,07 | 1,24 | 989,83 | 1,21 | 988,62 | 1,17 | 987,45 | 1,14 | 986,31 | 1,10 | 985,21 | 1,07 |
| 0,07 | 0,06 | 0,06 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,07 | 0,08 | 0,09 | 0,10 | 0,10 | 0,11 | |||||||||||||
| 11 | 999,38 | 1,51 | 997,87 | 1,46 | 996,41 | I,47 | 994,99 | 1,37 | 993,62 | 1,33 | 992,29 | 1,29 | 991,00 | 1,25 | 989,75 | 1,22 | 988,53 | 1,18 | 987,35 | 1,14 | 986,21 | 1,11 | 985,10 | 1,08 |
| 0,09 | 0,09 | 0,09 | 0,09 | 0,09 | 0,09 | 0,10 | 0,11 | 0,11 | 0,11 | 0,12 | 0,13 | |||||||||||||
| 12 | 999,29 | 1,51 | 997,78 | 1,46 | 996,32 | 1,42 | 994,90 | 1,37 | 993,53 | 1,33 | 992,20 | 1,30 | 990,90 | 1,26 | 989,64 | 1,22 | 988,42 | 1,18 | 987,24 | 1,15 | 986,09 | 1,12 | 984,97 | 1,09 |
| 0,09 | 0,09 | 0,09 | 0,09 | 0,10 | 0,10 | 0,10 | 0,10 | 0,11 | 0,12 | 0,13 | 0,14 | |||||||||||||
| 13 | 999,20 | 1,51 | 997,69 | 1,46 | 996,23 | 1,42 | 994,81 | 1,38 | 993,43 | 1,33 | 992,10 | 1,30 | 990,80 | 1,26 | 989,54 | 1,23 | 988,31 | 1,19 | 987,12 | 1,16 | 985,96 | 1,13 | 984,83 | 1,10 |
| 0,11 | 0,11 | 0,11 | 0,11 | 0,11 | 0,12 | 0,12 | 0,13 | 0,13 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | |||||||||||||
| 14 | 999,09 | 1,51 | 997,58 | 1,46 | 996,12 | 1,42 | 994,70 | 1,38 | 993,32 | 1,34 | 991,98 | 1,30 | 990,68 | 1,27 | 989,41 | 1,23 | 988,18 | 1,20 | 986,98 | 1,17 | 985,81 | 1,14 | 984,67 | 1,11 |
| 0,12 | 0,12 | 0,12 | 0,12 | 0,12 | 0,12 | 0,13 | 0,13 | 0,14 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | |||||||||||||
| 15 | 998,97 | 1,51 | 997,46 | 1,46 | 996,00 | 1,42 | 994,58 | 1,38 | 993,20 | 1,34 | 991,86 | 1,31 | 990,55 | 1,27 | 989,28 | 1,24 | 988,04 | 1,20 | 986,84 | 1,18 | 985,66 | 1,15 | 984,51 | 1,12 |
| 0,13 | 0,13 | 0,13 | 0,13 | 0,14 | 0,14 | 0,14 | 0,15 | 0,15 | 0,17 | 0,17 | 0,18 | |||||||||||||
| 16 | 998,84 | 1,51 | 997,33 | 1,46 | 995,87 | 1,42 | 994,45 | 1,39 | 993,06 | 1,34 | 991,72 | 1,31 | 990,41 | 1,28 | 989,13 | 1,24 | 987,89 | 1,22 | 986,67 | 1,18 | 985,49 | 1,16 | 984,33 | 1,13 |
| 0,14 | 0,14 | 0,14 | 0,14 | 0,14 | 0,15 | 0,15 | 0,15 | 0,16 | 0,17 | 0,17 | 0,18 | |||||||||||||
| 17 | 998,70 | 1,51 | 997,19 | 1,46 | 995,73 | 1,42 | 994,31 | 1,39 | 992,92 | 1,35 | 991,57 | 1,31 | 990,26 | 1,28 | 988,98 | 1,25 | 987,73 | 1,22 | 986,50 | 1,18 | 985,32 | 1,17 | 984,15 | 1,14 |
| 0,15 | 0,15 | 0,16 | 0,16 | 0,16 | 0,16 | 0,17 | 0,17 | 0,18 | 0,18 | 0,19 | 0,19 | |||||||||||||
| 18 | 998,55 | 1,51 | 997,04 | 1,47 | 995,57 | 1,42 | 994,15 | 1,39 | 992,76 | 1,35 | 991,41 | 1,32 | 990,09 | 1,28 | 988,81 | 1,26 | 987,55 | 1,23 | 986,32 | 1,19 | 985,13 | 1,17 | 983,96 | 1,15 |
| 0,17 | 0,16 | 0,16 | 0,16 | 0,16 | 0,16 | 0,17 | 0,18 | 0,18 | 0,19 | 0,20 | 0,21 | |||||||||||||
| 19 | 998,38 | 1,50 | 996,88 | 1,47 | 995,41 | 1,42 | 993,99 | 1,39 | 992,60 | 1,35 | 991,25 | 1,33 | 989,92 | 1,29 | 988,63 | 1,26 | 987,37 | 1,24 | 986,13 | 1,20 | 984,93 | 1,18 | 983,75 | 1,16 |
| 0,18 | 0,18 | 0,18 | 0,18 | 0,19 | 0,19 | 0,19 | 0,20 | 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,23 | |||||||||||||
| 20 | 998,20 | 1,50 | 996,70 | 1,47 | 995,23 | 1,42 | 993,81 | 1,40 | 992,41 | 1,35 | 991,06 | 1,33 | 989,73 | 1,30 | 988,43 | 1,27 | 987,16 | 1,24 | 985,92 | 1,21 | 984,71 | 1,19 | 983,52 | 1,17 |
| 0,19 | 0,19 | 0,19 | 0,19 | 0,19 | 0,20 | 0,20 | 0,21 | 0,21 | 0,22 | 0,23 | 0,23 | |||||||||||||
| 21 | 998,01 | 1,50 | 996,51 | 1,47 | 995,04 | 1,43 | 993,62 | 1,40 | 992,22 | 1,36 | 990,86 | 1,33 | 989,53 | 1,31 | 988,22 | 1,27 | 986,95 | 1,25 | 985,70 | 1,22 | 984,48 | 1,19 | 983,29 | 1,17 |
| 0,20 | 0,20 | 0,19 | 0,20 | 0,20 | 0,20 | 0,21 | 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,23 | 0,24 | |||||||||||||
| 22 | 987,81 | 1,50 | 996,31 | 1,46 | 994,85 | 1,43 | 993,42 | 1,40 | 992,02 | 1,36 | 990,66 | 1,34 | 989,32 | 1,31 | 988,01 | 1,28 | 986,73 | 1,25 | 985,48 | 1,23 | 984,25 | 1,20 | 983,15 | 1,18 |
| 0,21 | 0,21 | 0,21 | 0,21 | 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,22 | 0,23 | 0,24 | 0,24 | 0,25 | |||||||||||||
| 23 | 997,60 | 1,50 | 996,10 | 1,46 | 994,64 | 1,43 | 993,21 | 1,40 | 991,81 | 1,37 | 990,44 | 1,34 | 989,10 | 1,31 | 987,79 | 1,29 | 986,50 | 1,26 | 985,24 | 1,23 | 984,01 | 1,21 | 982,80 | 1,19 |
| 0,21 | 0,21 | 0,22 | 0,22 | 0,22 | 0,22 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | |||||||||||||
| 24 | 997,39 | 1,50 | 995,89 | 1,47 | 994,42 | 1,43 | 992,99 | 1,40 | 991,59 | 1,37 | 990,22 | 1,35 | 988,87 | 1,31 | 987,56 | 1,29 | 986,27 | 1,27 | 985,00 | 1,24 | 983,76 | 1,22 | 982,54 | 1,20 |
| 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,24 | 0,24 | 0,24 | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | |||||||||||||
| 25 | 997,16 | 1,50 | 995,66 | 1,47 | 994,19 | 1,43 | 992,76 | 1,41 | 991,35 | 1,37 | 989,98 | 1,35 | 988,63 | 1,32 | 987,31 | 1,29 | 986,02 | 1,27 | 984,75 | 1,25 | 983,50 | 1,23 | 982,27 | 1,21 |
| 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,24 | 0,24 | 0,24 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,27 | 0,28 | |||||||||||||
| 26 | 996,93 | 1,50 | 995,43 | 1,47 | 993,96 | 1,44 | 992,52 | 1,41 | 991,11 | 1,37 | 989,74 | 1,35 | 988,39 | 1,33 | 987,06 | 1,30 | 985,76 | 1,28 | 984,48 | 1,25 | 983,23 | 1,24 | 981,99 | 1,22 |
| 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,26 | 0,26 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,29 | |||||||||||||
| 27 | 996,68 | 1,50 | 995,18 | 1,47 | 993,71 | 1,44 | 992,27 | 1,41 | 990,86 | 1,38 | 989,48 | 1,35 | 988,13 | 1,33 | 986,80 | 1,31 | 985,49 | 1,29 | 984,20 | 1,26 | 982,94 | 1,24 | 981,70 | 1,23 |
| 0,25 | 0,25 | 0,26 | 0,26 | 0,26 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,28 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | |||||||||||||
| 28 | 996,43 | 1,50 | 994,93 | 1,48 | 993,45 | 1,44 | 992,01 | 1,41 | 990,60 | 1,38 | 989,22 | 1,36 | 987,86 | 1,34 | 986,52 | 1,31 | 985,21 | 1,29 | 983,92 | 1,27 | 982,65 | 1,25 | 981,40 | 1,23 |
| 0,26 | 0,27 | 0,27 | 0,27 | 0,27 | 0,28 | 0,28 | 0,28 | 0,29 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | |||||||||||||
| 29 | 996,17 | 1,51 | 994,66 | 1,48 | 993,18 | 1,44 | 991,74 | 1,41 | 990,33 | 1,39 | 988,94 | 1,36 | 987,58 | 1,34 | 986,24 | 1,32 | 984,92 | 1,29 | 983,63 | 1,28 | 982,35 | 1,26 | 981,09 | 1,24 |
| 0,27 | 0,27 | 0,27 | 0,28 | 0,28 | 0,28 | 0,28 | 0,29 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,32 | |||||||||||||
| 30 | 995,90 | 1,51 | 994,39 | 1,48 | 992,91 | 1,45 | 991,46 | 1,41 | 990,05 | 1,39 | 988,66 | 1,37 | 987,29 | 1,34 | 985,95 | 1,32 | 984,63 | 1,30 | 983,33 | 1,29 | 982,04 | 1,27 | 980,77 | 1,25 |
| 0,29 | 0,29 | 0,29 | 0,29 | 0,30 | 0,30 | 0,30 | 0,31 | 0,31 | 0,32 | 0,32 | 0,32 | |||||||||||||
| 31 | 995,61 | 1,51 | 994,10 | 1,48 | 992,62 | 1,45 | 991,17 | 1,42 | 989,75 | 1,39 | 988,36 | 1,37 | 986,99 | 1,35 | 985,64 | 1,33 | 984,31 | 1,30 | 983,01 | 1,29 | 981,72 | 1,27 | 980,45 | 1,26 |
| 0,29 | 0,29 | 0,29 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,34 | |||||||||||||
| 32 | 995,32 | 1,51 | 993,81 | 1,48 | 992,33 | 1,45 | 990,88 | 1,42 | 989,45 | 1,40 | 988,05 | 1,37 | 986,68 | 1,35 | 985,33 | 1,33 | 984,00 | 1,31 | 982,69 | 1,30 | 981,39 | 1,28 | 980,11 | 1,26 |
| 0,30 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,33 | 0,34 | 0,34 | |||||||||||||
| 33 | 995,02 | 1,52 | 993,50 | 1,48 | 992,02 | 1,45 | 990,57 | 1,43 | 989,14 | 1,40 | 987,74 | 1,37 | 986,37 | 1,36 | 985,01 | 1,34 | 983,67 | 1,31 | 982,36 | 1,31 | 981,05 | 1,28 | 979,77 | 1,27 |
| 0,30 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,33 | 0,33 | 0,34 | 0,34 | 0,35 | |||||||||||||
| 34 | 994,72 | 1,53 | 993,19 | 1,48 | 991,71 | 1,45 | 990,26 | 1,43 | 988,83 | 1,41 | 987,42 | 1,38 | 986,04 | 1,36 | 984,68 | 1,34 | 983,34 | 1,32 | 982,02 | 1,31 | 980,71 | 1,29 | 979,42 | 1,28 |
| 0,32 | 0,32 | 0,32 | 0,33 | 0,33 | 0,33 | 0,33 | 0,33 | 0,33 | 0,34 | 0,34 | 0,35 | |||||||||||||
| 35 | 994,40 | 1,53 | 992,87 | 1,48 | 991,39 | 1,46 | 989,93 | 1,43 | 988,50 | 1,41 | 987,09 | 1,38 | 985,71 | 1,36 | 984,35 | 1,34 | 983,01 | 1,33 | 981,68 | 1,31 | 980,37 | 1,30 | 979,07 | 1,29 |
| 0,32 | 0,32 | 0,33 | 0,33 | 0,33 | 0,33 | 0,34 | 0,34 | 0,35 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | |||||||||||||
| 36 | 994,08 | 1,53 | 992,55 | 1,49 | 991,06 | 1,46 | 989,60 | 1,43 | 988,17 | 1,41 | 986,76 | 1,39 | 985,37 | 1,36 | 984,01 | 1,35 | 982,66 | 1,33 | 981,33 | 1,32 | 980,01 | 1,31 | 978,70 | 1,29 |
| 0,33 | 0,34 | 0,34 | 0,34 | 0,35 | 0,35 | 0,35 | 0,35 | 0,36 | 0,36 | 0,36 | 0,37 | |||||||||||||
| 37 | 993,75 | 1,54 | 992,21 | 1,49 | 990,72 | 1,46 | 989,26 | 1,44 | 987,82 | 1,41 | 986,41 | 1,39 | 985,02 | 1,37 | 983,65 | 1,35 | 982,30 | 1,33 | 980,97 | 1,32 | 979,65 | 1,32 | 978,33 | 1,30 |
| 0,34 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,36 | 0,36 | 0,36 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,38 | 0,38 | |||||||||||||
| 38 | 993,41 | 1,54 | 991,87 | 1,50 | 990,37 | 1,47 | 988,90 | 1,44 | 987,46 | 1,41 | 986,05 | 1,39 | 984,66 | 1,37 | 983,29 | 1,36 | 981,93 | 1,34 | 980,59 | 1,32 | 979,27 | 1,32 | 977,95 | 1,31 |
| 0,35 | 0,35 | 0,36 | 0,36 | 0,36 | 0,37 | 0,37 | 0,37 | 0,37 | 0,38 | 0,38 | 0,39 | |||||||||||||
| 39 | 993,06 | 1,54 | 991,52 | 1,51 | 990,01 | 1,47 | 988,54 | 1,44 | 987,10 | 1,41 | 985,68 | 1,39 | 984,29 | 1,37 | 982,92 | 1,36 | 981,56 | 1,34 | 980,22 | 1,33 | 978,89 | 1,33 | 977,56 | 1,31 |
| 0,35 | 0,36 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,38 | 0,38 | 0,38 | 0,38 | 0,39 | 0,39 | 0,39 | |||||||||||||
| 40 | 992,71 | 1,55 | 991,16 | 1,51 | 989,65 | 1,48 | 988,17 | 1,45 | 986,72 | 1,42 | 985,30 | 1,39 | 983,91 | 1,37 | 982,54 | 1,36 | 981,18 | 1,35 | 979,83 | 1,33 | 978,50 | 1,33 | 977,17 | 1,32 |
| t °C | Алкохол в об.% |
| 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 |
| 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | |||||||||||||
| 0 | 986,63 | 1,00 | 985,63 | 0,96 | 984,67 | 0,92 | 983,75 | 0,87 | 982,88 | 0,84 | 982,04 | 0,81 | 981,23 | 0,77 | 980,46 | 0,75 | 979,71 | 0,73 | 978,98 | 0,72 | 978,26 | 0,70 | 977,56 | 0,70 |
| -0,03 | -0,02 | -0,01 | 0,00 | 0,02 | 0,04 | 0,05 | 0,07 | 0,09 | 0,11 | 0,13 | 0,15 | |||||||||||||
| 1 | 986,66 | 1,01 | 985,65 | 0,97 | 984,68 | 0,93 | 983,75 | 0,89 | 982,86 | 0,86 | 982,00 | 0,82 | 981,18 | 0,79 | 980,39 | 0,77 | 979,62 | 0,75 | 978,87 | 0,74 | 978,13 | 0,72 | 977,41 | 0,72 |
| -0,02 | -0,01 | 0,00 | 0,01 | 0,03 | 0,04 | 0,06 | 0,08 | 0,10 | 0,12 | 0,14 | 0,17 | |||||||||||||
| 2 | 986,68 | 1,02 | 985,66 | 0,98 | 984,68 | 0,94 | 983,74 | 0,91 | 982,83 | 0,87 | 981,96 | 0,84 | 981,12 | 0,81 | 980,31 | 0,79 | 979,52 | 0,77 | 978,75 | 0,76 | 977,99 | 0,75 | 977,24 | 0,74 |
| 0,00 | 0,01 | 0,02 | 0,04 | 0,05 | 0,06 | 0,08 | 0,10 | 0,12 | 0,14 | 0,16 | 0,18 | |||||||||||||
| 3 | 986,68 | 1,03 | 985,65 | 0,99 | 984,66 | 0,96 | 983,70 | 0,92 | 982,78 | 0,88 | 981,90 | 0,86 | 981,04 | 0,83 | 980,21 | 0,81 | 979,40 | 0,79 | 978,61 | 0,78 | 977,83 | 0,77 | 977,06 | 0,76 |
| 0,01 | 0,02 | 0,03 | 0,04 | 0,05 | 0,07 | 0,08 | 0,10 | 0,12 | 0,14 | 0,16 | 0,18 | |||||||||||||
| 4 | 986,67 | 1,04 | 985,63 | 1,00 | 984,63 | 0,97 | 983,66 | 0,93 | 982,73 | 0,90 | 981,83 | 0,87 | 980,96 | 0,85 | 980,11 | 0,83 | 979,28 | 0,81 | 978,47 | 0,80 | 977,67 | 0,79 | 976,88 | 0,79 |
| 0,02 | 0,03 | 0,05 | 0,06 | 0,08 | 0,09 | 0,11 | 0,13 | 0,14 | 0,16 | 0,18 | 0,20 | |||||||||||||
| 5 | 986,65 | 1,05 | 985, 60 | 1,02 | 984,58 | 0,98 | 983,60 | 0,95 | 982,65 | 0,91 | 981,74 | 0,89 | 980,85 | 0,87 | 979,98 | 0,84 | 979,14 | 0,83 | 978,31 | 0,82 | 977,49 | 0,81 | 976,68 | 0,81 |
| 0,04 | 0,06 | 0,06 | 0,07 | 0,08 | 0,10 | 0,11 | 0,13 | 0,15 | 0,17 | 0,19 | 0,21 | |||||||||||||
| 6 | 986,61 | 1,07 | 985,54 | 1,02 | 984,52 | 0,99 | 983,53 | 0,96 | 982,57 | 0,93 | 981,64 | 0,90 | 980,74 | 0,89 | 979,85 | 0,86 | 978,99 | 0,85 | 978,14 | 0,84 | 977,30 | 0,83 | 976,47 | 0,83 |
| 0,05 | 0,06 | 0,08 | 0,09 | 0,10 | 0,12 | 0,14 | 0,15 | 0,17 | 0,19 | 0,20 | 0,22 | |||||||||||||
| 7 | 986,56 | 1,08 | 985,48 | 1,04 | 984,44 | 1,00 | 983,44 | 0,97 | 982,47 | 0,95 | 981,52 | 0,92 | 980,60 | 0,90 | 979,70 | 0,88 | 978,82 | 0,87 | 977,95 | 0,85 | 977,10 | 0,85 | 976,25 | 0,85 |
| 0,07 | 0,08 | 0,09 | 0,10 | 0,11 | 0,12 | 0,14 | 0,16 | 0,18 | 0,19 | 0,21 | 0,23 | |||||||||||||
| 8 | 986,49 | 1,09 | 985,40 | 1,05 | 984,35 | 1,01 | 983,34 | 0,98 | 982,36 | 0,96 | 981,40 | 0,94 | 980,46 | 0,92 | 979,54 | 0,90 | 978,64 | 0,88 | 977,76 | 0,87 | 976,89 | 0,87 | 976,02 | 0,87 |
| 0,08 | 0,08 | 0,09 | 0,11 | 0,13 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | 0,18 | 0,20 | 0,22 | 0,24 | |||||||||||||
| 9 | 986,41 | 1,09 | 985,32 | 1,06 | 984,26 | 1,03 | 983,23 | 1,00 | 982,23 | 0,97 | 981,26 | 0,95 | 980,31 | 0,93 | 979,38 | 0,92 | 978,48 | 0,90 | 977,56 | 0,89 | 976,67 | 0,89 | 975,78 | 0,89 |
| 0,10 | 0,11 | 0,12 | 0,13 | 0,14 | 0,16 | 0,17 | 0,18 | 0,19 | 0,21 | 0,23 | 0,25 | |||||||||||||
| 10 | 986,31 | 1,10 | 985,21 | 1,07 | 984,14 | 1,04 | 983,10 | 1,01 | 982,09 | 0,99 | 981,10 | 0,96 | 980,14 | 0,94 | 979,20 | 0,93 | 978,27 | 0,92 | 977,35 | 0,91 | 976,44 | 0,91 | 975,53 | 0,91 |
| 0,10 | 0,11 | 0,12 | 0,13 | 0,15 | 0,16 | 0,17 | 0,19 | 0,21 | 0,23 | 0,25 | 0,27 | |||||||||||||
| 11 | 986,21 | 1,11 | 985,10 | 1,08 | 984,02 | 1,05 | 982,97 | 1,03 | 981,94 | 1,00 | 980,94 | 0,97 | 979,97 | 0,96 | 979,01 | 0,95 | 978,06 | 0,94 | 977,12 | 0,93 | 976,19 | 0,93 | 975,26 | 0,92 |
| 0,12 | 0,13 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | 0,17 | 0,19 | 0,21 | 0,22 | 0,24 | 0,26 | 0,27 | |||||||||||||
| 12 | 986,09 | 1,12 | 984,97 | 1,09 | 983,88 | 1,06 | 982,82 | 1,04 | 981,78 | 1,01 | 980,77 | 0,99 | 979,78 | 0,98 | 978,80 | 0,96 | 977,84 | 0,96 | 976,88 | 0,95 | 975,93 | 0,94 | 974,99 | 0,94 |
| 0,13 | 0,14 | 0,15 | 0,16 | 0,17 | 0,19 | 0,20 | 0,21 | 0,23 | 0,24 | 0,26 | 0,28 | |||||||||||||
| 13 | 985,96 | 1,13 | 984,83 | 1,10 | 983,73 | 1,07 | 982,66 | 1,05 | 981,61 | 1,03 | 980,58 | 1,00 | 979,58 | 0,99 | 978,59 | 0,98 | 977,61 | 0,97 | 976,64 | 0,97 | 975,67 | 0,96 | 974,71 | 0,96 |
| 0,15 | 0,16 | 0,17 | 0,18 | 0,19 | 0,20 | 0,22 | 0,23 | 0,24 | 0,26 | 0,27 | 0,29 | |||||||||||||
| 14 | 085,81 | 1,14 | 984,67 | 1,11 | 983,56 | 1,08 | 982,48 | 1,06 | 981,42 | 1,04 | 980,38 | 1,02 | 979,36 | 1,00 | 978,36 | 0,99 | 977,37 | 0,99 | 976,38 | 0,98 | 975,40 | 0,98 | 974,42 | 0,98 |
| 0,15 | 0,16 | 0,17 | 0,18 | 0,19 | 0,20 | 1,22 | 0,24 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,30 | |||||||||||||
| 15 | 985,66 | 1,15 | 984,51 | 1,12 | 983,39 | 1,09 | 982,30 | 1,07 | 981,23 | 1,05 | 980,18 | 1,04 | 979,14 | 1,02 | 978,12 | 1,01 | 977,11 | 1,00 | 976,11 | 0,99 | 975,12 | 1,00 | 974,12 | 1,00 |
| 0,17 | 0,18 | 0,19 | 0,20 | 0,21 | 0,22 | 0,23 | 0,25 | 0,26 | 0,28 | 0,30 | 0,31 | |||||||||||||
| 16 | 985,49 | 1,16 | 984,33 | 1,13 | 983,20 | 1,10 | 982,10 | 1,08 | 981,02 | 1,06 | 979,96 | 1,05 | 978,91 | 1,04 | 977,87 | 1,02 | 976,85 | 1,02 | 975,83 | 1,01 | 974,82 | 1,01 | 973,81 | 1,02 |
| 0,17 | 0,18 | 0,19 | 0,20 | 0,21 | 0,23 | 0,24 | 0,25 | 0,27 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | |||||||||||||
| 17 | 985,32 | 1 17 | 984,15 | 1,14 | 983,01 | 1,11 | 981,90 | 1,09 | 980,81 | 1,08 | 979,73 | 1,06 | 978,67 | 1,05 | 977,62 | 1,04 | 976,58 | 1,04 | 975,54 | 1,02 | 974,52 | 1,02 | 973,50 | 1,04 |
| 0,19 | 0,19 | 0,20 | 0,22 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,31 | 0,33 | |||||||||||||
| 18 | 985,13 | 1,17 | 983,96 | 1,15 | 982,81 | 1,13 | 981,68 | 1,11 | 980,57 | 1,09 | 979,48 | 1,07 | 978,41 | 1,06 | 977,35 | 1,05 | 976,30 | 1,05 | 975,25 | 1,04 | 974,21 | 1,04 | 973,17 | 1,05 |
| 0,20 | 0,21 | 0,22 | 0,23 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,29 | 0,30 | 0,32 | 0,34 | |||||||||||||
| 19 | 984,93 | 1,18 | 983,75 | 1,16 | 982,59 | 1,14 | 981,45 | 1,12 | 980,33 | 1,10 | 979,23 | 1,08 | 978,15 | 1,07 | 977,08 | 1,07 | 976,01 | 1,06 | 974,94 | 1,05 | 973,89 | 1,06 | 972,83 | 1,06 |
| 0,22 | 0,23 | 0,24 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | |||||||||||||
| 20 | 984,71 | 1,19 | 983,52 | 1,17 | 982,35 | 1,14 | 981,21 | 1,13 | 980,08 | 1,11 | 978,97 | 1,10 | 977,87 | 1,08 | 976,79 | 1,08 | 975,71 | 1,08 | 974,63 | 1,07 | 973,56 | 1,08 | 972,48 | 1,08 |
| 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,25 | 0,26 | 0,28 | 0,29 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,35 | 0,36 | |||||||||||||
| 21 | 984,48 | 1,19 | 983,29 | 1,17 | 982,12 | 1,16 | 980,96 | 1,14 | 979,82 | 1,13 | 978,69 | 1,11 | 977,58 | 1,10 | 976,48 | 1,09 | 975,39 | 1,09 | 974,30 | 1,09 | 973,21 | 1,09 | 972,12 | 1,09 |
| 0,23 | 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,35 | 0,36 | |||||||||||||
| 22 | 984,25 | 1,20 | 983,05 | 1,18 | 981,97 | 1,17 | 980,70 | 1,15 | 979,55 | 1,14 | 978,41 | 1,12 | 977,29 | 1,12 | 976,17 | 1,10 | 975,07 | 1,10 | 973,97 | 1,10 | 972,86 | 1,10 | 971,76 | 1,11 |
| 0,24 | 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,37 | |||||||||||||
| 23 | 984,01 | 1,21 | 982,80 | 1,19 | 981,61 | 1,18 | 980,43 | 1,16 | 979,27 | 1,15 | 978,12 | 1,13 | 976,99 | 1,13 | 975,86 | 1,12 | 974,74 | 1,11 | 973,63 | 1,12 | 972,51 | 1,12 | 971,39 | 1,13 |
| 0,25 | 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,35 | 0,36 | 0,38 | |||||||||||||
| 24 | 983,76 | 1,22 | 982,54 | 1,20 | 981,34 | 1,19 | 980,15 | 1,17 | 978,98 | 1,16 | 977,82 | 1,14 | 976,68 | 1,14 | 975,54 | 1,13 | 974,41 | 1,13 | 973,28 | 1,13 | 972,15 | 1,14 | 971,01 | 1,14 |
| 0,26 | 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,35 | 0,36 | 0,38 | 0,39 | |||||||||||||
| 25 | 983,50 | 1,23 | 982,27 | 1,21 | 981,06 | 1,20 | 979,86 | 1,18 | 978,68 | 1,17 | 977,51 | 1,16 | 976,36 | 1,15 | 975,21 | 1,15 | 974,06 | 1,14 | 972,92 | 1,15 | 971,77 | 1,15 | 970,62 | 1,15 |
| 0,27 | 0,28 | 0,29 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | |||||||||||||
| 26 | 983,23 | 1,24 | 981,99 | 1,22 | 980,77 | 1,20 | 979,57 | 1,19 | 978,38 | 1,18 | 977,20 | 1,17 | 976,03 | 1,16 | 974,87 | 1,16 | 973,71 | 1,16 | 972,55 | 1,16 | 971,39 | 1,16 | 970,23 | 1,17 |
| 0,29 | 0,29 | 0,30 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,34 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,41 | |||||||||||||
| 27 | 982,94 | 1,24 | 981,70 | 1,23 | 980,47 | 1,21 | 979,26 | 1,20 | 978,06 | 1,19 | 976,87 | 1,18 | 975,69 | 1,17 | 974,51 | 1,17 | 973,34 | 1,17 | 972,17 | 1,17 | 921,00 | 1,18 | 969,82 | 1,18 |
| 0,29 | 0,30 | 0,30 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,35 | 0,36 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | |||||||||||||
| 28 | 982,65 | 1,25 | 981,40 | 1,23 | 980,17 | 1,22 | 978,95 | 1,21 | 977,74 | 1,20 | 976,54 | 1,20 | 975,34 | 1,19 | 974,15 | 1,19 | 972,96 | 1,18 | 971,78 | 1,18 | 970,60 | 1,19 | 969,41 | 1,20 |
| 0,30 | 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | |||||||||||||
| 29 | 982,35 | 1,26 | 981,09 | 1,24 | 979,85 | 1,23 | 978,62 | 1,22 | 977,40 | 1,21 | 976,19 | 1,21 | 974,98 | 1,20 | 973,78 | 1,20 | 972,58 | 1,19 | 971,39 | 1,19 | 970,20 | 1,21 | 968,99 | 1,21 |
| 0,31 | 0,32 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | |||||||||||||
| 30 | 982,04 | 1,27 | 980,77 | 1,25 | 979,52 | 1,24 | 978,28 | 1,23 | 977,05 | 1,22 | 975,83 | 1,21 | 974,62 | 1,21 | 973,41 | 1,21 | 972,20 | 1,21 | 970,99 | 1,21 | 969,78 | 1,22 | 968,56 | 1,23 |
| 0,32 | 0,32 | 0,33 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | |||||||||||||
| 31 | 981,72 | 1,27 | 980,45 | 1,26 | 979,19 | 1,25 | 977,94 | 1,24 | 976,70 | 1,23 | 975,47 | 1,22 | 974,25 | 1,22 | 973,03 | 1,22 | 971,81 | 1,22 | 970,59 | 1,23 | 969,36 | 1,23 | 968,13 | 1,24 |
| 0,33 | 0,34 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | |||||||||||||
| 32 | 981,39 | 1,28 | 980,11 | 1,26 | 978,85 | 1,26 | 977,59 | 1,25 | 976,34 | 1,24 | 975,10 | 1,23 | 973,87 | 1,23 | 972,64 | 1,23 | 971,41 | 1,24 | 970,17 | 1,24 | 968,93 | 1,25 | 967,68 | 1,26 |
| 0,34 | 0,34 | 0,35 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | |||||||||||||
| 33 | 981,05 | 1,28 | 979,77 | 1,27 | 978,50 | 1,26 | 977,24 | 1,26 | 975,78 | 1,25 | 974,73 | 1,25 | 973,48 | 1,24 | 972,24 | 1,24 | 971,00 | 1,25 | 969,75 | 1,25 | 968,50 | 1,27 | 967,23 | 1,27 |
| 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,45 | |||||||||||||
| 34 | 980,71 | 1,29 | 979,42 | 1,28 | 978,14 | 1,27 | 976,87 | 1,27 | 975,60 | 1,26 | 974,34 | 1,26 | 973,08 | 1,25 | 971,83 | 1,25 | 970,58 | 1,26 | 969,32 | 1,27 | 968,05 | 1,27 | 966,78 | 1,29 |
| 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,43 | 0,44 | 0,45 | 0,47 | |||||||||||||
| 35 | 980,37 | 1,30 | 979,07 | 1,29 | 977,78 | 1,28 | 976,50 | 1,28 | 975,22 | 1,27 | 973,95 | 1,27 | 972,68 | 1,26 | 971,42 | 1,27 | 970,15 | 1,27 | 968,88 | 1,28 | 967,60 | 1,29 | 966,31 | 1,30 |
| 0,36 | 0,37 | 0,37 | 0,38 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,45 | 0,47 | |||||||||||||
| 36 | 980,01 | 1,31 | 978,70 | 1,29 | 977,41 | 1,29 | 976,12 | 1,28 | 974,84 | 1,28 | 973,56 | 1,28 | 972,28 | 1,28 | 971,00 | 1,28 | 969,72 | 1,28 | 968,44 | 1,29 | 967,15 | 1,31 | 965,84 | 1,31 |
| 0,36 | 0,37 | 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,45 | 0,46 | 0,47 | |||||||||||||
| 37 | 979,65 | 1,32 | 978,33 | 1,30 | 977,03 | 1,30 | 975,73 | 1,29 | 974,44 | 1,29 | 973,15 | 1,29 | 971,86 | 1,29 | 970,57 | 1,29 | 969,28 | 1,29 | 967,99 | 1,30 | 966,69 | 1,32 | 965,37 | 1,32 |
| 0,38 | 0,38 | 0,39 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | 0,47 | 0,48 | |||||||||||||
| 38 | 979,27 | 1,32 | 977,95 | 1,31 | 976,64 | 1,30 | 975,34 | 1,30 | 974,04 | 1,30 | 972,74 | 1,30 | 971,44 | 1,30 | 970,14 | 1,30 | 968,84 | 1,31 | 967,53 | 1,31 | 966,22 | 1,33 | 964,89 | 1,34 |
| 0,38 | 0,39 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,49 | |||||||||||||
| 39 | 978,89 | 1,33 | 977,56 | 1,31 | 976,25 | 1,31 | 974,94 | 1,31 | 973,63 | 1,31 | 972,32 | 1,31 | 971,01 | 1,31 | 969,70 | 1,31 | 968,39 | 1,32 | 967,07 | 1,33 | 965,74 | 1,34 | 964,40 | 1,36 |
| 0,39 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,49 | 0,50 | |||||||||||||
| 40 | 978,50 | 1,33 | 977,17 | 1,32 | 975,85 | 1,32 | 974,53 | 1,32 | 973,21 | 1,31 | 971,90 | 1,32 | 970,58 | 1,33 | 969,25 | 1,33 | 967,92 | 1,33 | 966,59 | 1,34 | 965,25 | 1,35 | 963,90 | 1,37 |
| t °C | Алкохол в об.% |
| 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 |
| 0 | 978,26 | 0,70 | 977,56 | 0,70 | 976,86 | 0,69 | 976,17 | 0,70 | 975,47 | 0,72 | 974,75 | 0,72 | 974,03 | 0,74 | 973,29 | 0,77 | 972,52 | 0,80 | 971,72 | 0,83 | 970,89 | 0,87 | 970,02 | 0,90 |
| 0,13 | 0,15 | 0,17 | 0,20 | 0,22 | 0,24 | 0,27 | 0,30 | 0,32 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | |||||||||||||
| 1 | 978,13 | 0,72 | 977,41 | 0,72 | 976,69 | 0,72 | 975,97 | 0,72 | 975,25 | 0,74 | 974,51 | 0,75 | 973,76 | 0,77 | 972,99 | 0,79 | 972,20 | 0,83 | 971,37 | 0,85 | 970,52 | 0,89 | 969,63 | 0,93 |
| 0,14 | 0,17 | 0,19 | 0,21 | 0,24 | 0,26 | 0,29 | 0,31 | 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,41 | |||||||||||||
| 2 | 977,99 | 0,75 | 977,24 | 0,74 | 976,50 | 0,74 | 975,76 | 0,75 | 975,01 | 0,76 | 974,25 | 0,78 | 973,47 | 0,79 | 972,68 | 0,82 | 971,86 | 0,85 | 971,01 | 0,87 | 970,14 | 0,92 | 960,22 | 0,96 |
| 0,16 | 0,18 | 0,20 | 0,23 | 0,25 | 0,27 | 0,29 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | |||||||||||||
| 3 | 977,83 | 0,77 | 977,06 | 0,76 | 976,30 | 0,77 | 975,53 | 0,77 | 974,76 | 0,78 | 973,98 | 0,80 | 973,18 | 0,82 | 972,36 | 0,84 | 971,52 | 0,87 | 970,65 | 0,89 | 969,76 | 094 | 968,82 | 098 |
| 0,16 | 0,18 | 0,21 | 0,23 | 0,25 | 0,28 | 0,30 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,39 | 0,42 | |||||||||||||
| 4 | 977,67 | 0,79 | 976,88 | 0,79 | 976,09 | 0,79 | 975,30 | 0,79 | 974,51 | 0,81 | 973,70 | 0,82 | 972,88 | 0,84 | 972,04 | 0,86 | 971,18 | 0,89 | 970,29 | 0,92 | 969,37 | 0,96 | 968,40 | 1,00 |
| 0,18 | 0,20 | 0,22 | 0,24 | 0,26 | 0,28 | 0,30 | 0,33 | 0,35 | 0,38 | 0,40 | 0,41 | |||||||||||||
| 5 | 977,49 | 0,81 | 976,68 | 0,81 | 975,87 | 0,81 | 975,06 | 0,81 | 974,25 | 0,83 | 973,42 | 0,84 | 972,58 | 0,86 | 971,71 | 0,88 | 970,83 | 0,92 | 969,91 | 0,94 | 968,97 | 0,98 | 967,99 | 1,02 |
| 0,19 | 0,21 | 0,23 | 0,25 | 0,27 | 0,30 | 0,33 | 0,34 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | |||||||||||||
| 6 | 977,30 | 0,83 | 976,47 | 0,83 | 975,64 | 0,83 | 974,81 | 0,84 | 973,97 | 0,85 | 973,12 | 0,87 | 972,25 | 0,88 | 971,37 | 0,91 | 970,46 | 0,94 | 969,52 | 0,96 | 968,56 | 1,00 | 967,56 | 1,04 |
| 0,20 | 0,22 | 0,24 | 0,26 | 0,28 | 0,30 | 0,32 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | |||||||||||||
| 7 | 976,10 | 0,85 | 976,25 | 0,85 | 975,40 | 0,85 | 974,55 | 0,86 | 973,69 | 0,87 | 972,82 | 0,89 | 971,93 | 0,91 | 971,02 | 0,93 | 970,09 | 0,96 | 969,13 | 0,98 | 968,15 | 1,02 | 967,13 | 1,06 |
| 0,21 | 0,23 | 0,25 | 0,27 | 0,29 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,42 | 0,44 | |||||||||||||
| 8 | 976,89 | 0,87 | 976,02 | 0,87 | 975,15 | 0,87 | 974,28 | 0,88 | 973,40 | 0,89 | 972,51 | 0,91 | 971,60 | 0,93 | 970,67 | 0,95 | 969,72 | 0,98 | 968,74 | 1,01 | 967,73 | 1,04 | 966,69 | 1,08 |
| 0,22 | 0,24 | 0,26 | 0,28 | 0,30 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,45 | |||||||||||||
| 9 | 976,67 | 0,89 | 975,78 | 0,89 | 974,89 | 0,89 | 974,00 | 0,90 | 973,10 | 0,91 | 972,19 | 0,93 | 971,26 | 0,95 | 970,31 | 0,98 | 969,33 | 1,00 | 968,33 | 1,03 | 967,30 | 1,06 | 966,24 | 1,09 |
| 0,23 | 0,25 | 0,27 | 0,29 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,45 | |||||||||||||
| 10 | 976,44 | 0,91 | 975,53 | 0,91 | 974,62 | 0,91 | 973,71 | 0,92 | 972,79 | 0,93 | 971,86 | 0,95 | 970,91 | 0,97 | 969,94 | 1,00 | 968,94 | 1,02 | 967,92 | 1,05 | 966,87 | 1,08 | 965,79 | 1,11 |
| 0,25 | 0,27 | 0,28 | 0,30 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | |||||||||||||
| 11 | 976,11 | 0,93 | 975,26 | 0,92 | 974,34 | 0,93 | 973,41 | 0,94 | 972,47 | 0,95 | 971,52 | 1,97 | 970,55 | 0,99 | 969,56 | 1,02 | 968,54 | 1,04 | 967,50 | 1,07 | 966,43 | 1,09 | 965,34 | 1,13 |
| 0,26 | 0,27 | 0,29 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,46 | |||||||||||||
| 12 | 975,91 | 0,94 | 974,99 | 0,94 | 974,05 | 0,95 | 973,10 | 0,96 | 972,14 | 0,97 | 971,17 | 1,99 | 970,18 | 1,01 | 969,17 | 1,03 | 968,14 | 1,06 | 967,08 | 1,09 | 965,99 | 1,11 | 964,88 | 1,15 |
| 0,26 | 0,28 | 0,30 | 0,32 | 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,19 | 0,41 | 0,41 | 0,45 | 0,47 | |||||||||||||
| 13 | 975,67 | 0,96 | 974,71 | 0,96 | 973,75 | 0,97 | 972,78 | 0,98 | 971,80 | 0,99 | 970,81 | 1,01 | 969,80 | 1,02 | 968,78 | 1,05 | 967,73 | 1,08 | 966,65 | 1,11 | 965,54 | 1,13 | 964,41 | 1,17 |
| 0,27 | 0,29 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,47 | |||||||||||||
| 14 | 975,40 | 0,98 | 974,42 | 0,98 | 973,44 | 0,99 | 972,45 | 1,00 | 971,45 | 1,01 | 970,44 | 1,02 | 969,42 | 1,04 | 968,38 | 1,07 | 967,31 | 1,10 | 966,21 | 1,12 | 965,09 | 1,15 | 963,94 | 1,19 |
| 0,28 | 0,30 | 0,32 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,48 | 0,47 | 0,49 | |||||||||||||
| 15 | 975,12 | 1,00 | 974,12 | 1,00 | 973,12 | 1,00 | 972,12 | 1,02 | 971,10 | 1,03 | 970,07 | 1,04 | 969,03 | 1,06 | 967,97 | 1,09 | 966,88 | 1,12 | 965,76 | 1,14 | 964,62 | 1,17 | 963,45 | 1,20 |
| 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,47 | 0,49 | |||||||||||||
| 16 | 974,82 | 1,01 | 973,81 | 1,02 | 972,79 | 1,02 | 971,77 | 1,03 | 970,74 | 1,05 | 969,69 | 1,06 | 968,63 | 1,08 | 967,55 | 1,11 | 966,44 | 1,13 | 965,31 | 1,10 | 964,15 | 1,19 | 962,96 | 1,22 |
| 0,30 | 0,31 | 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,47 | 0,49 | |||||||||||||
| 17 | 974,52 | 1,02 | 973,50 | 1,04 | 972,46 | 1,04 | 971,42 | 1,05 | 970,37 | 1,06 | 969,31 | 1,08 | 968,23 | 1,10 | 967,13 | 1,12 | 966,01 | 1,15 | 964,86 | 1,18 | 963,68 | 1,21 | 962,47 | 1,24 |
| 0,31 | 0,33 | 0,34 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,50 | |||||||||||||
| 18 | 974,21 | 1,04 | 973,17 | 1,05 | 972,12 | 1,06 | 971,06 | 1,07 | 969,99 | 1,08 | 968,91 | 1,10 | 967,81 | 1,11 | 966,70 | 1,14 | 965,56 | 1,17 | 964,39 | 1,19 | 963,20 | 1,23 | 961,97 | 1,26 |
| 0,32 | 0,34 | 0,35 | 0,36 | 0,38 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,46 | 0,47 | 0,49 | 0,50 | |||||||||||||
| 19 | 973,89 | 1,06 | 972,83 | 1,06 | 971,77 | 1,07 | 970,70 | 1,09 | 969,61 | 1,10 | 968,51 | 1,11 | 967,39 | 1,13 | 966,26 | 1,16 | 965,10 | 1,18 | 963,92 | 1,21 | 962,71 | 1,24 | 961,47 | 1,28 |
| 0,33 | 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,40 | 0,41 | 0,42 | 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,50 | 0,52 | |||||||||||||
| 20 | 973,56 | 1,08 | 972,48 | 1,08 | 971,40 | 1,09 | 970,31 | 1,10 | 969,21 | 1,11 | 968,10 | 1,13 | 966,97 | 1,14 | 965,81 | 1,17 | 964,64 | 1,20 | 963,44 | 1,23 | 962,21 | 1,26 | 960,95 | 1,29 |
| 0,35 | 0,36 | 0,37 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,47 | 0,49 | 0,50 | 0,52 | |||||||||||||
| 21 | 973,21 | 1,09 | 972,12 | 1,09 | 971,03 | 1,11 | 969,92 | 1,11 | 968,81 | 1,13 | 967,68 | 1,15 | 966,53 | 1,17 | 965,36 | 1,19 | 964,17 | 1,22 | 962,95 | 1,24 | 961,71 | 1,28 | 960,43 | 1,31 |
| 0,35 | 0,36 | 0,38 | 0,39 | 0,41 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | 0,48 | 0,49 | 0,51 | 0,52 | |||||||||||||
| 22 | 972,86 | 1,10 | 971,76 | 1,11 | 970,65 | 1,12 | 969,53 | 1,13 | 968,40 | 1,15 | 967,25 | 1,16 | 966,09 | 1,19 | 964,90 | 1,21 | 963,69 | 1,23 | 962,46 | 1,26 | 961,20 | 1,29 | 959,91 | 1,32 |
| 0,35 | 0,37 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,50 | 0,52 | 0,53 | |||||||||||||
| 23 | 972,51 | 1,12 | 971,39 | 1,13 | 970,26 | 1,13 | 969,13 | 1,15 | 967,98 | 1,16 | 966,82 | 1,18 | 965,64 | 1,20 | 964,44 | 1,23 | 963,21 | 1,25 | 961,90 | 1,28 | 960,68 | 1,30 | 959,38 | 1,33 |
| 0,36 | 0,38 | 0,39 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,46 | 0,48 | 049 | 0,51 | 0,53 | 0,54 | |||||||||||||
| 24 | 972,15 | 1,14 | 971,01 | 1,14 | 969,87 | 1,15 | 968,72 | 1,16 | 967,56 | 1,18 | 966,38 | 1,20 | 965,18 | 1,22 | 963,96 | 1,24 | 962,72 | 1,27 | 961,45 | 1,29 | 960,16 | 1,32 | 958,84 | 1,34 |
| 0,38 | 0,39 | 0,40 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,50 | 0,51 | 0,53 | 0,54 | |||||||||||||
| 25 | 971,77 | 1,15 | 970,62 | 1,15 | 969,47 | 1,17 | 968,30 | 1,18 | 967,12 | 1,19 | 965,93 | 1,21 | 964,72 | 1,24 | 963,48 | 1,26 | 962,22 | 1,28 | 960,94 | 1,31 | 959,63 | 1,33 | 958,30 | 1,36 |
| 0,38 | 0,39 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,46 | 0,48 | 0,49 | 0,50 | 0,52 | 0,53 | 0,55 | |||||||||||||
| 26 | 971,39 | 1,16 | 970,23 | 1,17 | 969,06 | 1,18 | 967,88 | 1,20 | 966,68 | 1,21 | 965,47 | 1,23 | 964,24 | 1,25 | 962,99 | 1,27 | 961,72 | 1,30 | 960,42 | 1,32 | 959,10 | 1,35 | 957,75 | 1,38 |
| 0,39 | 0,41 | 0,42 | 0,44 | 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,50 | 051 | 0,52 | 0,53 | 0,55 | |||||||||||||
| 27 | 971,00 | 1,18 | 969,82 | 1,18 | 968,64 | 1,20 | 967,44 | 1,21 | 966,23 | 1,22 | 965,01 | 1,25 | 963,76 | 1,27 | 962,49 | 1,28 | 961,21 | 1,31 | 959,90 | 1,33 | 958,57 | 1,37 | 957,20 | 1,40 |
| 0,40 | 0,41 | 0,43 | 0,44 | 0,46 | 0,48 | 0,49 | 0,50 | 052 | 0,53 | 0,55 | 0,56 | |||||||||||||
| 28 | 970,60 | 1,19 | 969,41 | 1,20 | 968,21 | 1,21 | 967,00 | 1,23 | 965,77 | 1,24 | 964,53 | 1,26 | 963,27 | 1,28 | 961,99 | 1,30 | 960,69 | 1,32 | 959,37 | 1,35 | 958,02 | 1,38 | 956,64 | 1,41 |
| 0,40 | 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,49 | 0,50 | 0,52 | 0,54 | 0,55 | 0,56 | |||||||||||||
| 29 | 970,20 | 1,21 | 968,99 | 1,21 | 967,78 | 1,23 | 966,55 | 1,24 | 965,31 | 1,26 | 964,05 | 1,27 | 962,78 | 1,29 | 961,49 | 1,32 | 960,17 | 1,34 | 958,83 | 1,36 | 957,47 | 1,39 | 956,08 | 1,43 |
| 0,42 | 0,43 | 0,45 | 0,46 | 0,47 | 0,48 | 0,50 | 0,52 | 0,53 | 0,54 | 0,56 | 0,58 | |||||||||||||
| 30 | 969,78 | 1,22 | 968,56 | 1,23 | 967,33 | 1,24 | 966,09 | 1,25 | 964,84 | 1,27 | 963,57 | 1,29 | 962,28 | 1,31 | 960,97 | 1,33 | 959,64 | 1,35 | 958,29 | 1,38 | 956,91 | 1,41 | 955,50 | 1,44 |
| 0,42 | 0,43 | 0,44 | 0,45 | 0,47 | 0,49 | 0,51 | 0,52 | 0,53 | 0,55 | 0,56 | 0,58 | |||||||||||||
| 31 | 969,36 | 1,23 | 968,13 | 1,24 | 966,89 | 1,25 | 965,64 | 1,27 | 964,37 | 1,29 | 963,08 | 1,31 | 961,77 | 1,32 | 960,45 | 1,34 | 959,11 | 1,37 | 957,74 | 1,39 | 956,35 | 1,43 | 954,92 | 1,45 |
| 0,43 | 0,45 | 0,46 | 0,48 | 0,49 | 0,50 | 0,51 | 0,52 | 0,54 | 0,56 | 0,57 | 0,58 | |||||||||||||
| 32 | 968,93 | 1,25 | 967,68 | 1,25 | 966,43 | 1,27 | 965,16 | 1,28 | 963,88 | 1,30 | 962,58 | 1,32 | 961,26 | 1,33 | 959,93 | 136 | 958,57 | 1,39 | 957,18 | 1,40 | 955,78 | 1,44 | 954,34 | 1,47 |
| 0,43 | 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,50 | 0,51 | 0,52 | 0,54 | 0,55 | 0,56 | 0,58 | 0,59 | |||||||||||||
| 33 | 968,50 | 1,27 | 967,25 | 1,27 | 965,96 | 1,28 | 964,68 | 1,30 | 963,38 | 1,31 | 962,07 | 1,33 | 960,74 | 1,35 | 959,39 | 1,37 | 958,02 | 1,40 | 956,62 | 1,42 | 955,20 | 1,45 | 953,75 | 1,48 |
| 0,45 | 0,46 | 0,47 | 049 | 0,50 | 0,51 | 0,52 | 0,54 | 0,55 | 0,56 | 0,58 | 0,60 | |||||||||||||
| 34 | 968,05 | 1,27 | 966,78 | 1,29 | 965,49 | 1,30 | 964,19 | 1,31 | 962,88 | 1,32 | 961,56 | 1,34 | 960,22 | 1,37 | 958,85 | 1,38 | 957,47 | 1,41 | 956,06 | 1,44 | 954,62 | 1,47 | 953,15 | 1,49 |
| 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,49 | 0,50 | 0,52 | 0,54 | 0,55 | 1,57 | 0,58 | 0,59 | 0,60 | |||||||||||||
| 35 | 967,60 | 1,29 | 996,31 | 1,30 | 965,01 | 1,31 | 963,70 | 1,32 | 962,38 | 1,34 | 961,04 | 1,36 | 959,68 | 1,38 | 958,30 | 1,40 | 956,90 | 1,42 | 955,48 | 1,45 | 954,03 | 1,48 | 952,55 | 1,50 |
| 0,45 | 0,47 | 0,48 | 0,49 | 0,51 | 0,53 | 0,54 | 0,55 | 0,57 | 0,59 | 0,60 | 0,61 | |||||||||||||
| 36 | 967,15 | 1,31 | 965,84 | 1,31 | 964,53 | 1,32 | 963,21 | 1,34 | 961,87 | 1,36 | 960,51 | 1,37 | 959,14 | 1,39 | 957,75 | 1,42 | 956,33 | 1,44 | 954,89 | 1,46 | 953,43 | 1,49 | 951,94 | 1,51 |
| 0,46 | 0,47 | 0,48 | 0,50 | 0,52 | 0,53 | 0,55 | 0,56 | 0,57 | 0,58 | 0,60 | 0,61 | |||||||||||||
| 37 | 966,69 | 1,32 | 965,37 | 1,32 | 964,05 | 1,34 | 962,71 | 1,36 | 961,35 | 1,37 | 959,98 | 1,39 | 958,59 | 1,40 | 957,19 | 1,43 | 955,76 | 1,45 | 954,31 | 1,48 | 952,83 | 1,50 | 951,33 | 1,52 |
| 0,47 | 0,48 | 0,50 | 0,51 | 0,52 | 0,54 | 0,55 | 0,57 | 0,58 | 0,59 | 0,60 | 0,61 | |||||||||||||
| 38 | 966,22 | 1,33 | 964,89 | 1,34 | 963,55 | 1,35 | 962,20 | 1,37 | 960,83 | 1,39 | 959,44 | 1,40 | 958,04 | 1,42 | 956,62 | 1,44 | 955,18 | 1,46 | 953,72 | 1,49 | 952,23 | 1,51 | 950,72 | 1,54 |
| 0,48 | 0,49 | 0,51 | 0,52 | 0,53 | 0,54 | 0,56 | 0,57 | 0,58 | 0,60 | 0,61 | 0,62 | |||||||||||||
| 39 | 965,74 | 1,34 | 964,40 | 1,36 | 963,04 | 1,36 | 961,68 | 1,38 | 960,30 | 1,40 | 958,90 | 1,42 | 957,48 | 1,43 | 956,05 | 1,45 | 954,60 | 1,48 | 953,12 | 1,50 | 951,62 | 1,52 | 950,10 | 1,55 |
| 0,49 | 0,50 | 0,51 | 0,53 | 0,54 | 0,55 | 0,56 | 0,58 | 0,60 | 0,61 | 0,62 | 0,64 | |||||||||||||
| 40 | 965,25 | 1,35 | 963,90 | 1,37 | 962,53 | 1,38 | 961,15 | 1,39 | 959,76 | 1,41 | 958,35 | 1,43 | 956,92 | 1,45 | 955,47 | 1,47 | 954,00 | 1,49 | 952,51 | 1,51 | 951,00 | 1,54 | 949,49 | 1,56 |
Таблица IV
Таблица за връзката между индекса на рефракция при 20 градуса C и алкохолното съдържание при 20 градуса C на чисти водоалкохолни смеси и дестилати
4. Определяне на общия сух екстракт. Общо сухо вещество
1. Определение
Общият сух екстракт или общото сухо вещество включва цялото количество вещества, които са нелетливи при определени физически условия. Тези физически условия трябва да бъдат такива, че веществата, които формират екстракта, да са подложени на възможно най-малки изменения по време на провеждане на теста.
Беззахарният екстракт е разликата между общия сух екстракт и общото количество захар.
Редуцираният екстракт е разликата между общия сух екстракт и общото количество захари, надхвърлящи един грам на литър, калиев сулфат над един грам на литър, евентуално наличие на манитол и всички други химически вещества, които евентуално са били добавени към виното.
Остатъчният екстракт е разликата между беззахарния екстракт и измерената киселинност, изразена като винена киселина.
Екстрактът се изразява в грамове на литър с точност до 0,5 g.
2. Принцип на метода
Опростен метод-измерване чрез денсиметър.
Общият сух екстракт се изчислява по непряк начин от относителното тегло на мъстта, а при виното-от относителното тегло на обезалкохоленото вино при определяне на алкохола чрез дестилация.
Сухият екстракт се изразява чрез количеството захароза, която, когато бъде разтворена в eдин литър вода, образува разтвор със същото относително тегло както мъстта или безалкохолното вино. Това количество е показано на таблицата.
3. Метод на изчисление
Относителното тегло d на обезалкохоленото вино се изчислява със следната формула:
dr = dv-da +1,000 , където:
dv e относителното тегло на виното при 20 °C (коригирано по отношение на летливата киселинност)(1);
da-относителното тегло при 20 °C на смес от вода и алкохол със същата алкохолна концентрация като виното;
dr-може да бъде изчислено и от плътностите при 20 °C, v на виното и a на сместа от вода и алкохол със същата алкохолна концентрация с помощта на формулата:
dr = 1,0018(v-a) + 1,000,
където коефициентът 1,0018 се приема приблизително равен на единица, когато v е под 1,05, което се случва най-често.
4. Изразяване на резултатите
Таблицата следва да се използва за изчисляване на общия сух екстракт в g/l от относителното тегло dr на безалкохолното вино или от относителното тегло dна мъстта.
Общият сух екстракт се изразява в грамове на литър с точност до първия десетичен знак.
(1)-Преди да се изчисли относителната плътност (или плътността) на виното, трябва да се коригира влиянието на летливата киселинност по формулата:
dv = d-0,0000086 a или v = 20-0,0000086 a,където:
a е количеството на летливите киселини в милиграми на литър.
Таблица за изчисление на общия сух екстракт в грамове на литър
| Относителна | Третият десетичен знак на относителната |
| плътност с | плътност |
| точност до | |
| втория де- | |
| сетичен знак |
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 |
| Грамове екстракт за литър |
| 1,00 | 0 | 2,6 | 5,1 | 7,7 | 10,3 | 12,9 | 15,4 | 18,0 | 20,6 | 23,2 |
| 1,01 | 25,8 | 28,4 | 31,0 | 33,6 | 36,2 | 38,8 | 41,3 | 43,9 | 46,5 | 49,1 |
| 1,02 | 51,7 | 54,3 | 56,9 | 59,5 | 62,1 | 64,7 | 67,3 | 69,9 | 72,5 | 75,1 |
| 85,5 | 77,7 | 80,3 | 82,9 | 88,1 | 90,7 | 93,3 | 95,9 | 98,5 | 101,1 | |
| 1,04 | 103,7 | 106,3 | 109,0 | 111,6 | 114,2 | 116,8 | 119,4 | 122,0 | 124,6 | 127,2 |
| 1,05 | 129,8 | 132,4 | 135,0 | 137,6 | 140,3 | 142,9 | 145,5 | 148,1 | 150,7 | 153,3 |
| 1,06 | 155,9 | 158,6 | 161,2 | 163,8 | 166,4 | 169,0 | 171,6 | 174,3 | 176,9 | 179,5 |
| 1,07 | 182,1 | 184,8 | 187,4 | 190,0 | 192,6 | 195,2 | 197,8 | 200,5 | 203,1 | 205,8 |
| 1,08 | 208,4 | 211,0 | 213,6 | 216,2 | 218,9 | 221,5 | 224,1 | 226,8 | 229,4 | 232,0 |
| 1,09 | 234,7 | 237,3 | 239,9 | 242,5 | 245,2 | 247,8 | 250,4 | 253,1 | 255,7 | 258,4 |
| 1,10 | 261,0 | 263,6 | 266,3 | 268,9 | 271,5 | 274,2 | 276,8 | 279,5 | 282,1 | 284,8 |
| 1,11 | 287,4 | 290,0 | 292,7 | 295,3 | 298,0 | 300,6 | 303,3 | 305,9 | 308,6 | 311,2 |
| 1,12 | 313,9 | 316,5 | 319,2 | 321,8 | 324,5 | 327,1 | 329,8 | 332,4 | 335,1 | 337,8 |
| 1,13 | 340,4 | 343,0 | 345,7 | 348,3 | 351,0 | 353,7 | 356,3 | 359,0 | 361,6 | 364,3 |
| 1,14 | 366,9 | 369,6 | 372,3 | 375,0 | 377,6 | 380,3 | 382,9 | 385,6 | 388,3 | 390,9 |
| 1,15 | 393,6 | 396,2 | 398,9 | 401,6 | 404,3 | 406,9 | 409,6 | 412,3 | 415,0 | 417,6 |
| 1,16 | 420,3 | 423,0 | 425,7 | 428,3 | 431,0 | 433,7 | 436,4 | 439,0 | 441,7 | 444,4 |
| 1,7 | 447,1 | 449,8 | 452,4 | 455,2 | 457,8 | 460,5 | 463,2 | 465,9 | 468,6 | 471,3 |
| 1,18 | 473,9 | 476,6 | 479,3 | 482,0 | 484,7 | 487,4 | 490,1 | 492,8 | 495,5 | 498,2 |
| 1,19 | 500,9 | 503,5 | 506,2 | 508,9 | 511,6 | 514,3 | 517,0 | 519,7 | 522,4 | 525,1 |
| 1,20 | 527,8 | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| Допълнителна таблица |
| Четвъртият | Грамове | Четвъртият | Грамове | Четвъртият | Грамове |
| десетичен | екстракт за | десетичен знак | екстракт | десетичен знак | екстракт |
| знак на | литър | на | за литър | на | за литър |
| относителната | относителната | относителната | |||
| плътност | плътност | плътност |
| 1 | 0,3 | 4 | 1,0 | 7 | 1,8 |
| 2 | 0,5 | 5 | 1,3 | 8 | 2,1 |
| 3 | 0,8 | 6 | 1,6 | 9 | 2,3 |
5. Определяне на редуциращите захари
1. Определение
Редуциращите захари включват всички захари с кетонна или алдехидна функция и се определят чрез тяхното редуциращо действие върху алкален разтвор на медна сол (купро).
2. Принцип на методите
2.1. Дефекация (утаяване)
2.1.1. Сравнителен метод-след неутрализацията и отстраняването на алкохола виното преминава през йонообменна колона, в която неговите аниони се заменят с ацетатни йони, след което следва утаяване с неутрален оловен ацетат.
2.1.2. Обикновени методи-виното се третира с един от следните реактиви:
2.1.2.1. неутрален оловен ацетат;
2.1.2.2. цинков II хексацианоферат.
2.2. Определяне
2.2.1. Единствен метод-утаеното вино или мъст влиза в реакция с определено количество разтвор на алкална медна сол, след което излишъкът от медни йони се определя йодометрично.
3. Утаяване
Захарното съдържание на течността, което следва да бъде определено, да е в интервала между 0,5 и 5 g/l.
Сухите вина да не се разреждат по време на утаяването; сладките вина следва да бъдат разреждани по време на утаяването, за да се приведе нивото на захарта в границите, предписани в таблицата:
| Описание | Съдържание | Плътност | Разреждане |
| на захар, в | (%) | ||
| грамове на | |||
| литър (g/l) | |||
| Мъст и | 125 | 1,038 | 1 |
| Мистели | |||
| Подсилени | от 25 до | от 1,005 | 4 |
| Или непод- | 125 | до 1,038 | |
| Силени вина | |||
| Полусладки | от 5 до 25 | от 0,997 | 20 |
| Вина | до 1,005 | ||
| Сухи вина | 5 | 0,997 | Без разреж- |
| дане |
3.1. Сравнителен метод
3.1.1. Реактиви
3.1.1.1. Разтвор на 1 M солна киселина (HCl);
3.1.1.2. Разтвор на 1 M натриев хидроксид (NaOH);
3.1.1.3. Разтвор на 4 M оцетна киселина (CH3COOH);
3.1.1.4. Разтвор на 2 M натриев хидроксид (NaOH);
3.1.1.5. Йонообменна cмола [Dowex 3 (20-50 mech) или еквивалентна на нея cмола].
Приготвяне на колоната със cмолата за анионен обмен-на дъното на бюретата се поставя малък пълнеж от стъклена вата и 15 ml анионобменна cмола (3.1.1.5).
Преди да бъде използвана, смолата се подлага на два пълни регенерационни цикъла чрез последователно преминаване през нея на разтвори на 1 M солна киселина (3.1.1.1) и натриев хидроксид (3.1.1.2). След изплакване с 50 ml дестилирана вода cмолата се прехвърля в цилиндричен съд за преливане, добавят се 50 ml от разтвора на 4 M оцетна киселина (3.1.1.3) и се разбърква в продължение на 5 min. Отново се напълва бюретата със cмола и през колоната се налива 100 ml от разтвора на 4 M оцетната киселина (3.1.1.3). (За предпочитане е да има определено количество от тази cмола, съхранявано в бутилка, която е напълнена с разтвор на 4 M оцетна киселина.) Колоната се промива с дестилирана вода, докато изтичащата течност не стане неутрална.
Регенериране на cмолата-смолата се промива със 150 ml разтвор на 2 M натриев хидроксид за елиминиране на киселините и голяма част от багрилната материя на смолата. Промива се със 100 ml вода и със 100 ml разтвор на 4 M оцетната киселина. Колоната се промива, докато промивната вода не стане неутрална.
3.1.1.6. Разтвор на неутрален оловен ацетат (приблизително наситен)
неутрален оловен ацетат [Pb(CH3COO)2 3 H2O]-250 g;
много гореща вода-до 500 ml.
Разбърква се до разтваряне.
3.1.1.7. Калциев карбонат (CaCO3).
3.1.2. Начин на работа
3.1.2.1. Сухи вина
Поставят се 50 ml вино в чаша с диаметър около 10 до 12 cm заедно с 1/2 (n-0,5) ml разтвор 1 M натриев хидроксид (3.1.1.2) (n е обемът на разтвора 0,1 M натриев хидроксид, използван за определяне на общата киселинност в 10 ml вино) и се изпарява над баня от вряща вода, в поток от горещ въздух, докато течността не намалее до 20 ml.
Тази течност се прокарва през колона с анионобменната cмола в ацетатна форма (3.1.1.5) със скорост 3 ml на всеки две минути. Събира се преминалата течност през колоната в 100-милилитрова мерителна колба. Съдът и колоната шестократно се измиват, като всеки път се използва 10 ml дестилирана вода. Прибавят се при разбъркване 2,5 ml наситен разтвор на оловен ацетат (3.1.1.6) и 0,5 g калциев карбонат (3.1.1.7), колоната се разклаща няколко пъти и се оставя да стои в продължение на минимум 15 min. Допълва се вода до нивото на маркировката. Филтрира се.
Един милилитър от този филтрат съответства на 0,5 ml вино.
3.1.2.2. Мъст, мистели, сладки и полусладки вина:
Указания за разреждане:
• Мъст и мистели-пробата за анализ се разрежда 10 % и се отмерват 10 ml от нея.
• Сладки вина, подсилени или неподсилени, с плътност между 1,005 и 1,038-пробата за анализ се разрежда 20 % и се отмерват 20 ml от нея.
• Полусладки вина с плътност при 20 °C между 0,997 и 1,005. Отмерват се 20 ml от неразреденото вино. Оставя се посоченият обем вино или мъст да тече през колона с анионобменна смола в ацетатна форма със скорост 3 ml на всеки 2 min. Преминалата течност се събира в 100-милилитрова мерителна колба и колоната се изплаква с вода, докато се получат около 90 ml течност. Прибавя се 0,5 g калциев карбонат и един милилитър наситен разтвор на оловен ацетат. Разбъркват се и се оставят да стоят в продължение на 15 min, като се разбърква от време на време. Допълва се вода до нивото на маркировката. Филтрира се.
Случаи:
• Един милилитър филтрат съответства на 0,01 ml мъст или мистел.
• Един милилитър филтрат съответства на 0,04 ml сладко вино.
• Един милилитър филтрат съответства на 0,20 ml полусладко вино.
3.2. Обикновени методи
3.2.1. Избистряне с неутрален оловен ацетат
3.2.1.1. Реактиви
Разтвор на неутрален оловен ацетат (приблизително наситен) (вж. 3.1.1.6);
Калциев карбонат.
3.2.1.2. Начин на работа
3.2.1.2.1. Сухи вина
Отмерват се 50 ml вино в 100-милилитрова мерителна колба; добавя се 1/2 (n 0,5) ml разтвор на 1 M натриев хидроксид (3.1.1.2) (n е обемът на разтвора на 0,1 M натриев хидроксид, използван за определяне на общата киселинност в 10 ml вино). Прибавят се при разбъркване 2,5 ml наситен разтвор на оловен ацетат (3.1.1.6) и 0,5 g калциев карбонат (3.1.1.7). Разклаща се няколко пъти и се оставя да стои в продължение на минимум 15 min. Допълва се вода до нивото на маркировката. Филтрира се.
Един милилитър филтрат съответства на 0,5 ml вино.
3.2.1.2.2. Мъст, мистел, сладки и полусладки вина:
В 100-милилитрова мерителна колба се поставят следните обеми вино (или мъст или мистел), като посочените по-долу разреждания са ориентировъчни:
• Мъст и мистели-пробата за анализ се разрежда 10 % и се отмерват 10 ml от нея.
• Сладки вина, подсилени или неподсилени, с плътност между 1,005 и 1,038-пробата за анализ се разрежда 20 % и се отмерват 20 ml от нея.
• Полусладки вина с плътност между 0,997 и 1,005-вземат се 20 ml от неразреденото вино. Добавят се 0,5 g калциев карбонат, около 60 ml вода и 0,5 или 1, или 2 ml наситен разтвор на оловен ацетат. Разбъркват се. Оставят се да стоят в продължение на 15 min, като от време на време се разбъркват. Допълва се вода до нивото на марката. Филтрира се.
Случаи:
• Един милилитър филтрат съответства на 0,01 ml мъст или мистел.
• Един милилитър филтрат съответства на 0,04 ml сладко вино.
• Един милилитър филтрат съответства на 0,20 ml полусладко вино.
3.2.2. Утаяване с цинков II-хексацианоферат
Този процес на избистряне се използва само при бели вина, леко оцветени сладки вина и мъст.
3.2.2.1. Реактиви
3.2.2.1.1. Разтвор I, калиев II хексацианоферат:
калиев II хексацианоферат [K4Fe(CN)6 3 H2O] - 150 g;
вода - до 1000 ml.
3.2.2.1.2. Разтвор II, цинков сулфат:
цинков сулфат (Zn SO4 7H2O) - 300 g;
вода - до 1000 ml.
3.2.2.2. Начин на работа
В 100-милилитрова мерителна колба се отмерват следните обеми вино (или мъст или мистел), като посочените разреждания са ориентировъчни:
• Мъст и мистели - пробата за анализ се разрежда 10 % и се отмерват 10 ml от нея.
• Сладки вина, подсилени или неподсилени, с плътност между 1,005 и 1,038 - пробата за анализ се разрежда 20 % и се отмерват 20 ml от нея.
• Полусладки вина с плътност между 0,997 и 1,005 - вземат се 20 ml от неразреденото вино.
• Сухи вина - вземат се 50 ml от неразреденото вино. Добавят се 5 ml от разтвор I, калиев II хексацианоферат (3.2.2.1.1) и 5 ml от разтвор II, цинков сулфат (3.2.2.1.2). Разбърква се и се долива с вода до маркировката. Изчаква се 10 минути. Филтрира се.
Случаи:
• Един милилитър филтрат съответства на 0,01 ml мъст или мистел.
• Един милилитър филтрат съответства на 0,04 ml сладко вино.
• Един милилитър филтрат съответства на 0,20 ml полусладко вино.
• Един милилитър филтрат съответства на 0,50 ml сухо вино.
4. Определяне на захарите
4.1. Реактиви
4.1.1. Алкален разтвор на медна сол:
меден сулфат, чист (CuSO4 5H2O) - 25 g;
лимонена киселина (C6H8O7 H2O) - 50 g;
кристален натриев карбонат (Na2CO3 10H2O) - 388 g;
вода - до 1000 ml.
Медният сулфат се разтваря в 100 ml вода, лимонената киселина - в 300 ml вода, а натриевият карбонат - в 300-400 ml гореща вода. Разбъркват се разтворите на лимонената киселина и на натриевия карбонат. Добавя се разтворът на медния сулфат и се довежда до един литър.
4.1.2. 30 % разтвор на калиев йодид:
калиев йодид (KI) - 30 g;
вода - до 100 ml.
Съхранява се в бутилка от цветно стъкло.
4.1.3. 25 % сярна киселина:
концентрирана сярна киселина (H2SO4) 20 =1,84 g/ml - 25 g;
вода - до 100 ml.
Киселината се прибавя бавно към водата, охлажда се и се довежда до 100 ml.
4.1.4. 5 g/l разтвор на нишесте - 5 g нишесте се разбърква в около 500 ml вода. Нагрява се до кипване, като постоянно се разбърква, след което се оставя да ври в продължение на 10 min. Добавят се 200 g натриев хлорид (NaCl). Оставя се да се охлади, след което се добавя вода, докато се получи един литър.
- натриев тиосулфат, 0,1 M разтвор;
- разтвор на инвертна захар, 5 g/l, който следва да се използва за проверка на метода за определяне:
В 200-милилитрова мерителна колба се поставят:
чиста суха захароза (C12H22O11) - 4,75 g;
вода, приблизително - 100 ml;
концентрирана солна киселина (HCl) 20=1,16-1,19g/ml - 5 ml.
Колбата се нагрява във водна баня, поддържана при 60 градуса C, докато температурата на разтвора достигне 50 градуса C; след това в продължение на 15 min се оставят колбата и разтворът при температура 50 градуса C. Колбата се оставя да се охлади по естествен начин в продължение на 30 min, след което се потапя в студена водна баня. Разтворът се прелива в еднолитрова мерителна колба и се допълва до един литър. Този разтвор може да се съхрани в продължение на един месец. В момента на употреба се неутрализира пробата за анализ (този разтвор е приблизително 0,06 M) с разтвор на натриев хидроксид.
4.2. Начин на работа
В 300-милилитрова йодна колба се прави смес от 25 ml алкален разтвор на медна сол, 15 ml вода и 10 ml от избистрения разтвор. Този обем захарен разтвор не трябва да съдържа повече от 60 mg инвертна захар. Добавят се няколко малки парчета пемза. Към колбата се прикрепя обратен хладник и в рамките на 2 min се нагрява сместа до кипене. Оставя се сместа да ври точно 10 min.
Колбата веднага се охлажда в студена течаща вода. След като се охлади изцяло, се добавят 10 ml 30 % разтвор на калиев йодид (4.1.2), 25 ml 25 % сярна киселина (4.1.3) и 2 ml разтвор на нишесте (4.1.4). Титрува се с разтвор на 0,1 M натриев тиосулфат (4.1.5) - n ml.
Освен това се прави и титруване без наличие на захарен разтвор-10 ml захарен разтвор се заменя с 10 ml дестилирана вода - n' ml натриев тиосулфат.
4.3. Изразяване на резултатите
4.3.1. Изчисления
Съдържащото се в пробата количество захар, изразена като инвертна захар, се получава от таблицата като функция на използваното количество натриев тиосулфат - (n'-n) в милилитри.
Съдържанието на захар във виното се изразява в грамове инвертна захар на литър, с точност до първия десетичен знак, като се взема предвид разреждането по време на избистрянето, както и обема на пробата за анализ.
4.3.2. Повторяемост
r = 0,015 хi
хi e концентрацията на инвертната захар в грамове на литър на проба
4.3.3. Възпроизводимост
R = 0,058 хi
хi e концентрацията на инвертната захар в грамове на литър на проба
Таблица за изчисляване на редуциращите захари, в милиграми, в зависимост от изразходваното количество 0,1 М натриев тиосулфат: (n'-n) в ml е количеството на редуциращите захари в mg
| Na2S2O3 | Редуци- | Разлика | Na2S2O3, | Редуци- | Разлика |
| (ml 0,1 M) | ращи | (ml 0,1 M) | ращи | ||
| захари | захари | ||||
| (в mg) | (в mg) | ||||
| 1 | 2,4 | 2, 4 | 13 | 33, 0 | 2, 7 |
| 2 | 4,8 | 2, 4 | 14 | 35, 7 | 2, 8 |
| 3 | 7, 2 | 2, 5 | 15 | 38, 5 | 2, 8 |
| 4 | 9, 7 | 2, 5 | 16 | 41, 3 | 2, 9 |
| 5 | 12, 2 | 2, 5 | 17 | 44, 2 | 2, 9 |
| 6 | 14, 7 | 2, 6 | 18 | 47, 2 | 2, 9 |
| 7 | 17, 2 | 2, 6 | 19 | 50, 0 | 3, 0 |
| 8 | 19, 8 | 2, 6 | 20 | 53, 0 | 3, 0 |
| 9 | 22, 4 | 2, 6 | 21 | 56, 0 | 3, 1 |
| 10 | 25,0 | 2, 6 | 22 | 59, 1 | 3, 1 |
| 11 | 27, 6 | 2, 7 | 23 | 62, 2 | |
| 12 | 30, 3 | 2, 7 |
6. Определяне на захароза
1. Принцип на методите
I. Метод за качествен анализ чрез тънкослойна хроматография-захарозата се отделя от останалите захари чрез тънкослойна хроматография върху плака, покрита с целулоза. Проявителят е карбамид-солна киселина в сушилня при 105 °C.
II. Метод за анализ и определяне чрез високоефективна течна хроматография-захарозата се изолира върху силициева алкиламинна колона и се детектира чрез рефрактометрия. Количественото определяне се извършва по метода на външния стандарт.
Забележка. Проверка на резултатите от анализа на мъст или вино може да се направи и по метода, основаващ се на деутериен ядрено-магнитен резонанс (ЯМР), който е описан във връзка с определянето на обогатителните добавки на мъстта, ректифицираната концентрирана мъст и вината.
За анализ и определяне на захароза може да се използва и газова хроматография, както е описано в метода ("42. Специфичен анализ на концентрирана и ректифицирана гроздова мъст" буква "е"-мезо-инозитол, ксило-инозитол и захароза).
2. Качествен анализ с тъкослойна хроматография
2.1. Оборудване
2.1.1. Хроматографски плаки, покрити с целулозен прах с избрана дебелина (20 20 cm, напр. MN300);
2.1.2. Хроматографска вана;
2.1.3. Микропипета;
2.1.4. Сушилня с терморегулиране до 105 градуса C ± 2 градуса C.
2.2. Реактиви
2.2.1. Обезцветяващ въглен;
2.2.2. Подвижна фаза: дихлорметан - ледена оцетна киселина (20 = 1,05 g/ml) - етилов алкохол - метилов алкохол - вода (50:25:9:6:10);
2.2.3. Проявител:
карбамид - 5 g;
солна киселина 2 M - 20 ml;
етилов алкохол - 100 ml.
2.2.4. Стандартен разтвор:
глюкоза - 35 g;
фруктоза - 35 g;
захароза - 0,5 g;
дестилирана вода - 1000 ml.
2.3. Процедура
2.3.1.Приготвяне на пробата
Когато мъстта или виното са силно оцветени, те се обезцветяват чрез обработка с активен въглен.
В случай с ректифицирана концентрирана мъст се използва разтвор на захар с концентрация 25 % (m/m) (25 °Brix), приготвен по начина, описан в метода " 24.Определяне на pH" на вино и мъст, т. 4.1.2, и се разрежда с вода до една четвърт от неговата концентрация-от обем 25 ml до 100 ml в мерителна колба.
2.3.2. Получаване на хроматограма
На стартовата линия на разстояние 2,5 mm от долния ръб на плаката се поставят - 10 l от пробата за анализ и 10 l от стандартния образец.
Поставя се плаката в хроматографската вана, наситена с пари на подвижната фаза. Оставя се подвижната фаза да достигне в границите на един сантиметър от горния край на плаката. Изважда се плаката и се изсушава в топла въздушна струя. Операцията се повтаря още два пъти, като плаката всеки път трябва да се изсушава. Плаката се напръсква равномерно с 15 ml проявител и се поставя в сушилня при 105 градуса C за около 5 min.
2.4. Резултати
Захарозата и фруктозата се наблюдават като тъмносиня точка на бял фон; глюкозата предизвиква зелена точка с по-малка плътност.
3. Методи за определяне с течна хроматография
Посочени са примерни хроматографски условия.
3.1. Оборудване
3.1.1. Хроматограф за високоефективна течна хроматография (HPLС):
• десетмикролитров инжектор;
• детектор-диференциален рефрактометър или интерферометричен рефрактометър;
• кварцова колона с алкиламинов пълнеж (дължина 25 mm, вътрешен диаметър 4 mm);
• предпазна колона, запълнена със същата фаза;
• устройство за изолиране на предпазната колона и на аналитичните колони или за поддържане на тяхната температура (30 градуса C);
• записващо устройство и ако е необходим интегратор;
• дебит на подвижната фаза: един милилитър на минута.
3.1.2. Приспособление за мембранна филтрация (0,45 m)
3.2. Реактиви
3.2.1. Двойно дестилирана вода;
3.2.2. Ацетонитрил (СН3CN) с качество, подходящо за високоефективна течна хроматография;
3.2.3. Подвижна фаза - ацетонитрил - вода, подложена преди това на мембранно филтриране (0,45 m), (80:20 v/v).
Преди да бъде използвана, подвижната фаза трябва да бъде обезгазена.
3.2.4. Стандартен разтвор - 1,2 g/l воден разтвор на захароза.
Филтрира се с помощта на мембранен филтър 0,45 m.
3.3. Начин на работа
3.3.1. Приготвяне на пробата:
• за вина и мъст - филтрира се с помощта на мембранен филтър (0,45 m);
• за ректифицирана концентрирана мъст - използва се разтворът, получен чрез разреждане на ректифицираната концентрирана мъст до 40 % (m/v), както е описано в метода "13. Определяне на обща киселинност", т. 5.1.2, и се филтрира с помощта на мембранен филтър 0,45 m.
3.3.2. Хроматографско определяне
В хроматографа последователно се инжектират 10 l от стандартния разтвор и 10 l от пробата за анализ, приготвена по начина, описан в т. 3.3.1. Тези впръсквания се повтарят в същия ред. Хроматограмата се записва. Времето на задържане на захарозата е приблизително 10 min.
3.4. Изчисления
При изчисляване се използва средната стойност на два резултата за стандартния разтвор и за пробата за анализ.
3.4.1. За вина и мъст-концентрацията се изчислява в грамове на литър.
3.4.2. За ректифицирана концентрирана мъст-ако C е концентрацията на захарозата в g/l в 40 % (m/v) разтвор на ректифицираната концентрирана мъст, тогава концентрацията на захарозата в g/kg в ректифицираната концентрирана мъст е 2,5 C.
3.5. Изразяване на резултатите
Концентрацията на захарозата във вината, мъстта и ректифицираната и концентрирана мъст се изразява в грамове на литър (за вината и мъстта) и в грамове на килограм (за ректифицираната и концентрирана мъст), всички с точност до първия десетичен знак.
7. Определяне на глюкоза и фруктоза
1. Определение
Глюкозата и фруктозата се определят поотделно по ензимен метод с цел да се изчисли съотношението глюкоза/фруктоза.
2. Принцип на метода
Глюкозата и фруктозата се фосфорилизират от аденозин трифосфат (АТФ) по време на ензимна реакция, катализирана чрез хексокиназа (ХК), като в резултат се получава глюкозо 6-фосфат (Г6Ф) и фруктозо 6-фосфат (Ф6Ф).
глюкоза + АТФ Г6Ф + АДФ
фруктоза + АТФ Ф6Ф + АДФ
Глюкозо 6-фосфат най-напред се окислява до глюконат 6-фосфат от никотинамид аденин динуклеотид фосфат (НАДФ) в присъствието на ензима глюкозо 6-фосфат дехидрогеназа (Г6ФДХГ). Полученото количество редуциран никотинамид аденин динуклеотид фосфат (НАДФТ) съответства на това на глюкозо 6-фосфат (Г6Ф), следователно и на съответното количество глюкоза.
Г6Ф + НАДФТ глюконат 6-фосфат + НАДФТ + H+
Редуцираният никотинамид аденин динуклеотид фосфат (НАДФТ) се определя количествено при дължина на вълната 340 nm.
В края на тази реакция глюкозо 6-фосфат се превръща във фруктозо 6-фосфат вследствие на действието на фосфоглюкозо изомераза (ФГИ):
Ф6Ф Г6Ф
Глюкозо 6-фосфат отново реагира с никотинамид аденин динуклеотид фосфат, в резултат на което се получава глюконат 6-фосфат и редуциран никотинамид аденин динуклеотид фосфат, след което се прави измерване на последното вещество.
3. Апаратура
• спектрофотометър, даващ възможност да се правят измервания при 340 nm дължина на вълната, при която поглъщането от НАДФТ е максимално. Това включва абсолютни измервания (т. е. не се използват калибровъчни графики, но се извършва стандартизиране с използване на светлинната абсорбируемост на НАДФТ), така че е необходимо да се направи проверка на скалите на апаратурата за дължината на вълната и на получаваните чрез апаратурата стойности за поглъщането. Ако не се разполага с такъв спектрофотометър, може да се използва спектрофотометър с източник, характеризиращ се с прекъснат спектър, който позволява да се правят измервания при 334 или при 365 nm;
• кювети с дължина на оптичния път един сантиметър или кювети за еднократна употреба;
• пипети за използване при работа с разтвори за ензимни анализи от 0,02, 0,05, 0,1, 0,2 ml.
4. Реактиви:
4.1. Разтвор 1: буферен разтвор (0,3 M триетаноламин; pH 7,6; 4 10-3 M в Mg2+; разтварят се 11,2 g триетаноламин хидрохлорид (C2H5)3N, HCl) и 0,2 g MgSO47H2O в 150 ml двойно дестилирана вода, добавят се около 4 ml разтвор на 5 M натриев хидроксид (NaOH), за да се получи pH 7,6, и се долива до 200 ml. Този буферен разтвор може да се съхранява в продължение на 4 седмици при +4 градуса C.
4.2. Разтвор 2: разтвор на никотинамид аденин динуклеотид фосфат (около 11,5 10-3 M). Разтварят се 50 mg никотинамид аденин динуклеотид фосфат в 5 ml двойно дестилирана вода. Този разтвор може да се съхранява в продължение на четири седмици при +4 градуса C.
4.3. Разтвор 3: разтвор на аденозин 5'-трифосфат (около 81 10-3 M). Разтварят се 250 mg динатриев аденозин 5' -трифосфат и 250 mg кисел натриев карбонат (NaHCO3) в 5 ml двойно дестилирана вода. Този разтвор може да се съхранява в продължение на четири седмици при +4 градуса C.
4.4. Разтвор 4: разтвор на хексокиназа/глюкоза 6-фосфат дехидрогеназа: cмесват се 0,5 ml хексокиназа (2 mg протеин/ml или 280 U/ml) с 0,5 ml глюкоза 6-фосфат дехидрогеназа (един милиграм протеин на милилитър). Този разтвор може да се съхранява в продължение на една година при +4 градуса С.
4.5. Разтвор 5: фосфоглюкозо изомераза (2 mg протеин/ml или 700 U/ml). Суспензията се използва неразредена. Този разтвор може да се съхранява в продължение на една година при +4 градуса С.
Забележка. Всички посочени разтвори се предлагат на пазара.
5. Начин на работа
5.1. Приготвяне на пробата
В зависимост от изчисленото количество глюкоза + фруктоза на литър пробата се разрежда, както следва:
| Измерване | Измерване | Разреждане | Фактор (F) |
| при 340 и | при 365 nm | с вода | на разреждане |
| 334 nm | |||
| до 0,4 g/l | 0,8 g/l | - | - |
| до 4,0 g/l | 8,0 g/l | 1 + 9 | 10 |
| до 10,0 g/l | 20,0 g/l | 1 + 24 | 25 |
| до 20,0 g/l | 40,0 g/l | 1 + 49 | 50 |
| до 40,0 g/l | 80,0 g/l | 1 + 99 | 100 |
| над 40,0 g/l | 80,0 g/l | 1 + 999 | 1000 |
5.2. Определяне
Оптическата нула на спектрофотометъра при дължина на вълната 340 nm се определя спрямо въздух или вода.
Температура - между 20 градуса C и 25 градуса C.
В две кювети с оптичен път един сантиметър се поставят:
| Сравнителна | Аналитична | |
| проба | проба | |
| Разтвор 1 (4.1) (20 °C) | 2,50 ml | 2,50 ml |
| Разтвор 2 (4.2) | 0,10 ml | 0,10 ml |
| Разтвор 3 (4.3) | 0,10 ml | 0,10 ml |
| Проба, която следва да бъде | 0,20 ml | |
| Измерена | ||
| Двойно дестилирана вода | 0,20 ml | |
| Правят се cмесите, разбър- | ||
| кват се и след около 3 min се | ||
| отчита поглъщането на раз- | ||
| творите (A1). Започва се ре- | ||
| акцията чрез добавяне на: | ||
| Разтвор 4 (4.4) | 0,02 ml | 0,02 ml |
| Разбърква се и се изчаква | ||
| 15 min; отчита се поглъща- | ||
| нето и след още 2 min се | ||
| проверява дали реакцията | ||
| е спряла (A2). Веднага се | ||
| добавя | ||
| Разтвор 5 (4.5) | 0,02 ml | 0,02 ml. |
Разбърква се; след 10 min се отчита поглъщането и след още две минути се проверява дали реакцията е спряла (A3).
Изчисляват се разликите в поглъщането:
A2-A1 съответстват на глюкоза,
A3-A2 съответстват на фруктоза,
За сравнителната и аналитичната проба.
Изчисляват се разликите в поглъщането за сравнителната (АТ) и за аналитичната проба (АD) и след това се изчислява следното:
- за глюкоза: АG= АD-АT
- за фруктоза: АF= АD-АT
Забележка. Времето, което е необходимо, за да приключи действието на ензима, може да е различно за различните партиди. Получената стойност е ориентировъчна и се препоръчва тя да бъде определяна за всяка партида.
5.3. Изразяване на резултатите
5.3.1. Изчисление
Общата формула за изчисляване на концентрациите е:
| V • PM | ||
| C = | А, в g/l, където | |
| 1000• d • v |
V е обемът на анализирания разтвор (ml);
v - обемът на пробата (ml);
PM - молекулната маса на веществото, което следва да бъде определено;
d - оптичният път на елемента (cm);
- коефициент на поглъщане на НАДФТ за 340 nm = 6,3 (mmole-1 • l • cm-1);
V = 2,92 за определяне на глюкоза;
V = 2,94 за определяне на фруктоза;
v = 0,20 ml;
M = 180;
d = единица.
Ето защо:
за глюкоза - C (g/l) = 0,417 АG
за фруктоза - C (g/l) = 0,420 АF
Ако пробата е била разредена по време на приготвянето й, резултатът се умножава с коефициента на разреждане F.
Забележка. Ако измерванията са извършени при 334 или 365 nm, се получават следните изрази:
• измерване при 334 nm: = 6,2 (mmole-1 • l • cm-1)
за глюкоза - C (g/l) = 0,425 АG
за фруктоза - C (g/l) = 0,428 АF
• измерване при 365 nm- = 3,4 (mmole-1 • l • cm-1)
за глюкоза - C (g/l) = 0,773 АG
за фруктоза - C (g/l) = 0,778 АF
5.3.2. Повторяемост (r)
r = 0,056 xi
5.3.3. Възпроизводимост (R)
R = 0,12 + 0,076 xi
xi - концентрацията на глюкоза или фруктоза в грамове на литър.
8. Откриване на обогатителни добавки към гроздова мъст, концентрирана гроздова мъст, ректифицирана и концентрирана гроздова мъст и вина с използване на деутериен ядрено-магнитен резонанс
1. Определение
Атомите на деутерия, който се съдържа в захарите и водата на мъстта, се разпределят след ферментацията в молекулите I, II, III и IV на виното:
CH2D CH2 OH (I) CH3 CHD OH (II)
CH3 CH2 OD (III) HOD (IV)
Добавянето на екзогенна захар (шаптализация) преди ферментирането на мъстта се отразява върху разпределението на деутерия.
В сравнение с параметрите на естественото вино от същия район обогатяването с екзогенна захар води до следните промени:
| Параметри |
| Вино | (D/H)I | (D/H)II | (D/H)QW | R |
| Естествено | ||||
| Обогатено със: | ||||
| - цвеклова захар | ||||
| - тръстикова | ||||
| захар | ||||
| - царевична захар |
(D/H)I - изотопно отношение, свързано с молекула I
(D/H)II - изотопно отношение, свързано с молекула II
(D/H)QW - изотопно отношение на водата във виното
| 2(D/H)II | |
| R = | |
| (D/H)I |
изразява относителното разпределение на молекули I и II; R се измерва директно от h-интензитетите на сигналите, като
| 3Hii | |
| R = | |
| hI |
(D/H)I характеризира предимно растителните видове, които са синтезирали захарта и в по-малка степен географското положение на мястото на реколтата (вида на водата, която е използвана по време на фотосинтезата);
(D/H)II отразява климатичните характеристики на мястото на производство на гроздето (вид дъждовна вода и климатични условия) и в по-малка степен концентрацията на захар в изходната мъст;
(D/H)QW отразява климатичните характеристики на мястото на производство и концентрацията на захар в оригиналната мъст.
2. Принцип на метода
Дефинираните параметри [R, (D/H)I, (D/H)II] се определят чрез деутериен ядрено-магнитен резонанс в етилов алкохол, извлечен от виното или от продуктите, получавани при ферментация на мъст, концентрирана мъст или ректифицирана и концентрирана мъст при определени условия; към тях може да се добави определяне на изотопното отношение на извлечената от виното вода, (D/H)QW и определяне на отношението
| C13 | |
| в етиловия алкохол. | |
| C12 |
3. Подготовка на пробата за анализ
3.1. Екстракция на етанола и водата във виното
Забележка. Всеки метод за екстракция на етанол може да бъде използван, доколкото 98 до 98,5 % от общото алкохолно съдържание във виното може да се възстанови и дестилатът от виното е с алкохолно съдържание 92 до 93 масови % (95 обемни %).
3.1.1. Апаратура и реактиви
• Апаратът за екстракция на етанол (фиг. 1) представлява:
- електрически нагревател с токов регулатор;
- облодънна колба с шлифовано гърло с обем един литър;
- колона "Кадиотова" с въртящо се устройство и подвижна част от тефлон;
- конични колби с шлифовано гърло 125 ml;
- бутилки с пластмасови тапи 60 и 125 ml.
• Реактиви за определяне на водното съдържание - по метода на Карл Фишер (примерно на Мерк-9241 и 9243).
3.1.2. Начин на работа
3.1.2.1. Определяне на алкохолното съдържание на виното до 0,05 об. % - tv
3.1.2.2. Екстракция на етанола
Хомогенизирана проба от 500 ml вино с алкохолно съдържание tv се поставя в колбата на апарата за дестилация с константа на оттичане, близка до 0,9. На мястото за събиране на дестилата се поставя конична колба с шлифовано гърло от 125 ml. Дестилатът се събира между 78,0 градуса C-78,2 градуса C, което е приблизително 40-60 ml. Ако температурата надвишава 78,5 градуса C, операцията се спира за 5 min.
Когато температурата се върне до 78 градуса C, отново се започва да се събира дестилатът до 78,5 градуса C и тази операция се повтаря, докато температурата, след прекратяване на събирането и работа в затворен кръг, не остане постоянна. Пълният процес на дестилация продължава около 5 h. Тази процедура позволява да се събере между 98 и 98,5 % от общото съдържание на алкохол във виното и да се събере дестилат с алкохолно съдържание между 92 и 93 масови % (95 обемни %), за установените условия на ЯМР, описани в т. 4.
Измерване на събрания етанол
Една хомогенна проба от остатъка се пази в колба 60 ml и представлява водното съдържание във виното. Нейното изотопно съотношение може да бъде определено при необходимост.
Забележка. Ако се разполага със спектрометър с 10 mm сонда (вж. т. 4), една хомогенна проба от 300 ml от виното е достатъчна.
3.1.2.3. Определяне на алкохолното съдържание в екстракта
Водното съдържание p, в g, е съдържанието на вода, определено по метода на Карл Фишер, като е използвана проба от около 0,5 ml от алкохол с точно известна маса p.
Фиг. 1. Устройство за екстракция на етанол
Алкохолното съдържание се определя по формулата:
| p-p' | |
| tDm = 100 | |
| p |
3.2. Ферментация на мъст, концентрирана мъст и ректифицирана и концентрирана мъст
3.2.1. Апарат и реагенти
• Винена киселина.
• DIFCO - азот от дрожди и бактерии без аминокиселини.
• Активни сухи дрожди (Saccharomyces cerevisiae).
Ако изотопното съотношение на мъстта е известно, дрождите могат да бъдат реактивирани преди да бъдат използвани в продължение на 15 min, като се използва минимално количество хладка недестилирана вода (1 g дрожди в 50 ml вода), с изотопно съотношение близко до това на водата в мъстта.
Когато не се познава изотопното отношение на водата в мъстта, тогава е по-добре да се използват директно дрождите.
Количеството на сухите дрожди, които трябва да се използват, е приблизително един грам или около 1010 клетки за един литър мъст.
Ферментатор с обем 1,5 l, снабден с устройство, което да го държи херметически затворен и да кондензира алкохолните пари, така че по време на ферментацията да не се допуска загуба на етанол. Превръщането на ферментиращите захари в алкохол трябва да бъде по-високо от 98 %.
3.2.2. Начин на работа
3.2.2.1. Мъст
• Прясна мъст
Прехвърля се във ферментатора един литър мъст, чиято концентрация на ферментиращи захари е била предварително определена. Добавят се сухи дрожди, предварително рехидратирани. Поставя се херметизиращото устройство. Ферментацията се оставя да протече при температура около 20 градуса C до пълното ферментиране на захарите. След като бъде определен алкохолът на продукта на ферментацията и след като бъде изчислена степента на превръщане на захарите в алкохол, ферментиралата течност се центрофугира и дестилира.
• Мъст, съдържаща серен диоксид (сулфитирана мъст).
Известно количество от мъстта, малко повече от един литър (около 1,2 l), се десулфитира чрез барботация на азот в мъстта на водна баня при температура 70-80 градуса C на обратен хладник, докато съдържанието на общ серен диоксид стане по-ниско от 200 mg/l. Внимава се да не се допусне никаква концентрация чрез изпаряване на водата. За целта се използва ефикасен хладник.
Един литър от десулфитираната мъст се прехвърля във ферментатора и се продължава, както е описано за прясната мъст.
Забележка. Ако за сулфитиране на мъстта е използван калиев метабисулфит, тогава преди десулфитиране на мъстта трябва да бъдат добавени 0,25 ml сярна киселина (20 = 1,84 g/ml) за грам метабисулфит, използван за един литър мъст.
3.2.2.2. Концентрирана мъст.
Във ферментатора се прехвърлят V ml концентрирана мъст, съдържаща количество захар, което е известно (приблизително 170 g). Обемът се довежда до един литър (1000-V) с обикновена вода със същото изотопно съотношение както сравнителната проба на мъстта, както е посочено в т. 3.2.1. Добавят се 3 g DIFCO - азот от дрожди и бактерии без аминокиселини. Хомогенизира се и се процедира, както е посочено.
3.2.2.3. Ректифицирана и концентрирана мъст.
Процедира се, както е посочено в т. 3.2.2.2. Довежда се до обем от един литър (1000-V) с обикновена вода със същото изотопно съотношение както сравнителната проба на мъст, но и също така съдържаща 3 g разтворена винена киселина.
Забележка. Запазват се 50 ml от мъстта или десулфитираната мъст, или концентрираната мъст, или ректифицираната и концентрирана мъст с оглед възможната екстракция на вода и определянето на нейното изотопно съотношение (D/H)QW.
Екстракцията на вода, съдържаща се в мъстта, може да бъде много лесно осъществена чрез азотропна дестилация, като се използва толуол.
3.3. Подготовка на алкохолната проба за ЯМР измерване
3.3.1. Реагенти
N,N-тетраметилкарбамид (TMU); използва се N,N-тетраметилкарбамид (TMU) с дадено стандартно изотопно съотношение D/H. Такава проба може да бъде доставена от:
DG for Science, Research and Development, Community
Bureau of References,
200 rue de la Loi,
B-1049, Brussels.
3.3.2. Начин на работа
• Сонда с диаметър 15 mm за ЯМР изследване. В предварително претеглена колба се прибавят 7 ml алкохол, получен по начина, описан в т. 3.1.2, и се претегля с точност 0,1 mg-mA; прибавят се 3 ml вътрешен стандарт (TMU) и отново се претегля с точност до 0,1 mg - mst. Хомогенизира се с разклащане.
• Сонда за ЯМР с диаметър 10 mm. Достатъчни са 3,2 ml алкохол и 1,3 ml (TMU). Според типа на спектрометъра и сондата, които се използват (т. 4), се добавя достатъчно количество от хексафлуоробензена като субстанция за стабилизиране на честотата на ядреномагнитното поле.
| Спектрометър | Сонда |
| 10 mm | 15 mm | |
| 7,05Т | 150 l | 200 l |
| 9,4Т | 35 l | 50 l |
3.4. Подготовка на водна проба за ЯМР изследване с цел възможно определяне на нейното изотопно съотношение.
3.4.1. Реагенти - N,N-тетраметилкарабамид - вж. т. 3.3.1.
3.4.2.Начин на работа
В предварително тарирана колба се прехвърлят 3 ml вода, получена както е описано в т. 3.1.2 или 3.2, и се измерва с точност до 0,1 mg-m'E. Добавят се 4 ml вътрешен стандарт (TMU) и се претегля с точност до 0,1 mg-m'st. Хомогенизира се чрез разклащане.
Забележка. Ако лабораторията разполага с електронен умножител за определяне на изотопни съотношения, измерването може да се проведе с този инструмент, за да се намали натоварването на ЯМР спектрометъра. Необходимо е да се стандартизира съотношението TIV (т. 5.2) за всички партиди вина, които се изследват.
4. Записване на спектрите ЯМР на 2Н за алкохола и за водата
Определяне на изотопното съотношение
4.1. Апарат
• ЯМР-спектрометър, снабден със специална деутериева сонда, настроена на характерна честота Vо на полето Bo (или за Во = 7,05 Т; Vо = 46,05 MHz, и за Во = 9,4 T и Vо = 61,4 MHz), когато има и протоново разделящ канал и канал за стабилизиране на честотата на ядреномагнитното поле (затворено) на флуориновата честота. Разлагането, измерено върху спектъра, трансформирано без експоненциална мултипликация (т.е. LB = 0)(фиг. 2б) и изразена чрез широчината при полувисочината на метиловия и метиленовия сигнал на етанола и метиловия сигнал на (TMU), да е по-ниско от 0,5 Hz.
• Чувствителността, измерена чрез експоненциален мултиплициращ фактор LB = 2 (фиг. 2a), да е по-голяма или еквивалентна на 150 за метиловия сигнал на етанол с алкохолно съдържание 95 обемни % (93,5 масови %). При тези условия интервалът на сигурност за измерването на височината на сигнала, калкулиран за 97,5% вероятност (по критерия на Стюдант-Фишер) и 10 повторения на спектъра, е 0,35 %.
• Автоматичен пробовземач.
• Компютър и софтуер.
• Сонди за проби 15 mm или 10 mm според вида на спектрофотометъра.
4.2. Стандартизиране на спектрометъра и проверки.
4.2.1. Стандартизиране-прави се редовно стандартизиране за хомогенност и чувствителност според инструкциите на производителя.
4.2.2. Проверка на валидността на проведената стандартизация-използват се стандартни етаноли, означени с буквите С, V и В, които имат изотопни концентрации, различни помежду си, своевременно стандартизирани. Те носят следните значения:
С - алкохол от тръстикова захар или царевично нишесте;
V - винен спирт;
В - алкохол от захар, добита от захарно цвекло.
Пробите могат да бъдат доставени от Community Bureau of References.
Като се следва процедурата, описана в т. 4.3, се определят изотопните стойности на тези алкохоли, като се означават по следния начин: Сmes; Vmes; Вmes (вж. т. 5.3).
Сравняват се със съответните еталонни стойности, изобразявайки високите стойности на Сst; Vst; Вst (вж. т. 5.3).
Фиг. 2а. Спектър RMN2H на етанола на виното с вътрешен стандарт (TMU:N,N-тетраметилурея)
Фиг. 2б. Спектър 2H на етанола, реализиран при същите условия както на фиг. 2а, но без експоненциална мултипликация (LB = 0)
Стандартното отклонение за повторяемостта, получено на средно 10 повторения на всеки един спектър, да е по-малко от 0,01 за съотношението R и по-малко от 0,3 ppm за (D/H)I и (D/H)II.
Средните стойности, получени за различните изотопни параметри [R, (D/H)I, (D/H)II], да са в рамките на стандартното отклонение на повторяемостта, дадено за тези параметри за трите стандартни алкохоли от C.B.Ref. Ако стойностите не са в посочените граници, проверките се правят отново.
4.3. Условия за получаване на ЯМР спектри
Алкохолната проба се поставя в епруветка от 10 или 15 mm или се въвежда в сондата. Пробата е подготвена, както е описано в т. 3.3 (или водната проба, подготвена, както е описано в т. 3.4).
Условията за получаване на ЯМР спектър са следните:
- постоянна температура на сондата (например 302 К);
- време за овладяване - най-малко 6,8 s за 1200 Hz спектрална широчина (16 К памет) (около 20 ppm при 61,4 MHz, или 27 ppm при 46,1 MHz);
- импулс: 90 градуса;
- уточняване на времето за овладяване; неговата стойност да е от същия порядък на нарастване както времето за подготовка на пробата (dwell time);
- параболично радиодетектиране: фиксира се офсета 01 между OD и CHD референтните сигнали за етанола и между HOD и (TMU)-референтните сигнали за водата;
- определя се стойността на разделящия офсет 02 от протоновия спектър, измерен от разделящата спирала бобина върху същата епруветка; добро разделяне се получава, когато 02 е поставен в средата на честотнияинтервал между CH3- и CH2-групите; използва се методът за разделяне на широката лента.
За всеки спектър се провеждат NS броя акумулации, достатъчен, за да се получи съотношението сигнал/шум, дадено в т. 4.1 и се повтаря този брой от NS акумулации NE = 10 пъти. Стойностите на NS зависят от типа на спектрометъра и сондата, които се използват (част 4). Примерите за възможен избор са:
| Спектрометър | Сонда |
| 10 mm | 15 mm | |
| 7,05Т | NS=304 | NS=200 |
| 9,04Т | NS=200 | NS=128 |
5. Изразяване на резултатите
5.1. Етанол
За всеки от 10-те спектъра (вж. ЯМР спектър за етанол, фиг. 2а) се определя:
| hII | сила на сигнала II (CH3CHDOH) | |
| -R = | 3 | --- = 3 ------------------ |
| hI | сила на сигнала I (CH2DCH2OH) |
| mst | (D/H)st | ||
| -(D/H)I = 1,5866TI | • | ||
| ma | tDm |
| mst | (D/H)st | ||
| -(D/H)II = 2,3799TII | • | ||
| Ma | tDm |
с
| сила на сигнала I (CH2DCH2OH) | |
| -TI = | |
| сила на сигнала на вътрешния стандарт (TMU) |
| сила на сигнала II (CH3TCHDOH) | |
| -TII = | |
| сила на сигнала на вътрешния стандарт (TMU) |
- СН3СНDОН, mst и mA , вж. т. 3.3.2
- tDm, вж. т. 3.1.2.3
- (D/H)st е изотопното отношение на вътрешния стандарт (TMU), посочен на бутилката, доставена от Community Bureau of References.
Използването на височината на пиковете вместо тяхната площ, което е по-малко прецизно, предполага, че широчината на пика на половината от височината са идентични и такова приближение е разумно, ако е приложимо (фиг. 2б).
5.2. Вода
Когато изотопното съотношение на водата е определено от ЯМР от смес от водата и (TMU), използва се следното съотношение:
| m'st | ||
| -(D/H)QW = 0,9306 TIV | (D/H)st, | |
| m'E |
където:
| площта на сигнала на водата, | |
| екстрахирана от виното (HOD) | |
| -TIV = | |
| площта на сигнала на вътрешния стандарт (TMU) |
- m'st и m'E-вж. т. 3.4.2
- (D/H)st - изотопното отношение на вътрешния стандарт (TMU), посочен върху бутилката, доставена от Community Bureau of References.
5.3. За всеки от изотопните параметри се изчислява средната от 10 определени стойности и интервалът на сигурност.
Допълнителен софтуер (например SNIF-ЯМР), подходящ за компютъра на спектрометъра, позволява такива изчисления да се извършват автоматично.
Забележка. Ако след стандартизацията на спектрометъра съществува систематична разлика между средните стойности, получени за характерните изотопи на стандартните алкохоли (т. 4.2.2) и стойностите, посочени от Community Bureau of References, в рамките на стандартното отклонение могат да бъдат приложими следните корекции, за да се получи вярната стойност за всяка проба Х.
Интерполацията ще бъде направена, като се вземат стойностите за стандартната проба, които са най-близки до тези на пробата Х.
Ако (D/H)iXmes е измерената стойност, а (D/H)iXcorr-коригираната стойност
(D/H)iXcorr = (D/H)iBst+[(D/H)iXmes-(D/H)iBmes],
където
| (D/H)iVst-(D/H)iBst | |
| a = | |
| (D/H)iVmes-(D/H)iBmes |
Пример:
Стандартните проби, доставени и стандартизирани от Community Bureau of References:
(D/H)iVst = 102,0 ppm (D/H)iBst = 91,95 ppm
Стандартните проби, измервани от лабораторията:
(D/H)iVmes = 102,8 ppm (D/H)iBmes = 93,0 ppm
Предполагаемата, некоригирана проба:
(D/H)iXmes = 100,2 ppm
изчислената стойност на = 1,0255 и (D/H)iXcorr = 99,3 ppm
6. Интерпретиране на резултатите
Сравняват се стойността RX, получена за R на предполагаема проба, със съотношенията, получени за контролните вина. Ако RX се различава с повече от 2 стандартни отклонения от средно претеглената RT-стойност, получена за контролното вино, резултатът може да има презумпция за фалшифициране.
6.1. Добавяне на тръстикова захар, захар от захарно цвекло и царевична глюкоза
6.1.1. Вина
Ако:
RX по-високо от RT - презумпция за добавяне на цвеклова захар.
RX по-малко от RT - може да се счита, че е добавена захар от захарна тръстика или царевична глюкоза.
Забелязва се, че (D/H)XII и (D/H)QXW са се повишили.
Изпитва се (D/H)XI -има презумпция за:
• обогатяване с цвеклова захар
(D/H)XI на предполагаемата проба е по-ниско от (D/H)ТI , средно претеглена стойност, получена от контролните проби с повече от едно стандартно отклонение
• обогатяване със захар от захарна тръстика или царевична глюкоза:
(D/H)XI e по-високо от (D/H)ТI с повече от едно стандартно отклонение
• изчисляване на обогатяването Е е изразено в об. % етанол
• в случай на добавка на захар от захарно цвекло:
| (D/H)ТI - (D/H)XI | ||
| E об. % = tV | , където | |
| (D/H)ТI -(D/H)BI |
(D/H)BI е изотопното отношение за локация I за алкохол от цвеклова захар: (D/H)BI = 92,5 (1)
tV - алкохолното съдържание на анализираното вино (X)
- случай на добавка на захар от захарна тръстика или царевична глюкоза
| (D/H)XI - (D/H)ТI | ||
| E об. % = tV | , където | |
| (D/H)CI -(D/H)ТI |
(D/H)CI е изотопното отношение за локация I за алкохол от захар от захарна тръстика или царевична глюкоза: (D/H)CI = 110,5 (1)
tV - алкохолното съдържание на анализираното вино (X)
(1) Тези стойности са дадени в банка за данни на Kомисията на ЕС
6.1.2. Мъст, концентрирана мъст и пречистена концентрирана мъст
Стойностите на изотопните параметри за извлечения алкохол, както е описано в т. 3.1, от придобития ферментирал продукт (т. 3.2) от мъстта, концентрираната мъст или ректифицираната и концентрирана мъст, са изпитани според инструкциите, дадени в т. 6 в частта "Интерпретиране на резултатите" (т. 6.1.1) и сравнени с алкохола, извлечен от продукта на ферментацията на мъстта.
Обогатяването Е в об. % изразява обема на алкохол, добавен към ферментиралия продукт. Като се знае степента на разреждането, което е възможно да е било проведено преди ферментацията (на концентрираната и ректифицирана мъст), приемайки, че от 16,83 g захар се получава един об. % алкохол, се изчислява количеството захар, прибавено към един литър мъст, концентрирана мъст или ректифицирана и концентрирана мъст.
6.2. Добавка на смес от захар, захарно цвекло и тръстикова захар или царевична глюкоза.
Изотопното съотношение (D/H)I и R са се изменили по-малко, отколкото ако е била прибавена захар само от единия тип.
(D/H)II е по-високо, както и (D/H)QW.
Тези добавяния могат да бъдат определени, като бъде определено и 13С/12С съотношението на етанола чрез спектрофотометрия; в този случай съотношението е повишено.
9. Определяне на пепел
1. Определение
Пепелното съдържание се дефинира като всички онези продукти, оставащи след изгаряне на утайката, останала след изпаряването на виното. Изгарянето се провежда по такъв начин, че всички катиони (изключвайки амониевия катион) са превърнати в карбонати или други безводни минерални соли.
2. Принцип на метода
Виненият екстракт се изгаря между 500 и 550 градуса C, докато не бъде постигнато пълно изгаряне на органичния материал.
3. Апаратура
3.1. Кипяща водна баня.
3.2. Аналитични везни с точност до 0,1 mg.
3.3. Нагревател (гореща плоча) или инфрачервен изпарител.
3.4. Терморегулируема муфелна пещ.
3.5. Ексикатор.
3.6. Плосък платинов тигел с диаметър 70 mm и височина 15 mm.
4. Начин на работа
В предварително тариран платинен съд (първоначално тегло P0 g) се отпипетирват 20 ml вино. Изпарява се на кипяща водна баня и остатъкът се загрява върху гореща плака при 200 градуса С или на инфрачервен изпарител, докато започне карбонизирането. Когато спрат да се образуват газове, съдът се поставя в електрическа пещ с температура 525 градуса С ± 25 градуса С. След 15 min карбонизиране съдът се отстранява от пещта, добавят се 5 ml дестилирана вода, изпарява се на водна баня или с помощта на инфрачервен изпарител и отново остатъкът се загрява до 525 градуса С в продължение на 10 min.
Ако окислението на карбонизираните частици не е завършило, операцията с измиването на частиците, изпаряването на водата и изгарянето се повтаря. За вина с високо съдържание на захари е по-добре да се добавят няколко капки чисто растително масло към екстракта преди първото изпепеляване с цел предпазване от димене.
След охлаждане в ексикатора съдът се претегля. Ако-P1 g е теглото на претегления ексикатор след охлаждането, то теглото на пепелта в пробата (20 ml) е p = (P1-P0), g.
5. Изразяване на резултатите
5.1. Метод на изчисляване
Теглото P1 на пепелта в грамове на литър се закръглява до втория знак след десетичната запетая от формулата P = 50 p.
10. Определяне на алкалност на пепел
1. Определение
Алкалността на пепелта се дефинира като сума от катионите (без амониевия катион), свързани с органичните киселини на виното.
2. Принцип на метода
Пепелта се разтваря в определено количество от горещ стандартен разтвор, като излишъкът се определя чрез титруване. Използва се метил-оранж като индикатор.
3. Реактиви и апаратура:
3.1. разтвор на 0,05 М сярна киселина (H2SO4);
3.2. разтвор на 0,1 M натриев хидроксид (NaOH);
3.3. 0,1 % разтвор на метил-оранж в дестилирана вода;
3.4. кипяща водна баня.
4. Начин на работа
Добавят се 10 ml от 0,05 М разтвор на сярна киселина (3.1) към пепелта от 20 ml вино, съдържаща се в платинения съд. Съдът се поставя на кипяща водна баня за около 15 min, като остатъкът се разбърква със стъклена бъркалка, за да се ускори разтварянето. Добавят се две капки от разтвора на метил-оранж и се титрува излишъкът от сярна киселина с 0,1 М натриев хидроксид (3.2) до промяна на цвета на индикатора в жълт.
5. Изразяване на резултатите
Метод на изчисляване
Алкалността на пепелта се изразява в милиеквиваленти на литър и се изчислява по формулата, като се закръглява до първия знак след десетичната запетая А = 5(10-n), където n e използваният обем 0,1 М натриев хидроксид.
11. Определяне нa хлориди
1. Принцип на метода
Хлоридите се определят директно във виното чрез потенциометрия посредством Ag/AgCl електрод.
2. Апаратура:
2.1. pH/mV метър, градуиран на интервали най-малко 2 mV.
2.2. Магнитна бъркалка.
2.3. Ag/AgCl електрод с електролит-наситен разтвор от калиев нитрат.
2.4. Микробюрета, градуирана в 1/100 ml.
2.5. Хронометър.
3. Реактиви:
3.1. Стандартен разтвор на хлорид; 2,1027 g калиев хлорид, (KCl) (максимално 0,005 % Брикс), изсушен преди употреба в ексикатор за няколко дни, се разтваря в дестилирана вода и се допълва до един литър. Един милилитър от този разтвор съдържа един милиграм Cl-.
3.2. Разтвор на сребърен нитрат: 4,7912 g от аналитичния сребърен нитрат (AgNO3) се разтварят в 10 % (v/v) разтвор на алкохол и се допълва до един литър. Един милилитър от този разтвор съответства на един милиграм Cl.
3.3. Азотна киселина с поне 65 % чистота (20 = 1,40 g/ml).
4. Процедура
4.1. Пет милилитра от стандартния разтвор на хлорид се отмерват в чаша от 150 ml, поставена на магнитна бъркалка, и се разрежда с дестилирана вода до около 100 ml, след което се подкисляват с един милилитър азотна киселина (поне 65 %). Електродът се потопява и се титрува чрез добавяне на нитратен разтвор за титруване с помощта на микробюрета при внимателно разбъркване. Добавят се следващите 2 ml на порции от 0,20 ml. Накрая се продължава с добавянето на фракции от един милилитър, докато всичките 10 ml бъдат добавени. След всяко добавяне се изчаква около 30 s преди да се отчетат съответстващите миливолти. Прехвърлят се така получените стойности на милиметрова хартия срещу съответстващите милилитри разтвор затитруване и се определя потенциалът на еквивалентния пункт на базата на единична точка от получената крива.
4.2. Пет милилитра от стандартния разтвор на хлориди се отмерват в чаша от 150 ml с 95 ml дестилирана вода и един милилитър азотна киселина (минимум 65 %). Електродът се потопява и се титрува при разбъркване до достигане на потенциала на еквивалентния пункт. Определянето се повтаря до получаването на адекватни резултати. Тази проверка трябва да се извършва преди всяка серия от анализи на хлориди в проби.
4.3. Петдесет милилитра от виното за анализ се отмерват в мерителна чаша от 150 ml, добавят се 50 ml дестилирана вода и 1 ml азотна киселина (минимум 65 %) и се титрува, като се следва процедурата, описана в т. 4.2.
5. Изразяване на резултатите
5.1. Изчисления
Ако n представлява количеството в милилитри разтвор на сребърен нитрат, изразходвано при титруването, съдържанието в анализираната проба е:
20 n - изразено като милиграма Cl на литър;
0,5633 n - изразено като милиеквиваленти на литър;
32,9 n - изразено като милиграма натриев хлорид на литър.
5.2. Повторяемост (r):
r = 1,2 mg Cl на литър;
r = 0,03 me/l;
r = 2,0 mg NaCl/l.
5.3. Възпроизводимост (R):
R = 4,1 mg Cl на литър;
R = 0,12 me/l;
R = 6,8 mg NaCl/l.
Забележка. За много прецизни анализи: получената крива се съпоставя с кривата на пълното титруване, получена по време на анализа на пробата с разтвор на сребърен нитрат.
а) отмерват се 50 ml от виното за анализ в чаша от 150 ml; добавят се 50 ml дестилирана вода и 1 ml азотна киселина (минимум 65 %); титрува се, като се използва разтвор на сребърен нитрат и се добавят 0,5 ml по време на отчитане на съответстващия потенциал в миливолти; получава се първият приблизителен обем разтвор на сребърен нитрат;
б) започва се определянето при същите условия; добавят се 0,5 ml от разтвора за титруване, докато добавеният обем достигне 1,5 до 2 ml по-малко от определения обем в буква "а"; след това се добавя по 0,2 ml разтвор до достигане приблизително на еквивалентния пункт и се продължава с добавянето на 0,5 ml.
Крайната точка на измерването и точният обем на сребърния нитрат, изразходван за титруването, се получават:
- или чрез построяване на крива и определяне на еквивалентния пункт;
- или посредством формулата
| E1 | ||
| V = V' + Vi | , където: | |
| E1 + E2 |
V е обемът на разтвора за титруване до еквивалентния пункт;
V' - обемът на разтвора за титруване преди най-голямото изменение на потенциала;
Vi - константният обем на съставките на разтвора за титруване, т.е. 0,2 ml;
E1 - втората разлика в потенциала преди най-голямата промяна на потенциала;
E2 - втората разлика в потенциала след най-голямата промяна на потенциала.
Пример:
| Обем AgNO3 | E потенциал | Разлика | Втора |
| за титруване | в миливолти | E | разлика E |
| 0 | 204 | ||
| 4 | |||
| 0,2 | 208 | 0 | |
| 4 | |||
| 0,4 | 212 | 2 | |
| 6 | |||
| 0,6 | 218 | 0 | |
| 6 | |||
| 0,8 | 224 | 0 | |
| 6 | |||
| 1,0 | 230 | 2 | |
| 8 | |||
| 1,2 | 238 | 4 | |
| 12 | |||
| 1,4 | 250 | 10 | |
| 22 | |||
| 1,6 | 272 | 22 | |
| 44 | |||
| 1,8 | 316 | 10 | |
| 34 | |||
| 2,0 | 350 | 8 | |
| 26 | |||
| 2,2 | 376 | 6 | |
| 20 | |||
| 2,4 | 396 |
В този пример крайната точка на титруването е между 1,6 и 1,8 ml. Най-голямата промяна в потенциала (E = 44 миливолта) се наблюдава в този интервал. Обемът на изразходвания разтвор сребърен нитрат за титруване, изразходван за измерване на хлоридите в тест-пробата, е:
| 22 | ||
| V = 1,6 + 0,2 | = 1,74 ml | |
| 22 + 10 |
12. Определяне на сулфати
1. Принцип на метода
1.1. Сравнителен метод
Утаяване като бариев сулфат и претегляне. Утаеният бариев сулфат се отделя чрез промиване на утайката със солна киселина. В случай на анализ на гроздова мъст или вино, богато на серен диоксид, преди анализа се препоръчва десулфитация чрез кипене в плътно затворен съд.
1.2. Бърз тест-метод
Вината се класифицират в няколко категории, като се използва т.нар. метод на ограниченията, който е базиран на утаяването на бариев сулфат чрез използване на точен разтвор на бариев йон.
2. Сравнителен метод
2.1. Реактиви:
2.1.1. 2 М разтвор на солна киселина (HCl);
2.1.2. Разтвор на бариев хлорид 200 g/l (BaCl2.2H2O).
2.2. Начин на работа
2.2.1. Основен начин на работа
Отливат се 40 ml от анализираната проба в 50 ml центрофужна епруветка; добавя се 2 ml 2 М солна киселина и 2 ml разтвор на бариев хлорид-200 g/l. Разбърква се със стъклена бъркалка с малко дестилирана вода и се оставя да престои 5 min. Центрофугира се 5 min, след това внимателно се отдекантирва бистрата течност. След това утайката от бариев сулфат се промива, както следва: добавят се 10 ml 2 М солна киселина, поставя се утайката в суспензия и се центрофугира 5 min, след което внимателно се отдекантирва бистрата част. Промиването се повтаря двукратно при същите условия с 15 ml дестилирана вода всеки път.
Утайката количествено се прехвърля посредством измиване с дестилирана вода в затворен платинов тигел и се поставя на водна баня при 100 градуса С до пълно изпаряване. Сухата утайка се накалява няколко пъти за кратко на пламък до получаването на бял остатък. Оставя се да се охлади в ексикатор и се претегля-m, mg (масата на бариевия сулфат).
2.2.2. Специална процедура: сулфатирана мъст и вино с високо съдържание на серен диоксид
Серният диоксид се елиминира предварително. В ерленмайерова колба 500 ml, снабдена с делителна фуния с кран за оттичане, се отмерват 25 ml вода и 1 ml чиста солна киселина (20 °C= 1,15 до 1,18 g/ml). Разтворът се кипва за отстраняването на въздуха и се прехвърлят 100 ml вино през делителна фуния. Загрява се непрекъснато, докато обемът в колбата се редуцира до 75 ml, като се прехвърля количествено след охлаждане в мерителна колба от 100 ml. Долива се до марката с вода. Определят се сулфатите в 40 ml проба, както е указано в т. 2.2.1.
2.3. Изразяване на резултатите
2.3.1. Изчисления
Съдържанието на сулфати, изразено в милиграма на литър калиев сулфат (K2SO4) е: 18,76 m.
Съдържанието на сулфати в мъст или вино, изразено в милиграма на литър калиев сулфат, се закръглява до цяло число.
2.3.2. Повторяемост
до 1000 mg/l: r = 27 mg/l;
до 1500 mg/l: r = 41 mg/l .
2.3.3. Възпроизводимост
до 1000 mg/l: R = 51 mg/l;
до 1500 mg/l: R = 81 mg/l .
3. Бърз тест-метод
3.1. Реактиви:
3.1.1. Точен разтвор на бариев хлорид
2,804 g бариев хлорид (BaCl2.2H2O) и 10 ml солна киселина (20 градуса C = 1,15 дo 1,18 g/ml) се разтварят в достатъчно количество вода за получаване на един литър разтвор; един милилитър от този разтвор преципитира определено количество сулфатни йони, еквивалентно на 2 mg калиев сулфат.
3.1.2. Сярна киселина (20 градуса C = 1,84 g/ml), 1/10 (m/v) разреден разтвор
3.2. Начин на работа.
В три тест-епруветки се отмерват 10 ml от мъстта или виното и се добавят към № 1-3,5 ml, към № 2-5 ml и към № 3-10 ml, от разтвора на бариевия хлорид. Разклаща се и се загрява до кипене; оставя се за един до два часа. Течността от всяка епруветка се отдекантирва, филтрира и се разделя на две части. Към едната част се добавят няколко части от разредената сярна киселина, към другата-няколко капки от разтвора на бариевия хлорид. Оглежда се всяка от епруветките и се забелязва дали съдържанието на всяка от тях е чисто или мътно. Интерпретацията на тези резултати се дава от таблицата:
| Вино | Бариев | Филтрирано вино + |
| дихлорид |
| разредена | бариев | ||
| сярна | дихлорид | ||
| киселина |
| ml | ml | мътно | бистро | |
| (по-малко от 0,7 g/l K2SO4) | ||||
| 1 опит | 10 | 3,5 | ||
| мътно | бистро | |||
| (повече от 0,7 g/l K2SO4 ) | ||||
| ml | ml | мътно | бистро | |
| (по-малко от 1 g/l K2SO4) | ||||
| 2 опит | 10 | 5 | ||
| мътно | бистро | |||
| (повече от 1 g/l K2SO4 ) | ||||
| ml | ml | мътно | бистро | |
| (по-малко от 2 g/l K2SO4) | ||||
| 3 опит | 10 | 10 | ||
| мътно | бистро | |||
| (повече от 2 g/l K2SO4) |
13. Определяне на обща киселинност
1. Определение
Общата киселинност на виното е сума от титруемите киселини, определени до рН 7 чрез титруване с точен алкален разтвор. Въглеродният диоксид не се включва в общата киселинност.
2. Принцип на метода
Потенциометрично титруване или титруване с бромтимолблау като индикатор и сравнение на цвета на крайния разтвор със стандартен.
3. Реактиви
3.1. Буферен разтвор рН 7,0:
- Монокалиев фосфат ([КН2РО4 ) - 107,3 g;
- 1 М разтвор на натриев хидроксид (NаОН) - 500 ml;
- Вода - до 1000 ml.
Може да се използва и готов буферен разтвор с рН 7,0 (стандартен образец).
3.2. 0,1 М разтвор на натриев хидроксид (NаОН)
3.3. Разтвор на индикатор бромтимолблау - 4 g/l:
- Бромтимолблау (С27Н28Вr2О5S) - 4 g.
- Хим. чист етанол, 96 об. % - 200 ml.
Разтваря се и се добавят:
- Вода, освободена от СО2 - 200 ml.
- 1 М разтвор на натриев хидроксид, достатъчно, за да даде синьо-зелено оцветяване (рН 7), приблизително - 7,5 ml.
- Вода - до 1000 ml.
4. Апаратура
4.1. Водна вакуум помпа.
4.2. Вакуумни колби с обем 500 ml.
4.3. Потенциометър с градуирана в рН единици скала и електроди. Стъкленият електрод трябва да се съхранява в дестилирана вода. Каломеловият електрод трябва да се съхранява в разтвор, наситен с калиев хлорид. Често е необходимо да бъде използван комбиниран електрод, който се съхранява в дестилирана вода.
4.4. Мерителни цилиндри от 50 ml (за вино) и от 100 ml (за ректифицирана и концентрирана гроздова мъст).
5. Процедура
5.1. Подготовка на пробата
5.1.1. Вина
Отстраняване на въглеродния диоксид: поставят се около 50 ml от виното във вакуумколбата; вакуумира се с водната помпа за около 1-2 min, като непрекъснато се разклаща.
5.1.2. Ректифицирана и концентрирана гроздова мъст
Поставят се 200 g от ректифицирана и концентрирана гроздова мъст във вакуумколбата; долива се до 500 ml с вода; хомогенизирa се.
5.2. Потенциометрично титруване
5.2.1. Калибриране на рН-метъра
рН-метърът е калибриран за работа при 20 градуса С съгласно инструкциите на производителя с буферен разтвор с рН 7,0 при 20 градуса С.
5.2.2. Метод на измерването
В мерителен цилиндър (т. 4.4) се поставя определен обем от пробата, подготвена, както е описано в 5.1, равен на 10 ml в случаите на анализ на вино и - 50 ml в случаите на анализ на ректифицирана и концентрирана гроздова мъст. Добавят се около 10 ml дестилирана вода и след това 0,1 М разтвор на натриев хидроксид (т. 3.2) от бюретата, докато рН не достигне стойност, равна на 7,0 при 20 градуса С. Натриевият хидроксид се добавя бавно, а разтворът се разбърква непрекъснато - n, ml [обемът на добавения 0,1 М натриев хидроксид (Na OH)].
5.3. Титруване с индикатор (бромтимолблау)
5.3.1. Предварителен тест: определяне на еквивалентния пункт по цвета на индикатора.
В мерителен цилиндър (т. 4.4) се поставят 25 ml кипяща дестилирана вода, 1 ml разтвор на бромтимолблау (т. 3.3) и обем, приготвен както в т. 5.1, равен на 10 ml в случаите на анализ на вино и 50 ml в случаите на анализ на ректифицирана и концентрирана гроздова мъст. Титрува ce с 0,1 М разтвор на натриев хидроксид (т. 3.2), докато цветът се промени в синьо-зелен. Добавят се 5 ml от буферния разтвор с рН 7 (т. 3.1).
5.3.2. Измерване
В мерителен цилиндър (т. 4.4) се поставят 30 ml кипяща дестилирана вода, 1 ml разтвор на бромтимолблау (т. 3.3) и обем, приготвен както в (т. 5.1), равен на 10 ml в случаите на анализ на вино и 50 ml в случаите на анализ на ректифицирана и концентрирана гроздова мъст. Титрува се с 0,1 М разтвор на натриев хидроксид (т. 3.2), докато цветът се промени както в теста, описан в т. 5.3.1 - n, ml (обемът на добавения 0,1 М натриев хидроксид).
6. Изразяване на резултатите
6.1. Метод на изчисляване
6.1.1. Вина
• общата киселинност се изразява в милиеквиваленти на литър и се определя по формулата А = 10n. Закръглява се до първия десетичен знак.
• общата киселинност, изразена в грамове винена киселина на литър, се изчислява по формулата А' = 0,075А. Закръглява се до първия десетичен знак.
6.1.2. Ректифицирана и концентрирана гроздова мъст
• общата киселинност се изразява в милиеквиваленти на килограм ректифицирана и концентрирана гроздова мъст по формулата: а=5n
• общата киселинност се изразява в милиеквиваленти на килограм общи захари по формулата
| 500n | |
| A = | _____, |
| P |
закръглена до първия десетичен знак, където:
Р е масовият % от общите захари (m/m).
6.2. Повторяемост (r) за титруването с индикатор:
за бели, розе и червени вина
r = 0,9 me/l;
r = 0,07 g винена киселина/l.
6.3. Възпроизводимост (R) за титруване с индикатор (т. 5.3):
За бяло вино и розе:
R = 3,6 me/l;
R = 0,3 g винена киселина/l;
За червено вино:
R = 5,1 me/l;
R = 0,4 g винена киселина/l.
14. Определяне на летлива киселинност
1. Определение
Летливата киселинност се формира от киселините от реда на оцетна киселина, които се намират във виното в свободно състояние или свързано във вид на соли.
2. Принцип на метода
Титруване на летливите киселини, отделени от виното чрез дестилация, и титруване на дестилата.
Въглеродният диоксид предварително се отстранява от виното. Киселинността на свободния или общия серен диоксид, дестилиран при тези условия, се отчита чрез съответна поправка. Киселинността на сорбиновата киселина, която може да е била добавена, също се определя.
Забележка. Част от използваната салицилова киселина, използвана в някои страни за стабилизиране на виното преди анализа, е представена в дестилата. Тя се определя и се изважда от киселинността. Методът за определяне е описан в т. 7.
3. Реактиви:
3.1. Кристална винена киселина (С4Н6О6).
3.2. 0,1 М разтвор на натриев хидроксид (NаОН).
3.3. 1 % разтвор на фенолфталейн в 96 об. % алкохол.
3.4. Солна киселина (20 градуса C= 1,18 до 1,19 g/ml) (разредена) (v/v).
3.5. 0,005 M разтвор на йод (I2).
3.6. Кристален калиев йодид (KI).
3.7. 5 g/l разтвор на нишесте.
Смесват се 5 g от нишестето с около 500 ml вода. Загрява се до кипене, като непрекъснато се разбърква и се вари 10 min. Добавя се 200 g натриев хлорид. Когато се охлади, се долива до един литър.
3.8. Наситен разтвор на натриев борат (Na2B4O710H2O), или около 55 g/l при 20 градуса С.
4. Апаратура
4.1. Уред за парова дестилация, състоящ се от:
• паров генератор; парата трябва да е освободена от въглеродния диоксид;
• колба с тръбичка за пара;
• дестилационна колона;
• хладник.
Това оборудване трябва да се подложи на следните три теста:
а) поставят се 20 ml кипяща вода в колбата; събират се 250 ml от дестилата и към него се добавят 0,1 ml от 0,1 М разтвор на натриев хидроксид (т. 3.2) и две капки разтвор на фенолфталейн (т. 3.3); розовото оцветяване следва да остане стабилно минимум 10 s (т.е. парата да е свободна от въглероден диоксид);
б) поставят се 20 ml от 0,1 М разтвор на оцетна киселина в колбата; събират се 250 ml от дестилата; титрува се с 0,1 М разтвор на натриев хидроксид (т. 3.2). Използваният обем трябва да е минимум 19,9 ml (т.е. поне 99,5% от оцетната киселина да е влязла с парата);
в) поставя се 20 ml от 1 М разтвор на млечната киселина в колбата; събират се 250 ml от дестилата и киселината се титрува с 0,1 М разтвор на натриев хидроксид (т. 3.2). Обемът на добавения разтвор на натриев хидроксид трябва да бъде по-малък или равен на 1,0 ml (т.е. не повече от 0,5 % от дестилираната млечна киселина).
Всяко оборудване или процедура, която успешно премине през тези тестове, отговаря на изискванията на официалните международни апаратури или процедури.
4.2. Водна помпа.
4.3. Вакуумколба.
5. Начин на работа
5.1. Подготовка на пробата - отстраняване на въглеродния диоксид.
Във вакуумколбата се поставят 50 ml от виното; вакуумира се с водната помпа за 1-2 min, като непрекъснато се разклаща.
5.2. Дестилация с водна пара: в колба се поставят 20 ml вино, освободено от въглероден диоксид, както е описано в т. 5.1. Добавят се около 0,5 g винена киселина (т. 3.1). Събират се минимум 250 ml от дестилата.
5.3. Титруване: титрува се с 0,1 М разтвор на натриев хидроксид (т. 3.2), като се използват две капки фенолфталейн (т. 3.3) за индикатор-n, ml (използваният обем натриев хидроксид).
Добавят се четири капки от разредената 1:4 солна киселина (т. 3.4), 2 ml от разтвора на нишесте (т. 3.7) и няколко кристалчета от калиевия йодид (т. 3.6). Свободният серен диоксид се титрува с 0,005 М разтвор на йод (т. 3.5)-n', ml (използваният обем йод).
Добавя се наситен разтвор на натриев борат (3.8) до появяването на розово оцветяване. Свързаният серен диоксид се титрува с 0,005 М разтвор на йод (т. 3.5)-n", ml (използваният обем йод).
6. Изразяване на резултатите
6.1. Начин на изчисляване
Летливата киселинност, изразена в милиеквивалента на литър, закръглена до първия десетичен знак, се изчислява по формулата:
А = 5(n-0,1n'-0,05n").
Летливата киселинност, изразена в грамове оцетна киселина на литър и закръглена до втория десетичен знак, се определя по формулата:
0,300(n-0,1n'-0,05n").
6.2.Повторяемост (r)
r = 0,7 me/l;
r = 0,04 g оцетна киселина/l.
6.3. Възпроизводимост (R)
R = 1,3 me/l;
R = 0,08 g оцетна киселина/l.
6.4. Вино с добавена сорбинова киселина
Когато 96 % от сорбиновата киселина е дестилирана и е получен дестилат с обем 250 ml, нейната киселинност се изважда от летливата киселинност, като се има предвид, че 100 mg сорбинова киселина отговарят на киселинност 0,89 me или 0,053 g оцетна киселина, и като се знае съдържанието на сорбиновата киселина, в mg/l.
7. Определяне на салициловата киселина, постъпила в дестилата от летливата киселинност
7.1. Принцип
След определянето на летливата киселинност и направената корекция за серния диоксид присъствието на салициловата киселина се отчита след подкисляване чрез появата на виолетово оцветяване, с добавяне на фери сол.
Определянето на увлечената в дестилата салицилова киселина заедно с летливата киселинност се осъществява във втори дестилат със същия обем както при определяне на летливата киселинност. В този дестилат салициловата киселина се определя колориметрично. Тя се изважда от летливата киселинност.
7.2. Реактиви
7.2.1. Солна киселина (HCl) (20 градуса C = 1,18 до 1,19 g/l)
7.2.2. 0,1 М разтвор на натриев тиосулфат (Na2S2O3.5H2O).
7.2.3. 10 %-ен разтвор (m/v) на железен (III) амониев сулфат [Fe2(SO4)3.(NH4)2SO4.24H2O].
7.2.4. 0,01 М разтвор на натриев салицилат. Разтворът съдържа 1,60 g/l натриев салицилат (NaC7H5О3).
7.3. Начин на работа
7.3.1. Определяне на салицилова киселина, увлечена в дестилата от летливите киселини.
Веднага след определянето на летливата киселинност и направената корекция за свободен и свързан серен диоксид в конична колба се поставят 0,5 ml солна киселина (т. 7.2.1), 3 ml от разтвора на железен (III) амониев тиосулфат (т. 7.2.2) и 1 ml от разтвора на железен (III) амониев сулфат (т. 7.2.3). При наличие на салицилова киселина се появява виолетово оцветяване.
7.3.2. Определяне на салицилова киселина
В мерителни колби се отчита обемът на дестилата до марката. Колбата се изпразва и се измива. Поставя се нова тест-проба от 20 ml вино на парна дестилация и се събира дестилатът в коничната колба до марката. Добавят се 0,3 ml чиста солна киселина (т. 7.2.1) и един милилитър от разтвора на железен (III) амониев сулфат (т. 7.2.3). Съдържанието на колбата се оцветява във виолетово.
В конична колба, идентична с тази, която е маркирана, се поставя дестилирана вода до същото ниво както дестилата. Добавят се 0,3 ml чиста солна киселина (т. 7.2.1) и един милилитър от разтвора на железен (III) амониев сулфат (т. 7.2.3). Титрува се от бюретата с 0,01 М разтвор на натриев салицилат (т. 7.2.4) до появата на виолетово оцветяване със същата интензивност както в коничната колба с винения дестилат-n''', ml (обемът на използвания натриев салицилат от бюретата).
7.4. Корекция на летливата киселинност
Извaжда се обемът 0,1n''', ml от обема n, ml 0,1 М разтвор на натриев хидроксид, използван за титруване на киселинността на дестилата, по време на определянето на летливата киселинност.
15. Определяне на постоянна киселинност
1. Принцип на метода
Постоянната киселинност е разликата между общата киселинност и летливата киселинност.
2. Изразяване на резултатите
Постоянната киселинност се изчислява във:
- милиеквиваленти на литър;
- грамове винена киселина на литър.
16. Определяне на винена киселина
1. Принцип на метода
1.1. Сравнителен метод
Винената киселина се утаява под формата на калциев рацемат и се определя тегловно. Определянето може да се извърши и обемно. Условията за утаяване (рН, общ използван обем, концентрация на утаяващите йони) са такива, че утаяването на калциевия рацемат се завършва напълно, докато калциевият D (-) тартарат остава в разтвора.
Когато виното съдържа метавинена киселина, която прави утаяването на калциевия рацемат непълно, тя предварително се хидролизира.
1.2. Обикновен метод
Винената киселина, разделена посредством йонообменна колона, се определя колориметрично в елюата чрез измерване на червения цвят, който се образува вследствие взаимодействието с ванадиевата киселина. Елюатът съдържа също така и млечна и ябълчна киселина, които не влияят върху резултата.
2. Сравнителен метод
2.1. Тегловен метод
2.1.1. Реактиви
2.1.1.1. Разтвор на калциев ацетат, съдържащ 10 g/l Ca:
Калциев карбонат (СаСО3)-25 g;
Ледена оцетна киселина (СН3СООН) (20 °C=1,05g/ml)-40 ml;
Вода-до един литър.
2.1.1.2. Калциев тартарат, кристален-(СаС4О6Н4.4Н2О):
В бехерова чаша от 400 ml се поставят 20 ml от разтвора на L (+) винена киселина с концентрация 5 g/l. Добавят се 20 ml от разтвора на D (-) амониевия тартарат с концентрация 6,126 g/l и 6 ml от разтвора на калциевия ацетат, което е 10 g калций на литър (т. 2.1.1.1).
Оставя се да престои 2 h, докато се утаи. Утайката се събира върху стъклен филтър с порьозност № 4 и се изплаква три пъти с около 30 ml дестилирана вода. Изсушава се до постоянно тегло в сушилня при 70 °С. Като се използват количествата посочени реактиви, се получават около 340 mg кристален калциев тартарат. Съхраняват се в затворена бутилка.
2.1.1.3. Разтвор за утаяване (рН 4,75):
• D (-) винена киселина - 122 mg;
• 25 % (v/v)разтвор на амониев хидроксид (20 градуса C = 0,97 g/ml) - 0,3 ml;
• разтвор на калциев ацетат (10 g/l калций) - 8,8 ml;
• вода -до 1000 ml.
Разтварят се D (-) винена киселина и се добавя амониевият хидроксид; обемът се довежда до около 900 ml; добавя се 8,8 ml от разтвора на калциевия ацетат (т. 2.1.1.1), след смесване рН се довежда до 4,75 с оцетна киселина и се долива до един литър.
Тъй като калциевият тартарат е слабо разтворим в този разтвор, се добавя 5 mg/литър калциев тартарат, разбърква се 12 h и се филтрира.
2.1.2. Начин на работа
2.1.2.1. Вино без добавена метавинена киселина
В колба с бъркалка с обем 600 ml се поставят 500 ml от разтвора за утаяване и 10 ml от виното. Смесват се и се започва утаяване чрез триене със стъклена бъркалка по стените на съда. Оставя се да се утаи 12 h (една нощ).
Течността се филтрира и се извършва утаяване върху претеглен стъклен филтър с порьозност № 4, закрепен върху чиста вакуумколба. Съдът, в който е извършено утаяването на филтрата, се изплаква с цел прехвърляне на цялата утайка. Изсушава се до постоянно тегло в сушилня при 70 градуса С. Претегля се полученият кристален калциев тартарат (СаС4О6Н4.4Н2О)-р.
2.1.2.2. Вино, към което е добавена метавинена киселина
Когато се анализира вино, към което е била добавена метавинена киселина или се подозира добавянето на такава, се процедира, като първоначално се хидролизира тази киселина, както следва: в конична колба с обем 50 ml се поставят 10 ml от виното и 0,4 ml ледена оцетна киселина (СН3СООН, 20 градуса C = 1,05 g/ml). Към колбата се свързва обратен хладник и се нагрява до кипене 30 min. Охлажда се и след това разтворът се прехвърля от коничната колба в цилиндрична колба с бъркалка с обем 600 ml. Колбата се изплаква двукратно, като се използват 5 ml вода всеки път и след това се продължава, както е описано в т. 2.1.2.1. Метавинената киселина се изчислява и се включва като винена киселина в крайния резултат.
2.1.3. Изразяване на резултатите
Една молекула калциев тартарат съответства на половин молекула L (+) винена киселина във виното.
Количеството на винената киселина на литър вино, изразено в милиеквиваленти, е равно на 384,5р. Закръглява се до първия десетичен знак.
Количеството винена киселина на литър вино, изразено в грамове винена киселина, е равно на 28,84•р. Закръглява се до първия десетичен знак.
Количеството винена киселина на литър вино, изразено в грамове калиев тартарат, е равно на 36,15•р. Закръглява се до първия десетичен знак.
2.2. Сравнителен обемен анализ
2.2.1. Реактиви:
2.2.1.1. Солна киселина (HCl) (1:5 v/v) (20 градуса C = 1,18 до 1,19 g/ml).
2.2.1.2. Разтвор на EDTA, 0,05 М:
• EDTA (етилендиамин тетраоцетна киселина, динатриева сол C10H14N2O8Na2.2H2O) - 18,61 g;
• дестилирана вода - до 1000 ml.
2.2.1.3. Разтвор на натриев хидроксид, 40 % (m/v):
• натриев хидроксид (NaOH) - 40 g;
• дестилирана вода - до 100 ml.
2.2.1.4. Комплексометричен индикатор: 1 % (m/m)
2-хидрокси-1-(2-хидрокси-4-сулфо-1-нафтилазо)- 3-нафтоинова киселина (C21H14N2O7S.3H2O) - един грам;
безводен натриев сулфат (Na2SO4) - 100 g.
2.2.2. Начин на работа
След претегляне се поставя стъкленият филтър G 4, съдържащ утайката от калциев тартарат на вакуум-колбата и утайката се разтваря в 10 ml разредена солна киселина (т. 2.2.1.1). Филтърът се промива с 50 ml дестилирана вода.
Добавят се 5 ml 40 % разтвор на натриев хидроксид (т. 2.2.1.3) и около 30 mg от индикатора (т. 2.2.1.4). Титрува се с 0,05 М EDTA (т. 2.2.1.2)-n, ml.
2.2.3. Изразяване на резултатите
Количеството винена киселина на литър вино, изразено в милиеквиваленти, е равно на 5n. Закръглява се до първия десетичен знак.
Количеството винена киселина на литър вино, изразен в грамове винена киселина, е равно на 0,375n. Закръглява се до първия десетичен знак.
Количеството винена киселина на литър вино, изразено в грамове калиев тартарат, е равно на 0,470n. Закръглява се до първия десетичен знак.
3. Обикновен метод
3.1. Реактиви
3.1.1. За предварителна обработка на виното
3.1.1.1.Разредена 30 %-на (v/v) оцетна киселина (CH3COOH; 20 градуса C = 1,05 g/ml).
3.1.1.2. Силно основна йонообменна смола (т.е. анионообменна смола от Merck 20-50 mesh, основност III) в ацетатна форма. Приготвя се суспензия на йонообменната смола (около 100 g) в 200 ml 30 % оцетна киселина (т. 3.1.1.1). Престоява за 24 h преди употреба. Йонообменната смола се съхранява в 30 % оцетна киселина за по-късни анализи.
3.1.1.3.Разредена 0,5%-на (v/v) оцетна киселина, (CH3COOH; 20 градуса C = 1,05 g/ml).
3.1.1.4. 0,5 М разтвор на натриев сулфат 7,1 g на 100 ml:
Разтварят се 71 g безводен натриев сулфат (Na2SO4) в дестилирана вода и се долива до 1000 ml.
3.1.2. За определяне на винена киселина
3.1.2.1. 27 %-ен (m/v) разтвор на натриев ацетат (NaCH3COО):
Разтварят се 270 g анхидрид на натриевия ацетат (NaCH3COО) в дестилирана вода и се долива до 1000 ml.
3.1.2.2. Ванадиев реактив:
Разтварят се 10 g амониев мета-ванадат (NH4VO3) в 150 ml 1 М разтвор на натриев хидроксид (т. 3.1.2.10). Разтворът се прехвърля в колба с обем 500 ml и се добавят 200 ml 27 %-ен разтвор на натриев ацетат (т. 3.1.2.1). Долива се до 500 ml с дестилирана вода.
3.1.2.3. 1 М разтвор на H2SO4
3.1.2.4. 0,5 М разтвор на H2SO4
3.1.2.5. 0,05 М разтвор на H2SO4
3.1.2.6. 0,05 М разтвор на перйодна киселина:
В колба с обем 1000 ml се поставят 10,696 g от натриевия перйодат (NaIO4) и 50 ml от 0,05 М сярна киселина (т. 3.1.2.4) и се долива до 1000 ml с дестилирана вода.
3.1.2.7. 10 % (m/v) разтвор на глицерол:
В колба с обем 100 ml се поставят 10 g глицерол (C3H8O3) и се долива до 100 ml с дестилирана вода.
3.1.2.8. Разтвор на натриев сулфат 7,1 g на 100 ml (вж. т. 3.1.1.4).
3.1.2.9. Разтвор на винена киселина, един грам на литър:
В колба с обем 500 ml се поставят 0,5 g винена киселина и 6,66 ml от 1 М разтвор на натриевия хидроксид (т. 3.1.2.10) и се долива до 500 ml със 7,1 % разтвор на натриев сулфат (т. 3.1.1.4).
3.1.2.10. 1 М разтвор на натриев хидроксид (NaOH).
3.2. Апаратура
3.2.1. Стъклена колона с вътрешен диаметър 10-11 mm и дължина около 300 mm, снабдена със суха тапа.
3.2.2. Спектрофотометър, позволяващ измерване на абсорбцията при дължина на вълната 490 nm, с клетки с оптичен път 10 mm.
3.3. Начин на работа
3.3.1. Подготовка на йонообменната колона
На колоната (т. 3.2.1) се поставя тампон от стъклен памук. Тампонът се намокря с дестилирана вода. В колоната се изсипват 10 ml от суспензията на йонообменната смола в ацетатна форма (т. 3.1.1.2). Оставя се да се утаи. Поставя се тампон от стъклен памук върху горната повърхност на йонообменната смола, за да не се нарушава повърхността й по време на промиването. Йонообменната смола се използва само еднократно.
3.3.2.Отделяне на органичните киселини
Тампонът се маха и се дава възможност на разтвора на оцетната киселина да премине през колоната до около 2 до 3 mm от горния край на тампона от стъклен памук.
Добавят се 10 ml 0,5 % разтвор от оцетна киселина (т. 3.1.1.3) и се оставя течността да се източи до същото ниво, както при предишното действие. Измиването се повтаря още 4 пъти.
След последното измиване кранът се затваря и се прехвърлят 10 ml от виното или мъстта върху йонообменната смола. Течността се оставя да изтича на капки, средно по една капка за секунда. Спира се изтичането точно над йонообменната смола. Добавят се още 10 ml от 0,5 %-ния разтвор от оцетна киселина (т. 3.1.1.3) към колоната и се оставя да се оттича със същата скорост както при предишния опит, а след това се промива 7 пъти по същия начин, като всеки път се използват по 10 ml вода. По време на последното промиване кранът се затваря веднага щом нивото на течността е точно над памучния тампон.
Абсорбираните в йонообменната смола киселини се елюират със 7,1 %-ен разтвор на натриев сулфат (т. 3.1.1.4). Елюатът се събира в мерителна колба от 100 ml до марката за калибриране.
3.3.3. Определяне на винена киселина
3.3.3.1. Вина без добавена метавинена киселина.
Поставят се по 20 ml oт елюата в две конични колби, условно обозначени с "а" и "b".
Колба "a" за определянето, а колба "b", в която винената киселина е била разложена от перйодната киселина-за контрола.
В колба "a" се поставя:
- 2 ml 1 М разтвор на H2SO4 (т. 3.1.2.3),
- 5 ml 0,05 М разтвор на сярна киселина H2SO4 (т. 3.1.2.5),
- Един ml 10 %-ен глицерол (т. 3.1.2.7).
В колба "b" се поставя:
- 2 ml 1 M H2SO4 (т. 3.1.2.3).
- 5 ml 0,05 М разтвор на перйодна киселина (т. 3.1.2.6).
Изчаква се 15 min и се добавя: eдин милилитър 10%-ен глицерол (т. 3.1.2.7), който да разложи излишната перйодна киселина. Изчаква се 2 минути. След това с разбъркване се добавят с пипета по 5 ml от ванадиевия реагент (т. 3.1.2.2) първо в колба "b" и веднага след това в колба "а". Веднага хронометърът се стартира и съдържанието на колби "а" и "b" се излива в клетките на спектрофотометъра. След 90 s се oтчита абсорбцията при 490 nm дължина на вълната на течността в колба "а" (за определяне) спрямо течността в колба "b" (контрола).
Разтвори, съдържащи високи нива на винена киселина, които дават абсорбции над горната част на стандарта, се разреждат със 7,1 %-ен разтвор на натриев сулфат и след това се измерват по описания начин.
3.3.3.2. Вина, в които е била добавена метавинена киселина
При анализирането на вина, към които е била добавена метавинена киселина или се предполага, че е била добавена, тази киселина най-напред се хидролизира съгласно описания референтен метод. След охлаждане съдържанието на коничните колби се излива върху горната част на йонообменната колона, последвано от двукратно измиване с 5 ml вода. Продължава се по описания начин. Метавинената киселина се включва като винена киселина в крайния резултат.
3.3.4. Изготвяне на калибрационната крива.
В градуирани 100 ml колби с пипета се поставят по 10, 20, 30, 40 и 50 ml от разтвор на винена киселина с концентрация един грам на литър (т. 3.1.2.9) и се допълват до 100 ml със 7,1 %-ен разтвор на натриев сулфат (т. 3.1.1.4). Концентрациите на тези разтвори отговарят на винени елюати, съдържащи 1, 2, 3, 4 и 5 g винена киселина/l.
В две конични колби "а" и "b" се поставят по 20 ml от тези разтвори и се продължава по същия начин както за винения елюат.
Начертава се графиката на абсорбциите на тези разтвори като функция от концентрацията на съдържащата се винена киселина в тях, леко изкривяваща се надолу към началната точка. Ако е необходимо, се начертава по-внимателно тази част от кривата, като се използват разтвори с точно известни концентрации, чието съдържание е под един грам на литър.
3.3.5. Изразяване на резултатите
По измерената абсорбция на елюата от калибрационната крива се отчита концентрацията на винената киселина във виното, в грамове на литър. Резултатът се закръглява до първия десетичен знак.
17. Определяне на лимонена киселина
1. Принцип на метода
Лимонената киселина се трансформира в оксалоацетат и ацетат в реакция, катализирана от цитратлиаза (CL):
| CL | ||
| Цитрат | <---> | оксалоацетат + ацетат |
В присъствието на малатдехидрогеназа (MDH) и лактатдехидрогеназа (LDH) оксалоацетатът и неговото декарбоксилирано производно (пируват) се редуцират до L-малат и L-лактат чрез редуциран никотинамид аденин динуклеотид (NADH):
| MDH | ||
| Оксалоацетат +NADH + H+ | <----> | L-малат + NAD+ |
| LDH | ||
| Пируват + NADH + H+ | <----> | L-лактат + NAD+ |
Количеството на NADH, окислено до NAD+ в тези реакции е пропорционално на количеството на присъстващия цитрат. Окислението на NADH се измерва чрез намаляването на абсорбцията при 340 nm дължина на вълната.
2. Реактиви
2.1. Буферен разтвор с рH 7,8
(0,51 М разтвор на глицилглицин; рH = 7,8; Zn2+:0,6•10-3М):
Разтварят се 7,13 g глицилглицин в около 70 ml двойно дестилирана вода. Довежда се рH до 7,8 с приблизително 13 ml 5 М разтвор на натриев хидроксид. Добавят се 10 ml разтвор от цинков хлорид (ZnCl2) (80 mg в 100 ml вода) и се допълва с двойно дестилирана вода. Разтворът остава траен 4 седмици при 4 градуса С
2.2. Разтвор на редуциран никотинамид аденин динуклеотид (NADH) (приблизително 6•10-3 М): Разтварят се 30 mg NADH и 60 mg NaHCO3 в 6 ml двойно дестилирана вода.
2.3. Разтвор на малатдехидрогеназа /лактатдехидрогеназа (MDH/LDH) (0,5 mg MDH/ml; 2,5 mg LDH/ml): смесват се 0,1 ml MDH (5 mg. MDH/ml), 0,4 ml разтвор на амониев сулфат (3,2 М) и 0,5 ml LDH (5 mg/ml). Този разтвор остава траен най-малко една седмица при 4 градуса С.
2.4. Цитратлиаза CL (5 mg протеин на ml). Разтварят се 168 mg лиофилизирана цитратлиаза в един милилитър леденостудена вода. Този разтвор остава траен най-малко една седмица при 4 градуса С и поне 4 седмици, ако е замръзнал.
Препоръчва се преди използване да се провери ензимната активност.
2.5. Поливинилполипиролидон (PVPP)
Забележка. Всички описани реагенти са в наличност в търговската мрежа.
3. Апаратура
3.1. Спектрофотометър, позволяващ измерване при 340 nm, което е дължина на вълната, за максималната абсорбция от NADH.
При липса на такъв спектрофотометър може да се използва и спектрофотометър с непрекъснат спектрален източник, позволяващ да се правят измервания при 334 или 365 nm дължина на вълната.
Необходимо е скалите за дължина на вълната и спектрална абсорбция да бъдат проверени, тъй като има измервания на абсолютната абсорбция (не се използват калибрационни криви, а стандартизацията се извършва чрез коефициента на екстинкция на NADH).
3.2. Стъклени кювети с дължина на оптичния път 1 cm или кювети за еднократна употреба.
3.3. Микропипети за отмерване от 0,02 до 2 ml.
4. Подготовка на пробата
Съдържанието на цитрат обикновено се определя директно във виното без предварително премахване на оцветяването и без разреждане, при условие че съдържанието на лимонената киселина е по-малко от 400 mg/l. Ако е повече, виното се разрежда, докато концентрацията на цитрата достигне стойности между 20 и 400 mg/l (между 5 и 80 g цитрат в тест-пробата).
Препоръчва се предварително третиране на червени вина с PVPP , които са богати на фенолни съединения. Третирането се извършва по следния начин:
Приготвя се суспензия от около 0,2 g PVPP във вода и се оставя да престои 15 min. След това се филтрира през нагънат филтър. В мерителна колба с обем 50 ml се поставят 10 ml от виното и с помощта на шпатула се добавя влажният PVPP, отделен от филтъра. Сместа се разклаща за 2-3 min. Филтрува се.
5. Начин на работа
Спектрофотометърът се настройва на дължина на вълната 340 nm. Абсорбцията се измерва с кювети 1 cm. Оптическата нула на апарата се определя спрямо въздух. В кюветите се поставят:
| Сравнителна | Аналитична | |
| проба | проба | |
| Разтвор 2.1 | 1,00 ml | 1,00 ml |
| Разтвор 2.2 | 0,10 ml | 0,10 ml |
| Проба за измерване | - | 0,20 ml |
| Двойно дестилирана | 2,00 ml | 1,80 ml |
| вода | ||
| Разтвор 2.3 | 0,02 ml | 0,02 ml |
| Смесват се и след около 5 min | ||
| се отчита абсорбцията на раз- | ||
| творите в референтната клетка и клетката с пробите (А1). | ||
| Добавят се: | ||
| Разтвор 2.4 | 0,02 ml | 0,02 ml |
Смесват се. Изчаква се около 5 min, когато реакцията е завършила, и се отчитат абсорбциите на разтворите в контролата и пробата (А2).
Пресмятат се разликите в абсорбциите (А1-А2) за контролата и пробата.
Пресмятат се разликите в абсорбциите на контролите и пробите:
A = AD-AТ
Забележка. Времето, необходимо за приключване на ензимната активност, може да варира между поредица експерименти. Описаната стойност е само със справочен характер и се препоръчва тя да се определя за всяка поредица.
6. Изразяване на резултатите
Концентрацията на лимонената киселина се дава в милиграма на литър. Закръглява се до най-близкото цяло число.
6.1. Метод на изчисление
Общата формула за изчисляване на концентрацията е:
| V • PM | ||
| С = A | , където: | |
| e • d • v |
V е обемът на тестовия разтвор в милилитри (тук 3,14 ml);
v - обемът на пробата в милилитри (тук 0,2 ml);
PМ - молекулната маса на веществото, която трябва да бъде определена (тук М=192,1 за анхидрида на лимонената киселина, използвана в примера);
d - оптичният път в сантиметри (тук 1 cm);
- абсорбционният коефициент на NADH при 340 nm;
= 6,3 mmole-1•l•cm-1;
така, че
С = 479A.
Ако пробата е била разредена по време на нейната подготовка, резултатът се умножава по фактора на разреждане.
Забележка.
При 334 nm - C = 488A(= 6,2 mmole-1•l•cm-1);
При 365 nm - C = 887A (= 3,4 mmole-1•l•cm-1).
6.2. Повторяемост (r)
За концентрация на лимонена киселина по-малка от 400 mg/l
r = 14 mg/l.
За концентрация на лимонена киселина по-голяма от 400 mg/l
r = 28 mg/l.
6.3. Възпроизводимост (R)
За концентрация на лимонена киселина по-малка от 400 mg/l
R = 39 mg/l.
За концентрация на лимонена киселина по-голяма от 400 mg/l
R = 65 mg/l.
18. Определяне на млечна киселина
1. Принцип на метода
1.1. Сравнителен метод
В присъствието на никотинамид аденин динуклеотид (NAD) млечната киселина (L-лактат и D-лактат) се окислява в пируват по реакция, катализирана от L-лактат дехидрогеназа (L-LDH) и D-лактат дехидрогеназа (D-LDH).
Равновесието на реакцията е по посока на лактата. Отстраняването на пирувата от реакционната среда измества равновесието на реакцията по посока на образуване на пируват. В присъствие на L-глутамат пируватът се трансформира в L-аланин в резултат на реакция, катализирана от глутамат-пируват трансаминаза (GPT):
| L-LDH | ||
| L-лактат + NAD+ | <----> | пируват + NADH + H+ (1) |
| D-LDH | ||
| D-лактат + NAD+ | <----> | пируват + NADH + H+(2) |
| D-LDH | ||
| пируват + L-глутамат | <----> | L-аланин + -кетоглутарат.(3) |
Образуваното количество NADH се измерва чрез увеличаване на абсорбцията при дължина на вълната 340 nm и е пропорционално на първоначално представеното количество лактат.
Забележки: L-млечната киселина може да бъде определена независимо посредством реакции (1) и (3).
D - млечната киселина може да бъде определена подобно чрез реакции (2) и (3).
1.2. Обикновен метод
Млечната киселина, разделена чрез преминаване през колона с йонообменна смола, се окислява до етанал и се определя колориметрично след реакция с нитропрусид и пиперидин.
2. Сравнителен метод
2.1. Реактиви
2.1.1. Буферен разтвор, рН 10 (глицилглицин, 0,6 mole/l; L-глутамат 0,1 mole/l):
Разтварят се 4,75 g глицилглицин и 0,88 g L-глутаминова киселина в приблизително 50 ml двойно дестилирана вода, рН се довежда до 10 с няколко милилитра 10 М разтвор на натриев хидроксид и се долива до 60 ml с двойно дестилирана вода. Този разтвор остава траен най-малко 12 седмици при +4 градуса С.
2.1.2. Разтвор на никотинамид аденин динуклеотид (NAD) около 40 10-3 М: разтварят се 900 mg NAD в 30 ml двойно дестилирана вода. Този разтвор остава стабилен най-малко 4 седмици при +4 градуса С.
2.1.3. Глутамат-пируват трансаминаза (GPT)-суспензия, 20 mg/ml. Суспензията остава стабилна най-малко една година при +4 градуса С.
2.1.4. L-лактат дехидрогеназа (L-LDH)-суспензия, 5 mg/ml. Тази суспензия остава трайна най-малко една година при 4 градуса С.
2.1.5. D-лактат дехидрогеназа (D-LDH)-суспензия, 5 mg/ml. Тази суспензия остава трайна най-малко една година при 4 градуса С.
Препоръчително е преди определянето да бъде проверена ензимната активност.
Забележка. Всички реактиви могат да се намерят в търговската мрежа.
2.2. Апаратура
2.2.1. Спектрофотометър, позволяващ измерване при 340 nm дължина на вълната, при която абсорбцията от NADH е максимална. Ако такъв не е налице, използва се прекъснат спектрален източник, позволяващ измерване при 334 или 365 nm.
Тъй като методът включва измерване на абсолютната абсорбция (т.е. не се използват калибровъчни криви, а определянето става чрез отчитане на коефициента на екстинция на NADH), то скалите, отчитащи дължината на вълната и абсорбцията, трябва да бъдат проверени.
2.2.2. Стъклени кювети с оптичен път 1 cm или кювети за еднократна употреба.
2.2.3. Микропипети за отмерване на обеми от 0,02 до 2 ml.
2.3. Подготовка на пробата
Предварителна бележка: нито една част от стъкленото оборудване, която влиза в контакт с реакционната смес, не трябва да бъде докосвана с пръсти, тъй като с това може да въведе L-млечна киселина и това да изкриви резултатите.
Обикновено лактатът се определя директно въввиното, без предварително отстраняване на оцветяването и без разреждане, така че концентрацията да бъде по-малка от 100 mg/l. Въпреки това, ако концентрацията на млечната киселина е в порядъка между:
100 mg/l и 1 g/l-се разрежда с двойно дестилирана вода 1/10;
1 g/l и 2,5 g/l-се разрежда с двойно дестилирана вода 1/25;
2,5 g/l и 5 g/l се разрежда с двойно дестилирана вода 1/50.
2.4. Начин на работа
2.4.1. Определяне на общо количество млечна киселина
Буферният разтвор трябва да бъде при температура между 20-25 градуса С преди да се пристъпи към измерване.
Спектрофотометърът се настройва на дължина на вълната 340 nm. Измерванията се извършват с кювети с дължина на оптичния път 1 cm. Нулата на апарата се определя по отношение на въздух или вода. В кюветите се поставят:
| Сравнителна | Аналитична | |
| проба | проба | |
| Разтвор 2.1.1 | 1,00 ml | 1,00 ml |
| Разтвор 2.1.2 | 0,20 ml | 0,20 ml |
| Двойно дестилирана | 1,00 ml | 0,80 ml |
| вода | ||
| Суспензия 2.1.3 | 0,02 ml | 0,02 ml |
| Проба за анализ | - | 0,20 ml |
С помощта на стъклена бъркалка или бъркалка от синтетичен материал с равен край се смесват; след около 5 min се измерват абсорбциите им (А1) и се добавят:
| Разтвор 2.1.4 | 0,02 ml | 0,02 ml |
| Разтвор 2.1.5 | 0,05 ml | 0,05 ml |
Хомогенизира се и се изчаква, докато реакцията приключи (около 30 min). Отново се измерват абсорбциите на разтворите в сравнителната и аналитичната проба (А2)
Изчисляват се разликите в абсорбциите (А2-А1) в сравнителните кювети и тези на пробите. Определя се разликата от абсорбциите между разликите на абсорбциите на контролите и пробите A = AD-AT.
2.4.2. Определяне на L-млечна и D-млечна киселина
Определянето на тези киселини може да бъде извършено независимо чрез прилагане на процедурата за общо количество млечна киселина до етапа на определяне на А1 и след това да се продължи, както следва:
Добавят се 0,02 ml от разтвор по т. 2.1.4, хомогенизира се и се изчаква, докато реакцията приключи (около 20 min); измерва се абсорбцията на разтворите в кюветите на контролата и пробата (А2); добавя се 0,05 ml от разтвор 2.1.5, хомогенизира се и се изчаква, докато реакцията приключи (около 30 min); измерва се абсорбцията на разтворите в кюветите на контролата и пробата (А3). Изчисляват се разликите в абсорбциите между (А2-А1) за L-млечната киселина и (А3-А2) за D-млечната киселина в контролната кювета и тези на пробите. Определя се разликата от абсорбциите между разликите от абсорбциите на контролите и разликите от абсорбциите между пробите.
A = AD-AT
Забележка. Времето, необходимо за преустановяване на ензимната активност, може да варира за различните проби. Получената величина е дадена само като упътване и се препоръчва да бъде определяна за всяка група от проби. Когато се определя само L-млечна киселина, времето за инкубация може да бъде редуцирано до 10 min.
2.5. Изразяване на резултатите
Концентрацията на млечната киселина се дава в грамове на литър. Закръглява се до първия десетичен знак.
2.5.1. Метод на изчисление
Основната формула за изчисляване на концентрацията в g/l е:
| V • PM | ||
| С = A | , където: | |
| 1000 • d • v |
V e обемът на анализирания разтвор в милилитри (V = 2,24 ml за L - млечната киселина, V = 2,29 ml за D - млечната киселина и за общото количество млечна киселина);
v - обемът на пробата в милилитри (в случая 0,2 ml);
РМ - молекулната маса на веществото, което се анализира (в случая за DL - млечната киселина М = 90,08);
d - оптичният път в сантиметри (в случая 1 cm);
e - абсорбционният коефициент на NADH при 340 nm;
e = 6,3 (mmole-1.l.cm-1)
2.5.1.1. Общо количество млечна киселина и D-млечна киселина
С = 0,164А
Ако пробата е разредена по време на нейната подготовка, резултатът се умножава по фактора на разреждането.
Забележка.
Измерване при 334 nm: С = 0,167А (= 6,2 mmole-1.l.cm-1);
Измерване при 365 nm: С = 0,303А (= 3,4 mmole-1.l.cm-1).
2.5.1.2. L-млечна киселина
С = 0,160А
Ако пробата е разредена по време на нейната подготовка, резултатът се умножава по фактора на разреждането.
Забележка.
Измерване при 334 nm: С = 0,163А ( = 6,2 mmole-1.l.cm-1);
Измерване при 365 nm: С = 0,297А ( = 3,4 mmole-1.l.cm-1).
2.5.2. Повторяемост (r)
r = 0,02 + 0,07xi,g/l, където:
xi е концентрацията на млечната киселина в пробата, g/l.
2.5.3. Възпроизводимост (R)
R = 0,05 + 0,125xi, g/l, където:
xi-е концентрацията на млечната киселина в пробата, g/l.
3. Обикновен метод
3.1.1. За предварителна обработка на виното
Вж. метода "16. Определяне на винена киселина", обикновен метод, т. 3.1.1.
3.1.2. За определяне на млечна киселина
3.1.2.1. 0,1 М разтвор на цериев (IV) сулфат в 0,35 М сярна киселина:
Охлаждайки се разтварят 40,431 g от цериевия (IV) сулфат [Ce(SO4)2.4H2O] в 350 ml от внимателно премерен 1 М разтвор на сярна киселина (т. 3.1.2.4). Долива се до 1000 ml с дестилирана вода.
3.1.2.2. 2,5 М разтвор на натриев хидроксид (NaOH)
3.1.2.3. Разтвор на натриев ацетат-270 g на литър [приготвен от изсушен натриев ацетат (NaCH3COO)]
3.1.2.4. 1 М сярна киселина (H2SO4)
3.1.2.5. 2 % (m/v) разтвор на натриев нитро фероцианид [Na2(Fe(CN)5NO).2H2O]
Съхранява се на тъмно в добре затворена бутилка. Разтворът не се задържа по-дълго от 8 дни.
3.1.2.6. 10 % (v/v) разтвор на пиперидин (C5H11N)
3.1.2.7. 1 М разтвор на млечна киселина: 100 ml млечна киселина (C3H6O3) се разреждат в 400 ml вода. Този разтвор се поставя в капсула и се нагрява над кипяща водна баня 4 h, като обемът периодично се допълва с дестилирана вода. След охлаждане се допълва до един литър. Млечната киселина се титрува в 10 ml от този разтвор с едномоларен разтвор на натриев хидроксид (т. 3.1.2.8). Разтворът се довежда до едномоларна млечна киселина (90 g).
3.1.2.8. 1 М разтвор на натриев хидроксид (NaOH).
3.2. Апаратура
3.2.1. Стъклена колона с вътрешен диаметър 10-11 mm и дължина приблизително 300 mm с кран за регулиране на потока.
3.2.2. Водна баня за поддържане на постоянна температура от 65 градуса С.
3.2.3. Спектрофотометър, позволяващ да бъдат направени измервания на абсорбцията при 570 nm дължина на вълната, и кювети с оптичен път един сантиметър.
3.3. Начин на работа
3.3.1. Подготовка на йонообменната колона.
Вж. метод "16. Определяне на винена киселина" - обикновен метод т. 3.3.1.
3.3.2. Определяне на органични киселини
Вж. метод "16. Определяне на винена киселина" - обикновен метод, т. 3.3.2.
3.3.3. Определяне на млечна киселина. В 50-милилитрова стъклена епруветка с шлифована запушалка се поставят 10 ml от елюата и се добавят 10 ml от разтвор на цериевия сулфат (т. 3.1.2.1). Разбърква се: поставя се епруветката във водна баня с постоянна температура 65 градуса С за 10 min. Във времето, когато епруветката се потопява във водната баня, стъклената запушалка се маха за няколко секунди за компенсиране на повишеното налягане, дължащо се на разширението. След това запушалката отново се поставя, така че добре да се запуши епруветката и да се избегне загуба на образувания етанал (ацеталдехид). Епруветката се изважда от водната баня и се охлажда под течаща вода до около 20 градуса С. Добавят се 5 ml от 2,5 М разтвор на натриев хидроксид (т. 3.1.2.2), разбърква се и се филтрува.
Вземат се 15 ml от филтрата и се преливат в епруветка от 50 ml с шлифована запушалка, в която вече има хомогенна смес от 5 ml 27 %-ен разтвор на натриев ацетат (т. 3.1.2.3) и 2 ml 1 М сярна киселина (т. 3.1.2.4). Добавят се 5 ml от разтвора на натриев нитрофероцианид [Na2(Fe(CN)5NO).2H2O] (т. 3.1.2.5), смесват се и след това се добавят 5 ml от разтвора на пиперидина (т. 3.1.2.6), енергично се разбърква и веднага се внася този разтвор в кюветата на спектрофотометъра. Полученото оцветяване варира от зелено до виолетово и се измерва при 570 nm дължина на вълната спрямо въздуха (няма кювета на оптичния път). То нараства и след това рязко намалява.
Измененията на абсорбцията се проследяват и се избира максималната стойност като определяща.
Ако елюатът е твърде богат на млечна киселина и абсорбцията е твърде висока, елюатът се разрежда със 7,1 %-ен разтвор на натриев сулфат (т. 3.1.1) и се продължава с измервания на разредения разтвор.
3.3.4. Построяване на калибрационната крива.
Отпипетирват се 10 ml от едномоларния разтвор на млечна киселина (т. 3.1.2.7) и 10 ml от титрирания едномоларен разтвор на натриев хидроксид (т. 3.1.2.8) в 1000 ml мерителна колба и се допълва до марката със 7,1 %-ен разтвор на натриев сулфат. Вземат се по 5, 10, 15, 20 и 25 ml от този разтвор и се поставят в 100 ml мерителни колби. Допълват се до марката със 7,1 %-ен разтвор на натриев сулфат (т. 3.1.1). Вземат се 10 ml от всеки от получилите се разтвори и се определят техните абсорбции съгласно начина на работа, описан в т. 3.3.3 за елюата. Концентрациите за тези разтвори отговарят на елюати от вино, съдържащи 0,45, 0,9, 1,35, 1,80 и 2,25 g/l млечна киселина. Графиката на абсорбциите на тези разтвори в зависимост от концентрацията на млечна киселина в тях е права линия.
3.4. Изразяване на резултатите
По стойността на измерената абсорбция на елюата от калибрационната крива се намира концентрацията на млечната киселина във виното, в грамове на литър. Закръглява се до първия десетичен знак.
Забележка. Вина, съдържащи повече от 250 mg/l серен диоксид, може да имат и съдържание на етаналсулфонова киселина, която се включва в стойностите, получени за млечната киселина. В този случай резултатът се коригира със стойността, получена от следната допълнителна операция: 15 ml от елюата се смесва в епруветка с шлифована запушалка с 5 ml на 27 %-ен разтвор от натриев ацетат (т. 3.1.2.3) и 2 ml на 0,775М H2SO4 (77,5 ml на едномоларна сярна киселина се допълва до 100 ml с дестилирана вода). След това както при определянето на млечната киселина се добавят 5 ml на 2 %-ен разтвор на [Na2(Fe(CN)5NO).2H2O] (т. 3.1.2.5) и 5 ml на 10 %-ен разтвор на пиперидин (т. 3.1.2.6). След разбъркване се измерва абсорбцията при същите условия, описани за определянето на млечната киселина. Намира се тази абсорбция на калибрационната крива, за да се определи стойността В на млечната киселина, в грамове на литър, дължаща се на етаналсулфоновата киселина. Ако L' е стойността на млечната киселина във виното без корекция в g/l, истинската концентрация L на млечната киселина се определя по формулата: L = L'-0,4B, g/l.
19. Определяне на L - ябълчна киселина
1. Принцип на метода
В присъствието на никотинамид-аденин-динуклеотид (NAD) L-ябълчната киселина се окислява до оксалоацетат в реакция, катализирана от L-малатдехидрогеназа (L-MDH).
Равновесието на реакцията обикновено е изтеглено към малата. Премахването на оксалоацетата от реакционната смес измества равновесието към формирането на оксалоацетат. В присъствието на L-глутамат оксалоацетатът се трансформира в L- аспартат. Реакцията се катализира от глутаматна-оксалацетатна-трансаминаза (GOT).
| L-MDH | ||
| L-малат + NAD+ | <----> | оксалоацетат + NADH + H+ (1) |
| GOT | ||
| Оксалоацетат+L-глутамат | <----> | L-аспартат + -кетоглутарат (2) |
Образуването на NADH, измерено чрез нарастването на абсорбцията при 340 nm дължина на вълната, е пропорционално на първоначално присъстващото количество от L-малата.
2. Реагенти
2.1. Буферен разтвор с рH 10.
(Глицилглицин 0,6 М; L-глутамат 0,1 М): разтварят се 4,75 g от глицилглицин и 0,88 g от L-глутаминова киселина в приблизително 50 ml двойно дестилирана вода; рH 10 достига до 10 с около 4,6 ml от 10М натриев хидроксид и се допълва до 60 ml с двойно дестилирана вода. Този разтвор остава стабилен за най-малко 12 седмици при +4 градуса С.
2.2. Разтвор на никотинамид аденин динуклеотид (NAD), приблизително 47 • 10-3 М-разтварят се 420 mg от NAD в 12 ml двойно дестилирана вода. Този разтвор остава стабилен за най-малко 4 седмици при +4 градуса С.
2.3. Суспензия от глутамат-оксалацетат-трансаминаза (GOT)-2 mg/ml. Суспензията остава стабилна най-малко година при +4 градуса С.
2.4. Разтвор на L-малатна дехидрогеназа (L-MDH) - 5 mg/ml. Този разтвор остава стабилен за най-малко една година при +4 градуса С.
Забележка. Всички описани реагенти се срещат в наличност в търговската мрежа.
3. Апаратура
3.1. Спектрофотометър, позволяващ да се правят измервания при 340 nm, дължината на вълната с максимална абсорбция от NADH. При липса на такъв спектрофотометър може да се използва и спектрофотометър с непрекъснат спектрален източник, позволяващ да се правят измервания при 334 или 365 nm дължина на вълната.
Необходимо е скалите за дължина на вълната и спектралната абсорбция на вълната да бъдат проверени, тъй като има измервания на абсолютната абсорбция (не се използват калибрационни криви, а стандартизацията се извършва чрез коефициента на екстинкция на NADH).
3.2. Стъклени кювети с дължина на оптичния път 1 cm или кювети за еднократна употреба.
3.3. Микропипети за отпипетиране на течности от 0,01 до 2 ml.
4. Подготовка на пробата
Съдържанието на L-малат обикновено се определя директно върху виното без предварително премахване на оцветяването и без разреждане, при условие че съдържанието на лимонената киселина е по-малко от 350 mg/l (измерено при 365 nm). Ако това не е така, виното се разрежда с двойно дестилирана вода, докато концентрацията на L-малат е между 30 и 350 mg/l (т.е. количеството на L-малата е между 3 и 35 g).
Ако концентрацията на малат във виното е по-малка от 30 mg/l, обемът на пробата може да бъде увеличен до един милилитър. В този случай обемът на добавяната вода трябва да бъде намален по такъв начин, че общите обеми в двете кювети да бъдат равни.
5. Начин на работа
Спектрофотометърът се настройва на дължина на вълната 340 nm. Измерването на абсорбцията се извършва с кювети с дължина на оптичния път един сантиметър. Нулата на апарата се определя по отношение на въздух или вода. В кюветите се поставят:
| Сравнителна | Аналитична | |
| проба | проба | |
| Разтвор 2.1 | 1,00 ml | 1,00 ml |
| Разтвор 2.2 | 0,20 ml | 0,20 ml |
| Двойно дестилирана | 1,00 ml | 0,90 ml |
| вода | ||
| Суспензия 2.3 | 0,01 ml | 0,01 ml |
| Проба | - | 0,10 ml |
| Смесват се и се изчаква 3 | ||
| min. Измерват се абсорб- | ||
| циите на контролата и про- | ||
| бата (А1) | ||
| Добавя се: | ||
| Разтвор 2.4 | 0,01 ml | 0,01 ml |
Смесват се, изчаква се (5-10 min), докато реакцията завърши, и се отчитат абсорбциите на контролата и пробата (А2). Изчисляват се разликите в абсорбциите (А2-А1) за контролата и пробата. Изчислява се разликата между абсорбционните разлики за еталонния разтвор и за пробата.
A = AD-AТ
Забележка: Времето, необходимо за завършване на ензимната активност, може да варира между пробите. Получената стойност е само със справочен характер. Препоръчва се тя да се определя за всяка поредица от проби.
6. Изразяване на резултатите
Концентрацията на L-млечната киселина се дава в грамове на литър.Закръглява се до първия десетичен знак.
6.1. Метод на изчисление.
Основната формула за пресмятане концентрацията е:
| V • PM | ||
| С = A | g/l, където: | |
| 1000 • e • d • v |
V е обемът от анализирания разтвор в милилитри (в случая 2,22 ml);
v - обемът на контролата в милилитри (в случая 0,1 ml);
РМ - молекулната маса на анализираната субстанция (в случая за L - ябълчна киселина - 134,09);
d - оптичният път в сантиметри (в случая 1 cm);
е коефициентът на абсорбция на NАDH при 340 nm (e = 6,3 mmole-1 . l. cm-1)
За L-малата:
С = 0,473 A g/l
Ако пробата е била разредена по време на приготвянето й, резултатът се умножава по фактора на разреждане.
Забележка.
Измерване при 334 nm: С = 0,482 A;
Измерване при 365 nm: C = 0,876 A.
6.2. Повторяемост (r)
r = 0,03+0,034xi, където:
xi е концентрацията на ябълчна киселина в пробата, в g/l
6.3. Възпроизводимост (R)
R = 0,05 +0,071xi, където:
xi е концентрацията на ябълчната киселина в пробата, в g/l
20. Определяне на D-ябълчна киселина
(ензимен метод)
1. Принцип
В присъствието на D-малат хидрогеназа (D-MDH) D-ябълчната киселина се окислява от никотинамид аденин динуклеотид (NAD) до оксалоацетат. Образуваният оксалоацетат трансформира в пируват и въглена киселина.
D-малат + NAD+ D-MDH пируват + СО2 + NADH + H+
Количеството на образувалия се NADH е пропорционално на концентрацията на D-ябълчната киселина и се измерва при дължина на вълната 334, 340 или 365 nm.
2. Реактиви
Комбинация за извършване на приблизително 30 анализа:
а) колба 1 с около 30 ml разтвор, състоящ се от буферен разтвор на Hepes [N-(2-хидроксиетил) пиперазин-N'-етансулфонова киселина] pH = 9,0 и стабилизатори;
б) колба 2 с около 210 mg NAD лиофилизат;
в) три колби 3 с D-MDH лиофилизат, около 8U всяка.
Приготвяне на разтворите:
а) съдържанието на колба 1 се използва, без да се разрежда; преди използване температурата на разтвора се довежда до 20-25 градуса C;
б) съдържанието на колба 2 се разрежда с 4 ml двойно дестилирана вода;
в) съдържанието на една от колбите 3 се разрежда с 0,6 ml двойно дестилирана вода; преди използване температурата на разтвора се довежда до 20-25 градуса C.
Устойчивост на разтворите
Съдържанието на колба 1 е стабилно в продължение поне на една година, ако се съхранява при +4 градуса C; разтворът в колба 2 е стабилен в продължение на три седмици, ако се съхранява при +4 градуса C или в продължение на два месеца, ако се съхранява при минус 20 градуса C; разтвор 3 е стабилен в продължение на 5 дни, ако се съхранява при +4 градуса C.
3. Апаратура
3.1. Спектрофотометър, даващ възможност да се правят измервания при дължина на вълната 340 nm, при която поглъщането от NADH е максимално. Ако не се разполага с такъв спектрофотометър, може да се използва спектрофотометър с източник, характеризиращ се с прекъснат спектър, който позволява да се правят измервания при 334 или 365 nm. Тъй като се правят абсолютни измервания (т.е. не се използва набор от калибровъчни разтвори, а се използва светлинната абсорбируемост на NADH), необходимо е да се направи проверка на скалите за дължината на вълната и на спектралното поглъщане на апаратурата.
3.2. Стъклени кювети с дължина на оптичния път един сантиметър (в зависимост от предпочитанията може да се използват и кювети за еднократна употреба).
3.3. Микропипети за пипетиране на обеми в диапазона от 0,01 до 2 ml.
4. Приготвяне на пробата за анализ
Анализът на D-малат обикновено се извършва директно върху виното, без предварително обезцветяване. Количеството D-малат в кюветата трябва да е между 2 и 50 g. Ето защо виното се разрежда, за да се получи концентрация на D-малат между 0,02 и 0,5 g/l или съответно 0,02 и 0,3 g/l (в зависимост от използваната апаратура).
Таблица с данни за разреждането:
| Намерено количество на | Разреждане | Фактор на |
| D-малат/литри | с вода | разреждане F |
| определено при: |
| 340 или 334 nm | 365 nm | ||
| 0,3 g | 0,5 g | - | 1 |
| 0,3-3,0 g | 0,5-5,0 g | 1 + 9 | 10 |
5. Процедура
При настройка на спектрофотометъра за дължина на вълната 340 nm поглъщането се определя чрез използване на кювети от един сантиметър, като за нулиране се използва въздух (без кювета в оптичния път) или вода.
Отпипетирва се в кюветите:
| Еталонен | Проба за | |
| разтвор | анализ | |
| (ml) | (ml) | |
| Разтвор 1 | 1,00 | 1,00 |
| Разтвор 2 | 0,10 | 0,10 |
| Бидестилирана вода | 1,80 | 1,70 |
| Проба за определяне | - | 0,10 |
| Разбърква се и след около 6 min се | ||
| измерва абсорбцията на еталонния | ||
| разтвор и на пробата за анализ (A1). | ||
| Добавя се | ||
| Разтвор 3 | 0,05 | 0,05 |
Разбърква се, изчаква се, докато реакцията завърши (около 20 min) и се измерва абсорбцията на еталонния разтвор и на пробата за анализ (A2). Изчислява се абсорбционната разлика (A2-A1) за еталонния разтвор (AТ) и за разтвора на пробата за анализ (AE). Най-накрая се изчислява разликата между тези разлики:
A = AE -AТ
Забележка. Времето, което е необходимо, за да приключи действието на ензима, може да е различно за различните партиди. Получената стойност е ориентировъчна и се препоръчва да бъде определяна за всяка партида.
D-ябълчната киселина реагира бързо, макар и много по-бавно ензимът преобразува също така и L-винената киселина. Това обяснява слабата странична реакция, която може да бъде коригирана чрез екстраполация (вж. приложение А).
6. Изразяване на резултатите
Общата формула за изчисляване на концентрацията в милиграми на литър е:
| V • PM | ||
| С = DA | , където: | |
| e • d • v |
V е обемът на разтвора на пробата за анализ, в ml (в случая 2,95 ml);
v - обемът на пробата за анализ в ml (в случая 0,1 ml);
PM - молекулната маса на веществото, което следва да бъде анализирано (за D-ябълчна киселина, в случая-134,09);
d - оптиченият път на кюветата, в сантиметри (в случая 1 cm);
= коефициент на поглъщане на NADH:
при 340 nm = 6,3 (mmole -1.1. сm-1)
при 365 nm = 3,4 (mmole -1.1 . сm-1)
при 334 nm = 6,18 (mmole -1 .1 . сm-1).
Ако пробата за анализ е била разредена по време на приготвянето й, резултатът се умножава с коефициента на разреждане.
Концентрацията на D-ябълчна киселина се изразява в милиграми на литър. Закръглява се до цяло число.
7. Точност
В приложение Б са резюмирани данни от интерлабораторни изследвания на точността на метода. Стойностите, получени от интерлабораторните изследвания, може и да не са приложими за обхвати на концентрацията на анализираното вещество и за матрици, които са различни от посочените в приложение Б.
7.1. Повторяемост
Абсолютната разлика между два отделни резултата, получени за идентично изследвано вещество, подложено на анализ от оператор, който използва един и същи уред, във възможно най-кратък интервал от време, не надхвърля степента на повторяемост r в повече от 5% от случаите.
r = 11 mg/l.
7.2. Възпроизводимост
Абсолютната разлика между два отделни резултата, получени за идентично изследвано вещество, подложено на анализ в две различни лаборатории, не надхвърля степента на възпроизводимост R в повече от 5% от случаите.
R = 20 mg/l.
8. Коментар
С оглед на степента на точност на този метод стойности на D-ябълчна киселина под 50 mg/l трябва да бъдат потвърдени при необходимост чрез друг аналитичен метод, основаващ се на друг принцип на измерване, напр. като този на Пржиборски и съавтори (Mitteilungen Klosterneuburg 43, 1993, 215-218).
Пробата вино в кюветата не трябва да превишава 0,1 ml, за да не бъде инхибирано ензимното действие на полифенолите.
Приложение А
Странична реакция
Страничните реакции обикновено се дължат на вторични реакции на ензима, на наличието на други ензими в матрицата на пробата или на взаимодействието на един или повече елементи на матрицата с друг, едновременно действащ фактор в ензимната реакция.
При нормална реакция поглъщането достига постоянна стойност след определено време, обикновено 10 до 20 min, в зависимост от скоростта на специфичната ензимна реакция. Ако възникнат вторични реакции, обаче, поглъщането не достига постоянна стойност, а се увеличава постоянно с времето. Този вид процес обикновено се нарича "странична реакция".
Когато възникне странична реакция, поглъщането на разтвора трябва да се измерва периодично (на всеки две до пет минути) след изтичане на времето, което е необходимо за един стандартен разтвор да достигне своето крайно ниво на поглъщане. Ако поглъщането се увеличава постоянно, е необходимо да се направят пет или шест измервания и да се екстраполират в обратна посока с помощта на графика или изчисления, с цел да се определи поглъщането, което би трябвало да се наблюдава при добавяне на последния ензим (T0). Концентрацията на субстрата се изчислява въз основа на разликата на екстраполираното към този момент поглъщане (Af-Ai).
Приложение А
Фигура 1. Странична реакция
Приложение Б
Статистически резултати от паралелни интерлабораторни изследвания
Година на изследване - 1995.
Брой на лабораториите - 8.
Брой на пробите - 5 с добавка на D-ябълчена киселина
| Данни | A | B | C | D | E |
| Брой на лабораториите, ели- | 7 | 8 | 7 | 8 | 7 |
| Минирани след представяне- | |||||
| то на силно отклоняващи се | |||||
| Резултати | |||||
| Брой на лабораториите с | 1 | - | 1 | - | 1 |
| Отклоняващи се резултати. | |||||
| Брой приемливи резултати | 35 | 41 | 35 | 41 | 36 |
| Средна стойност (), (mg/l ) | 161,7 | 65,9 | 33,1 | 106,9 | 111,0 |
| Стандартно отклонение на | |||||
| повторяемост (sr), (mg/l ) | 4,53 | 4,24 | 1,93 | 4,36 | 4,47 |
| Относително стандартно | |||||
| отклонение на възпроизво- | 2,8 | 6,4 | 5,8 | 4,1 | 4,00 |
| димост (RSDr),(%) | |||||
| Граница на повторяемост | 12,7 | 11,9 | 5,4 | 12,2 | 12,5 |
| Стандартно отклонение на | |||||
| възпроизводимост (sR), (mg/l ) | 9,26 | 7,24 | 5,89 | 6,36 | 6,08 |
| Относително стандартно | |||||
| отклонение на възпроизво- | 5,7 | 11 | 17,8 | 5,9 | 5,5 |
| димост (RSDR), (%) | |||||
| Граница на възпроизво- | 25,9 | 20,3 | 16,5 | 17,8 | 17,0 |
| димост(R),(mg/l ) |
Вид на пробите:
А - червено вино;
В - червено вино;
С - бяло вино;
D - бяло вино;
E - бяло вино.
21. Определяне на обща ябълчна киселина (обикновен метод)
1. Принцип на метода
Ябълчната киселина, изолирана с помощта на анионобменна колона, напълнена с анионобменна смола, се определя колориметрично в елюата чрез измерване на жълтото оцветяване, което тя дава под действието на 96% сярна киселина и на хромотропова киселина. Веществата, съдържащи се в елюата, пречат на тази реакция. Тези вещества реагират с 86% сярна киселина и хромотропова киселина. За да се елиминира влиянието на тези вещества, е достатъчно от абсорбцията, получена след реакцията между хромотропова и 96%-на сярна киселина, да се извади абсорбцията, получена от реакцията с хромотропова киселина и 86%-на сярна киселина.
2. Апаратура
2.1. Стъклена колона с приблизителна дължина 250 mm и вътрешен диаметър 35 mm, с кран.
2.2. Стъклена колона с приблизителна дължина 300 mm и вътрешен диаметър 10-11 mm, с кран.
2.3. Водна баня, термостатично контролирана до 100 °С.
2.4. Спектрофотометър, позволяващ измерване на абсорбцията при 420 nm, със стъклени кювети с оптичен път един сантиметър.
3. Реактиви
3.1. Силно основна йоннообменна смола (примерно Merck III).
3.2. Натриев хидроксид 5 % (m/v).
3.3. Оцетна киселина 30 % (m/v).
3.4. Оцетна киселина 0,5 % (m/v).
3.5. Разтвор на натриев сулфат (Na2SO4), 10 %(m/v).
3.6. Концентрирана сярна киселина 95 до 97% (m/m).
3.7. Сярна киселина 86 % (m/m).
3.8. Разтвор на хромотропова киселина, 5 % (m/v).
Преди всяко определяне се приготвя пресен разтвор чрез разтваряне на 500 mg динатриева сол на хромотроповата киселина (C10H6Na2O8S2.2H2О) в 10 ml дестилирана вода.
3.9. Разтвор на DL-ябълчна киселина-0,5 g/l.
Разтварят се 250 mg/l ябълчна киселина (С4H6O5) в достатъчно количество 10 %-ен разтвор на натриев сулфат (т. 3.5) и се долива до 500 ml с разтвор на динатриев сулфат (10 %).
4. Начин на работа
4.1. Приготвяне на йоннообменната смола
На дъното на колоната с размери 35 x 250 mm се поставя намокрен с дестилирана вода стъклен памук. Налива се водна суспензия от анионобменната смола в стъклената колона по такъв начин, че течността да остане на ниво 50 mm над нивото на смолата. Промива се с 1000 ml дестилирана вода. Колоната се промива с разтвор на натриев хидроксид (5%), като се оставя течността да достигне до 2-3 mm над нивото на смолата. Тази операция се повтаря още два пъти и смолата се оставя в контакт в продължение на един час. Колоната се промива с 1000 ml дестилирана вода. Напълва се отново колоната с 30%-на оцетна киселина и се оставя течността да изтече до 2-3 mm над нивото на смолата. Тази операция се повтаря още два пъти. Оставя се поне 24 h да престои преди употреба. Смолата се съхранява с 30 %-на оцетна киселина за по-късно използване.
4.2. Подготвяне на йоннообменната смола
В долния край на колоната с размери 11 x 300 mm се поставя тампон от стъклен памук. Суспензията от йоннообменната смола, приготвена както е описано в т. 4.1, се налива до височина 10 cm. Кранът се оставя отворен. Разтворът на 30 %-на оцетна киселина се оставя да изтече до 2-3 mm над горната повърхност на смолата. Колоната се измива с 50 ml 0,5 %-на оцетна киселина.
4.3. Изолиране на DL-ябълчна киселина
Прехвърлят се 10 ml вино или гроздова мъст в колоната, в която има йоннообменна смола, както е описано в т. 4.2. Оставя се да изтича капка по капка (дебитът да е около капка в секунда) и се спира изтичането при достигане на течността 2-3 mm над горното ниво на смолата. Колоната се измива първоначално с 50 ml 0,5%-на оцетна киселина, а след това с 50 ml дестилирана вода, като й се позволява да изтече до същото ниво и със същата скорост.
Киселините, задържани от смолата, се елюират с 10% разтвор на натриев сулфат (т. 3.5) при същите условия. Елюатът се събира в 100 ml мерителна колба. Колоната може да бъде регенерирана, като се следва процедурата, описана в т. 4.1.
4.4. Определяне на ябълчната киселина
Маркират се две 30-милилитрови епруветки с широко гърло и шлиф с "А" и "Б". Във всяка една епруветка се добавя по един милилитър от елюата (т. 4.3) и един милилитър от 5%-на хромотропова киселина. Добавят се в епруветка "А" (контролата) 10 ml 86%-на сярна киселина и 10 ml 96 %-на сярна киселина в епруветка "Б" (пробата). Запушва се и се хомогенизира чрез разклащане, като се внимава да не се навлажни стъклената запушалка. Епруветките се поставят в кипяща водна баня за 10 min. Охлаждат се епруветките на тъмно до 20 градуса С. Точно 90 min от началото на охлаждането се измерва абсорбцията на съдържанието в епруветка "Б" спрямо контролата "А", при 420 nm в 10 mm кювети.
4.5. Построяване на калибрационна крива
В мерителни колби от 50 ml се отпипетирват по 5, 10, 15 и 20 ml от разтвор на ябълчна киселина с концентрация 5,0 g/l. Доливат се до марката с разтвор на 10%-ен натриев сулфат. Тези разтвори съответстват на елюати, получени от вино, със съдържание 0,5; 1,0; 1,5 и 2 g DL-ябълчна киселина/l.
Продължава се, както е описано в т. 4. 4.
Графиката на стойностите на абсорбациите на тезиразтвори е функция от концентрацията на ябълчната киселина в тях и представлява права линия, пресичаща началото на координатна система.
Интензитетът на полученото оцветяване зависи до голяма степен от концентрацията на сярната киселина. Необходимо е да се проверява калибрационната крива за поне една точка на серия определяния, за да се провери дали концентрацията на сярната киселина не се е променила.
5. Представяне на резултатите
Концентрацията на елюата се намира от калибрационната крива посредством екстраполиране на стойността на измерената абсорбация, за да се отчете съответстваща концентрация на ябълчната киселина в грамове на литър. Закръглява се до първия десетичен знак.
| Повторяемост (r): | |
| Съдържание 2 g/l: | r = 0,1 g/l; |
| Съдържание 2 g/l: | r = 0,2 g/l. |
| Възпроизводимост: (R) | |
| R = 0,3 g/l |
22. Определяне на сорбинова киселина
1. Принцип на методите
1.1 Определяне чрез ултравиолетова спектрофотометрия
Сорбиновата киселина (транс, транс 2,4 хексадеинова киселина), извлечена чрез дестилация с водна пара, се определя във винения дестилат чрез спектрофотометрия в ултравиолетовата област. Вещества, които пречат в ултравиолетовата област, се отстраняват чрез изпаряване до сухо с предварително леко алкализиране на дестилата с калциев хидроксид. Количества, по-малки от 20 mg/l, се потвърждават с използване на тънкослойна хроматография (чувствителност 1 mg/l).
1.2. Определяне чрез газова хроматография
Сорбиновата киселина се извлича с диетилов етер и се определя чрез газова хроматография с вътрешен стандарт.
1.3. Определяне на следи чрез тънкослойна хроматография.
Сорбиновата киселина, екстрахирана с диетилов етер, се определя чрез метода на тънкослойната хроматография. Нейната концентрация е отчетена полуколичествено.
2. Метод за определяне с ултравиолетова светлина
2.1. Реактиви
2.1.1. Кристална винена киселина (С4Н6О6).
2.1.2. Разтвор на калциев хидроксид [Са(ОН)2 ], приблизително 0,02 М.
2.1.3. Сравнителен разтвор на сорбинова киселина 20 милиграма на литър.
Разтварят се 20 mg сорбинова киселина (С6Н8О2) в приблизително 2 ml от 0,1 M разтвор на натриев хидроксид. Прехвърля се в мерителна колба с обем 1000 ml и се допълва до марката с вода. Възможно е също така и да се разтворят 26,8 mg калиев сорбат С6Н7КО2 във вода и да се допълни до 1000 ml с вода.
2.2 Апаратура
2.2.1. Парогенератор (вж. метод "14. Определяне на летлива киселинност").
2.2.2. Водна баня при 100 градуса С.
2.2.3. Спектрофотометър, позволяващ измерване при дължина на вълната 256 nm, с кварцови кювети с оптичен път един сантиметър.
2.3. Начин на работа
2.3.1. Дестилация
В барботьора се прехвърлят 10 ml вино и се прибавя 1-2 g винена киселина (т. 2.1.1). Събират се 250 ml от дестилата.
2.3.2. Построяване на калибрационната крива
Чрез разреждане на сравнителния разтвор (т. 2.1.3) с вода се подготвят четири разтвора, съдържащи 0,5, 1,0, 2,5 и 5 mg сорбинова киселина/l. Измерва се тяхната абсорбция със спектрофотометър при 256 nm, използвайки дестилирана вода като контрола. Начертава се кривата, показваща изменението на абсорбцията, като функция на концентрацията. Функцията е линейна.
2.3.3. Определяния
5 ml от дестилата се поставят в изпарителен съд с диаметър 55 mm и се прибавя 1 ml разтвор на калциев хидроксид (т. 2.1.2). Изпарява се на водна баня до сухо.
Остатъкът се разтваря в няколко милилитра дестилирана вода. Пренася се количествено в 20 ml обемна колба и се добавя вода до марката. Със спектрофотометър се измерва абсорбцията при 256 nm. Като контрола се използва разтвор, който е получен чрез разреждане на 1ml разтвор на калциев хидроксид (т. 2.1.2) до 20 ml. Нанасят се стойностите от измерената абсорбция на калибрационната крива и от нея се отчита концентрацията.
Забележка. В практиката изпарението може да се пренебрегне и да се работи директно върху дестилата, разреден с дестилирана вода до 1:4.
2.4. Представяне на резултатите
2.4.1. Изчисления
Концентрацията на сорбинова киселина във виното се изразява в mg/l; изчислява се по формулата:
100С, където:
С е концентрацията на сорбинова киселина в разтвора, анализирана чрез спектрофотометрия, изразена в mg/l.
3. Анализ чрез газова хроматография
3.1. Реактиви
3.1.1. Диетилов етер [(С2Н5)2О], дестилиран непосредствено преди употреба.
3.1.2. Вътрешен стандартен разтвор-разтвор от нонанова киселина (С11Н22О2) в 95%-ен етанол при концентрация един грам на литър.
3.1.3. Воден разтвор на сярна киселина (Н2SO4, 20 градуса C = 1,84 g/ml), разреден 1:3 (v/v).
3.2. Апаратура
3.2.1. Газов хроматограф, снабден с пламъчно-йонизиращ детектор и колона от неръждаема стомана (4 m 1/8 инча), предварително обработена с диметилхлорозилен и напълнена със стационарна фаза, състояща се от cмес от 5% диетиленгликол сукцинат и 1% DEGS-H3PO4 фосфорна киселина или от cмес от 7% диетиленгликол адипат и 1% DEGА-H3PO4 фосфорна киселина, фиксирана върху Gaschrom Q 80-100 mesh.
За обработката с диметилдихлорсилан (DMDC) през колоната се пропуска разтвор, съдържащ 2-3 g DMDCS в пречистен тoлуол. Колоната веднага се измива с метанол; пропуска се азот и след това се напълва с хексан и отново повече азот. След тези процедури колоната се напълва.
Оперативни условия:
температура на колоната - 175 градуса С;
температура на инжектора и детектора - 230 градуса С;
носещ газ-азот (скорост на потока 200 ml/min).
3.2.2. Микроспринцовка 10 l, градуирана за измерване до 0,1 l.
Забележка. Могат да се използват и други видове колони, които имат добра разделителна способност, в частност капилярни колони (примерно FFAP). Описаният работен метод е даден като пример.
3.3. Начин на работа
3.3.1. Подготовка на пробата за анализ
В стъклена епруветка с обем приблизително 40 ml, снабдена с шлифована запушалка, се прехвърлят 20 ml вино, прибавят се 2 ml от вътрешния стандартен разтвор (т. 3.1.2) и 1 ml от разредената сярна киселина (т. 3.1.3). След cмесването на разтворите чрез неколкократно обръщане на епруветката към съдържанието се добавят 10 ml диетилов етер (т. 3.1.1). Сорбиновата киселина се екстрахира в органична фаза посредством разклащане в продължение на 5 min. Оставя се да се утаи.
3.3.2. Подготовка на сравнителния разтвор
Избира се вино, чийто етеров екстракт не дава на хроматограмата пик, съответстващ на елюирана сорбинова киселина. Във виното се добавя сорбинова киселина с концентрация 100 mg/l. Приготвят се 20 ml отанализирания разтвор, като се следва процедурата, описана в т. 3.3.1.
3.3.3. Хроматография
С микроспринцовка се инжектират 2 l от екстрахираната с етер фаза, описана в т. 3.3.2, и 2 l от екстрахираната с етер фаза, описана в т. 3.3.1.
Записване на хроматограмата: проверява се идентичността на съответните времена на задържане на сорбиновата киселина. Измерва се площта на всеки пик.
3.4. Изразяване на резултатите
3.4.1. Изчисления
Концентрацията на сорбинова киселина в анализираното вино, изразена в mg/l, се изчислява по формулата:
| h | I | ||
| 100 | mg/l, където | ||
| H | i |
Н е височината на пика на сорбиновата киселина в сравнителния разтвор;
h - височината на пика на сорбиновата киселина в пробата;
I - височината на пика на вътрешния стандарт в сравнителния разтвор;
i - височината на пика на вътрешния стандарт в пробата.
Забележка. Концентрацията на сорбиновата киселина може да бъде определена по същия начин, но чрез измерване на площите на пиковете под съответните пикове.
4. Определяне на следи от сорбинова киселина чрез тънкослойна хроматография
4.1. Реактиви
4.1.1. Диетилов етер (С2Н5)2О.
4.1.2. Воден разтвор на сярна киселина (H2SO4, 20 градуса C = 1,84 g/ml), разреден 1:3 (v/v).
4.1.3. Стандартен разтвор на сорбинова киселина в cмес от етанол и вода с алкохолно съдържание 10 об.%, съдържащ 20 mg/l.
4.1.4. Подвижна фаза-хексан-пентан-оцетна киселина (20:20:3) (С6Н14_С5Н12-СН3СООН, 20 градуса C = 1,05 g/ml)
4.2. Апаратура
4.2.1. Покрита плака за тънкослойна хроматография 20 x 20 cm, с полиамиден гел с дебелина 0,15 mm, с добавка от флуоресцентен индикатор.
4.2.2. Вана за тънкослойна хроматография.
4.2.3. Микропипета от 5 l ±0,1 l
4.2.4. Ултравиолетова лампа (254 nm)
4.3. Начин на работа
4.3.1. Подготовка на пробата за анализ
В стъклена епруветка с шлифована запушалка от 25 ml се поставят 10 ml вино, след което се добавя 1 ml сярна киселина (т. 4.1.2) и 5 ml диетилов етер (т. 4.1.1). Cмесва се, като епруветката се обръща многократно и се оставя да се утаи.
4.3.2. Приготвяне на сравнителен разтвор за разреждане
Чрез разреждане на разтвора, описан в т. 4.1.3, се приготвят пет разредени разтвора, съдържащи съответно 2, 4, 6, 8 и 10 mg сорбинова киселина/l.
4.3.3 Хроматография
С микропипета се поставят 5 l от екстрахираната с етер фаза, получена в т. 4.3.1, и 5 l от всеки разреден стандартен разтвор (т. 4.3.2) в положение 2 сm от по-ниския ръб на плаката и на 2 сm един от друг.
Подвижната фаза (т. 4.1.4) се поставя във ваната за хроматографиране на височина около 0,5 cm, така че да позволява насищането на атмосферата в него с парите на разтворителя. Плаката се поставя във ваната. Хроматограмата се развива над 12 до 15 сm (процесът трае около 30 min). Плаката се изсушава със струя студен въздух и хроматограмата се наблюдава под 254 nm UV лампа.
Петната, показващи наличието на сорбинова киселина, се оцветяват в тъмновиолетово на жълто флуоресциращия фон на плаката.
4.4. Изразяване на резултатите
Сравняването на интензитета на петната от анализираната проба и на тези от стандартния разтвор позволява полуколичественото определяне на концентрацията на сорбиновата киселина в количества между 2 и 10 mg/l. Концентрация от 1 mg/l може да бъде определена посредством анализиране на 10 l от разтвора на пробата.
Концентрации над 10 mg/l могат да бъдат определени с анализиране на 5l (отмерени с микропипета).
23. Определяне L-аскорбинова киселина
1. Принцип на методите
Предложените методи позволяват определянето на L-аскорбинова киселина и на дехидроаскорбинова киселина във вина и мъст.
1.1. Сравнителен метод (флуорометричен)
L-аскорбиновата киселина се окислява с активен въглен в дехидроаскорбинова киселина. Последната образува флуоресциращо съединение с ортофенилендиамин (ОФДА). Провеждането на контролен тест в присъствието на борна киселина позволява определянето на съпътстваща флуорeсценция (чрез формирането на комплекс борна киселина-дехидроаскорбинова киселина) и изваждането й от резултата на флуориметричното изследване.
1.2. Обикновен метод (колориметричен)
L-аскорбиновата киселина се окислява с йод до дехидроаскорбинова киселина, която се утаява с динитрофенилхидразин с цел получаване на бис (2,4-динитрофенилхидразон). След разделяне с тънкослойна хроматография и разтваряне в оцетно-кисела среда червено оцветеният дериват се определя спектрофотометрично при 500 nm.
2. Сравнителен метод (флуорометричен)
2.1. Реактиви
2.1.1. Разтвор на ортофенилендиамин дихидрохлорид (C6H10Cl2N2)-0,02 g в 100 ml, приготвен непосредствено преди употреба.
2.1.2. Разтвор на натриев ацетат трихидрат (NaCH3COO.3H2O)-500 g/l.
2.1.3. Смесен разтвор на борна киселина и натриев ацетат:
Разтвор на 3 g борна киселина (H3BO3) в 100 ml разтвор на натриев ацетат (т. 2.1.2). Разтворът трябва да се приготвя непосредствено преди употреба.
2.1.4. Разтвор на ледена оцетна киселина CH3COOH (20 градуса C = 1,05 g/ml), разреден до 56% (v/v) с pH около 1,2.
2.1.5. Сравнителен разтвор на L-аскорбинова киселина, 1 g/l:
Приготвя се непосредствено преди употреба, като се разтварят 50 mg L-аскорбинова киселина (C6H8O6), предварително дехидратирана в ексикатор, защитен от светлина, в 50 ml разтвор на оцетна киселина (т. 2.1.4).
2.1.6. Активен въглен-химически чист за анализ (1)
В ерленмаерова колба от 2 l се поставят 100 g активен въглен и се добавят 500 ml 10%-ен (v/v) разтвор на солна киселина (HCl, 20 градуса C= 1,19 g/ml). Нагрява се до кипене. Филтрува се през шотов филтър с порьозност 3. Третираният по този начин въглен се събира в конусовидна колба от 2 l, добавя се един литър вода, разбърква се и се филтрира с шотов филтър с порьозност 3. Тази опeрация се повтаря още два пъти. Остатъкът се поставя в сушилня с регулируема температура до 115 ± 5 градуса С за 12 h (примерно една нощ).
2.2. Апаратура
2.2.1. Флуориметър. Използва се спектрофлуориметър, снабден с лампа, даващ непрекъснат спектър при минимално напрежение. Оптималната дължина на вълната за възбуждане и емисия се определят предварително и зависят от използваното оборудване. Дължината на вълната за възбуждане ще бъде приблизително 350 nm, а тази на емисията 430 nm.
Кювети с оптичен път 1 cm.
(1) Наименование "Негрил".
2.2.2. Шотов стъклен филтър с порьозност 3.
2.2.3. Тест епруветки (диаметър около 10 mm).
2.2.4. Бъркалки за тест епруветки
2.3. Начин на работа
2.3.1. Подготовка на пробите от вино или мъст
Част от виното или мъстта се поставя в мерителна колба с обем 100 ml и се разрежда до марката с 56%-ен разтвор на оцетна киселина (т. 2.1.4),за да се получи разтвор на L-аскорбинова киселина с концентрация между 0 и 60 mg/l. Съдържанието се хомогенизира чрез разбъркване. Добавят се 2 g активен въглен (т. 2.1.6) и се оставя 15 min, като от време на време се разбърква. Филтрира се през филтърна хартия и първите няколко милилитра от филтрата се отстраняват. В две други мерителни колби с обем 100 ml се поставят 5 ml от филтрата и 5 ml от смесен разтвор на борна киселина и натриев ацетат (т. 2.1.3) (контрола), а във втората-5 ml от разтвора на натриевия ацетат (т. 2.1.2) (проба). Оставя се 15 min, като от време на време се разбърква. Разрежда се с дестилирана вода до 100 ml. Взимат се по 2 ml от съдържанието на всяка колба и се добавят 5 ml разтвор на орто-фенилендиамин (т. 2.1.1), разбърква се, оставя се 30 min, докато протече реакцията и разтворът потъмнее, след което се мери спектрофлуориметрично.
2.3.2. Изготвяне на калибрационна крива
В три мерителни колби с обем 100 ml се поставят съответно по 2,4 и 6 ml от разтвора на L-аскорбиновата киселина (т. 2.1.5), разрежда се до 100 ml с разтвор на оцетна киселина (т. 2.1.4) и чрез разбъркване се хомогенизира. Сравнителните разтвори, приготвени по този начин, съдържат съответно по 2,4 и 6 mg /100 ml. Добавят се 2 g активен въглен (т. 2.1.6) към всяка от колбите и се оставя за 15 min, като се разбъркват периодично. Филтрира се през обикновена филтърна хартия, като се отстраняват първите няколко милилитра от филтрата. Поставят се по 5 ml от всеки филтрат в три мерителни колби с обем 100 ml (първите серии). Операцията се повтаря. Получават се втори серии от трите мерителни колби. Към всяка от колбите в първите серии (отговарящи на контролите) се прибавят по 5 ml от смесения разтвор на борна киселина и натриев ацетат (т. 2.1.5) и към всяка от колбите от вторите серии-5 ml от разтвора на натриев ацетат (т. 2.1.2). Оставят се за 15 min, като се разбъркват периодично. Доливат се до 100 ml с дестилирана вода. Взимат се по 2 ml от съдържанието на всяка от колбите, добавят се 5 ml разтвор на ортофенилендиамин (т. 2.1.1), разбъркват се. Реакцията протича за 30 min, докато разтворът потъмнее, и след това се измерва спектрофлуориметрично.
2.3.3. Флуориметрично определяне
Нулата на измерващата скала се регулира за всеки разтвор за построяване на калибриращата крива и определяните разтвори със съответната контрола. След това се измерва интензитетът на флуоресценция на всеки разтвор от тези на калибрационната крива и тези на опитните. Начертава се калибрационната крива, която е права линия, минаваща през началото на координационната система. На тази линия се намира стойността, която е определена с измерването, и тя съответства на определена концентрация на L-аскорбинова киселина + дехидроаскорбинова киселина в анализирания разтвор.
2.3.4. Изразяване на резултатите
Концентрацията на L-аскорбинова киселина и на дехидроаскорбинова киселина във виното в милиграми на литър се изчислява по формулата СF, където F е факторът на разреждане.
3. Обикновен метод (колориметричен метод)
3.1 Реактиви:
3.1.1. Разтвор на мета-фосфорна киселина, 30 %-на (m/v)
Вземат се 30 g мета-фосфорна киселина (HPO3)n, предварително стрита в хаван. Промива се бързо с дестилирана вода и се разбърква. Промитата киселина се разтваря в дестилирана вода, като се разклаща в мерителна колба с обем 100 ml и се долива до марката. Разтворът има концентрация приблизително 30% (m/v) мета-фосфорна киселина.
3.1.2. 3%-ен (m/v) разтвор на мета-фосфорна киселина, приготвен непосредствено преди употребата посредством разреждане 1:10 с дестилирана вода на разтвор по т. 3.1.1.
3.1.3. 1%-ен (m/v) разтвор на мета-фосфорна киселина, приготвен непосредствено преди употребата посредством разреждане 1:30 с дестилирана вода на разтвор по т. 3.1.1.
3.1.4. Полиамидна суспензия
Приготвя се суспензия от 10 g полиамид за хроматография с 60 ml дестилирана вода. Оставя се за два часа. Така приготвеното количество е достатъчно за четири анализа.
3.1.5. Тиокарбамид [(NH2)2CS].
3.1.6. 0,05 М разтвор на йод (I2).
3.1.7. 6% (m/v) разтвор на 2,4-динитрофенилхидразин:
Приготвя се суспензия от 6 g 2,4-динитрофенилхидразин (C6H6N4O4) в 50 ml ледена оцетна киселина (20 градуса C = 1,05 g/ml), добавят се 50 ml сярна киселина (20 градуса C = 1,84 g/ml). 2,4-динитрофенилхидразинът се разтваря чрез разбъркване.
3.1.8. Етилацетат (C4H8O2) - добавя се 2%-на (v/v) ледена оцетна киселина (т. 3.1.12).
3.1.9. Хлороформ (CHCl3).
3.1.10. 0,5% (m/v) воден разтвор на нишесте.
3.1.11. Подвижна фаза:
етилацетат - 50 об. %;
хлороформ - 60 об. %;
ледена оцетна киселина - 5 об. %.
Сместа от разтворители се оставя в покой за 12 h преди употреба.
3.1.12. Ледена оцетна киселина CH3COOH (20 градуса C = 1,05 g/ml).
3.1.13. Разтвор на L-аскорбинова киселина - 0,1 g/100 ml от 1%-ен разтвор на мета-фосфорна киселина (т. 3.1.3).
3.2. Апаратура
3.2.1. Лабораторна центрофуга и центрофужни епруветки от 50 ml с шлифовани запушалки.
3.2.2. Водна баня за охлаждане с термостатично контролирана температура, между 5 и 10 градуса С.
3.2.3. Термостатирана водна баня при 20 градуса С.
3.2.4. Плаки за тънкослойна хроматография 20x 20 сm, покрити със силикагел G (дебелина 0,25 или 0,3 mm).
3.2.5. Хроматографска вана.
3.2.6. Микропипети, позволяващи измерването на обеми до 0,2 ml.
3.2.7. Спектрофотометър, позволяващ измерване при 500 nm с кювети с оптичен път 1 cm.
3.3. Начин на работа
3.3.1. Окисляване на L-аскорбиновата киселина до дехидроаскорбинова.
В мерителна колба с обем 100 ml се поставят 50 ml от виното, добавят се 15 ml от полиамидната суспензия (т. 3.1.4) и се долива до марката с 3%-ен разтвор на мета-фосфорна киселина (т. 3.1.2.). Разтворът се оставя за един час, като се разклаща на равномерни интервали от време. Филтрира се през нагънат филтър. В центрофужна епруветка се събират 20 ml от филтрата, добавя се 1 ml от 0,05 М разтвор на йод (т. 3.1.6). Хомогенизира се чрез разклащане на затворената центрофужна епруветка и след една минута отделящият се йод се редуцира посредством прибавяне на около 25 mg тиокарбамид.
3.3.2. Образуване и екстрахиране на бис (2,4-динитрофенилхидразин) на дикетоглутаровата киселина.
Епруветката се поставя в охладена водна баня с поддържана температура между 5 и 10 градуса С, добавят се 4 ml от разтвора на 2,4-динитрофенилхидразин (т. 3.1.7). Съдържанието внимателно се смесва, като се избягва намокрянето на шлифованата запушалка. Епруветкатасе затваря плътно и се поставя във водната баня при 20 градуса С, за около 16 h (примерно една нощ).
Към съдържанието на центруфужната епруветка се добавя 15 ml от етилацетата (т. 3.1.8). Епруветката се затваря и се разклаща енергично около 30 s. Центрофугира се около 5 min с центрофужна сила 350-400 g. Отпипетират се 10 ml от екстракта на етилацетата в конични колби с шлифована запушалка. Запушалката се отстранява и се добавят допълнително 5 ml етилацетат (т. 3.1.8)-центрофужната епруветка отново се разклаща 30 s и се центрофугира 5 min при същата скорост. Отпипетират се 5 ml от екстракта на етилацетат в конични колби, съдържащи 10 ml от първата екстракция. Сместа се хомогенизира с разклащане.
3.3.3. Разделяне на бис (2,4-динитрофенилхидразин) посредством хроматография. Процедурата продължава 2 h, следвайки екстракцията (т. 3.3.2).
Поставят се 0,2 ml от екстракта на етилацетат към стартовата линия, намираща се на 2 cm от ръба на плаката, оставя се 2 cm разстояние от двете страни на плаката. Подвижната фаза (т. 3.1.11) се поставя в хроматографската вана на дълбочина от 1 cm, като се позволява на атмосферата там да се насити с парите на разтворителя. Въвежда се плаката, като се оставя разтворителят да се придвижи към върха на плаката. Плаката се изсушава с вентилатор. Плаката трябва да се държи във вертикално положение над гланцирана хартия и с помощта на шпатула перпендикулярно на зоната на движение се изстъргват червените петна (които се характеризират с наличието на 2,4-динитрофенилхидразин). Праховидният продукт се прехвърля без загуби в конична колба, снабдена с шлифована запушалка, и се добавят 4 ml оцетна киселина (т. 3.1.12). Оставя се за 30 min, като периодично се разбърква. Филтрира се през нагъната филтърна хартия директно в кюветата на спектрофотометъра (т. 3.2.7). Полученият филтрат трябва да е напълно бистър. Измерва се абсорбцията на разтвора при 500 nm, като се използва оцетна киселина (т. 3.1.12) в сравнителната кювета за нулиране на апарата.
3.3.4. Построяване на калибрационна крива
В три мерителни колби от 100 ml се поставят съответно по 5, 10 и 15 ml разтвор на L-аскорбинова киселина (т. 3.1.13), след което се долива 1 %-ен разтвор на мета-фосфорна киселина (т. 3.1.3) до марката. Така получените разтвори са с концентрация съответно 50, 100 и 150 mg аскорбинова киселина/l. Третират се по 50 ml от всеки от разтворите съгласно процедурите, описани в т. 3.3.1, 3.3.2 и 3.3.3. Начертава се калибрационната крива, която е права линия, преминаваща през началото на координационната система.
3.3.5. Изразяване на резултатите
Концентрацията на L-аскорбинова киселина + дехидроаскорбинова киселина във виното се изразява в милиграми на литър.
3.3.5.1. Изчисления
Стойността на абсорбцията, измерена съгласно т. 3.3.3, се намира на калибрационната крива и след това се определя концентрацията на L-аскорбинова киселина + дехидроаскорбинова киселина в анализирания разтвор.
Забележка. Ако концентрацията на L-аскорбинова киселина + дехидроаскорбинова киселина е по-голяма от 150 mg/l, обемът на пробите за анализ следва да се редуцира до 25, 20 или 10 ml вино, а полученият резултат се умножава по фактора на разреждане F.
24. Определяне на рH
1. Принцип на метода
Измерва се разликата в потенциала на двата електрода, потопени в анализираната течност. Единият от двата електрода има потенциал, който е функция от рН на течността, докато другият има фиксиран потенциал, който е известен и представлява сравнителния електрод.
2. Апаратура
2.1. рН-метър със скала, калибрирана в рН единици, позволяващ измерванията да бъдат направени с точност до ± 0,05.
2.2. Електроди:
2.2.1. Стъклен електрод, съхраняван в дестилирана вода.
2.2.2. Наситен с каломел калиево-хлориден сравнителен електрод, съхраняван в наситен разтвор на калиев хлорид.
2.2.3. Или комбиниран електрод, съхраняван в дестилирана вода.
3. Реактиви
3.1. Буферни разтвори
3.1.1. Наситен разтвор на калиев хидроген тартарат, съдържащ минимум 5,7 g/l калиев хидроген тартарат С4Н5КО6 при 20 градуса С.
Този разтвор може да бъде съхраняван до два месеца чрез добавяне на 0,1 g тимол на 200 ml.
| 3,57 при 20 градуса C | |
| рН | 3,56 при 25 градуса C |
| 3,55 при 30 градуса C |
3.1.2. Разтвор на калиев хидрогенфталат, 0,05 М, съдържащ 10,211 g/l калиев хидроген фталат С8Н5КО4 при 20 градуса С.
(Максимален срок за съхранение: два месеца.)
| 3,999 при 15 градуса C | |
| 4,003 при 20 градуса C | |
| рН | 4,008 при 25 градуса C |
| 4,015 при 30 градуса C |
3.1.3. Разтвор, съдържащ:
Монокалиев фосфат (KH2PO4) - 3,402 g;
Дикалиев фосфат (K2HPO4) - 4,354 g;
Вода - до един литър.
(Максимален срок на съхранение - 2 месеца.)
| 6,90 при 15 градуса C | |
| 6,88 при 20 градуса C | |
| рН | 6,86 при 25 градуса C |
| 6,85 при 30 градуса C |
Забележка. Фирмени стандартни буфери също могат да се използват.
4. Начин на работа
4.1. Подготовка на пробите за анализ
4.1.1. За гроздова мъст и вино:
Работи се директно с мъст и вино.
4.1.2. За ректифицирана и концентрирана мъст:
Ректифицираната и концентрирана мъст се разреждат с вода до концентрация 25% ± 0,5% (m\m) от общата захар (25 °Brix).
Ако Р е процентът (m\m) общи захари в ректифицираната и концентрираната мъст, измерената маса се изчислява по формулата
| 2500 |
| P |
и се довежда до 100 g с вода. Използваната вода трябва да е с проводимост под 2 микросименса на сантиметър.
4.2. Нулиране на уреда
Нулирането се извършва преди всяко измерване съгласно инструкциите към всеки уред.
4.3. Калибриране на рН-метъра
Уредът се калибрира при 20 градуса С посредством буферен разтвор с рН 6,88 и 3,57 при 20 градуса С.
За калибриране на рН-метъра се използват буферни разтвори с рН 4,00 при 20 градуса С.
4.4. Определяне
Електродът се поставя в анализираната проба, където температурата е 20-25 градуса С и възможно най-близо до 20 градуса С. Стойността на рН се отчита директно от скалата. Необходимо е да бъдат осъществени най-малко по две измервания на всяка проба.
Крайният резултат се изразява като средноаритметична стойност на две измервания.
5. Изразяване на резултатите
рН на мъстта, виното или на 25%-ен (m\m) (25 °Brix) разтвор на ректифицирана и концентрирана мъст се закръглява с точност до втория десетичен знак.
25. Определяне на серен диоксид
1. Определение
Свободен серен диоксид е серният диоксид, представен във виното или мъстта под следните форми - Н2SO3, НSO3-, чието равновесие е функция от рН и температурата:
| Н2SO3 | <========> | Н+ + НSO-3, |
Н2SO3 представлява молекулярният серен диоксид.
Общият серен диоксид е сума от различните форми на серния диоксид, намиращи се във виното, в свободно състояние или свързани с компонентите на виното.
2. Свободен и общ серен диоксид
2.1. Принцип на метода
2.1.1. Сравнителен метод
2.1.1.1. За вино и гроздова мъст
Серният диоксид се увлича от поток от въздух или азот. Той се улавя или окислява чрез барботиране в разтвор на водороден пероксид. Образувалата се сярна киселина се определя чрез титруване със стандартен разтвор на натриев хидроксид. Свободният серен диоксид се извлича от виното при ниска температура (10 градуса С).
Общият серен диоксид от виното се извлича при висока температура (около 100 °С).
2.1.1.2. За ректифицирана и концентрирана мъст
Общият серен диоксид се извлича от предварително разредената ректифицирана и концентрирана мъст при висока температура (около 100 градуса С).
2.1.2. Бърз метод за определяне (за вино и мъст).
Свободният серен диоксид се определя чрез директно йодометрично титруване.
Свързаният серен диоксид се определя чрез йодометрично титруване след алкална хидролиза. Когато се добави към свободния серен диоксид, се получава общият серен диоксид.
2.2. Сравнителен метод
2.2.1. Апаратура
2.2.1.1. Използваният уред трябва да е в съответствие с показаната схема и в частност що се отнася до хладника.
Апаратура за определяне на серен диоксид
(дименсиите са в милиметри; вътрешните диаметри на четирите концентрични сонди, образуващи хладника, са 45, 34, 27 и 10 mm)
Сондата за отвеждане на газ в барботьора В завършва с малка сфера с диаметър 1 cm и с 20 отвора 0,2 mm около големия хоризонтален кръг. Като алтернатива на сондата може да се използва шотова плака, която да дава възможност за голям брой много малки мехурчета и по този начин да осигурява добър контакт между течността и газовата фаза.
Дебитът на газа трябва да бъде около 40 l/h. Смукателното шише от дясно на фигурата е предназначено да ограничава налягането, което се образува от водна помпа до 20-30 cm воден стълб. С цел регулиране на вакуума до необходимата величина се инсталира дебитомер с капилярна тръба между барботьора и смукателното шише.
2.2.1.2. Микробюрета
2.2.2. Реактиви
2.2.2.1. 85% - на фосфорна киселина (Н3РО4, r(20 градуса C) = 1,71g/ml).
2.2.2.2. Разтвор на водороден пероксид (Н2О2) - 9,1 g/l - (три обема).
2.2.2.3. Индикаторен реактив:
- метил червено - 100 mg;
- метиленово синьо - 50 mg;
- спирт, 50 об. % - 100 ml.
2.2.2.4. 0,01 М разтвор на натриев хидроксид (NaOH).
2.2.3. Начин на работа
2.2.3.1. Определяне на свободния серен диоксид
Виното се съхранява в пълна и затворена бутилка при 20 градуса С в продължение на два дни преди измерването.
• В барботьора В се поставят 2 до 3 ml от разтвора на водородния пероксид (т. 2.2.2.2). Две капки от индикатора се поставят в барботьора В и разтворът на водородния пероксид се неутрализира с 0,01 М разтвор на натриев хидроксид (т. 2.2.2.4). Барботьорът се свързва с апаратурата.
• В колбата А с обем от 250 ml се поставят 50 ml от пробата и 15 ml фосфорна киселина (т. 2.2.2.1). Колбата се свързва с апарата.
Мехурчета въздух (или азот) се пропускат в апарата за 15 min. Увлеченият серен диоксид се окислява до сярна киселина. Барботьор В се отстранява от уреда и образуваната киселина се титрува с 0,01 М разтвор на натриев хидроксид (т. 2.2.2.4) - n , ml.
2.2.3.2. Изразяване на резултатите
Свободният серен диоксид се изразява в милиграми на литър. Закръглява се до най-близкото цяло число.
2.2.3.2.1. Изчисления
Свободният серен диоксид в милиграми на литър е: 6,4.n.
2.2.3.3. Определяне на общия серен диоксид
2.2.3.3.1.За ректифицирана и концентрирана мъст се използва проба, получена чрез разреждане на пробата за анализ до 40 %-ен (m/v) разтвор, както е указано в метод "13. Определяне на обща киселинност", т. 5.1.2. В облодънна колба А с обем 250 ml се прехвърлят 50 ml от този разтвор, както и 5 ml фосфорна киселина (т. 2.2.2.1). Колбата се свързва с апаратурата.
2.2.3.3.2. Вино и мъст
Ако предполагаемата концентрация в пробата е по-малка или равна на 50 mg/l общ серен диоксид, в колба А се поставят 50 ml от пробата и 15 ml от фосфорната киселина (т. 2.2.2.1). Свързва се колбата с апаратурата.
2.2.3.3.3. Ако предполагаемата концентрация в пробата е по-голяма или равна на 50 mg/l от общия серен диоксид, в колба А с обем 100 ml се поставят 20 ml от пробата и 5 ml от фосфорната киселина (т. 2.2.2.1) и колбата се свързва с апаратурата.
В барботьора В се поставят 2-3 ml от разтвора на водороден пероксид (т. 2.2.2.2), неутрализира се, както е описано. Виното се налива в колба А и се загрява до кипене, като се използва малък пламък с височина 4-5 cm, който директно да докосва дъното на колбата. Тя не се поставя върху метална плочка, а върху диск с отвор, чийто диаметър е приблизително 30 mm. Това се прави, за да се избегне прегряване на екстрактните вещества във виното, които се отлагат по стените на колбата.
Кипенето се поддържа, докато се подава въздушна (или азотна) струя. Цялото количество серен диоксид се извлича и окислява за около 15 min. Образуваната сярна киселина се определя чрез титруване с 0,01 М разтвор на натриев хидроксид (т. 2.2.2.4.) - n ml.
2.2.3.4. Изразяване на резултатите.
Общото количество серен диоксид се измерва в милиграми на литър и в милиграми на килограм от общите захари. Закръглява се до цяло число.
2.2.3.4.1. Изчисления
• За вина и мъст
Общият серен диоксид, в милиграми на литър :
- проби с ниско съдържание на серен диоксид (тестова проба от 50 ml) е 6,4.n;
- други проби (тестова проба от 20 ml) - 16.n.
• За ректифицирана и концентрирана мъст
Количеството на серен диоксид се изразява в милиграми общи захари (подготвена проба от 50 ml) (т. 2.2.3.3.1) и се изчислява по формулата
| 1600 n | |
| , където | |
| P |
Р е процентът (m/m) от общото количество захари.
2.2.3.4.2. Повторяемост (r)
• cъдържание 50 mg/l ( проба 50 ml), r = 1 mg/l;
• cъдържание 50 mg/l (проба 20 ml), r = 6 mg/l.
2.2.3.4.3. Възпроизводимост (R)
• cъдържание 50 mg/l (проба 50 ml), R = 9 mg/l;
• cъдържание 50 mg/l (проба 20 ml), R = 15 mg/l.
2.3. Бърз метод за определяне.
2.3.1. Реактиви
2.3.1.1. Етилендиаминтетраоцетна киселина (EDTA) (Complexon III): динатриева сол на EDTA (C10H14N2Na2O8 2H2O).
2.3.1.2. Разтвор на натриев хидроксид (NaOH) - 4 M 160g/l.
2.3.1.3. Разтвор (1:10 v/v) на сярна киселина (H2SO4, 20 градуса C = 1,84 g/ml).
2.3.1.4. Разтвор на нишесте - 5 g/l:
5 g нишесте се смесва с около 500 ml вода. Довежда се до кипене, като непрекъснато се разбърква и се поддържа кипенето в продължение на 10 min. Добавя се 200 g натриев хлорид (NaCl). След охлаждане разтворът се допълва до един литър.
2.3.1.5. 0,025 М йоден разтвор, (I2).
2.3.2. Апаратура
2.3.2.1. Йодни колби 500 ml.
2.3.2.2. Бюрета.
2.3.2.3. Пипети от 1, 2, 5 и 50 ml.
2.3.3. Начин на работа
2.3.3.1. Свободен серен диоксид.
В йодни колби от 500 ml ce поставят:
- 50 ml вино;
- 5 ml разтвор на нишесте (т. 2.3.1.4);
- 30 mg EDTA (т. 2.3.1.1);
- 3 ml H2SO4 с концентрация 1:10 (v/v) (т. 2.3.1.3).
Титрува се веднага с 0,025 М йод (т. 2.3.1.5), докато сместа запази ясен син цвят за 10-15 s-n (ml изразходван йод).
2.3.3.2. Определяне на свързан серен диоксид
Добавя се 8 ml разтвор 4 М на натриев хидроксид (т. 2.3.1.2), сместа се разклаща веднъж и се оставя да престои 5 min. Бързо се добавя предварително налят в мерителен цилиндър или бехерова чаша 10 ml разтвор на сярна киселина с концентрация 1:10 (v/v) (т. 2.3.1.3) и при енергично разбъркване веднага се титрува с 0,025 М йод (т. 2.3.1.5)-n' (ml изразходван йод). Добавят се 20 ml 4М-ен разтвор на натриев хидроксид (т. 2.3.1.2), разклаща се веднъж и се оставя да престои 5 min. Разрежда се с 200 ml ледено студена вода, доколкото е възможно. Бързо се добавят, предварително наляти в мерителен цилиндър или бехерова чаша 30 ml разтвор на сярна киселина с концентрация 1:10 (v/v) (т. 2.3.1.3). При енергично разбъркване веднага се титрува с 0,025 М йод (т. 2.3.1.5)-n" (ml изразходван йод).
2.3.4. Изразяване на резултатите.
2.3.4.1. Изчисление.
- Свободният серен диоксид в mg/l, е 32n.
- Общото количество серен диоксид в mg/l е 32(n + n' + n").
Забележки:
1. За червени вина с ниска концентрация на SO2 е подходящо да се използва йоден разтвор с по-ниска концентрация от 0,025 М (например 0,01 М; в този случай трябва да се замести коефициентът 32 от формулата-с 12,8).
2. Полезно е червените вина да се осветяват отдолу с лъч жълта светлина или от обикновена електрическа крушка, чийто лъч минава през разтвор на калиев хромат, или от натриева лампа. Наблюдението трябва да се извърши в тъмна стая, като се следи прозрачността на виното - при достигане на крайната точка то помътнява.
3. Ако количеството на серния диоксид е близо до или надвишава допустимите граници, общото количество серен диоксид трябва да се установи по сравнителния метод.
4. Ако е особено необходимо да се измери само свободният серен диоксид, анализът трябва да се извърши с проба, която е съхранявана при анаеробни условия при температура 20 градуса С в продължение на два дни преди анализа. Измерването също трябва да се проведе при температура 20 градуса С.
5. Поради това, че някои вещества се окисляват от йода в кисела среда, за по-прецизни измервания трябва отделно да се изчислява количеството на използвания йод. За тази цел свободният серен диоксид трябва да се свърже с излишък от етанал или пропанал, преди да се извърши йодното титруване. Поставят се 50 ml вино в йодна колба от 300 ml, добавят се 5 ml разтвор на етанал (C2H4O, в концентрация 7 g/l ) или 5 ml разтвор на пропанал (C3H6O), с концентрация 10 g/l .
Колбата се запушва и се оставя да престои 30 min. Добавят се 3 ml сярна киселина 1:10 v/v (т. 2.3.1.3.) и 0,025 М йоден разтвор (т. 2.3.1.5.) в количество, достатъчно да причини промяна в цвета на нишестето-n''' (ml използван йод). Той се изважда от n (свободния серен диоксид) и от n+n'+n" (общото количество серен диоксид).
По принцип n''' е малък-0,2 до 0,3 ml 0,025 М йоден разтвор. Ако към виното е добавена аскорбинова киселина, n''' ще има по-висока стойност и тогава e възможно количеството на това вещество да се измери поне приблизително, от стойността на n''', като се има предвид, че един милилитър от 0,025 М йоден разтвор окислява 4,4 mg аскорбинова киселина. С изчисляване на n''' твърде лесно може да се установи наличието на остатъчна аскорбинова киселина в количества над 20 mg/l във вината, към които тя е била добавена.
3. Молекулен серен диоксид
3.1. Принцип на метода
Процентното съдържание на молекулен серен диоксид (H2SO3) в свободния серен диоксид се изчислява като функция на pH, алкохолното съдържание и температурата.
За дадена температура и алкохолно съдържание:
| H2SO3 | <=====> | H+ +НSO3-, |
| L |
L = [H2SO3] + [НSO3-],
където
- I е йонната сила;
- А и В - са коефициенти, вариращи с промяна на температурата и алкохолното съдържание;
- КTе константа на термодинамична дисоциация: стойностите на рkT са дадени в табл. 1 за различно алкохолно съдържание и температури;
- Kм - е константа на смесена дисоциация; в таблица 2 са дадени стойностите на рKм за различни температури и алкохолно съдържание при средна стойност на йонната сила I = 0,038.
Съдържанието на молекулен серен диоксид, изчислено по формулата, е дадено в таблица 3 за различни стойности на рН, температура и алкохолно съдържание.
3.2. Изчисление.
При известни стойности на рН на виното и неговото алкохолно съдържание процентното съдържание Х% на молекулен серен диоксид е дадено в таблица 3 за температура t градуса С.
Съдържанието на молекулен серен диоксид в mg/l е ХС, където С е съдържание на свободен серен диоксид в mg/l.
Таблица № 1
Стойности на термодинамичната константа рkT
| Алкохол в об.% | Температура, в °С |
| 20 | 25 | 30 | 35 | 40 | |
| 0 | 1,798 | 2,000 | 2,219 | 2,334 | 2,493 |
| 5 | 1,897 | 2,098 | 2,299 | 2,397 | 2,527 |
| 10 | 1,997 | 2,198 | 2,394 | 2,488 | 2,606 |
| 15 | 2,099 | 2,301 | 2,503 | 2,607 | 2,728 |
| 20 | 2,203 | 2,406 | 2,628 | 2,754 | 2,895 |
Таблица № 2
Стойности на термодинамичната константа ркм (I = 0,038)
| Алкохол в об.% | Температура, в °С |
| 20 | 25 | 30 | 35 | 40 | |
| 0 | 1,723 | 1,925 | 2,143 | 2,257 | 2,416 |
| 5 | 1,819 | 2,020 | 2,220 | 2,317 | 2,446 |
| 10 | 1,916 | 2,116 | 2,311 | 2,405 | 2,522 |
| 15 | 2,014 | 2,216 | 2,417 | 2,520 | 2,640 |
| 20 | 2,114 | 2,317 | 2,538 | 2,663 | 2,803 |
Таблица № 3
Процент на молекулярен серен диоксид от свободния серен диоксид (I = 0,038)
| pH | T = 20 °C |
| алкохол, в об.% |
| 0 | 5 | 10 | 15 | 20 | |
| 2,8 | 7,73 | 9,46 | 11,55 | 14,07 | 17,09 |
| 2,9 | 6,24 | 7,66 | 9,40 | 11,51 | 14,07 |
| 3,0 | 5,02 | 6,18 | 7,61 | 9,36 | 11,51 |
| 3,1 | 4,03 | 4,98 | 6,14 | 7,58 | 9,36 |
| 3,2 | 3,22 | 3,99 | 4,94 | 6,12 | 7,58 |
| 3,3 | 2,58 | 3,20 | 3,98 | 4,92 | 6,12 |
| 3,4 | 2,06 | 2,56 | 3,18 | 3,95 | 4,92 |
| 3,5 | 1,64 | 2,04 | 2,54 | 3,16 | 3,95 |
| 3,6 | 1,31 | 1,63 | 2,03 | 2,53 | 3,16 |
| 3,7 | 1,04 | 1,30 | 1,62 | 2,02 | 2,53 |
| 3,8 | 0,83 | 1,03 | 1,29 | 1,61 | 2,02 |
| T = 25 °C |
| 2,8 | 11,47 | 14,23 | 17,15 | 20,67 | 24,75 |
| 2,9 | 9,58 | 11,65 | 14,12 | 17,15 | 22,71 |
| 3,0 | 7,76 | 9,48 | 11,55 | 14,12 | 17,18 |
| 3,1 | 6,27 | 7,68 | 9,40 | 11,55 | 14,15 |
| 3,2 | 5,04 | 6,20 | 7,61 | 9,40 | 11,58 |
| 3,3 | 4,05 | 4,99 | 6,14 | 7,61 | 9,42 |
| 3,4 | 3,24 | 4,00 | 4,94 | 6,14 | 7,63 |
| 3,5 | 2,60 | 3,20 | 3,97 | 4,94 | 6,16 |
| 3,6 | 2,07 | 2,56 | 3,18 | 3,97 | 4,55 |
| 3,7 | 1,65 | 2,05 | 2,54 | 3,18 | 3,98 |
| 3,8 | 1,32 | 1,63 | 2,03 | 2,54 | 3,18 |
| T = 30 °C |
| 2,8 | 18,05 | 20,83 | 24,49 | 29,28 | 35,36 |
| 2,9 | 14,89 | 17,28 | 20,48 | 24,75 | 30,29 |
| 3,0 | 12,20 | 14,23 | 16,98 | 20,71 | 25,66 |
| 3,1 | 9,94 | 11,65 | 13,98 | 17,18 | 21,52 |
| 3,2 | 8,06 | 9,48 | 11,44 | 14,15 | 17,88 |
| 3,3 | 6,51 | 7,68 | 9,30 | 11,58 | 14,75 |
| 3,4 | 5,24 | 6,20 | 7,53 | 9,42 | 12,08 |
| 3,5 | 4,21 | 4,99 | 6,08 | 7,63 | 9,84 |
| 3,6 | 3,37 | 4,00 | 4,89 | 6,16 | 7,98 |
| 3,7 | 2,69 | 3,21 | 3,92 | 4,95 | 6,44 |
| 3,8 | 2,16 | 2,56 | 3,14 | 3,98 | 5,19 |
| T = 35 °C |
| 2,8 | 22,27 | 24,75 | 28,71 | 34,42 | 42,18 |
| 2,9 | 18,53 | 20,71 | 24,24 | 29,42 | 36,69 |
| 3,0 | 15,31 | 17,18 | 20,26 | 24,88 | 31,52 |
| 3,1 | 12,55 | 14,15 | 16,79 | 20,83 | 26,77 |
| 3,2 | 10,24 | 11,58 | 13,82 | 17,28 | 22,51 |
| 3,3 | 8,31 | 9,42 | 11,30 | 14,23 | 18,74 |
| 3,4 | 6,71 | 7,63 | 9,19 | 11,65 | 15,49 |
| 3,5 | 5,44 | 6,16 | 7,44 | 9,48 | 12,71 |
| 3,6 | 4,34 | 4,95 | 6,00 | 7,68 | 10,36 |
| 3,7 | 3,48 | 3,98 | 4,88 | 6,20 | 8,41 |
| 3,8 | 2,78 | 3,18 | 3,87 | 4,99 | 6,80 |
| T = 40 °C |
| 2,8 | 29,23 | 30,68 | 34,52 | 40,89 | 50,14 |
| 2,9 | 24,70 | 26,01 | 29,52 | 35,47 | 44,74 |
| 3,0 | 20,67 | 21,83 | 24,96 | 30,39 | 38,85 |
| 3,1 | 17,15 | 18,16 | 20,90 | 25,75 | 33,54 |
| 3,2 | 14,12 | 14,98 | 17,35 | 21,60 | 28,62 |
| 3,3 | 11,55 | 12,28 | 14,29 | 17,96 | 24,15 |
| 3,4 | 9,40 | 10,00 | 11,70 | 14,81 | 20,19 |
| 3,5 | 7,61 | 8,11 | 9,52 | 12,13 | 16,73 |
| 3,6 | 6,14 | 6,56 | 7,71 | 9,88 | 13,77 |
| 3,7 | 4,94 | 5,28 | 6,22 | 8,01 | 11,25 |
| 3,8 | 3,97 | 4,24 | 5,01 | 6, 47 | 9, 15 |
26. Определяне на натрий
1. Принцип на методите
1.1. Сравнителен метод-атомноабсорбционна спектрофотометрия.
Натрият във виното се измерва директно с атомноабсорбционна спектрофотометрия след добавяне на специален буфер от цезиев хлорид за подтискане йонизацията на натрия.
1.2. Обикновен метод-пламъкова фотометрия.
Натрият се измерва директно в разредено вино поне 1:10 чрез пламъкова фотометрия.
2. Сравнителен метод
2.1. Реактиви
2.1.1. Разтвор, съдържащ един грам натрий на литър:
Използва се стандартен търговски разтвор, съдържащ един грам натрий на литър. Такъв разтвор може да се приготви чрез разтваряне на 2,542 g безводен натриев хлорид (NaCl) в дестилирана вода и допълване на обема до един литър.
Този разтвор се съхранява в полиетиленова бутилка.
2.1.2. Моделен разтвор:
Лимонена киселина (C6H8O7.Н2О) - 3,5 g;
Захароза (C12H22O11) - 1,5 g;
Глицерин (C3H8O3) - 5,0 g;
Безводен калциев хлорид (CaCl2) - 50 mg;
Безводен магнезиев хлорид (MgCl2) - 50 g;
100 %-ов алкохол (C2H5OН) - 50 ml;
Дейонизирана вода - до 500 ml.
2.1.3 Разтвор на цезиев хлорид, съдържащ 5% цезий:
Разтварят се 6,330 g цезиев хлорид (CsCl) в 100 ml дестилирана вода.
2.2. Апаратура
2.2.1. Атомноабсорбционен спектрофотометър, снабден с горелка за пламък въздух-ацетилен.
2.2.2. Лампа с кух катод за определяне на натрий.
2.3. Начин на работа
2.3.1. Приготвяне на пробата
В мерителна колба от 50 ml се отмерват с пипета 2,5 ml от виното, добавя се един милилитър от разтвора на цезиев хлорид (т. 2.1.3.) и се допълва до марката с дестилирана вода.
2.3.2. Калибриране
Поставят се по 5,0 ml от моделния разтвор в набор мерителни колби с обем 100 ml и се добавят съответно по 0, 2,5, 5,0, 7,5 и 10 ml от разтвор на натрий с концентрация един грам на литър (т. 2.1.1.), предварително разреден в съотношение 1:100. Към всяка колба се добавя по 2 ml от разтвора на цезиев хлорид (т. 2.1.3.) и колбите се допълват до 100 ml с дестилирана вода.
Така приготвените стандартни разтвори съдържат съответно по 0, 0,25, 0,50, 0,75 и 1,00 милиграма натрий на литър и по един грам цезий на литър. Разтворите се съхраняват в полиетиленови съдове.
2.3.3. Измерване
Дължината на вълната се настройва на 589,0 nm. Абсорбционната скала се нулира, като се използва моделен разтвор, съдържащ един грам цезий на литър (т. 2.3.2.). Разреденото вино директно се впръсква в горелката на спектрофотометъра, след което последователно се впръскват стандартните разтвори (т. 2.3.2.). Отчитат се показанията за абсорбция. Всяко измерване се повтаря.
2.4. Изразяване на резултатите.
2.4.1. Метод на изчисление.
Графиката на абсорбцията се построява като функция от концентрацията на натрия в стандартните разтвори. Върху графиката се отбелязва получената абсорбция на разреденото вино и се определя концентрацията на натрий С в него, в милиграми на литър. Тогава концентрацията на натрий във виното, в mg/l, ще бъде равна на 20 С. Закръглява се до най-близкото цяло число.
2.4.2. Повторяемост (r)
r = 1 + 0,024xi, mg/l,
където xi-е концентрацията на натрий в пробата, в mg/l.
2.4.3. Възпроизводимост (R)
R = 2,5 + 0,05xi, mg/l,
където xi е концентрацията на натрий в пробата, в mg/l.
3. Обикновен метод
3.1. Реактиви
3.1.1. Еталонен разтвор, съдържащ 20 mg натрий на литър:
100 %-ов алкохол (C2H5OH) - 10 ml;
Лимонена киселина (C6H8O7.H2O) - 700 mg;
Захароза (C12H22O11) - 300 mg;
Глицерин (C3H8O3) - 1000 mg;
Кисел калиев тартарат (C4H5KO6) - 481,3 mg;
Безводен калциев хлорид (CaCl2) - 10 mg;
Безводен магнезиев хлорид (MgCl2) - 10 mg;
Сух натриев хлорид (NaCl) - 50,84 mg;
Вода - до eдин литър.
3.1.2. Разтвор за разреждане
100%-ов алкохол (C2H5OH) - 10 ml;
Лимонена киселина (C6H8O7.H2O) - 700 mg;
Захароза (C12H22O11) - 300 mg;
Глицерин (C3H8O3) - 1000 mg;
Кисел калиев тартарат (C4H5KO6) - 481,3 mg;
Безводен калциев хлорид (CaCl2) - 10 mg;
Безводен магнезиев хлорид (MgCl2) - 10 mg;
Вода-до един литър.
За да се приготви разтворът от точки 3.1.1. и 3.1.2., киселият калиев тартарат се разтваря в приблизително 500 ml много гореща дестилирана вода. Този разтвор се смесва с 400 ml дестилирана вода, в която предварително са разтворени другите вещества, и се допълва до един литър.
Разтворите се съхраняват в полиетиленови съдове, като в тях се добавят по две капки алил изотиоцианат.
3.2. Апаратура
3.2.1. Пламъков фотометър, захранван с въздушно бутанова смес.
3.3 Начин на работа
3.3.1. Калибриране
В мерителни колби от 100 ml се поставят по 5, 10, 15, 20 и 25 ml от еталонния разтвор (т. 3.1.1) и се допълват до 100 ml с разреждащия разтвор (т. 3.1.2). По този начин се получават разтвори, съдържащи съответно по 1, 2, 3, 4 и 5 mg натрий на литър.
3.3.2 Измерване
Измерванията се извършват при 589,0 nm. С дестилирана вода уредът се настройва до 100% пропускливост. Директно в горелката на фотометъра последователно се впръскват стандартните разтвори (т. 3.3.1), след това се впръсква виното, разредено с дестилирана вода в съотношение 1:10, и се отчитат показанията на уреда за процент на пропускливост. Ако е необходимо, разреденото 1:10 вино може да се разреди допълнително с разреждащия разтвор (т. 3.1.2.).
3.4. Изразяване на резултатите
3.4.1 Метод на изчисление
Построява се графика за промените в процент на пропускливост в зависимост от концентрацията на натрий в стандартните разтвори. Върху тази графика се отбелязва пропускливостта, получена за пробата разредено вино, и се определя съответната концентрация на натрий С.
Концентрацията на натрий в милиграми на литър е СF, където F е факторът на разреждане.
3.4.2 Повторяемост (r)
(С изключение на ликьорните вина) r = 1,4 mg/l.
За ликьорни вина r = 2,0 mg/l.
3.4.3 Възпроизводимост (R)
R = 4,7 + 0,08xi, mg/l, където xi е съдържанието на натрий в пробата, в mg/l.
27. Определяне на калий
1. Принцип на методите
1.1. Сравнителен метод
Калият се измерва директно в разредено вино с атомноабсорбционна спектрофтометрия след добавяне на специален буфер, цезиев хлорид, подтискащ йонизацията, за да се предотврати йонизирането на калия.
1.2. Обикновен метод.
Наличието на калий се установява директно в разреденото вино чрез пламъкова фотометрия.
2. Сравнителен метод
2.1. Реактиви
2.1.1. Разтвор, съдържащ един грам калий на литър:
Използва се стандартен търговски разтвор, съдържащ един грам калий на литър. Такъв разтвор може да се приготви чрез разтваряне на 4,813 g кисел калиев тартарат (C4H5KO6) в дестилирана вода и допълване на обема до един литър.
2.1.2. Моделен разтвор:
Лимонена киселина (C6H8O7Н2О) - 3,5 g;
Захароза (C12H22O11) - 1,5 g;
Глицерин (C3H8O3) - 5,0 g;
Безводен калциев хлорид (CaCl2) - 50 mg;
Безводен магнезиев хлорид (MgCl2) - 50 mg;
100%-ов алкохол (C2H5OН) - 50 ml;
Дестилирана вода - до 500 ml.
2.1.3. Разтвор на цезиев хлорид, съдържащ 5% цезий:
Разтварят се 6,33 g цезиев хлорид (CsCl) в 100 ml дестилирана вода.
2.2 Апаратура
2.2.1 Атомноабсорбционен спектрофотометър, снабден с горелка за пламък въздух-ацетилен.
2.2.2 Лампа с кух катод за определяне на калий.
2.3 Начин на работа
2.3.1 Приготвяне на пробата
В мерителна колба от 50 ml се отмерват 2,5 ml от виното, предварително разредено в съотношение 1:10, и се добавя един милилитър от разтвора на цезиев хлорид (т. 2.1.3.). Допълва се до марката с дестилирана вода.
2.3.2 Калибриране
В комплект мерителни колби с обем 100 ml се поставят по 5,0 ml от моделния разтвор (т. 2.1.2.) и се добавят съответно по 0, 2,0, 4,0, 6,0 и 8,0 ml от калиевия разтвор един g/l (т. 2.1.1.), предварително разреден в съотношение 1:100. Към всяка колба се добавя по 2 ml от разтвора на цезиев хлорид (т. 2.1.3.) и с дестилирана вода колбите се допълват до 100 ml. Така приготвените стандартни разтвори съдържат съответно по 0, 2, 4, 6 и 8 милиграма калий на литър и по един грам цезий на литър. Разтворите се съхраняват в полиетиленови бутилки.
2.3.3 Измерване
Дължината на вълната се настройва на 769,9 nm. Абсорбционната скала се нулира, като се използва моделен разтвор, съдържащ един грам цезий на литър (т. 2.3.2.). Директно в горелката на спектрофотометъра се впръсква разреденото вино (т. 2.3.1.), след което последователно се впръскват стандартните разтвори (т. 2.3.2.). Отчитат се показанията за абсорбция. Всяко измерване се повтаря.
2.4 Изразяване на резултатите.
2.4.1. Метод на изчисление
Построява се графиката на промените в абсорбцията като функция от концентрацията на калий в стандартните разтвори. Върху графиката се записва средната стойност на абсорбцията, получена за пробата разредено вино, и се определя концентрацията на калий С в него, в милиграми на литър. Тогава концентрацията на калий във виното в милиграми на литър е FС, където F е факторът на разреждане ( в случая 200). Закръглява се до най-близкото цяло число.
2.4.2. Повторяемост (r):
r = 35 mg/l.
2.4.3. Възпроизводимост (R):
R = 66 mg/l.
2.4.4. Други начини за изразяване на резултатите:
- в милиеквиваленти на литър - 0,0256FC.
- в милиграми на литър кисел калиев тартарат - 4,813FC.
3. Обикновен метод - атомна абсорбция
3.1. Реактиви:
3.1.1. Сравнителен разтвор, съдържащ 100 mg калий на литър:
100%-ов алкохол (C2H5OH) - 10 ml;
Лимонена киселина (C6H8O7.H2O) - 700 mg;
Захароза (C12H22O11) - 300 mg;
Глицерин (C3H8O3) - 1000 mg;
Натриев хлорид (NaCl) - 50,8 mg;
Безводен калциев хлорид (CaCl2) - 10 mg;
Безводен магнезиев хлорид (MgCl2) - 10 mg;
Кисел калиев тартарат (C4H5KO6) - 481,3 mg;
Дестилирана вода - до 1000 ml.
Киселият калиев тартарат се разтваря в около 500 ml много гореща дестилирана вода, този разтвор се смесва с 400 ml дестилирана вода, в която предварително са разтворени другите вещества, и се допълва до един литър.
3.1.2. Разтвор за разреждане
100 %-ов алкохол (C2H5OH) - 10 ml;
Лимонена киселина (C6H8O7 H2O) - 700 mg;
Захароза (C12H22O11) - 300 mg;
Глицерин (C3H8O3) - 1000 mg;
Натриев хлорид (NaCl) - 50,8 mg;
Безводен калциев хлорид (CaCl2) - 10 mg;
Безводен магнезиев хлорид (MgCl2) - 10mg;
Винена киселина (C4H6O6) - 383 mg;
Дестилирана вода - до 1000 ml.
Разтворите се съхраняват в полиетиленови бутилки, като към тях се добавят по две капки алилизотиоцианат.
3.2 Апаратура
3.2.1. Пламъков фотометър, захранван с въздушно бутанова смес.
3.3. Начин на работа
3.3.1. Калибриране
В мерителни колби с обем 100 ml се поставят съответно по 25, 50, 75 и 100 ml от еталонния разтвор (т. 3.1.1.) и се допълват до 100 ml с разреждащия разтвор (т. 3.1.2.). По този начин се получават разтвори, съдържащи съответно по 25, 50, 75 и 100 милиграма калий на литър.
3.3.2. Измерване
Измерванията се правят при 766 nm. С дестилирана вода уредът се настройва до 100% пропускливост. Последователно се впръскват стандартните разтвори (т. 3.3.1.) директно в горелката на фотометъра, след това се впръсква виното, разредено с дестилирана вода в съотношение 1:10, и се отчитат показанията на уреда. Разреденото 1:10 вино може да се разреди допълнително с разреждащия разтвор (т. 3.1.2.).
3.4. Изразяване на резултатите
3.4.1. Метод на изчисление
Построява се графиката за изменението на процента на пропускливост като функция от концентрацията на калий в стандартните разтвори. Върху тази графика се отчита пропускливостта, получена за пробата разредено вино, и се определя съответната концентрация на калий С.
Концентрацията на калий в милиграми на литър ще бъде CF, където F е факторът на разреждане. Закръглява се до най-близкото цяло число.
3.4.2. Повторяемост (r):
r = 17 mg/l.
3.4.3. Възпроизводимост (R):
R = 66 mg/l.
3.4.4. Други начини за изразяване на резултатите.
- в милиеквиваленти на литър - 0,0256FC;
- в милиграми кисел калиев тартарат на литър - 4,813FC.
28. Определяне на магнезий
1. Принцип на метода
Магнезият се определя директно във виното след подходящо разреждане, чрез атомноабсорбционна спектрофотометрия.
2. Реактиви
2.1. Концентриран стандартен разтвор, съдържащ един грам магнезий на литър:
Използва се стандартен търговски магнезиев разтвор един грам на литър (1 g/l). Такъв разтвор може да се приготви чрез разтваряне на 8,3646 g магнезиев хлорид (MgCl2.6H2O) в дестилирана вода и допълване на обема до един литър.
2.2. Разреден стандартен разтвор, съдържащ 5 mg магнезий на литър.
Забележка. Стандартните магнезиеви разтвори се съхраняват в полиетиленови съдове.
3. Апаратура
3.1. Атомноабсорбционен спектрофотометър с горелка за пламък въздух - ацетилен.
3.2. Лампа с кух катод за определяне на магнезий.
4. Начин на работа
4.1. Приготвяне на пробата
Виното се разрежда с бидестилирана вода в съотношение 1:100.
4.2. Калибриране
В комплект мерителни колби с обем 100 ml се сипват съответно по 5, 10, 15 и 20 ml от разредения стандартен магнезиев разтвор (т. 2.2.) и колбите се допълват до 100 ml с дестилирана вода. Така приготвените стандартни разтвори съдържат съответно 0,25, 0,50, 0,75 и 1,0 mg магнезий на литър. Тези разтвори се съхраняват в полиетиленови съдове.
4.3. Измерване
Дължината на вълната се настройва на 285 nm. Абсорбционната скала се нулира, като се използва дестилирана вода. Разреденото вино директно се впръсква в горелката на спектрофотометъра, след което последователно се впръскват стандартните разтвори (т. 4.2.). Отчитат се показанията за абсорбция. Всяко измерване се повтаря.
5. Изразяване на резултатите
5.1. Метод на изчисление
Графиката за промените на абсорбцията се построява като функция от концентрацията на магнезий в стандартните разтвори. Върху графиката се отчита средната стойност на абсорбцията, получена за пробата разредено вино, и се определя концентрацията на магнезий С в него в mg/l. В такъв случай концентрацията на магнезий във виното е 100C, mg/l. Закръглява се до най-близкото цяло число.
5.2. Повторяемост (r):
r = 3 mg/l.
5.3. Възпроизводимост (R):
R = 8 mg/l.
29. Определяне на калций
1. Принцип на метода
Калцият се определя директно във виното след подходящо разреждане чрез атомноабсорбционна спектрофотометрия и добавяне на буфер.
2. Реактиви
2.1. Стандартен разтвор, съдържащ един грам калций на литър:
Използва се стандартен търговски калциев разтвор от един грам на литър. Такъв разтвор може да се приготви чрез разтваряне на 2,5 g калциев карбонат (CaCO3) в HCl 1:10 (v/v), в количество, достатъчно да го разтвори напълно. Разтворът се допълва с дестилирана вода до един литър.
2.2. Разреден стандартен разтвор, съдържащ 50 mg калций на литър.
Забележка. Стандартните калциеви разтвори се съхраняват в полиетиленови съдове.
2.3. Разтвор на лантанов хлорид, съдържащ 50 g лантан на литър.
Разтварят се 13,369 g лантанов хлорид (LaCl3.7H2O) в дестилирана вода; добавя се един милилитър солна киселина (HCl), разредена в съотношение 1:10 (v/v) и се допълва до 100 ml.
3. Апаратура
3.1. Атомноабсорбционен спектрофотометър с горелка за пламък въздух-ацетилен.
3.2. Лампа с кух катод за определяне на калций.
4. Начин на работа
4.1. Приготвяне на пробата
В мерителна колба с обем 20 ml се поставят един ml от виното и два ml от разтвора на лантановия хлорид (т. 2.3.). Колбата се допълва до марката с дестилирана вода. Виното, разредено в съотношение 1:20, съдържа 5 g лантан на литър.
Забележка. За сладки вина концентрация 5 g лантан на литър е достатъчна, при условие че разреждането не е намалило съдържанието на захар под границата от 2,5 g/l. При вина с по-висока концентрация на захар концентрацията на лантан се увеличава до 10 g/l.
4.2. Калибриране.
В набор мерителни колби с обем 100 ml се поставят съответно по 0, 5, 10, 15 и 20 ml от разредения стандартен калциев разтвор (т. 2.2.). Във всяка колба се добавя по 10 ml разтвор на лантанов хлорид (т. 2.3.) и с дестилирана вода се допълват до 100 ml. Така приготвените разтвори съдържат съответно 0, 2,5, 5,0, 7,5 и 10 mg калций на литър и по 5 g лантан на литър. Тези разтвори се съхраняват в полиетиленови съдове.
4.3. Измерване.
Дължината на вълната се настройва на 422,7 nm. Абсорбционната скала се нулира, като се използва разтвор, съдържащ 5 g лантан на литър(т. 4.2.). Разреденото вино директно се впръсква в горелката на спектрофотометъра, след което последователно се впръскват петте стандартни разтвора от т. 4.2. Отчитат се показанията за абсорбция. Всяко измерване се повтаря.
5. Изразяване на резултатите
5.1. Метод на изчисление.
Графиката за промените на абсорбцията се построява като функция от концентрацията на калций в стандартните разтвори. Върху графиката се отчита средната стойност на абсорбцията, получена за пробата разредено вино, и се определя концентрацията на калций С в него. Тогава концентрацията на калций във виното е 20C, mg/l. Закръглява се до най-близкото цяло число.
5.2. Повторяемост (r):
Концентрация 60 mg/l: r = 2,7 mg/l.
Концентрация 60 mg/l: r = 4 mg/l.
5.3. Възпроизводимост (R):
R = 0,114xi - 0,5,
където
xi - е концентрация в пробата, в mg/l.
30. Определяне на желязо
1. Принцип на методите
Сравнителен метод
След разреждане на виното в подходящо съотношение и отстраняване на алкохола желязото се измерва директно чрез атомноабсорбционна спектрофотометрия.
Обикновен метод
След минерализиране на виното с 30 % разтвор на водороден пероксид желязото, което се намира под форма на тривалентно Fe (III), преминава в двувалентно Fe (II) и се определя по оцветяването, получено при взаимодействието му с ортофенантролин.
2. Сравнителен метод
2.1. Реактиви
2.1.1. Концентриран стандартен разтвор на желязо, съдържащ един грам Fe (III) на литър.
Използва се стандартен търговски разтвор - един грам на литър. Такъв разтвор може да се приготви чрез разтваряне на 8,6341 g фероамониев сулфат [FeNH4(SO4)2.12H2O] в бидестилирана вода, леко подкислена с 1М солна киселина. Обемът се допълва до един литър.
2.1.2. Разреден стандартен разтвор на желязо с концентрация 100 mg/l.
2.2. Апаратура
2.2.1. Ротационен изпарител във водна баня с термостатичен контрол.
2.2.2. Атомноабсорбционен спектрофотометър с горелка за пламък въздух-ацетилен.
2.2.3. Лампа с кух катод за определяне на желязо.
2.3. Начин на работа
2.3.1. Подготовка на пробата
Алкохолът в пробата се отстранява с ротационенизпарител (50-60 градуса по Целзий) с намаляване на обема на пробата до половината от първоначалния й обем. Пробата се допълва до първоначалния обем с бидестилирана вода. Пробата се разрежда преди измерването.
2.3.2. Калибриране
В набор мерителни колби с обем 100 ml се поставят съответно по 1, 2, 3, 4 и 5 ml от разтвора, съдържащ 100 mg желязо на литър (т. 2.1.2.), и колбите се допълват до 100 ml с дестилирана вода. Така приготвените разтвори съдържат съответно по 1, 2, 3, 4 и 5 mg желязо на литър. Тези разтвори се съхраняват в полиетиленови съдове.
2.3.3. Измерване
Дължината на вълната се настройва на 248,3 nm. Абсорбционната скала се нулира, като се използва дестилирана вода. Разредената проба директно се впръсква в горелката на спектрофотометъра, след което последователно се впръскват петте стандартни разтвора (т. 2.3.2.). Отчитат се показанията за абсорбция. Всяко измерване се повтаря.
2.4. Изразяване на резултатите
2.4.1. Метод на изчисление
Графиката за промените на абсорбцията се построява като функция от съдържанието на желязо в стандартните разтвори. Върху графиката се отчита средната стойност на абсорбцията, получена за пробата разредено вино, и се определя съдържанието на желязо С в него. Тогава съдържанието на желязо във виното е FC, mg/l, където F е факторът на разреждане. Закръглява се до първия десетичен знак.
3. Обикновен метод
3.1. Реактиви
3.1.1. 30 % (m/v) разтвор на водороден пероксид (Н2О2), несъдържащ желязо.
3.1.2. Разтвор на 1М солна киселина, несъдържащ желязо.
3.1.3. Амониев хидроокис [(NH4OH), (20 градуса по Целзий = 0,92 g/ml)].
3.1.4. Раздробена пемза на гранули, третирана с вряща солна киселина, разредена в съотношение 1:2 и промита с дестилирана вода.
3.1.5. 2,5 %-ен разтвор на хидрохинон (C6H6O2), подкислен с един милилитър концентрирана сярна киселина (20 градуса по Целзий = 1,84 g/ml) за 100 ml от разтвора. Този разтвор се съхранява в тъмна бутилка в хладилника и се изхвърля при най-малък признак на потъмняване.
3.1.6. 20 %-ен разтвор на натриев сулфит (Na2SO3), приготвен от неутрален безводен натриев сулфит.
3.1.7. Ортофенантролинов разтвор (C12H8N2.Н2О)-0,5 % в 96 об. % алкохол.
3.1.8. 20 % (m/v) разтвор на амониев ацетат (CH3COONH4).
3.1.9. Разтвор на Fe (III), съдържащ един грам желязо на литър. Ако се предпочита, може да се използва стандартен търговски разтвор, който може да се приготви чрез разтваряне на 8,6341 g фероамониев сулфат [FeNH4(SO4)2.12H2O] в 100 ml 1М солна киселина (т. 3.1.2.) и допълване на обема до един литър с 1М солна киселина (т. 3.1.2.).
3.1.10. Разреден стандартен разтвор на желязо, съдържащ 100 mg желязо на литър.
3.2. Апаратура
3.2.1. Киелдалова колба, 100 ml.
3.2.2. Спектрофотометър, с който могат да се правят измервания при дължина на вълната 508 nm.
3.3. Начин на работа
3.3.1. Минерализация
3.3.1.1. За вина със съдържание на захар под 50 g/l:
В Киелдалова колба с обем 100 ml се поставят 25 ml от виното, 10 ml от разтвора на водородния пероксид (т. 3.1.1.) и няколко гранули пемза (т. 3.1.4.). Разтворът се концентрира до обем 2-3 ml.
Течността се оставя да изстине и към нея се добавя амониев хидроокис (т. 3.1.3.) в количество, достатъчно за алкализиране на течността и утаяване на хидроксиди, като се внимава да не се намокрят стените на колбата. След охлаждането към алкализираната течност се добавя 1М солна киселина (т. 3.1.2.) в количество, достатъчно да разтвори утаените хидроокиси, и полученият разтвор се прехвърля в мерителна колба с обем 100 ml. Киелдаловата колба се изплаква с 1М солна киселина (т. 3.1.2.) и течността от изплакването се добавя към мерителната колба, допълвайки нейния обем до 100 ml.
3.3.1.2. За мъст и вина със съдържание на захар над 50 g/l.
3.3.1.2.1. Ако съдържанието на захар е между 50 и 200 g/l:
• пробата от 25 ml вино се третира с 20 ml разтвор на водороден пероксид (т. 3.1.1.);
• процедурата от т. 3.3.1.1. се повтаря.
3.3.1.2.2. Ако съдържанието на захар е над 200 g/l: Пробите вино или мъст се разреждат в съотношение 1:2 или 1:4, преди да се третират, според процедурата по т. 3.3.1.2.1.
3.3.2. Празна проба
Празната проба се извършва с дестилирана вода, като се използва същият обем от разтвора на водороден пероксид (т. 3.1.1.), използван при минерализирането, и се следва процедурата по т. 3.3.1.1.
3.3.3. Определяне
В две отделни мерителни колби с обем 50 ml се поставят 20 ml от разтвора на солната киселина, получен след минерализирането (т. 3.3.1.1.) и 20 ml от разтвора на солна киселина, получен от празната проба (т. 3.3.2). Към всяка колба се добавят по 2 ml от разтвора на хидрохинон (т. 3.1.5.), 2 ml от разтвора на сулфит (т. 3.1.6) и един милилитър от разтвора на ортофенантролин (т. 3.1.7.). Разтворите се оставят да престоят 15 min-през това време Fe (III) се редуцира до Fe (II). Добавят се по 10 ml от разтвора на амониев ацетат (т. 3.1.8.), допълват се обемите до 50 ml с дестилирана вода и двете мерителни колби се разклащат. Използва се разтворът, получен от празната проба, за да се нулира абсорбционната скала при 508 nm. Измерва се абсорбцията на разтвора при същата дължина на вълната.
3.3.4. Калибриране
В набор мерителни колби с обем 50 ml се поставят съответно по 0,5, 1, 1,5 и 2 ml от разтвора, съдържащ 100 mg желязо на литър (т. 3.1.10) и към всяка от тях се добавят по 20 ml дестилирана вода. Процедурата, описана в т. 3.3.3 се повтаря, за да се измери абсорбцията на всеки от така приготвените стандартни разтвори, които съдържат съответно по 50, 100, 150 и 200 g желязо.
3.4. Изразяване на резултатите
Метод на изчисление
Графиката за изменението на абсорбцията се построява като функция от съдържанието на желязо в стандартните разтвори. Отчита се абсорбцията, получена с разтвора за изследване, и се изчислява съдържанието на желязо С в пробата солна киселина от 20 ml, получена след процедурата по минерализиране, т.е. в 5 ml от винената проба за анализ.
• Съдържанието на желязо във виното е 200 C, mg/l. Закръглява се до първия десетичен знак.
• Ако виното (или мъстта) e било разредено, съдържанието на желязо е 200FC, mg/l, където F е факторът на разреждане. Закръглява се до първия десетичен знак.
31. Определяне на мед
1. Принцип на метода
Методът се основава на атомноабсорбционна спектрофотометрия.
2. Апаратура
2.1. Платинено блюдо
2.2. Атомноабсорбционен спектрофотометър.
2.3. Лампа с кух катод за определяне на мед.
2.4. Захранване с газ-въздух-ацетилен или азотен окис-ацетилен.
3. Реактиви
3.1. Мед (метал).
3.2. Азотна киселина (HNO3), (20 градуса по Целзий = 1,38 g/ml), с концентрация 65 %.
3.3. Разредена азотна киселина, 1:2 (v/v).
3.4. Разтвор на мед в концентрация 1 g/l:
Използва се стандартен фирмен разтвор на мед. Такъв разтвор може да се приготви, като се отмери един грам мед (чист метал) и се прехвърли без загуба в мерителна колба от 1000 ml. Добавя се разредена азотна киселина в съотношение 1:2 (v/v) (т. 3.3), в количество, достатъчно (но без излишък) да разтвори метала, добавят се 10 ml от концентрираната азотна киселина (т. 3.2) и с бидестилирана вода колбата се допълва до марката.
3.5. Разтвор, съдържащ мед в концентрация 100 mg/l:
В мерителна колба с обем 100 ml се поставят 10 ml от разтвора, приготвен според т. 3.4, и с бидестилирана вода колбата се допълва до пълния й обем.
4. Начин на работа
4.1. Подготовка на пробата и измерване съдържанието на мед.
Приготвя се подходящо разреден разтвор с бидестилирана вода.
4.2. Калибриране
В набор мерителни колби с обем 100 ml се отмерват съответно по 0,5, 1,0 и 2,0 ml от разтвора по т. 3.5. (100 mg/l мед) и обемът им се допълва до 100 ml с бидестилирана вода. Така приготвените разтвори съдържат съответно по 0,5, 1,0 и 2,0 mg мед на литър.
4.3. Измерване
Абсорбцията се измерва при 324,8 nm. Скалата се нулира с бидестилирана вода. Абсорбцията на стандартните разтвори се измерва директно, в последователност, приготвени според инструкциите в т. 4.2. Всяко измерване се повтаря.
5. Изразяване на резултатите
Метод на изчисление. Графиката за промените на абсорбцията се построява като функция от концентрацията на мед в стандартните разтвори.
Като се използва измерената абсорбция на пробите, върху калибрационната крива се отчита концентрацията С в милиграми на литър.
Концентрацията на съдържащата се мед е FC, mg/l, където F е факторът на разреждане. Закръглява се до втория десетичен знак.
Забележки:
1. Разтворите за построяване на калибрационната крива и разрежданията на пробата се избират в съответствие с чувствителността на апарата, който ще се използва, и концентрацията на мед в пробата.
2. Когато в пробата за анализ се очакват много ниски концентрации на мед, се следва процедурата: В платинено блюдо се поставят 100 ml от пробата и течността се изпарява на водна баня при 100 градуса по Целзий, докато придобие гъстота на сироп. Капка по капка се добавят 2,5 ml концентрирана азотна киселина (т. 3.2.) , докато дъното на блюдото се покрие изцяло. Внимателно утайката се изгаря до пепел на електрически котлон или слаб пламък; след това блюдото се поставя в муфелна пещ, загрята до 500 градуса по Целзий ± 25 градуса по Целзий, и се оставя в пещта за около един час. След охлаждане пепелта се овлажнява с един милилитър концентрирана азотна киселина (т. 3.2.), докато в същото време се раздробява със стъклена пръчка; сместа се оставя да се изпари и отново се изгаря до пепел, както преди това. Блюдото отново се поставя в муфелната пещ за 15 min. Третирането с азотна киселина се повтаря поне три пъти. Пепелта се разтваря, като в блюдото се добави един милилитър концентрирана азотна киселина (т. 3.2.) и 2 ml бидестилирана вода и сместа се прехвърля в колба от 10 ml. Блюдото се измива три пъти, като всеки път се използват по 2 ml бидестилирана вода. Накрая обемът на колбата се допълва с бидестилирана вода.
32. Определяне на кадмий
1. Принцип на метода
Кадмият се измерва директно във виното чрез атомноабсорбционна спектрофотометрия.
2. Апаратура
Преди употреба всички стъклени прибори трябва да се измиват в концентрирана азотна киселина, загрята до 70-80 градуса по Целзий, а след това да се изплакнат в бидестилирана вода.
2.1. Атомноабсорбционен спектрофотометър, снабден с графитна пещ, мултипотенциометър и с възможност за корекция на фона.
2.2. Лампа с кух катод за определяне на кадмий.
2.3. Автоматични микропипети от 5 l, със сменяеми връхчета, за еднократна употреба.
3. Реактиви
Използваната вода трябва да бъде бидестилирана в боросиликатен стъклен апарат или да се използва вода с подобна степен на пречистеност. Всички реактиви трябва да имат потвърдена чистота за анализ и е особено важно да не съдържат кадмий.
3.1. 85 % фосфорна киселина (20 градуса по Целзий = 1,71 g/ml).
3.2. Разтвор на фосфорна киселина, получен чрез разреждане на 8 ml фосфорна киселина с вода до 100 ml.
3.3. 0,02 М разтвор на двувалентна натриева сол на етилендиаминтетраоцетната киселина (EDTA).
3.4. pH 9 буферен разтвор: в мерителна колба 100 ml се разтварят 5,4 g амониев хлорид в няколко милилитра вода, добавят се 35 ml разтвор на амониев хидроксид (20 градуса по Целзий = 0,92 g/ml), разреден до 25 % (v/v) и се допълва с вода до 100 ml.
3.5. Черно ерихромно Т-1 % (m/m) твърда смес от натриев хлорид.
3.6. Кадмиев сулфат (CdSO4.8H2O).
Титърът на разтвора на кадмиевия сулфат се проверява по следния метод:
В цилиндричен съд с малко вода се отмерват точно 102,6 mg от пробата на кадмиев сулфат и съдът се разклаща, докато съдържанието му се разтвори; добавят се 5 ml от буферния разтвор с pH 9 и приблизително 20 mg от черно ерихром Т. Титрува се с разтвора на EDTA, докато индикаторът започне да се оцветява в синьо.
Обемът на добавената EDTA е 20 ml. Ако има малка разлика в обема, премерената доза кадмиев сулфат за тестване, използвана при приготвянето на еталонния разтвор, се коригира в съответствие с тази разлика.
3.7. Еталонен разтвор на кадмий, с концентрация един грам на литър
Използва се стандартен разтвор. Той може да се приготви чрез разтваряне на 2,2820 g кадмиев сулфат във вода и c допълване на обема до един литър. Разтворът се съхранява в бутилка от боросиликатно стъкло с шлифована стъклена запушалка.
4. Начин на работа
4.1. Приготвяне на пробата:
Виното се разрежда в съотношение 1:2 (v/v) с разтвор на фосфорна киселина.
4.2. Подготовка на калибрационния обхват на разтворите:
Еталонният разтвор на кадмий се използва за приготвяне на серия от разредени разтвори с титър, съответно 2,5; 5; 10 и 15 g кадмий на литър.
4.3. Измерване
4.3.1. Програмиране на пещта (долната информация служи само за ориентация):
- изсушаване при 100 градуса по Целзий в продължение на 30 s;
- минерализация при 900 градуса по Целзий в продължение на 20 s;
- атомизация при 2250 градуса по Целзий в продължение на 2-3 s;
- дебит на азот (продухващ газ) - 6 l/min.
Забележка. В края на процедурата температурата се увеличава до 2700 градуса по Целзий, за да се почисти пещта.
4.3.2. Измервания на атомната абсорбция:
Избира се дължина на вълната 228,8 nm. Абсорбционната скала се нулира с бидестилирана вода. С помощта на микропипета трикратно се отмерват и поставят в пещта по 5 l от всеки от разтворите в калибрационния обхват и от пробата на разтвора за анализ. След всяко поставяне се отчита измерената абсорбция. Абсорбцията се изчислява като средна стойност на резултатите от трите измервания
5. Изразяване на резултатите
5.1. Метод на изчисление
Кривата за изменението на абсорбцията се построява като функция от концентрацията на кадмий в разтворите от калибрационния обхват. Промените следват линейна зависимост. Средната стойност на абсорбцията, получена за пробата на разтвора, се отбелязва върху кривата и се отчита съответната концентрация на кадмий С. Концентрацията на кадмий във виното е 2C, mg/l.
33. Определяне на сребро
1. Принцип на метода
Методът се основава на атомноабсорбционна спектрофотометрия след минерализиране на пробата.
2. Апаратура
2.1. Платинено блюдо.
2.2. Водна баня с термостатичен контрол до 100 градуса по Целзий.
2.3. Пещ с контрол на температурата до 500-525 градуса по Целзий.
2.4. Атомноабсорбционен спектрофотометър.
2.5. Лампа с кух катод за определяне на сребро.
2.6. Захранване с газ: въздух, ацетилен.
3. Реактиви
3.1. Сребърен нитрат (AgNO3).
3.2. Азотна киселина (HNO3)(20 градуса по Целзий = 1,38 g/ml) с концентрация 65 %.
3.3. Разредена азотна киселина - 1:10 (v/v).
3.4. Разтвор, съдържащ сребро в концентрация един грам на литър (1 g/l).
Използва се стандартен търговски разтвор на сребро. Той се приготвя чрез разтваряне на 1,575 g сребърен нитрат в разредена азотна киселина и допълване на обема до 1000 ml с разредена азотна киселина (т. 3.3).
3.5. Разтвор, съдържащ сребро в концентрация 10 mg/l:
10 ml от разтвора, приготвен според инструкциите в т. 3.4, се разреждат до 1000 ml с разредена азотна киселина.
4. Начин на работа
4.1. Подготовка на пробата:
В платинено блюдо се поставят 20 ml от пробата и течността се изпарява до сухо на кипяща водна баня. В пещта остатъкът се изгаря до пепел при 500-525 градуса по Целзий. Бялата пепел се овлажнява с един милилитър концентрирана азотна киселина (т. 3.2). Течността се изпарява на кипяща водна баня, като се добавя отново един милилитър азотна киселина (т. 3.2) и повторно се изпарява. Добавят се 5 ml от разредената азотна киселина (т. 3.3) и сместа леко се нагрява до разтваряне.
4.2. Калибриране
В набор мерителни колби с обем 100 ml с пипета се отмерват съответно по 2, 4, 6, 8, 10 и 20 ml от разтвора в т. 3.5 (10 mg сребро на литър) и колбите се допълват до марката с разредена азотна киселина (т. 3.3). Така приготвените разтвори съдържат съответно по 0,20, 0,40, 0,60, 0,80, 1,0 и 2,0 mg сребро на литър.
4.3. Измерване
Дължината на вълната се настройва на 328,1 nm. Абсорбционната скала се нулира с разредена азотна киселина (3.3). Абсорбцията на разтвора, получен съгласно т. 4.1, се измерва директно на спектрофотометъра, а след това се измерва абсорбцията на еталонните разтвори. Всяко измерване се повтаря.
5. Изразяване на резултатите
Метод на изчисление
Графиката на изменението на абсорбцията се построява като функция от концентрацията на сребро в стандартните разтвори. Като се използва измерената абсорбция на пробата от калибрационната крива, се отчита концентрацията С в mg/l. Концентрацията на сребро във виното е 25C, mg/l. Закръглява се до втория десетичен знак.
Забележка. Концентрацията на разтворите за построяване на калибрационната крива, обемът на използваната проба и крайният обем на течността се избират така, че да съответстват на чувствителността на уреда, който се използва.
34. Определяне на цинк
1. Принцип на метода
След отстраняване на алкохола, цинкът се измерва директно във виното с атомноабсорбционна спектрофотометрия.
2. Реактиви
Използваната вода трябва да е бидестилирана вода или друга вода със същата чистота и съхранявана в стъкленица от боросиликатно стъкло.
2.1. Стандартен разтвор, съдържащ един грам цинк на литър:
Използва се стандартен търговски разтвор на цинк. Той може да се приготви и чрез разтваряне на 4,3975 g цинков сулфат (ZnSO4.7H2O) във вода и допълване на обема до един литър.
2.2. Разреден разтвор на цинк, съдържащ 100 mg цинк на литър.
3. Апаратура
3.1. Ротационен изпарител във водна баня с термостатичен контрол.
3.2. Атомен абсорбционен спектрофотометър с ацетиленова горелка.
3.3. Лампа с кух катод за определяне на цинк.
4. Начин на работа
4.1. Приготвяне на пробата:
От проба 100 ml вино се отстранява алкохолът, като се намали обемът на пробата наполовина, използвайки ротационния изпарител (температура 50-60 градуса по Целзий). Допълва се до първоначалния обем 100 ml с бидестилирана вода.
4.2. Калибриране
В четири мерителни колби с обем 100 ml се поставят съответно по 0,5, 1,0, 1,5 и 2,0 ml от разтвора, съдържащ 100 mg цинк на литър (т. 2.2), и те се допълват до марката с бидестилирана вода. Така приготвените разтвори съдържат съответно по 0,5, 1,0, 1,5 и 2,0 mg цинк на литър.
4.3. Измерване
Дължината на вълната се настройва на 213,9 nm. Абсорбционната скала се нулира с бидестилирана вода. Виното се впръсква директно с горелката на спектрофотометъра, след което последователно се впръскват четирите стандартни разтвора. Отчитат се показанията за абсорбция. Всяко измерване се повтаря.
5. Изразяване на резултатите
5.1. Метод на изчисление
Графиката на промените на абсорбцията се построява като функция от концентрацията на цинк в стандартните разтвори. Върху графиката се отбелязва средната стойност на абсорбцията, получена за пробата разредено вино, и се отчита концентрацията на цинк в нея. Закръглява се с точност до първия десетичен знак.
35. Определяне на олово
1. Принцип на метода
Оловото във виното се измерва директно с атомноабсорбционна спектрофотометрия.
2. Апаратура
Преди употреба всички стъклени прибори се измиват с концентрирана азотна киселина, загрята до 70-80 градуса по Целзий, а след това се изплакват с бидестилирана вода.
2.1. Атомноабсорбционен спектрофотометър, снабден с графитна пещ, мултипотенциометър с възможност за корекция на неспецифичната абсорбция.
2.2. Лампа с кух катод за определяне на олово.
2.3. Автоматични микропипети от 5 l със сменяеми връхчета за еднократна употреба.
3. Реактиви
Всички реактиви трябва да имат потвърдена чистота за анализ и е особено важно да не съдържат олово. Използваната вода трябва да бъде бидестилирана, съхранявана в боросиликатни стъкленици, или да се използва вода с подобна степен на чистота.
3.1. 85 %-на фосфорна киселина (20 градуса по Целзий = 1,71 g/ml).
3.2. Разтвор на фосфорна киселина, получен чрез разреждане на 8 ml фосфорна киселина с вода до 100 ml.
3.3. Азотна киселина (20 градуса по Целзий = 1,38 g/ml).
3.4. Разтвор на олово в концентрация един грам на литър (1 g/l).
Използва се стандартен търговски разтвор. Този разтвор може да се приготви и чрез разтваряне на 1,600 g оловен (II) нитрат [Pb(NO3)2] в азотна киселина, разредена до един процент (v/v) и с допълване на обема до един литър. Разтворът се съхранява в съд от боросиликатно стъкло с шлифована стъклена запушалка.
4. Начин на работа
4.1. Приготвяне на пробата:
Виното се разрежда в съотношение 1:2 или 1:3 с разтвор на фосфорна киселина, в зависимост от предполагаемата концентрация на олово.
4.2. Подготовка на калибрационния обхват на разтворите:
Като се използва еталонният разтвор на олово, се приготвят серия от разтвори с титър съответно 2,5, 5, 10 и 15 g олово на литър, чрез разреждане с бидестилирана вода.
4.3. Определяне
4.3.1. Програмиране на пещта (долната информация служи само за ориентация):
- изсушаване при 100 градуса по Целзий в продължение на 30 s;
- минерализация при 900 градуса по Целзий в продължение на 20 s;
- атомизация при 2250 градуса по Целзий за 2-3 s;
- поток от азот (носещ газ) - 6 l/min.
Забележка: В края на процедурата температурата се увеличава до 2700 градуса по Целзий с цел почистване на пещта.
4.3.2. Измервания
Избира се дължина на вълната 217 nm. Абсорбционната скала се нулира с бидестилирана вода. С помощта на микропипета в програмираната пещ се въвеждат на порции по 5 l от всеки от разтворите в калибрационния обхват и от разтворите на анализираната проба. Записват се измерените абсорбции. Намира се средната стойност от три измервания.
5. Изразяване на резултатите
Метод на изчисляване. Кривата на изменението на абсорбцията се начертава като функция от концентрациите на оловото в калибрационния обхват. Зависимостта е линейна. Стойностите на абсорбцията на анализираните разтвори на пробaта се нанасят на калибрационната крива, получена от концентрациите на оловото С. Концентрацията на олово е FC, g/l, където F е факторът на разреждане.
36. Определяне на флуориди
1. Принцип на метода
Съдържанието на флуориди във виното, към което е прибавен буфер, се определя със селективен електрод с твърда мембрана. Измереният потенциал е пропорционален на логаритъма от активността на флуоридните йони в средата, съгласно с уравнението:
-E = E0 ± S log aF, където:
-Е е потенциалът на йон-селективния електрод, измерен със сравнителен електрод в анализираната среда;
-Е0 - стандартният потенциал на измерващата клетка;
-S - напрежението на йон-селективния електрод (фактор на Нернст); при 25 градуса по Целзий теоретичното напрежение е равно на 59,2 mV;
-aF - активността на флуоридните йони в изследвания разтвор.
2. Апаратура
2.1. Флуориден йон-селективен кристален мембранен електрод
2.2. Референтен електрод (каломелов Ag/AgCl)
2.3. Миливолтметър (рН-метър с разширена скала в миливолта), с точност до 0,1 mV.
2.4. Магнитна бъркалка с покрита пластина, която предпазва анализирания разтвор от топлината на мотора. Съдът за разбъркване е покрит с пластмаса (полиетилен или еквивалентен материал).
2.5. Пластмасови чашки с вместимост 30-50 ml и пластмасови съдове (полиетилен или еквивалентен материал).
2.6. Точни пипети (градуирани в микролитри или други еквивалентни пипети).
3. Реактиви
3.1. Стандартен разтвор на флуориди от един грам на литър.
Използват се стандартни търговски разтвори от един грам на литър. Разтворът може да бъде приготвен и чрез разтваряне на 2,210 g натриев флуорид (предварително изсушен 3 h при 105 градуса по Целзий) в дестилирана вода. Долива се до един литър с дестилирана вода. Разтворът се съхранява в пластмасов съд.
3.2. Стандартните разтвори на флуориди с подходящи концентрации се приготвят чрез разреждане на нормалния разтвор с дестилирана вода и се съхраняват в пластмасови съдове. Разтворите със съдържание на флуориди в mg/l се приготвят непосредствено преди работа с тях.
3.3. Буферен разтвор с рН 5,5
Към вода (около 50 ml) се добавят 10 g от циклохексан-диамин-(1,2)-тетраоцетна киселина (ЦДТА); в 700 ml дестилирана вода се добавя разтвор, съдържащ 58 g натриев хлорид и 29,4 g тринатриев цитрат. ЦДТА се разтваря посредством прибавяне на около 6 ml от 32 % (m/v) разтвор на натриев хидроксид. Накрая се добавят 57 ml оцетна киселина (20 градуса по Целзий = 1,05 g/ml) и с 32 % натриев хидроксид (около 45 ml) рН се довежда до 5,5. Охлажда се с дестилирана вода и се долива до един литър.
4. Начин на работа
Първоначални бележки:
Необходимо е да се внимава всички разтвори по време на измерването да останат при температура 25 градуса по Целзий ± 1 градуса по Целзий (отклонение от повече от 1 градуса по Целзий причинява промени от ± 0,2 mV).
4.1. Директен метод
Определеният обем вино се поставя в пластмасовачашка заедно със същия обем буферен разтвор. Разтворът се разбърква внимателно. Когато индикаторът на апарата се стабилизирa (стабилността е достигната, когато потенциалът варира не повече от 0,2-0,3 mV за 3 min), се отчита стойността на потенциала в mV.
4.2. Метод на стандартната добавка
Без да се прекъсва разбъркването, с помощта на прецизна пипета се добавя известен обем от стандартния разтвор на флуорида към анализираната среда. След стабилизиране показанията на апарата стойността на потенциала се отчита в mV.
Концентрацията на стандартния разтвор, който следва да се добави, се избира, както следва:
а) два или три пъти се увеличава концентрацията на флуорида в анализираната среда;
б) обемът на анализираната среда трябва да остане практически константна величина (увеличение на обема до І 1 %).
Условие "б" улеснява изчисленията (вж. 5).
Приблизителната концентрация на анализираната среда се отчита на калибрационната крива, построена на семи-логаритмична скала със стандартни разтвори на флуориди с титър съответно: 0,1, 0,2, 0,5, 1,0 и 2,0 mg/l.
Забележка. Ако приблизителната концентрация на изследваната проба е по-висока от концентрациите на еталонните разтвори, пробата се разрежда.
Пример:
Ако приблизителното съдържание на флуориди в анализираната среда (обем 20 ml) е 0,25 mg/l F- , концентрацията се увеличава с 0,25 mg/l. За тази цел е необходимо да се използва подходяща пипета. Прибавят се например 0,20 ml от стандартния разтвор (1 %), съдържащ 25 mg/l F- , или 0,50 ml стандартен разтвор със 100 mg/l F-.
5. Изчисления
Съдържанието на флуориди в анализираната среда се изразява в mg/l и се изчислява по формулата:
| VаСа | 1 | |||
| СF = | , където | |||
| Vо | (antilog E/S)-1 |
СF е концентрацията на флуориди в анализираната среда, mg/l;
Са - концентрацията на добавените флуориди в анализираната среда (Vа), mg/l;
Vо - първоначалният обем на анализираната среда преди добавянето, ml;
Vа - обемът на добавения разтвор, ml;
Е - разликата в потенциалите Е1 и Е2, получени в т. 4.1 и 4.2, в mV;
S - напрежението на електрода в анализираната среда.
Ако Vа е много близо до Vо (вж. т. 4.2.), СF се изчислява по формулата:
| 1 | |
| С(F) = С(а) | |
| (antilog E/S)-1 |
Получената стойност се умножава по фактора на разреждане, получен от добавянето на буферен разтвор.
37. Определяне на въглероден диоксид
1. Принцип на методите
1.1. Сравнителен метод
1.1.1. Негазирани вина (налягане на СО2 І 0,5 • 105 Ра) (105 паскала (Ра) = 1 бар.)
Обемът вино, взет от пробата, се охлажда до около 0 градуса по Целзий и се смесва с подходящо количество натриев хидроксид до рН 10-11. Титрува се с разтвор на киселина в присъствието на карбоанхидраза. Съдържанието на въглероден диоксид се изчислява от обема на киселината, необходим за промяната на рН от 8,6 (бикарбонатна форма) до 4,0 (въглена киселина). Контролно титруване се провежда при същите условия с вино, освободено от въглероден диоксид, с цел да се отчете обемът на разтвора на натриев хидроксид, необходим за неутрализирането на киселините на виното.
1.1.2. Пенливи и искрящи вина
Пробата от виното за анализ се охлажда почти до точката на замръзване. След отделяне на определено количество вино, което ще служи за контрола, след отделяне на въглеродния диоксид, останалата част от бутилката се алкализира, за да се фиксира въглеродният диоксид под формата на Nа2СО3. Титрува се с разтвор на киселина в присъствието на карбоанхидраза. Съдържанието на въглеродния диоксид е приспаднато от обема на разтвора на киселината, поставен, за да се промени рН от 8,6 (бикарбонатна форма) до 4,0 (въглена киселина). Контролно титруване се провежда при същите условия с вино, от което е отделен въглеродният диоксид с цел да се определи обемът натриев хидроксид, изразходван за неутрализиране на киселините на виното.
1.2. Обикновен метод-пенливи и искрящи вина.
Манометричен метод-отделеното налягане от въглеродния диоксид се измерва директно в бутилка посредством афрометър.
2. Сравнителен метод
2.1. Негазирани вина (налягането на СО2 І 0,5 • 105 Ра).
2.1.1. Апаратура
2.1.1.1. Магнитна бъркалка.
2.1.1.2. рН-метър.
2.1.2. Реактиви
2.1.2.1. 0,1 М разтвор на натриев хидроксид (NаОН).
2.1.2.2. 0,05 М разтвор на сярна киселина (Н2SО4).
2.1.2.3. Разтвор на карбоанхидраза, 1g/l.
2.1.3. Начин на работа
Пробата от виното заедно с пипетата от 10 ml, използвана за взимането на пробата, се охлажда до около 0 градуса по Целзий.
В чаша с обем 100 ml се поставят 25 ml натриев хидроксид (т. 2.1.2.1.) и се добавят две капки воден разтвор на карбоанхидраза (т. 2.1.2.3.). Посредством пипета, охладена до 0 градуса по Целзий, се добавят 10 ml от виното. Чашата се поставя на магнитната бъркалка, включва се електродът на рН-метъра и се бърка на бавни обороти. Когато температурата на течността достигне стайна температура, се титрува бавно с разтвор на сярна киселина (т. 2.1.2.2.) до рН 8,6.
Титруването се продължава със сярна киселина (т. 2.1.2.2.) до достигане на рН до 4,0-n, ml.
Въглеродният диоксид се отстранява от около 50 ml от пробата вино посредством разбъркване под вакуум за около 3 min, като колбата се загрява на водна баня до около 25 градуса по Целзий. Същата процедура се повтаря и с 10 ml от виното, от което е отстранен въглеродният диоксид - n', ml.
2.1.4. Изразяване на резултатите
Един милилитър от титрувания 0,1 М разтвор на натриев хидроксид отговаря на 4,4 mg въглероден диоксид.
Количеството въглероден диоксид в грамове на литър вино е равно на
0,44(n-n'), където:
n-използваният обем сярна киселина за промяна на рН от 8,6 до 4,0;
n'-използваният обем сярна киселина за титруване на декарбонизираното вино.
Закръглява се до втория десетичен знак.
Забележка.
Когато виното е леко наситено с въглероден диоксид (съдържанието на СО2 e по-малко от един грам на литър), не е необходимо добавянето на карбоанхидраза за катализиране на хидратацията на СО2.
2.2. Пенливи и искрящи вина
2.2.1. Апаратура
2.2.1.1. Магнитна бъркалка
2.2.1.2. рН-метър
2.2.2. Реактиви
2.2.2.1. 50 % (m/m) разтвор на натриев хидроксид (NаОН).
2.2.2.2. 0,05 М разтвор на сярна киселина (Н2SО4).
2.2.2.3. Разтвор на карбоанхидраза, един грам на литър.
2.2.3. Начин на работа.
Нивото на виното в бутилката се маркира и след това се охлажда до началото на замръзване. Бутилката се оставя леко да се загрее, като се разклаща, докато изчезнат ледените кристали. Запушалката бързо се отстранява и 45-50 ml от виното се поставят в мерителен цилиндър за контролно титруване. Точно отделеният обем v милилитра се определя от скалата на цилиндъра, след като той се върне до стайна температура.
След като контролната проба е отстранена, в бутилка с обем 750 ml се добавят 20 ml от разтвора на натриев хидроксид (т. 2.2.2.1.). Изчаква се, докато виното достигне стайна температура. В бехерова чаша от 100 ml се прехвърлят 30 ml преварена, дестилирана вода и две капки от разтвора на карбоанхидразата (т. 2.2.2.3.). Добавят се 10 ml от предварително алкализираното вино. Чашката се поставя на магнитната бъркалка, включва се електродът и се бърка на бавни обороти. Титрува се бавно с разтвор на сярна киселина (т. 2.2.2.2.) до достигане на рН 8,6. Резултатите се отчитат на бюретата. Титруването продължава бавно с разтвор на сярна киселина (т. 2.2.2.2.) до достигане на рН 4,0-n, ml (обемът киселина, изразходван за промяна на рН от 8,6-4,0).
Отстранява се СО2 от v ml вино, поставено от една страна за контролно титруване чрез третиране под вакуум за 3 min, като колбата се загрява на водна баня до около 25 градуса по Целзий. Поставят се 10 ml от декарбонизираното вино и се добавят 30 ml преварена дестилирана вода, както и 2-3 капки разтвор на натриев хидроксид (т. 2.2.2.1.), за довеждане на рН до 10-11. Процедурата се продължава, както е описано - n' ml (обемът на добавената 0,05 М сярна киселина).
2.2.4. Изразяване на резултатите
Един милилитър 0,05 М сярна киселина отговаря на 4,4 mg СО2.
Бутилката алкализирано вино се изпразва и първоначалният обем се определя с точност до един милилитър, посредством доливане до марката с вода-V ml.
Количеството на СО2 в грамове на литър вино e
| V-v + 20 | ||
| 0,44(n-n') | , където: | |
| V-v |
V e първоначалният обем на анализираното вино;
v-отделеният обем на пробата вино, доведена до стайна температура (вж. т. 2.2.3).
Закръглява се до втория десетичен знак.
2.3. Изразяване на резултатите
Изходното налягане при 20 градуса по Целзий (Рафр20) се изчислява в паскали по формулата:
| Q | ||
| Рафр(20) = | - Р(атм), | |
| 1,951 • 10-5(0,86-0,01A)(1-0,00144S) |
където:
Q е съдържанието на СО2, g/l;
А - алкохолното съдържание на виното, при 20 градуса по Целзий;
S - съдържанието на захар във виното, g/l;
Ратм е атмосферното налягане, Pa.
3. Обикновен метод (пенливи и искрящи вина)
3.1. Апаратура
Афрометър
Напрежението в бутилките с пенливо и искрящо вино се измерва с афрометър. Той има различни форми в зависимост от начина, по който бутилката е затворена (с метална запушалка, капачка, коркова или пластмасова тапа, вж. фиг. 1 и 2). Афрометрите са градуирани в паскали (Ра) (1 паскал (Ра) = 1 N/m2 = 10-5 бара.), независимо, че обичайно като мерни единици се използват 105 паскали или килопаскали.
Те попадат в различни класове. Класът на манометъра е прецизиран за пълно отчитане в зависимост от точността на скалата, изразена в процент (примерно манометър 1000 кРа клас 1 означава, че максималното налягане от 1000 кРа може да бъде отчетено с точност до ± 10 кРа). За прецизно измерване се препоръчва инструмент от клас 1.
Афрометърът трябва да бъде проверяван редовно (поне веднъж годишно).
3.2. Начин на работа
Измерванията се провеждат с бутилки, чиято температура е стабилизирана в продължение на 24 h.
След като се пробие капачката, тапата или запушалката на бутилката, тя трябва да бъде разклатена енергично, докато налягането се установи до постоянно, за да бъде отчетено.
3.3. Изразяване на резултатите
Свръхналягането при 20 градуса по Целзий (Рафр20) се изразява в Ра или кРа и е в съответствие с прецизността на манометъра.
Показанията трябва да се във форма, съответстваща на точността на манометъра (примерно: 6,3•105 Ра или 630 кРа, а не 6,33•105 Ра или 633 кРа за клас 1, манометър с пълна скала на отчитане от 1000 кРа).
Ако температурата, при която се извършва измерването, е различна от 20 градуса по Целзий, се прави корекция на резултатите, като измереното налягане се умножи по коефициента
| Рафр20 | |
| ______, | даден в таблицата. |
| Рафрt |
Това превръща резултатите в резултати при 20 градуса по Целзий.
4. Връзка между налягането и количеството на въглеродния диоксид в пенливо вино (Не се взема предвид присъствието на други газове (О2, N2 и т.н.), които имат много малко влияние върху налягането.).
От изходното налягане при 20 градуса по Целзий (Рафр20) се изчислява абсолютното налягане при 20 градуса по Целзий (Pабс20) по формулата:
Pабс(20) = Ратм + Рафр(20),
където:
Pатм е атмосферното налягане, изразено в Pa.
Количеството на въглеродния диоксид във виното се изразява чрез изразите:
- в литри СО2 на литър вино:
0,987.10-5Pабс20(0,86-0,01А)(1-0,00144S);
- в грамове СО2 на литър вино:
1,951.10-5Pабс20(0,86-0,01А)(1-0,00144S),
където:
А е алкохолното съдържание във виното при 20 градуса по Целзий;
S-съдържанието на захари във виното, g/l.
Таблица
Отношение на налягането Рафр20 за пенливи и искрящи вина при 20 градуса по Целзий и налягането Рафрt при температура t
| 0 | 1,85 | 13 | 1,24 |
| 1 | 1,80 | 14 | 1,20 |
| 2 | 1,74 | 15 | 1,16 |
| 3 | 1,68 | 16 | 1,13 |
| 4 | 1,64 | 17 | 1,09 |
| 5 | 1,59 | 18 | 1,06 |
| 6 | 1,54 | 19 | 1,03 |
| 7 | 1,50 | 20 | 1,00 |
| 8 | 1,45 | 21 | 0,97 |
| 9 | 1,40 | 22 | 0,95 |
| 10 | 1,36 | 23 | 0,93 |
| 11 | 1,32 | 24 | 0,91 |
| 12 | 1,28 | 25 | 0,88 |
38. Определяне на цианидни производни
(Внимание! Необходимо е да се спазват изискванията за безопасност при работа с химикалите хлорамин-T, пиридин, калиев цианид, солна киселина и фосфорна киселина. Изхвърлянето на използваните продукти трябва да се извършва съгласно действащите разпоредби, свързани с околната среда. Да се внимава с циановодородната киселина, която се отделя при дестилиране на подкислени вина.)
1. Принцип
Цялото количество свободна циановодородна киселина във виното се отделя чрез киселинна хидролиза и се изолира чрез дестилация. След като реагира с хлорамин-T и пиридин, образуваният глутакон диалдехид се определя чрез колориметрия въз основа на синьото оцветяване с 1,3-диметил-барбитурова киселина.
2. Апаратура
2.1. Дестилационна апаратура
За определяне на алкохолното съдържание на виното се използва класическият метод за дестилация (т. 4.1).
2.2. Колба от 500 ml с кръгло дъно със стандартизирани шлифовани свързващи елементи.
2.3. Водна баня с термостатично регулиране при 20 градуса по Целзий
2.4. Спектрофотометър, даващ възможност да се правят измервания при дължина на вълната 590 nm
2.5. Стъклени кювети или кювети за еднократна употреба с оптичен път 20 mm
3. Реактиви
3.1. 25 % (m/v) фосфорна киселина (H3PO4)
3.2. 3 % (m/v) разтвор на хлорамин - T (C7H7ClNNa O2S.3Н2О)
3.3. Разтвор на 1,3-диметил-барбитурова киселина - разтварят се 3,658 g 1,3-диметил-барбитурова киселина (C6H8N2O3) в 15 ml пиридин и 3 ml солна киселина (20 градуса по Целзий = 1,19 g/ml) и се добавят 50 ml дестилирана вода.
3.4. Калиев цианид (KCN).
3.5. 10 %-ен (m/v) разтвор на калиев йодид (KJ).
3.6. Разтвор на сребърен нитрат (AgNO3) 0,1 M.
4. Процедура
4.1. Дестилация
В 500-милилитрова колба (т. 2.2) се наливат 25 ml вино, 50 ml дестилирана вода, един милилитър фосфорна киселина (т.3.1) и се пускат няколко стъклени топчета. Колбата веднага се поставя в дестилатора. Използва се фуния за преливане на дестилата в градуирана колба с обем 50 ml, съдържаща 10 ml вода. Градуираната колба се потопява във вода с лед. В градуираната колба се събират 30-35 ml дестилат (или общо около 45 ml течност).
Фунията на кондензатора се промива с няколко милилитра дестилирана вода. Дестилатът се оставя да достигне 20 градуса по Целзий и се налива дестилирана вода до съответната марка.
4.2. Измерване
В 50-милилитрова конична колба с шлифована стъклена пробка се прехвърлят 25 ml дестилат, добавя се 1 ml разтвор на хлорамин-T (т.3.2) и с пробката колбата се затваря херметично. След 60 s се добавят 3 ml 1,3-диметил-барбитурова киселина (т.3.3), съдът се затваря херметично с пробката и се оставя в продължение на 10 min. След това се измерва поглъщането по отношение на контролен образец (25 ml дестилирана вода вместо 25 ml дестилат) при дължина на вълната 590 nm, в кювети с оптичен път 20 mm.
5. Построяване на калибровъчната крива
5.1. Аргентометрично титруване на калиевия цианид
Измерването се прави внимателно. В градуирана колба с обем 300 ml се разтварят около 0,2 g KCN (т. 3.4) в 100 ml дестилирана вода, добавят се 0,2 ml разтвор на калиев йодид (т.3.5) и се титрува с разтвор на 0,1 M сребърен нитрат (т.3.6) до получаване на устойчиво жълтеникаво оцветяване.
Като се има предвид фактът, че един милилитър разтвор на 0,1 M сребърен нитрат отговаря на 13,2 mg KCN, се изчислява концентрацията на KCN в пробата.
5.2. Стандартна крива
5.2.1. Приготвяне на стандартни разтвори
След като е установена концентрацията на KCN съгласно процедурата, описана в т. 5.1., се приготвя стандартен разтвор, съдържащ 30 mg циановодородна киселина на литър (30 mg HCN = 72,3 mg KCN ). Разтворът се разрежда до 1/10.
В мерителна колба с обем 100 ml се прехвърлят съответно по 1,0, 2,0, 3,0, 4,0, и 5,0 ml от разредения разтвор (пробата) и колбите се допълват с дестилирана вода до марката. Приготвените разтвори съдържат съответно по 30, 60, 90, 120 и 150 g циановодородна киселина на литър.
5.2.2. Титруване
Вземат се 25-милилитрови проби от получените по този начин стандартни разтвори и се продължава съгласно указанията в т. 4.1 и 4.2.
Стойностите, които се получават за поглъщането на стандартните разтвори в зависимост от съдържанието на циановодородна киселина, трябва да образуват графично права линия, пресичаща началото на координатната система.
6. Изразяване на резултатите
Циановодородната киселина се изразява в микрограмове на литър и се закръглява до цяло число.
Метод на изчисляване. Концентрацията на циановодородната киселина се отчита по калибрационната крива. Ако пробата за анализ е била разредена, резултатът се умножава с коефициента на разреждане.
Повторяемост (r) и възпроизводимост (R)
бяло вино:
r = 3,1 g/l или приблизително 6 % xi;
R = 12 g/l или приблизително 25 % xi.
червено вино:
r = 6,4 g/l или приблизително 8 % xi;
R = 23 g/l или приблизително 29 % xi,
където:
xi е средната концентрация на HCN във виното;
за бяло вино - xi = 48,4 mg/l;
за червено вино - xi = 48,4 mg/l.
39. Определяне на алил изотиоцианат
1. Принцип на метода
Алил изотиоцианатът, съдържащ се във виното, се отделя чрез дестилация и се определя посредством газова хроматография.
2. Реактиви
2.1. Абсолютен алкохол
2.2. Стандартен разтвор: разтвор на алил изотиоцианат в абсолютен алкохол, съдържащ 15 mg/l активен алил изотиоцианат.
2.3. Замразена сместа, състояща се от етанол и сух лед (температура минус 60 градуса по Целзий).
3. Апаратура
3.1. Апарат за дестилация, през който непрекъснато се пропуска струя от азот.
3.2. Подгряващо покритие, термостатично контролирано.
3.3. Дебитометър.
3.4. Газов хроматограф с пламъко-фотометричен детектор, снабден със селективен филтър за серни компоненти (дължина на вълната 394 nm), или друг подходящ детектор.
3.5. Хроматографска колона от неръждаема стомана с вътрешен диаметър 3 mm и дължина 3 m, пълна с Carbowax 20M върху 10 % на хромосорб WHP, 80-100 mesh.
3.6. Mикроспринцовка от 10 l
4. Начин на работа
В дестилационната колба се наливат два литра вино. В двете епруветки за събиране се добавят няколко милилитра етанол (т. 2.1.) така, че порьозните части на газовите тръби да бъдат напълно покрити. Двете епруветки се изстудяват отвън със замръзнала смес. Колбата се свързва със събирателните епруветки и започва да се вкарва азот с обем 3 l/h. Виното се загрява до 80 градуса по Целзий с помощта на загряващата обвивка, дестилира се и се отделят 45-50 ml от дестилата.
Хроматографът се кондиционира: препоръчително е да се използват следните условия:
- температура на инжектора - 200 градуса по Целзий;
- температура на колоната - 130 градуса по Целзий;
- газов поток от хелиев носител - 20 ml/min.
С помощта на микроспринцовка се въвежда определено количество стандартен разтвор, така че пикът, съответстващ на алил изотиоцианата, лесно да се отличава на хроматограмата.
По същия начин се въвежда и еквивалентно количество от дестилата. Времето на задържане се установява по пика, който съответства на този на алил изотиоцианата.
При описаните условия компонентите, които са естествено представени във виното, не дават заблуждаващи пикове на хроматограмата на пробата.
Фиг. Апарат за дестилация в ток от азот
40. Цветни характеристики
1. Вина и гроздова мъст
1.1. Определение
Хроматичните характеристики на виното са:
• пропускливост-тя варира обратно пропорционално на цветния интензитет на виното;
• хроматичност-характеризира се с доминиращата дължина на вълната (която характеризира нюанса) и чистотата.
Цветните характеристики на червените вина и вината розе се изразяват чрез цветния интензитет и нюанса, които се определят по обикновения метод.
1.2. Принцип на методите
1.2.1. Сравнителен метод-спектрофотометричен метод, който позволява определянето на тримерните величини. Необходими са три-хроматични координати за определянето на цвета, както е залегнало в Международната комисия по осветяването (International Commission on Illumination CIE).
1.2.2. Обикновен метод (приложим за червени вина и вина розе)-спектрофотометричен метод, чрез който се определят цветните характеристики. По принцип се изразява с интензитета на цвета, даден от сумата на абсорбциите при дължина на вълната 420, 520 и 620 nm за един сантиметър оптичен път в пробата.
Цветът се изразява като абсорбция при 420 и 520 nm.
1.3. Сравнителен метод
1.3.1. Апаратура
1.3.1.1. Спектрофотометър, позволяващ измерване между 300 и 700 nm
1.3.1.2. Чифт стъклени кювети с оптичен път b 0,1, 0,2, 0,5, 1, 2 и 4 cm.
1.3.2. Начин на работа
1.3.2.1. Подготовка на пробата
Мътното вино трябва да бъде избистрено чрез центрофугиране. Въглеродният диоксид в младото и пенливо вино трябва да бъде отстранен посредством разклащане под вакуум.
1.3.2.2. Измервания
Оптичният път b в стъклените кювети също трябва да бъде избран така, че измерваната абсорбция да попада в интервала между 0,3 и 0,7. Подходящо е да се използват кювети с 2 (или 4) cm оптичен път за бели вина; един сантиметър-за вина розе, и 0,1 (или 0,2) cm-за червени вина. Спектрофотометричното измерване трябва да бъде извършено с дестилирана вода като сравнителна течност в кювети със същия оптичен път b с цел нулиране на абсорбцията по скалата при дължини на вълната 445, 495, 550 и 625 nm.
Четирите съответстващи абсорбции за виното трябвада бъдат закръглени до третия десетичен знак за оптичен път b-А445, А495, А550 и А625.
1.3.3. Изчисления
Стойностите на абсорбциите за оптичен път b cm се отчитат от таблица I. Изчисляват се съответните пропускливости (Т %), отговарящи на Т445, Т495, Т550 и Т625.
Изчисляват се тримерните величини Х, У, Z, закръглени до първия знак след десетичната запетая, от следните уравнения:
Х = 0,42Т625 + 0,35Т550 + 0,21Т445
У = 0,20Т625 + 0,63Т550 + 0,17Т495
Z = 0,24Т495 + 0,94Т445
Изчисляват се координатите на цвета х и у по формулите:
| X | Y | |||
| x = | y = | |||
| X + Y + Z | X + Y + Z |
1.3.4. Изразяване на резултатите
1.3.4.1. Относителната пропускливост се дава от стойността на У, изразена в проценти (за черно У=0 %; за безцветни течности У = 100 %).
1.3.4.2. Хроматичността се определя от доминиращата дължина на вълната и чистотата. Диаграмата на хроматичността е изразена на фиг. 1. Точката 0 отговаря на източник на бяла светлина, представена чрез стандарта С с координати хо = 0,3101 и уо = 0,3163, храктеризиращи средно ярка дневна светлина.
• Доминираща дължина на вълната. Точка С се намира върху диаграмата с координати х и у. Ако С е извън триъгълника АОВ, се прекарва права линия, свързваща точките О и С. Тя се продължава и пресича спектъра в точка S, която отговаря на доминиращата дължина на вълната. Ако точка С е във вътрешността на триъгълника АОВ, прекарва се права от С към О и тя пресича спектъра в точка, която отговаря на дължината на вълната, характеризираща допълнителния цвят на виното. Тази дължина на вълната се изразява чрез стойността на буквата С.
• Чистота. Когато точката С е извън триъгълника АОВ, чистотата се изразява в %, чрез съотношението:
| разстояние от точка С до точка О | |
| 100 | |
| разстояние от точка O до точка S |
Когато точката С е в триъгълника АОВ, чистотата се определя от процента на съотношението:
| разстоянието от точка С до точка О(1) | |
| 100 | |
| разстоянието от точка О до точка Р |
(1) Това разстояние се пресмята в смисъл на ОС.
Р е точката, където правата линия ОС пресича линията на ярко червения цвят (линия АВ). Чистотата се дава директно от диаграмите за хроматичност, като се познават х и у (фиг. 2, 3, 4, 5 и 6).
1.3.4.3. Резултати
Луминесцентността, хроматичността (изразени с доминираща дължина на вълната) и чистотата дефинират напълно цвета на виното. Тези величини се представят в анализното свидетелство заедно със стойността на оптичния път, при която са били направени измерванията.
1.4. Обикновен метод
1.4.1. Апаратура
1.4.1.1. Спектрофотометър, позволяващ измерване между 300 и 700 nm.
1.4.1.2. Чифт стъклени кювети с оптичен път b, - 0,1, 0,2, 0, 5 и 1 cm.
1.4.2. Предварителна подготовка на пробата
Мътното вино се центрофугира.
Въглеродният диоксид в младото и пенливото вино се отстранява посредством разклащане под вакуум.
1.4.3. Начин на работа
Оптичният път b в градуирани кювети се избира, така че да позволява измерване на абсорбцията А между 0,3 и 0,7.
Спектрофотометричното измерване се извършва с дестилирана вода като сравнителна течност в кювета със същия оптичен път b с цел нулиране на абсорбцията по скалата при дължина на вълната 420, 520 и 620 nm.
1.4.4. Изразяване на резултатите
1.4.4.1. Изчисления
Абсорбциите се изчисляват за един сантиметър оптичен път при три дължини на вълните, разделено на b (дебелина на кюветата) в сантиметри - А420, А520 и А620.
Интензитетът I се изразява с формулата:
I = А420 + А520 + А620, където:
А420 - абсорбцията при дължина на вълната 420 nm;
А520 - абсорбцията при дължина на вълната 520 nm;
А620 - абсорбцията при дължина на вълната 620 nm.
Закръглява се с точност до третия десетичен знак.
Нюансът се изразява с формулата
| А420 | |
| N = | _____. |
| А520 |
Закръглява се до третия десетичен знак.
Таблица I
Трансформация на поглъщанията към излъчванията (Т %)
Начин на работа
Първият знак на абсорбцията се отчита във вертикалната колона 1, а вторият знак след десетичната запетая се отчита върху хоризонталната линия 2. Намира се цифрата, отговаряща на точката на пресичането им. За да се получи пропускливостта, това число се разделя на 10, ако абсорбцията е по-малка от единица; на 100- ако лежи между едно и 2; на 1000-ако е между 2 и 3.
Забележка. Числото горе вдясно на всяко квадратче позволява да се държи сметка чрез интерполация за третия десетичен знак върху стойността на поглъщане.
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | |
| 0 | 100023 | 97722 | 95522 | 93321 | 91221 | 89120 | 87120 | 85119 | 83219 | 81319 |
| 1 | 79418 | 77618 | 75917 | 74117 | 72416 | 70816 | 69216 | 67615 | 66115 | 64615 |
| 2 | 63114 | 61714 | 60314 | 58914 | 57513 | 56213 | 54913 | 53712 | 52512 | 51312 |
| 3 | 50111 | 49011 | 47911 | 46811 | 45710 | 4479 | 4369 | 42710 | 41710 | 4079 |
| 4 | 3989 | 3899 | 3809 | 3718 | 3638 | 3558 | 3478 | 3398 | 3317 | 3248 |
| 5 | 3167 | 3097 | 3027 | 2957 | 2886 | 2827 | 2756 | 2696 | 2636 | 2576 |
| 6 | 2516 | 2455 | 2406 | 2345 | 2295 | 2245 | 2195 | 2145 | 2095 | 2045 |
| 7 | 1994 | 1955 | 1904 | 1864 | 1824 | 1784 | 1744 | 1704 | 1664 | 1624 |
| 8 | 1583 | 1554 | 1513 | 1484 | 1444 | 1413 | 1383 | 1353 | 1323 | 1293 |
| 9 | 1263 | 1233 | 1203 | 1172 | 1153 | 1122 | 1103 | 1072 | 1053 | 1022 |
Пример:
| Абсорбция | 0,47 | 1,47 | 2,47 | 3,47 |
| Проводимост Т % | 33,9 | 3,4 | 0,3 | 0 |
Проводимостта Т % е изразена с точност до 0,1 %.
Фиг. 1. Хроматична диаграма, включваща всички цветове в спектъра
Фиг. 2. Хроматична диаграма за вина с ярко червен цвят и вина с керемидено червен цвят
Фиг. 3. Хроматична диаграма за вина с ярко червен цвят и вина с керемидено червен цвят
Фиг. 4. Хроматична диаграма за вина с ярко червен цвят и с виолетов цвят
Фиг. 5. Хроматична диаграма за вина с ярко червен цвят и с виолетов цвят
Фиг. 6. Хроматична диаграма за вина с ярко червен цвят и с виолетов цвят
2. Ректифицирана и концентрирана гроздова мъст
2.1. Принцип на метода
Абсорбцията на ректифицираната гроздова мъст се измерва при дължина на вълната 425 nm, оптичен път един сантиметър след разреждане, до достигане на концентрация на захарта 25 % (m/m) (25 ° по Брикс).
2.2. Апаратура
2.2.1. Спектрофотометър, позволяващ измерване от 300 до 700 nm.
2.2.2. Стъклени кювети с оптична дължина един сантиметър.
2.2.3. Мембранен филтър с размер на порите 0,45 m.
2.3. Начин на работа
2.3.1. Подготовка на пробата
Използва се разтворът със захарна концентрация 25 % (m/m) (25 ° по Брикс), приготвен, както е описано в метода "24. Определяне на pH", т. 4.1.2. Филтрира се през мембранния филтър с пори с диаметър 0,45 m.
2.3.2. Определяне на абсорбцията
Абсорбционната скала се нулира при дължина на вълната 425 nm, като се използва кювета, съдържаща дестилирана вода, с оптична дължина от един сантиметър.
Абсорбцията А се измерва при същата дължина на вълната с разтвор, съдържащ 25 % захар (25 ° по Брикс), приготвен както в т. 2.3.1 и поставен в кювета с оптична дължина един сантиметър.
2.4. Изразяване на резултатите
Стойността на абсорбцията на ректифицирана и концентрирана гроздова мъст при дължина на вълната 425 nm в 25%-ен разтвор (25 ° по Брикс) се закръглява до втория десетичен знак.
41. Определяне на индекса на Фолин-Чикалто
1. Определение
Индексът на Фолин-Чикалто се използва за определяне на фенолните съединения.
2. Принцип на метода
Всички фенолни съединения, съдържащи се във виното, се окисляват чрез реактива на Фолин-Чикалто. Този реактив се получава от cмес от фосфор-волфрамова киселина (H3PW12O40) и фосфор-молибденова киселина (H3PMo12O40), която след окисляване на фенолите се редуцира до cмес от сини окиси на волфрама (W8O23) и молибдена (Mo8O23). Полученото синьо оцветяване има максимум на абсорбцията при 750 nm и е пропорционално на общото количество първоначални фенолни съединения.
3. Реактиви
Всички са с квалификация "химически чист за анализ". Използваната вода е дестилирана или с подобна чистота.
3.1. Реактив на Фолин-Чикалто
Този реактив може да се намери в търговската мрежа, готов за използване. Приготвя се по следния начин: В 700 ml дестилирана вода се разтварят 100 g натриев волфромат (Na2WO4.2H2O) и 25 g натриев молибдат (Na2MoO4.2H2O). Добавят се 50 ml 85 % фосфорна киселина (20 градуса по Целзий = 1,71 g/ml) и 100 ml концентрирана солна киселина (20 градуса по Целзий = 1,19 g/ml). Разтворът се оставя да ври в продължение на 10 h, при условия на свободно извиране на водата, след което се добавят 150 g литиев сулфат (LiSO4.H2O) и няколко капки бром и се поставя отново да ври в продължение на 15 min. Оставя се да се охлади и се долива дестилирана вода до един литър.
3.2. 20 %-ен (m/v) разтвор на безводен натриев карбонат (Na2CO3).
4. Апаратура
Нормална лабораторна апаратура, в случая:
4.1. мерителни колби от 100 ml;
4.2. спектрофотометър, работещ при 750 nm.
5. Начин на работа
5.1. Червени вина
В мерителна колба от 100 ml (т. 4.1) се прехвърлят задължително в следната последователност: един милилитър от виното, предварително разредено 1:5; 50 ml дестилирана вода; 5 ml от реактива на Фолин-Чикалто (т. 3.1); 20 ml от разтвора на натриевия карбонат (т. 3.2). В колбата се долива с дестилирана вода до 100 ml. Разбърква се до получаването на хомогенна cмес. Изчаква се 30 min, за да се стабилизира реакцията. Абсорбцията се определя при 750 nm в кювета с оптичен път един сантиметър, спрямо чиста дестилирана вода, измерена вместо виното (контрола). Ако абсорбцията не е около 0,3, то пробата подходящо се разрежда.
5.2. Бели вина
Същата процедура се изпълнява с един милилитър неразредено вино.
5.3. Ректифицирана и концентрирана гроздова мъст
5.3.1. Подготовка на пробата
Използва се разтворът с концентрация на захарта 25 %(m/m) (25 ° по Брикс), подготвена по начин, описан в метода "24. Определяне на pH", т. 4.1.2.
5.3.2. Измерване
Процедира се по описания начин за червено вино (т. 5.1), като се използват 5 ml от пробата по описания в т. 5.3.1 начин и се измерва абсорбцията спрямо контролната проба, приготвена с 25 % (m/m) разтвор на инвертна захар.
6. Изразяване на резултатите
6.1. Метод на изчисляване
Резултатът е изразен чрез индекс, получен чрез умножаване на абсорбцията по 100 за червени вина, разредени в съотношение 1:5 (или като се използва съответният фактор на разреждане) и съответно по 20 за бели вина. За ректифицирана и концентрирана гроздова мъст резултатът се умножава по 16.
6.2. Повторяемост
Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или непосредствено едно след друго, от един и същ анализатор, върху една и съща проба, при еднакви условия, не трябва да е по-голяма от единица. Добрата повторяемост на резултатите се постига с изключително чиста апаратура (мерителните колби и спектрофотометричните кювети).
42. Специфичен анализ на концентрирана и ректифицирана гроздова мъст
а) Общи катиони
1. Принцип на метода
Пробата се третира чрез силно кисела катионобменна смола. Катионите се обменят срещу Н+. Те се изразяват чрез разликата между общата киселинност на елюата и тази на анализираната проба.
2. Апаратура
2.1. Стъклена колона с вътрешен диаметър 10-11 mm и дължина приблизително 300 mm, с кран.
2.2. pH-метър със скала, разграфена най-малко с 0,1 pH мерни единици.
2.3. Електроди:
- стъклен електрод, потопен в дестилирана вода;
- сравнителен каломелов електрод, потопен в разтвор на наситен калиев хлорид;
- или комбиниран електрод, потопен в дестилирана вода.
3. Реактиви
3.1. Силна катион-обменна cмола в Н+ форма, предварително накисната във вода една нощ, за да набъбне.
3.2. 0,1 M разтвор на натриев хидроксид.
3.3. Хартиен pH индикатор
4. Начин на работа
4.1. Подготовка на пробата
Използва се разтворът, получен чрез разреждане на ректифицирана и концентрирана гроздова мъст до 40 % (m/v), както е описано в метода "13. Определяне на обща киселинност", т. 5.1.2.
4.2. Подготовка на йонно-обменната колона
В колоната се поставят приблизително 10 ml от предварително набъбнала cмола в Н+ форма. Колоната се изплаква с дестилирана вода, докато се премахне киселинността, като за проверка се използва хартиен индикатор.
4.3. Йонен обмен
През колоната се пропускат 100 ml от разтвора на концентрираната и ректифицирана гроздова мъст, приготвен съгласно т. 4.1, със скорост една капка на секунда. Елюатът се събира в чаша. Колоната се изплаква с 50 ml дестилирана вода. Киселинността на елюата (включително водата от изплакването) се титрува с 0,1 M разтвор на натриев хидроксид, докато рН стане 7 при 20 градуса по Целзий. Алкалният разтвор се прибавя бавно и постоянно при разклащане на получения разтвор от време на време - n, ml.
5. Изразяване на резултатите
Киселинността на елюата се изразява в милиеквивалента на килограм общи захари с точност до първия десетичен знак.
5.1. Изчисления
• Киселинността на елюата се изразява в милиеквивалента на килограм ректифицирана и концентрирана гроздова мъст по формулата:
Е = 2,5n, където
n са използваните милилитри 0,1 M разтвор на натриев хидроксид.
• Общата киселинност на концентрирана и ректифицирана мъст се изразява в милиеквивалента на килограм (вж. метод "13. Определяне на обща киселинност", т. 6.1.2): а.
• Общите катиони се изразяват в милиеквиваленти на килограм общи захари:
| 2,5n-a | |
| 100 | _______, |
| P |
където:
Р е процентът на общите захари (m/m);
а - общата киселинност в милиеквиваленти на килограм ректифицирана и концентрирана мъст
б) Проводимост
1. Принцип на метода
Измерва се електрическата проводимост на колона с течност, ограничена с два паралелни платинени електрода, които съставляват едно от отклоненията на Уитстонов мост. Проводимостта варира с изменението на температурата. Измерванията се правят при 20 градуса по Целзий.
2. Апаратура
2.1. Уред за анализ на проводимостта, позволяващ измерване на проводимостта в граници 1-1000 микросименса на сантиметър.
2.2. Водна баня, даваща възможност за достигане на температура на анализираната проба около 20 градуса по Целзий ± 2 градуса по Целзий.
3. Реактиви
3.1. Дейонизирана вода със специфична проводимост под 2 микросименса на сантиметър при 20 градуса по Целзий.
3.2. Сравнителен разтвор на калиев хлорид
В дейонизирана вода (т. 3.1) се разтварят 0,581 g калиев хлорид (КCl), предварително изсушен до постоянна маса при температура 105 градуса по Целзий. Допълва се до един литър с дейонизирана вода (т. 3.1). Този разтвор има проводимост от 1000 микросименса на сантиметър, при 20 градуса по Целзий. Съхранява се не повече от три месеца.
4. Начин на работа
4.1. Подготовка на пробата за анализ
Използва се разтвор с обща концентрация на захарите 25 %(m/m) (25 ° по Брикс), както е описано в метода "24. Определяне на pH", т. 4.1.2.
4.2. Определяне на проводимостта
Температурата на анализираната проба се довежда до 20 градуса по Целзий чрез поставянето й на водна баня и тази температура се поддържа до ± 0,1 градуса по Целзий. Клетката за проводимост се изплаква два пъти с изследвания разтвор. Измерва се проводимостта и полученият резултат се изразява в микросименси на сантиметър.
5. Изразяване на резултатите
Резултатът се изразява в микросименси на сантиметър (Scm-1) при 20 градуса по Целзий, при 25 % (m/m) (25 ° по Брикс) разтвор на ректифицирана и концентрирана гроздова мъст. Закръглява се до цяло число.
Изчисления. Ако апаратът не е снабден с компенсатор на температурата, проводимостта се коригира, като се използва таблицата. Ако температурата е под 20 градуса по Целзий, корекцията се добавя, а ако температурата е над 20 градуса по Целзий - се изважда.
Таблица
Корекции на проводимостта (за температури, различни от 20 градуса по Целзий) в микросименси на сантиметър-1
| Про- | Температури |
| води- | |
| мост |
| 20, 2 | 20, 4 | 20,6 | 20,8 | 21, 0 | 21,2 | 21,4 | 21,6 | 21,8 | 22, 0 (1) | |
| 19,8 | 19,6 | 19,4 | 19,2 | 19,0 | 18,8 | 18,6 | 18,4 | 18,2 | 18,0 (2) | |
| 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 50 | 0 | 0 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 2 | 2 | 2 |
| 100 | 0 | 1 | 1 | 2 | 2 | 3 | 3 | 3 | 4 | 4 |
| 150 | 1 | 1 | 2 | 3 | 3 | 4 | 5 | 5 | 6 | 7 |
| 200 | 1 | 2 | 3 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 |
| 250 | 1 | 2 | 3 | 4 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 |
| 300 | 1 | 3 | 4 | 5 | 7 | 8 | 9 | 11 | 12 | 13 |
| 350 | 1 | 3 | 5 | 6 | 8 | 9 | 11 | 12 | 14 | 15 |
| 400 | 2 | 3 | 5 | 7 | 9 | 11 | 12 | 14 | 16 | 18 |
| 450 | 2 | 3 | 6 | 8 | 10 | 12 | 14 | 16 | 18 | 20 |
| 500 | 2 | 4 | 7 | 9 | 11 | 13 | 15 | 18 | 20 | 22 |
| 550 | 2 | 5 | 7 | 10 | 12 | 14 | 17 | 19 | 22 | 24 |
| 600 | 3 | 5 | 8 | 11 | 13 | 16 | 18 | 21 | 24 | 26 |
(1) изваждане на корекцията
(2) добавяне на корекцията
в) Хидроксиметилфурфурол
1. Принцип на метода
1.1. Колориметричен метод
Алдехидните деривати на фурана, най-важният от които е хидроксиметилфурфурол, реагират с барбитуровата киселина и пара-толуидина, при което се получава червено съединение. Определя се чрез колориметрия при 550 nm.
1.2. Високоефективна течна хроматография (HPLC).
Разделяне чрез пропускане през хроматографска колона с обърната фаза и определяне при 280 nm.
2. Колориметричен метод
2.1. Апаратура
2.1.1. Спректрофотометър за измервания между 300-700 nm.
2.1.2. Стъклени кювети с оптична дължина един сантиметър.
2.2. Реактиви
2.2.1. 0,5 % разтвор (m/v) на барбитурова киселина.
В дестилирана вода се разтварят 500 mg барбитурова киселина (C4O3N2H4) и разтворът се загрява на водна баня до 100 градуса по Целзий. Долива се с дестилирана вода до 100 ml. Разтворът се съхранява до една седмица.
2.2.2. 10 % (m/v) разтвор на пара-тулоидин.
В мерителна колба с обем 100 ml се прехвърлят 10 g паратулоидин [C6H4(CH3)NH2], добавят се 50 ml изопропанол [CH3CH(OH)CH3] и 10 ml ледена оцетна киселина [CH3COOH (r20 градуса по Целзий = 1,05 g/ml)]; добавя се изопропанол до обем 100 ml. Този разтвор се подновява всеки ден.
2.2.3. 1 %-ен (m/v) разтвор на етанал (ацеталдехид) (CH3CHO).
Приготвя се непосредствено преди употреба.
2.2.4. Разтвор на хидроксиметилфурфурол (C6O3H6), съдържащ един g/l.
Последователно се приготвят разтвори, съдържащи съответно 5, 10, 20, 30, и 40 mg/l. Разтворът с концентрация един грам на литър, а така също и разредените разтвори се приготвят непосредствено преди употреба.
2.3 Подготовка за работа
2.3.1. Подготовка на пробата.
Използва се разтвор, получен при разреждане на ректифицирана и концентрирана гроздова мъст до 40 % (m/v), както е описано в метода "13. Определяне на обща киселинност", т. 5.1.2. Анализът се извършва върху 2 ml от този разтвор.
2.3.2. Колориметрично определяне
Във всяка една от двете колби "а" и "b" с обем 25 ml със стъклени запушалки се поставят по 2 ml от пробата, приготвена както е указано в т. 2.3.1. Във всяка колба се поставя по 5 ml разтвор на паратолуидин (т. 2.2.2) и се разбърква. Добавя се един милилитър дестилирана вода в колба "b" (контрола) и един милилитър барбитурова киселина (т. 2.2.1) в колба "а". Разклащат се за хомогенизиране. Съдържанието от колбите се прехвърля в спектрофотометрични кювети с оптичен път един сантиметър. Абсорбционната скала се нулира, като се използва съдържанието на колба "b" и дължина на вълната 550 nm. Промяната в абсорбцията се следва в зависимост от съдържанието на колба "а"; записва се максималната стойност на абсорбцията А, която се достига след две до пет минути.
Пробите с концентрация на хидроксиметилфурфурола над 30 mg/l се разреждат преди анализа.
2.3.3. Построяване на калибрационната кривата
Прехвърлят се в две колби "а" и "б" с обем 25 ml по 2 ml от всеки разтвор на хидроксиметилфурфурол с концентрация съответно 5, 10, 20, 30, и 40 mg/l (т. 2.2.4) и се процедира, както е описано в т. 2.3.2.
Графиката, изобразяваща изменението в абсорбцията като зависимост от концентрацията на хидроксиметилфурфурола в милиграма на литър, е права линия, преминаваща през центъра на координатната система.
2.4. Изразяване на резултатите
Концентрацията на хидроксиметилфурфурола в ректифицирана и концентрирана гроздова мъст се изразява в милиграма на килограм (mg/kg) от общите захари.
2.4.1. Начин на изчисляване
Концентрацията на хидроксиметилфурфурола, С mg/l, в изследваната проба се получава, като абсорбцията А на пробата се отнесе към калибрационната крива.
Концентрацията на хидроксиметилфурфурола е
| C | ||
| 250 | ____, | mg/kg от общите захари, където: |
| P |
Р е процентът (m/m) на общите захари на ректифицираната и концентрирана гроздова мъст.
3. Високоефективна течна хроматография (HPLC)
3.1. Апаратура
3.1.1. Течен хроматограф под високо налягане, оборудван със:
- инжектор с обем 5 и 10 ml;
- спектрофотометричен детектор за измервания при 280 nm;
- колона (например Bondopak C18, Waters Ass.);
- регистриращ уред, по възможност интегратор;
- скорост на потока на подвижната фаза - 1,5 ml/min.
3.1.2. Мембранен филтър (с диаметър на порите 0,45 mm).
3.2. Реактиви
3.2.1. Двойно дестилирана вода
3.2.2. Метанол (CH3OH), дестилиран или за HPLC.
3.2.3. Оцетна киселина [(CH3COOH), r20 градуса по Целзий = 1,05 g/ml].
3.2.4. Подвижна фаза: вода-метанол (т. 3.2.2) и оцетна киселина (т. 3.2.3), предварително филтрирани през мембранен филтър (0,45 mm) в съотношение 40:9:1 (v/v). Тази cмес ежедневно се приготвя и дегазира преди употреба.
3.2.5. Сравнителен разтвор на хидроксиметилфурфурол-25 mg/l (m/v).
В мерителна колба с обем 100 ml се поставят 25 mg точно претеглен хидроксиметилфурфурол (C6H3О6) и до марката се долива метанол (т. 3.2.2). Този разтвор се разрежда 1:10 с метанол (т. 3.2.2.). Филтрира се през мембранен филтър 0,45 mm. Ако се съхранява в кафява стъклена бутилка в хладилник, този разтвор остава траен от два до три месеца.
3.3. Начин на работа
3.3.1. Подготовка на пробата
Използва се разтвор, получен чрез разреждане на концентрирана гроздова мъст до 40 % (m/v), както е описано в метода "13. Определяне на обща киселинност", т. 5.1.2, и се филтрира през мембранен филтър (с размер на порите 0,45 mm).
3.3.2. Определяне чрез хроматография
В хроматографа се инжектирват 5 (или 10) ml от пробата, подготвена съгласно т. 3.3.1 и 5 (или 10) ml от сравнителния разтвор на хидроксиметилфурфурол (т. 3.2.5). Хроматограмата се записва. Времето на задържане на хидроксиметилфурфурола е приблизително 6-7 min.
3.4. Изразяване на резултатите
Съдържанието на хидроксиметилфурфурол в концентрирана ректифицирана мъст се изразява в милиграма на килограм от общото съдържание на захари.
3.4.1. Начин на изчисляване
Ако С в mg/l е концентрацията на хидроксиметилфурфурол в разтвор 40 % (m/v) на концентрирана и ректифицирана мъст, концентрацията на хидроксиметилфурфурол е
| 250C | |
| ____, | mg/kg общи захари, |
| P |
където:
Р е процентът на общите захари в концентрирана и ректифицирана гроздова мъст (m/m).
г) Тежки метали
1. Принцип на метода
Бърз метод за оценка на тежки метали
Тежките метали се откриват в подходящо разредена концентрирана гроздова мъст чрез оцветяване, получено при образуването на сулфиди. Те се оценяват чрез сравнение със сравнителен разтвор на олово, който отговаря на максимално допустимата концентрация.
Определяне на съдържанието на олово с атомноабсорбционна спектрофотометрия.
Полученият хелат от взаимодействието на амониев пиролидиндитиокарбамат с оловото се екстрахира с метилизобутилкетона и абсорбцията се измерва при 283,3 nm. Съдържанието на олово се определя, като за сравнение се използват стандартни разтвори с известна концентрация.
2. Бърз метод на оценка на тежки метали
2.1. Реактиви
2.1.1. Разредена солна киселина, 70 % (m/v). Разреждат се 70 g (HCl)(r20 градуса по Целзий = 1,16 до 1,19 g/ml) с вода до 100 ml.
2.1.2. Разредена солна киселина, 20 % (m/v). Разреждат се 20 g солна киселина (HCl) (r20 градуса по Целзий = 1,16 до 1,19 g/ml) с вода до 100 ml.
2.1.3. Разтвор на амоняк. Разреждат се 14 g амоняк (NH3) (r20 градуса по Целзий = 0,931 до 0,934 g/ml) с вода до 100 ml.
2.1.4. Буферен разтвор с рН 3,5
В 25 ml вода се разтварят 25 g амониев ацетат (СН3СООNН4) и се прибавят 38 ml разредена солна киселина (т. 2.1.1). Ако е необходимо, рН се коригира с разредена солна киселина (т. 2.1.2) или разреден амоняк (т. 2.1.3). Допълва се с вода до 100 ml.
2.1.5. 4 %-eн (m/v) разтвор на тиоацетамид (C2H5NS).
2.1.6. 85 %-eн (m/v) разтвор на глицерол (С3Н8О3), (nD20 градуса по Целзий = 1,449 до 1,455).
2.1.7. Реактив на тиоацетамид
Към 0,2 ml разтвор на тиоацетамид (т. 2.1.5) се прибавя един милилитър от cмес, приготвена от 5 ml вода, 15 ml разтвор на 1 M натриев хидроксид и 20 ml глицерол (т. 2.1.6). Загрява се на водна баня при 100 градуса по Целзий в продължение на 20 s. Подготвя се непосредствено преди употреба.
2.1.8. Разтвор на олово със съдържание 0,002 g/l.
Разтвор на олово един грам на литър се приготвя, като в колба с обем 250 ml се разтворят във вода 0,400 g оловен нитрат [Pb(NO3)2] и се долее до марката с вода. Преди употреба този разтвор се разрежда 500 пъти с вода (2 ml до 1000), за да се получи разтвор с концентрация 0,002 g/l.
2.2. Начин на работа
10 g от ректифицирана и концентрирана гроздова мъст се разтварят в 10 ml вода. Прибавят се 2 ml буферен разтвор с рН 3,5 (т. 2.1.4) и се cмесват. Прибавя се 1,2 ml реактив-тиоацетамид (т. 2.1.7). Cмесват се веднага. Контролната проба се подготвя при същите условия, като се използва оловен разтвор 0,002 g/l (т. 2.1.8). След 2 min се появява евентуално кафяво оцветяване на разтвора на ректифицираната и концентрирана гроздова мъст и то не е по-наситено от колкото е в контролната проба.
2.3. Изчисления
При условията на тази процедура контролната проба отговаря на максимално допустимата концентрация на тежки метали (изразена като олово - 2 mg/kg) в ректифицирана и концентрирана гроздова мъст.
3. Определяне на съдържанието на олово с атомноабсорбационен спектрофотометър
3.1. Апаратура
3.1.1. Атомноабсорбционен спектрофотометър, снабден с горелка за пламък въздух-ацетилен.
3.1.2. Лампа с кух катод за определяне на олово.
3.2. Реактиви
3.2.1. Ледена оцетна киселина
12 g ледена оцетна киселина (r20 градуса по Целзий = 1,05 g/ml) се разтварят с вода до 100 ml.
3.2.2. 1 %-ен (m/v) разтвор на амониев пиролидиндитиокарбамат (C5H12N2S2).
3.2.3. Метилизобутилкетон [(CH3)2CHCH2COCH3].
3.2.4. Разтвор на олово, съдържащ 0,010 g олово на литър.
Разтвор на олово с концентрация един g/l (т. 2.1.8) се разрежда до 1 %-ен (v/v) разтвор, т. е. 100 пъти.
3.3. Начин на работа
3.3.1. Разтвор за изпитване.
Разтварят се 10 g от ректифицираната и концентрирана мъст в разтвор от равни обеми ледена оцетна киселина и вода (т. 3.2.1) и се допълва до 100 ml с този разтвор. Добавят се 2 ml от разтвора на амониев пиролидиндитиокарбамат (т. 3.2.2) и 10 ml метилизобутилкетон (т. 3.2.3). Разбърква се и се оставя да е закрит от светлина за около 30 s. Оставя се да се разслоят двата слоя. Използва се метилизобутилкетоновият слой.
3.3.2. Сравнителен разтвор
Подготвят се три сравнителни разтвора, съдържащи повече от 10 g концентрирана ректифицирана мъст, респ. 1,0 2,0 и 3 ml от разтвора на олово 0,010 g/l (т. 3.2.4). Третира се както изпитващият разтвор.
3.3.3. Контрола
Контролата се подготвя при същите условия, описани в т. 3.3.1 за разтвора за изпитване, но без добавяне на концентрирана ректифицирана мъст.
3.3.4. Определяне
Избира се дължина на вълната 283,3 nm.
Контролата се впръсква в пламъка и се регулира абсорбционната нула.
Оперира се с метилизобутилкетоновия слой на екстрактите и се определят абсорбциите за изпитващия и контролните разтвори.
3.4. Изразяване на резултатите
Съдържанието на олово се изразява в милиграми на килограм концентрирана и ректифицирана мъст. Закръглява се до първия десетичен знак.
3.4.1. Изчисления
Прекарва се крива, представляваща абсорбцията като функция на концентрацията на олово, добавено в сравнителните разтвори. Нулевата концентрация съответства на изпитващия разтвор.
Екстраполира се пресечната точка на правата с отрицателната част на оста на концентрацията. Разстоянието от точката на пресичане до началото на координатната система дава концентрацията на олово в изпитвания разтвор.
д) Химично определяне на етанол
Този метод се използва за определяне на алкохола в нискоалкохолни течности като мъст, концентрирана мъст и ректифицирана и концентрирана мъст.
1. Принцип на метода
Обикновена дестилация. Окисляване на етанола в дестилата с калиев бихромат. Титруване на излишъка от бихромата с разтвор на желязо (II).
2. Апаратура
2.1. Използва се дестилационната апаратура, описана в метода "3. Определяне на алкохолното съдържание", т. 3.2.
3. Реактиви
3.1. Разтвор на калиев бихромат
В достатъчно количество вода се разтварят 33,600 g калиев бихромат, (K2Cr2O7), за да се получи един литър разтвор при 20 градуса по Целзий. Един милилитър от този разтвор окислява 7,8924 mg алкохол.
3.2. Разтвор на феро (II) амониев сулфат
В достатъчно количество вода се разтварят 135 g феро (II) амониев сулфат [FeSO4.(NH4)2SO4.6H2O], за да се получи един литър разтвор, и се долива 20 ml концентрирана сярна киселина (H2SO4) (r20 градуса по Целзий = 1,84 g/ml). Този разтвор малко или много съответства на половината от обема на бихроматния разтвор, когато е прясно приготвен. Той се окислява бавно с течение на времето.
3.3. Разтвор на калиев перманганат
1,088 g от калиевия перманганат (KMnO4) се разтварят в достатъчно количество вода, за да се получи един литър разтвор.
3.4. Разредена сярна киселина 1:2 (v/v).
Към 500 ml вода при непрекъснато разбъркване и на порции се прибавят 500 ml сярна киселина (H2SO4)(r20 градуса по Целзий = 1,84 g/ml).
3.5. Разтвор на фероортофенантролин
0,695 g железен сулфат (FeSO4.7H2O) се разтварят в 100 ml вода и се добавят 1,485 g ортофенантролинов монохидрат (C12H8N2.H2O). Загрява се, за да се разтвори по-добре. Полученият яркочервен разтвор се съхранява много добре.
4. Начин на работа
4.1 Дестилация
В дестилационна колба се поставят 100 g концентрирана и ректифицирана гроздова мъст и 100 ml вода. Дестилира се и дестилатът се събира в мерителна колба с обем 100 ml, след което се довежда до марката с вода.
4.2 Окисляване
Взема се колба със стъклена запушалка и широко гърло, позволяващо измиването му без загуби. В колбата се поставят 20 ml от разтвора за титруване-калиев бихромат (т. 3.1) и 20 ml от разредената сярна киселина 1:2 (v/v) (т. 3.4), и се разклаща. Добавят се 20 ml от дестилата. Колбата се запушва и разклаща и се изчаква поне 30 min, като се разклаща от време на време (това е колбата с разтвор за анализ).
Титрува се с разтвор на феро (II) амониев сулфат (т. 3.2) спрямо калиево-бихроматния разтвор чрез поставяне в идентична колба на същите количества реактиви, като 20 ml дестилат се заменят с 20 ml дестилирана вода (това е контролната колба).
4.3 Титруване
Към съдържанието на "колбата с пробата за анализ" се добавят четири капки от ортофенантролиновия разтвор (т. 3.5). Излишният бихромат се титрува чрез добавяне на феро (II) амониев сулфат (т. 3.2). Добавянето на феро (II) амониев сулфат се преустановява, когато cместа промени цвета си от зеленосин на кафяв. За по-точното определяне края на титруването, се променя цвета на cместа обратно от кафяв на зеленосин с разтвор на калиев перманганат (т. 3.3). Изважда се една десета от обема на използвания разтвор от обема на добавения феро (II) амониев сулфат -n, ml (разлика от обемите).
По същия начин се процедира с "контролната колба" -n', ml (разлика от обемите).
5. Изразяване на резултатите
Количеството етанол се изразява в грамове на килограм общи захари. Закръглява се до първия десетичен знак.
5.1 Метод на изчисляване
n' са милилитрите от железния разтвор, който редуцира 20 ml бихроматен разтвор, а той окислява 157,85 mg чист етанол.
Един милилитър от феро (II) разтвора има същата редуцираща сила, както:
| 157,85 | |
| ______, | mg етанол; |
| n' |
n'- n са милилитрите разтвор на феро (II) разтвора и имат същата редуцираща способност, както:
| n'-n | ||
| 157,85 | _____, | mg етанол. |
| n' |
Етанолът, в g/kg, концентрирана и ректифицирана мъст, е:
| n'-n | |
| 7,892 | ______. |
| n' |
Етанолът, в g/kg общи захари, е:
| n'-n | |
| 789,2 | ______, |
| n'P |
където:
P е съдържанието на общите захари, в % (m/m).
e) Мезо-инозитол, ксило-инозитол и захароза
1. Принцип на метода
Газова хроматография на силанови производни
2. Реактиви
2.1. Вътрешен стандарт-ксилол (течен разтвор от около 10 g/l, към който с върха на шпатула е добавен натриев азид).
2.2. Бис-триметилсилил-трифлуорацетамид (C8H18F3NOSi2).
2.3. Триметилхлоросилен (C3H9ClSi).
2.4. Пиридин химически чист за анализ (C5H5N).
2.5. Мезо-инозитол (C6H12O6).
3. Апаратура
3.1. Газов хроматограф, оборудван със:
3.2. Капилярна колона (например с размери: дължина 25 m и вътрешен диаметър 0,3 mm, покрита с филм OV 1 с дебелина 0,15 mm).
Експериментални условия: газ носител - водород или хелий;
скорост на носещия газ - около 2 ml/min;
температура на инжектора и детектора - 300 градуса по Целзий;
програмиране на температурата - една минута при 160 градуса по Целзий, 4 градуса по Целзий/min до 260 градуса по Целзий, поддържане на температура 260 градуса по Целзий за около 15 min;
съотношение на разделяне - около 1:20.
3.3. Интегратор.
3.4. Микроспринцовка 10 ml.
3.5. Микропипети 50, 100 и 200 ml.
3.6. Колба 2 ml с тефлонова запушалка.
3.7. Сушилня.
4. Метод на работа
Прецизно претеглена проба от около 5 g концентрирана и ректифицирана гроздова мъст се поставя в колба с обем 50 ml. Добавя се един милилитър от стандартен разтвор на ксилол (т. 2.1) и вода до марката. След хомогенизиране на пробата се вземат 100 ml от cместа, поставят се в колба и се изсушава на лек въздушен поток. За да се подпомогне изпаряването, при необходимост може да се добави 100 ml чист етилов алкохол. Остатъкът внимателно се разтваря в 100 ml пиридин (т. 2.4) и 100 ml бис-триметилсилил-трифлуорацетамид (т. 2.2) и 10 ml триметилхлорсилан (т. 2.3). Колбата се запушва с тефлоновата запушалка и се нагрява в сушилня до 60 градуса по Целзий в продължение на един час.
Инжектират се 0,5 ml от тази течност в хроматографа посредством празна и затоплена игла.
5. Изчисляване на резултатите
Приготвя се разтвор, който съдържа:
60 g/l глюкоза, 60 g/l фруктоза, един грам на литър мезо-инозитол, един грам на литър захароза. Претеглят се 5 g от разтвора и се следва процедурата, описана в т. 4. От получената хроматограма се изчисляват резултатите за мезо-инозитола и захарозата по отношение на ксилитола.
За сцило-инозитол, който не се предлага готов в търговската мрежа и има време на задържане, лежащо между последния пик на аномеричната форма на глюкозата и пика на мезо-инозитола (вж. приложената диаграма), се взима същият резултат, както за мезо-инозитола.
6. Изразяване на резултатите
Мезо-инозитол и сцило-инозитол се изразяват в милиграми на килограм общи захари. Захарозата се изразява в грамове на килограм гроздова мъст.
Фиг. 1. Газхроматограма на мезо-инозитол, сцило-инозитол и захароза.
43. Определяне на изотопното отношение 18О/16О във водата на вината
I. Описание на метода
1. Цел на метода
Целта на този метод е да се измери изотопното отношение 18O/16O на води с различен произход. Изотопното отношение 18O/16O може да се изрази като отклонение d 0/00 на отношението спрямо стойността на изотопното отношение на международния еталонен образец V.SMOW
| R(i) | ||
| d(i) [0/00] | = 1000 | [ _____ -1]. |
| R(SMOW) |
2. Принцип
Изотопното отношение 18O/16O се определя чрез масова спектрометрия на изотопните отношения (МСИО) от йонен ток m/z 46 (12C16O18O) и m/z 44 (12C16O2), генериран от въглероден диоксид, получен след обмен с водата във виното, в съответствие с реакцията:
C(16)O(2) + H(218)O <====> C(16)O(18)O + H(216)O.
Въглеродният диоксид в газова фаза се използва за анализ.
3. Реактиви
- въглероден диоксид за анализ;
- SMOW (стандартна средна океанска вода);
- GISP (Greenland Ice Sheet Precipitation);
- SLAP (Standard Light Arctic Precipitation);
- вода за сравнение, специфична за лабораторията, внимателно стандартизирана по отношение на еталонния образец на Международната агенция за атомна енергия във Виена (IAEA).
4. Лабораторно оборудване
- масспектрометър за изотопни отношения със собствена повторяемост 0,05 0/00;
- троен колектор за едновременно регистриране на йони с m/z 44, 45 и 46 или - по подразбиране - двоен колектор за измерване на йони с m/z 44 и 46;
- термостатна система (± 0,5 градуса по Целзий) за реализиране на равновесие между CO2 и водното съдържание във виното;
- вакуумна помпа, която е в състояние да достигне вътрешно налягане 0,13(Pa);
- ампули за проби с обем 15 ml и капилярна добавъчна тръбичка с вътрешен диаметър около 0,015 mm;
- пипета на Епендорф с пластмасова конична част за еднократна употреба.
5. Експериментални методи
5.1. Ръчен метод
Работен режим на равновесния метод
Вкарване на пробата
- Взема се пипета на Епендорф с фиксиран обем 1,5 ml, поставя се конична част и се изпомпва анализираната течност, за да бъде вкарана в балонна колба. След това се нанася силиконова смазка около гърлото на балонната колба, тя се прикрепя към вентила, като едновременно с това се проверява дали той е затворен плътно.
- Процедурата се повтаря за всяка балонна колба от работната рампа, като в един от балоните се налива лабораторната вода за сравнение.
Дегазиране на рампата
Двете рампи се охлаждат с течен азот, след което чрез отваряне на вентилите цялата система се продухва до 0,1 mm Hg.
След това вентилите се затварят и се оставя да се нагрее. Цикълът на дегазиране се повтаря, докато не изчезнат промените в налягането.
Привеждане на водата и CO2 в равновесие:
Работната рампа се охлажда до минус 70 градуса по Целзий (смес от течен азот и алкохол), за да може водата да замръзне, след което рампата се поставя в условия на вакуум. След стабилизиране на вакуума рампата се изолира чрез задействане на вентила и активиране системата за вкарване на CO2. CO2 се вкарва в работната рампа и след като е изолирана от останалата част на системата - рампата се поставя в термостатна вана при 25 градуса по Целзий (± 0,5 градуса по Целзий) в продължение на 12 h (една нощ). За да се оптимизира процесът по отношение на времето, необходимо за привеждане в равновесие, препоръчително е да се приготвят пробите в края на деня, за да може през нощта да се установи равновесие.
Прехвърляне на CO2, обменен в мерителните клетки
На празен ред непосредствено до работната рампа се поставя поставка за пробите, в която има толкова мерителни клетки, колкото са балонните колби, съдържащи обменен CO2. Празните клетки внимателно се продухват и обменените газове, съдържащи се в балоните, се прехвърлят един след друг в мерителните клетки, охладени с течен азот. След това мерителните клетки се оставят да се нагреят до стайна температура.
5.2. Използване на апаратура за автоматичен обмен.
За да се получи равновесие, ампулите за пробите се пълнят с 2 ml вино или 2 ml вода (лабораторен работен еталонен образец) и се охлаждат до минус 18 градуса по Целзий. Плъзгачите с пробите, съдържащи замразените продукти, се адаптират към равновесната система и след създаване на вакуум в системата се вкарва въглероден диоксид при налягане 800 хектопаскала (hPa).
Балансът се постига при температура 22 ± 0,5 градуса по Целзий след минимален период от 5 h, при умерено разбъркване. Тъй като времето на установяване на равновесие зависи от геометрията на ампулите, оптималната продължителност трябва да се определи най-напред за използваната система.
След това съдържащият се в ампулите въглероден диоксид се прехвърля във въвеждащата камера на масовия спектрометър с помощта на капилярна тръбичка и измерването се извършва съгласно специфичния протокол за конкретния вид оборудване.
6. Изчисления и изразяване на резултатите
Относителната разлика d' на интензитетите на йоните m/z 46 и 44 (I46/I44) между пробите и еталонния образец се изчислява с помощта на формулата
| (I(46)/I(44))проба | |||
| d' проба | = 1000 | [____________________ -1], | 0/00, |
| (I(46)/I(44))еталон |
Съдържанието на 18О в пробите, сравнено с еталона V.SMOW на скалата V.SMOW/SLAP, се изчислява по формулата
| d' проба-d' SMOW | |||
| d' (18)O | = 55,5 | [_________________]. | |
| d' SMOW-d' SLAP |
Приетата за SLAP стойност е равна на 55,5 0/00 в сравнение с V.SMOW. Изотопното отношение на еталонния образец се определя след всяка серия от 10 измервания на неизвестни проби.
7. Точност:
- повторяемостта r е 0,24 0/00.
- възпроизводимостта R е 0,50 0/00.
44. Определяне на етилкарбамат във виното: селективни методи на анализ с използване на газова хроматография / масспектрометрия
(Приложими за определяне на етилкарбамат при концентрация между 10 и 200 mg/l.)
(Внимание! Спазват се изискванията за безопасност при работа с химикали, етилов алкохол, ацетон и канцерогенни продукти (етилкарбамат и дихлорметан). Изхвърлянето на използваните разтворители трябва да се извършва съгласно действащите разпоредби, свързани с околната среда.)
А. Принцип
Пропил карбамат се добавя към образци, използвани като вътрешен стандарт; разтворът се разрежда с вода и се зарежда в 50-милиметрова екстракционна колона за твърда фаза. Етилкарбаматът и пропилкарбаматът се елюират с дихлорметан.
Елюатът се концентрира във вакуумен ротационен изпарител. Концентратът се анализира чрез газова хроматография (GC). Детектирането се извършва чрез масспектрометрия с използване на фрагментометрия в SIM (селективно регистриране на йони).
Б. Апаратура и хроматографски условия (пример)
а) Газова хроматограма / масспектрометър (GC/MS) и при необходимост филтър за пробите и система за обработка на данните или еквивалентни средства.
Капилярна колона от кварц с размери: дължина 30 m (1) и вътрешен диаметър 0,25 mm, 0,25 mm на Carbowax 20M.
Хроматографски условия: температура на инжектора - 180 градуса по Целзий; скорост на газа (хелий ) - един милилитър на минута; метод на инжектиране-директно.
Температурна програма: 40 градуса по Целзий за 0,75 min, нарастваща след това с 10 градуса по Целзий/min до 60 градуса по Целзий, след това с 3 градуса по Целзий/min до 150 градуса по Целзий (2), покачване до 220 градуса по Целзий и поддържане на тази температура в продължение на 4,25 min . Специфичното време на задържане за етилкарбамата е 23-27 min, а за пропилкарбамата-2 - 31 min.
Интерфейс на газова хроматография/масспектрометър (GC/MS): трансферна линия 220 градуса по Целзий.
(1) При определени много гъсти вина може да се предпочете използването на капилярна колона от 50 m.
(2) При определени много гъсти вина може да се предпочете прилагането на температурна програма 2 градуса по Целзий/min.
Параметрите на масспектрометъра се настройват ръчно с перфлуоротрибутиламин и се оптимизират за по-ниска чувствителност по отношение на масата, режим на SIM регистриране, време на задържане на разтворителя и началото на хроматограмата - 22 min, време на задържане/йон 100 ms.
б) Вакуумен ротационен изпарител или концентрираща система, подобна на Kuderna Danish.
Забележка. Аналитичният добив на етилкарбамата от пробите за анализ C (g) трябва да бъде между 90 и 110 % по време на анализа.
в) Колба-облодънна с обем 300 ml, с единично шлифовано гърло.
г)Епруветка - 4 ml, градуирана, със свързващ елемент, който е покрит с тефлон, с тапа.
В. Реактиви
а) Ацетон - качество GC.
Забележка. Всяка партида преди използване се проверява в газовия хроматограф/масспектрометър (GC/MS) за липса на чувствителност за йони с m/z 62, 74 и 89.
б) Дихлорометан.
Забележка. Преди използване всяка партида се проверява в газовия хроматограф/ масспектрометър (GC/MS) след 200-кратна концентрация с цел проверка за липса на чувствителност за йони с m/z 62, 74 и 89.
в) Етилов алкохол - безводен.
г) Етилкарбамат (EC), стандартни разтвори.
1. Изходен разтвор - 1,00 mg/ml. Претеглят се 100 mg EC (чистота і 99 %), наливат се в мерителна колба с обем 100 ml и се разреждат с ацетон.
2. Стандартен работен разтвор - 10,0 mg/ml. Пресипва се един милилитър изходен разтвор на EC в мерителна колба с обем 100 ml и се разрежда с ацетон до марката.
д) Пропилкарбамат (PC), стандартни разтвори:
1. Изходен разтвор - 1,00 mg/ml. Претеглят се 100 mg PC (чистота і 99 %), прехвърлят се в мерителна колба с обем 100 ml и се разреждат с ацетон до марката.
2. Стандартен работен разтвор - 10,0 mg/ml. Прехвърля се един милилитър изходен разтвор на PC в мерителна колба с обем 100 ml и се разрежда с ацетон до марката.
3. Разтвор PC - 400 ng/ml, вътрешен стандартен разтвор. Прехвърлят се 4 ml стандартен работен разтвор на PC в мерителна колба с обем 100 ml и се разреждат с ацетон до марката.
е) Стандартни калибрирани разтвори EC-PC.
Разреждат се стандартен работен разтвор EC буква "г", т. 2 и стандартен работен разтвор PC буква "д", т.(2) с дихлорометан, за да се получат:
1. (100 ng EC и 400 ng PC)/ ml;
2. (200 ng EC и 400 ng PC)/ ml;
3. (400 ng EC и 400 ng PC)/ ml;
4. (800 ng EC и 400 ng PC)/ ml;
5. (1600 ng EC и 400 ng PC)/ ml.
ж) Проба за анализ - 100 ng EC/ml в 40 % етилов алкохол.
Пресипва се един милилитър стандартен работен разтвор EC буква "г", т. 2 в мерителна колба 100 ml и се разрежда с 40 % етилов алкохол до марката.
з) Екстракционна колона за твърда фаза-материал за еднократна употреба, предварително запълнена с диатомит(кизелгур), вместимост 50 ml.
Забележка. Преди анализа се проверява всяка партида екстракционни колони за възстановяване на EC и PC и за липса на чувствителност за йони с m/z 62, 74 и 89. Приготвя се проба за анализ със 100 ng EC/ml , буква"ж". Прави се анализ на 5,00 ml от пробата, както е описано в букви Г ("а"), Д и Е. Възстановяването на 90-110 ng EC/ml е достатъчно. Абсорбенти, чиито частици се характеризират с неравномерен диаметър, могат да предизвикат бавен поток, който да повлияе на възстановяването на EC и PC. Ако след няколко опита не бъдат получени 90 до 110 % от стойността за анализираната проба, колоната се сменя или се използва коригирана калибровъчна крива на възстановяването, за целите на количественото определяне на EC. За да се получи коригирана калибровъчна крива, се приготвят стандартни разтвори, както е описано в буква "е", чрез използване на 40 % етилов алкохол, вместо дихлорометан.
Прави се анализ на един милилитър от стандартния калибровъчен разтвор, както е описано в букви Г, Д и Е.
Създава се нова калибровъчна крива чрез използване на съотношението EC/РС на екстрахираните стандарти.
Г. Приготвяне на пробата за анализ
Поставят се следните обеми вещество за анализ в две отделни чаши с обем 100 ml за преливане:
а) вина, съдържащи над 14 об. % алкохол - 5,00 ± 0,01 ml;
б) вина, съдържащи максимум 14 об. % алкохол - 20,00 ± 0,01 ml.
Към всяка чаша се добавя един милилитър PC разтвор, служещ за вътрешен стандарт,както е описано в буква В ("д") (т. 3), и вода, за да се получи общ обем 40 ml (или 40 g).
Д. Екстракция
Екстракцията се извършва под капака на екстрактора, с необходимата вентилация.
Пробата, приготвена съгласно буква Г, се поставя в екстракционната колона. Чашата се изплаква с 10 ml вода и изплакващата вода се излива в колоната. Оставя се течността да бъде абсорбирана в продължение на 4 min. Елюира се с 2 x 80 ml дихлорометан. Елюатът се събира в конична колба с обем от 300 ml. Елюатът се изпарява до 2-3 ml в ротационен изпарител с водна баня при 30 градуса по Целзий. (Забележка. Не се оставя да ври до изсъхване.) Концентрираният остатък се прехвърля с пипета на Пастьор в градуирана епруветка от 4 ml. Колбата се изплаква с един милилитър дихлорометан и се прелива в епруветката изплакващата вода. Концентрацията на пробата се увеличава до един милилитър чрез слаб азотен поток. Концентратът се премества в колба за автоматично пробовземане за GC/MS анализ.
Е. GC/MS анализ
а)Калибровъчна крива
Инжектира се един микролитър от всеки стандартен калибровъчен разтвор, описани в буква B ("e") в GC/MS. Начертава се графика, като по вертикалната ос се отчита отношението на площите EC-PC за регистрираните йони m/z 62, а по хоризонталната ос-количеството EC в нанограма за милилитър (100, 200, 400, 800, 1600 ng/ml).
б) Количествено определение на EC
В системата GC/MS се инжектира един микролитър концентриран екстракт, приготвен съгласно буква Д, и се изчислява отношението на площите EC-PC за йони m/z 62. Установява се концентрацията на EC нанограма за милилитър в екстракта чрез използване на калибровъчната крива на вътрешния стандарт. Изчислява се концентрацията на EC в пробата за анализ (ng/ml) чрез разделяне на количеството EC нанограми (ng) в екстракта на обема на пробата за анализ (ml).
в) Потвърждение на идентичността на етилкарбамата
Определя се дали има регистриране на йони с m/z 62, 74 и 89 по време на периода на задържане на ЕС. Регистрирането на тези йони е свързано-съответно с основните фрагменти (M-C2H2)+ и (M-CH3)+ и молекулните йони (M)+. Наличието на EC се потвърждава, ако относителните съотношения на тези йони са в границите на 20 % от съотношенията за стандартните образци EC. Може да е необходимо допълнително увеличаване на концентрацията на екстракта, за да се получи достатъчно добра чувствителност за йони m/z 89.
Ж. Съвместен анализ
Таблицата показва отделни резултати за използван на практика образец и за двата вида вино. Критерият на Кохран води до елиминирането само на една двойка резултати-за вино с алкохолно съдържание над 14 об. % и за вино с алкохолно съдържание 14 об. % или по-малко-от две различни лаборатории.
Относителната възпроизводимост (RSDR) се характеризира с намаление при увеличение на концентрацията на етилкарбамата.
Характеризиране на метода за определяне на етилкарбамат в спиртни напитки чрез GC/MS (газ/мас).
| Проба | Средна | Аналитичен | Sr | SR | RSDr | RSDR |
| проба | добив за | (%) | (%) | |||
| етилкарбамат, | добавката | |||||
| намерено в | от етил- | |||||
| (ng/ml) | карбамат | |||||
| (%) |
| Вина с | 40 | 1,59 | 4,77 | 4,01 | 12,02 | |
| алкохолно | 80 | 89 | 3,32 | 7,00 | 4,14 | 8,74 |
| съдържание | 162 | 90 | 8,20 | 11,11 | 5,05 | 6,84 |
| > 14 об. % | ||||||
| Вина с | 11 | 0,43 | 2,03 | 3,94 | 18,47 | |
| алкохолно | 25 | 93 | 1,67 | 2,67 | 6,73 | 10,73 |
| съдържание | 48 | 93 | 1,97 | 4,25 | 4,10 | 8,86 |
| І 14 об. % |
Приложение № 4 към чл. 10, ал. 1
МЕТОДИ ЗА АНАЛИЗ НА СПИРТ И СПИРТНИ НАПИТКИ
1. Определяне алкохолното съдържание
(обикновен метод)
1. Определение
Обемният алкохолен градус е равен на литрите алкохол, съдържащи се в 100 l спиртна напитка, като съответните обеми са измерени при 20 градуса по Целзий.
2. Начин на работа
Алкохолното съдържание на спирт се определя със спиртомер или арeометър и корекционни алкохолометрични таблици (метод "3. Определяне алкохолното съдържание" към приложение № 3).
2. Оценка на цвета и бистротата на спирт
1. Цел на метода
Методът позволява да се оценят цветът и бистротата на неутралния алкохол.
2. Определение
Под цвят и бистрота се разбират цветът и бистротата, определени по процедурата, описана в т. 5 на метода.
3. Принцип
Цветът и бистротата се оценяват визуално чрез сравнение с вода на бял фон и на черен фон.
4. Апаратура-безцветни епруветки с дължина най-малко 40 cm.
5. Начин на работа
На бял и черен фон се поставят две епруветки (съгласно т. 4); в една от епруветките се поставя определено количество от пробата на височина около 40 cm; в другата епруветка се сипва вода до същата височина. Пробата се наблюдава отгоре, по дължината на оста на епруветката и се сравнява с еталона.
6. Изразяване на резултатите
Оценяват се цветът и бистротата на пробата, като се наблюдава по начина, описан в т. 5.
3. Определяне на времето за обезцветяване на разтвор от калиев перманганат
1. Цел на метода
Методът цели да се определи времето, за което неутрален алкохол обезцветява разтвор на калиев перманганат.
2. Определение
Времето за обезцветяване на разтвор на калиев перманганат, определено по описания метод, е броят на минутите, за които оцветяването на пробата се изравнява с това на еталона след добавката на един милили тър разтвор на калиев перманганат, с концентрация 1 mmol/l в проба от 10 ml.
3. Принцип
Определя се времето, за което цветът на пробата след добавянето на разтвор на калиев перманганат се уеднаквява с този на еталона, като това време се назовава време за обезцветяване на разтвор на калиев перманганат.
4. Реактиви
4.1. Разтвор на калиев перманганат с концентрация един милимол на литър. Разтворът трябва да бъде приготвен непосредствено преди употреба.
4.2. Оцветяващ разтвор А (червен):
- Претеглят се точно 59,50 g (CoCl2.6H2O).
- Приготвя се cмес, съставена от 25 ml солна киселина (r20 градуса по Целзий = 1,19 g/ml) и 975 ml вода.
- Поставя се претегленото количество кобалтов дихлорид и част от cместа в мерителна колба с обем 1000 ml и се долива с остатъка от cместа до марката при температура от 20 градуса по Целзий.
4.3. Оцветяващ разтвор Б (жълт):
- Претеглят се точно 45,00 грама (FeCl3.6H2O).
- Приготвя се cмес от 25 ml солна киселина (HCl) (r20 градуса по Целзий = 1,19 g/ml) и 975 ml вода, след което с количеството железен трихлорид се постъпва както с претегленото количество кобалтов дихлорид при оцветяващия разтвор А.
4.4. Еталон за оцветяване
С пипета се вземат 13 ml от оцветяващия разтвор А и 5,5 ml от оцветяващия разтвор Б и се поставят в мерителни колби с обем 100 ml, след което при температура 20 градуса по Целзий се добавя вода до марката.
Забележка.
Оцветяващите разтвори А и Б могат да бъдат запазени в продължение на повече от месец, като се съхраняват при температура 4 градуса по Целзий и защитени от светлина. Еталонът за оцветяване трябва да бъде приготвян периодично на определени интервали от време.
5. Апаратура
5.1. Епруветки тип Nessler от 100 ml от прозрачно безцветно стъкло, градуирани до 50 ml, със запушалка от шлифовано стъкло или обикновени епруветки, безцветни, с диаметър 20 mm.
5.2. Пипети от 1, 2, 5, 10 и 50 ml.
5.3. Термометър, измерващ до 50 градуса по Целзий, градуиран през 0,1 или 0,2 градуса по Целзий.
5.4. Аналитична везна.
5.5. Термостатична вана при 20 ± 0,5 градуса по Целзий.
5.6. Мерителни колби с обем 1000 и 100 ml с шлифовани запушалки.
6. Начин на работа
С пипета се вземат 10 ml от пробата и се поставят в обикновена епруветка или в епруветка тип Nessler;
- поставят се в термостатична вана при 20 градуса по Целзий;
- в зависимост от количеството на използваната проба се добавят 1-5 ml от разтвор на KMnO4 (1 mmol/l), cмесва се и се оставя в термостатичната вана при 20 градуса по Целзий;
- отбелязва се началният момент;
- с пипета се вземат 10 ml от контролния разтвор и се поставят в обикновена епруветка със същия диаметър или 50 ml от контролния разтвор в епруветка тип Nessler;
- наблюдава се промяната на цвета на пробата и се сравнява от време на време на бял фон с цвета на еталона;
- когато цветът на пробата се уеднакви с този на контролния разтвор, се определя времето, изтекло от началния момент.
Забележка. По време на опита анализираният разтвор не трябва де се излага на прякото въздействие на слънчева светлина.
7. Отчитане на резултатите
7.1. Изразяване на резултатите
Времето за обезцветяване е времето, за което цветът на епруветката, съдържаща пробата, се уеднакви с това на контролната епруветка. При неутрален алкохол продължителността трябва да бъде най-малко 18 min при температура 20 градуса по Целзий.
7.2. Повторяемост
Разликата във времената за обезцветяване при два опита, извършени едновременно или непосредствено един след друг с една и съща проба от един и същ анализатор при еднакви условия, не трябва да надвишава 2 min.
8. Бележки
8.1. Следи от манганов диоксид оказват катализиращ ефект върху реакцията. Необходимо е използваните пипети и епруветки да бъдат грижливо почистени и да са били използвани само за тази цел. Да се почистят със солна киселина и изплакнат внимателно с вода. Стъклото не трябва да има никаква следа от жълто оцветяване.
8.2. Необходимо е да се контролира качеството на водата, използвана за приготвяне на разредения разтвор на калиев перманганат (т. 4.1). Тя не трябва да абсорбира калиев перманганат. Ако е невъзможно да се постигне необходимото качество, трябва да се нагрее до кипване дестилираната вода и към нея да се прибави неголямо количество калиев перманганат, така че да се получи леко розово оцветяване. Този разтвор трябва да се охлади, за да се използва за разреждане.
8.3. При някои проби обезцветяването може да се извърши, без да се преминава точно през същия нюанс на контролния разтвор.
8.4. Опитът с калиев перманганат може да бъде опорочен, ако алкохолната проба, която се анализира, не е била съхранявана в абсолютно чисто стъклено шише, затворено със запушалка от шлифовано стъкло, промита с алкохол, или с друга запушалка с калаено или алуминиево покритие.
4. Определяне на съдържанието на алдехиди (обикновен метод)
1. Цел на метода
Методът се състои в определяне на съдържанието на алдехиди в неутралния алкохол, изразено като ацеталдехид.
2. Определение
Количеството на алдехидите, изразени като ацеталдехид, се определя по описания метод.
3. Принцип на метода
Цветът, който придобива пробата след реакцията с реактива на Schiff, се сравнява с цвета на контролните разтвори, имащи установено съдържание на ацеталдехид.
4. Реактиви
- Хлорхидрат на р-розанилин (фуксинова основа).
- Натриев сулфит или натриев метабисулфит, безводен.
- Солна киселина (r20 градуса по Целзий = 1,19 g/ml).
- Активен въглен на прах.
- Разтвор на нишесте, приготвен от един грам разтворимо нишесте и 5 g HgI2 (съхраняван), от които се образува суспензия в малко хладка вода. Cмесват се с 500 ml вряща вода, подложени на кипене в продължение на 5 min. След това разтворът се филтрира и охлажда.
- Разтвор на йод 0,05 mole/l.
- Амино-етанол [CH3CH(NH2)OH] (МG 61.08).
Приговяне на реактива на Schiff (Шиф):
- разтварят се 5,0 g хлорхидрат на р-розанилин с около 1000 ml топла вода в мерителна колба с обем 2000 ml;
- при необходимост се оставя да престои във вана до пълно разтваряне;
- разтварят се 30 g натриев сулфит (или същото количество натриев метабисулфит, безводен) в около 200 ml вода и се добавя към охладения разтвор на
р-розанилин;
- оставя се да престои около 10 min;
- добавят се 60 ml солна киселина (r20 градуса по Целзий = 1,19 g/ml);
- след обезцветяването на разтвора е възможна появата на слабо оцветяване в кафяво-разтворът се долива до марката с вода;
- ако е необходимо, се филтрира през нагънат филтър с малко активен въглен, така че разтворът да стане безцветен.
Бележки:
• Рекативът на Schiff трябва да бъде приготвен поне 14 дни преди използването му.
• Съдържанието на свободен SO2 в реактива трябва да бъде в рамките на 2,8 - 6,0 mmole/100 ml, а pH трябва да бъде 1.
Определяне на съдържанието на свободен SO2
Вземат се с пипета 10 ml от реактива на Schiff и се поставят в Ерленмайерова колба с обем 250 ml; добавя се 200 ml вода; добавя се 5 ml нишестен разтвор; титрува се с помощта на йоден разтвор (0,05 mole/l) до оцветяване на нишестето; ако съдържанието на свободен SO2 не е в указаните граници, той трябва или да се приведе до приемлива стойност чрез повишаването му с добавка на необходимото количество натриев метабисулфит (0,126 g Na2SO3/100 ml) от реактива на милимол-липсващ SO2, или да се понижи чрез разбъркване на реактива с вкарване на въздух.
Изчисляване на свободния SO2 в реактива:
- милимол свободен SO2/100 ml от реактива е равен на:
| ml от консумирания йоден разтвор (0,05mole/l•3,2•100) | |
| = | |
| 64•10 | |
| ml от консумирания йоден разтвор (0,05mole/l) | |
| = | |
| 2 |
Важна бележка.
В случай че бъдат възприети други начини за приготвяне на реактива на Schiff, е необходимо да се провери чувствителността на реактива, която трябва да бъде такава, че по време на опита:
- не трябва да се появява никакво оцветяване при опит на празна проба с освободен от алдехиди неутрален алкохол;
- розовото оцветяване трябва да бъде забележимо при наличие на 0,1 g ацеталдехид/хектолитър абсолютен алкохол.
• Пречистване на търговски продукт 1-амино-етанол:
Разтварят се напълно 5 g 1-амино-етанол в около 15 ml чист етанол; добавят се около 50 ml сух диетилов етер (за утаяване 1-амино-етанол); поставя се в хладилна камера в продължение на няколко часа; филтрират се кристалите и се изплаква със сух диетилов етер; суши се в продължение на 3-4 h във вакуумна сушилня в присъствието на сярна киселина.
Забележка. Пречистеният 1-амино-етанол да e бял; в противен случай е необходимо да се повтори кристализацията.
5. Апаратура
5.1. Епруветки за колориметрия 20 ml, снабдени със запушалка от шлифовано стъкло.
5.2. Пипети от 1, 2, 3, 4, 5 и 10 ml.
5.3. Термостатична вана при 20 ± 0,5 градуса по Целзий.
5.4. Абсорбционен спектрофотометър, оборудван с кювети с оптичен път 50 mm.
6. Начин на работа
6.1. Предварителна забележка.
Когато се определя съдържанието на алдехид по този метод, е необходимо да се следи съдържанието на алкохол от пробата да бъде минимум 90,0 об. %. В противен случай съдържанието на алкохол следва да се повиши с добавка на съответно количество химически чист етанол.
6.2. Контролна крива.
Претеглят се на аналитична везна 1,3860 g пречистен сух 1-амино-етанол; разтваря се в химически чист етанол в мерителна колба с вместимост от 1000 ml; допълва се до марката с вода при температура 20 градуса по Целзий; разтворът съдържа 1 % ацеталдехид на литър; провежда се серия от разреждания на два етапа, така че да се получат 10 контролни разтвора със съдържание от 0,1-1,0 mg ацеталдехид в 100 ml от разтвора; с помощта на тези контролни разтвори в съответствие с т. 6.3 се определят абсорбционните стойности и се изготвя крива.
6.3. Определяне на съдържанието на алдехиди.
С пипета се вземат 5 ml от мострата и се поставят в епруветка за колориметрия; добавят се 5 ml вода, cмесват се и се държат при постоянна температура от 20 градуса по Целзий; едновременно се приготвя контрола с 5 ml 96 об. % химически чист етанол, прибавят се 5 ml вода, cмесват се и се държат също при температура от 20 градуса по Целзий; след това се добавят всеки път по 5 ml от реактива на Schiff в епруветките с шлифована запушалка и се разклащат силно; държат се в термостатична вана при 20 градуса по Целзий в продължение на 20 min; съдържанието се излива в кювети; абсорбционната стойност се определя при 546 nm.
Бележки:
• За да се определят стойностите на алдехидите, е необходимо при всеки анализ да се проверява валидността на контролната крива чрез сравняване с разтвори образци и при необходимост се изготвя отново контролната крива.
• При всеки случай трябва да се следи контролата да бъде безцветна.
7. Отчитане на резултатите
7.1. Формула и метод за изчисляване
Изготвя се графика, показваща отклоненията в оптическата плътност в зависимост от съдържанието на алдехид, и на тази графика се определя съдържанието на алдехиди в пробата.
Съдържанието на алдехиди, изразено в грамове ацеталдехид на хектолитър абсолютен алкохол, е
| 100А |
| ____, |
| Т |
където:
А е съдържанието на ацеталдехид в пробата, изразено в g/hl, чиято стойност е определена по контролната крива;
Т - алкохолното съдържание в об. %, определено по метод "3. Определяне алкохолното съдържание" към приложение № 3.
7.2. Повторяемост
Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или непосредствено едно след друго, от един и същ анализатор, върху една и съща проба, при еднакви условия, не трябва да надвишава 0,1 g алдехид на хектолитър абсолютен алкохол.
5. Определяне на съдържанието на висши алкохоли (обикновен метод)
1. Цел на метода
Отнася се за метод за определяне на съдържанието на висши алкохоли в неутралния алкохол, изразено като метил-2-пропанол-1.
2. Определение
Количеството на висшите алкохоли, изразено като метил-2-пропанол-1, се определя по описания метод.
3. Принцип
Определя се оптическата плътност на цветно съединение при 560 nm, с корекция в случай на наличие на алдехиди в пробата. При взаимодействието на висшите алкохоли с ароматен алдехид с разредена сярна киселина се получава цветно съединение (реакция на Комаровски), което се сравнява с оцветяването, получено от реакцията с метил-2-пропанол-1 при същите условия.
4. Реактиви
4.1. Разтвор на салицилов алдехид един тегловен %, приготвен чрез добавяне на един грам салицилов алдехид към 99 g химически чист етанол при 96 об. %.
4.2. Концентрирана сярна киселина (r20 градуса по Целзий Н2SO4= 1,84 g/ml).
4.3. Метил-2-пропанол-1.
4.4. Контролни разтвори на метил-2-пропанол-1.
Във воден разтвор на етанол при 96 об. % се разреж да метил-2-пропанол-1 (т. 4.3), за да се получи серия от контролни разтвори, съдържащи съответно по 0,1, 0,2, 0,4, 0,6 и 1,0 g/hl метил-2-пропанол-1 от разтвора.
4.5. Контролни разтвори на ацеталдехид.
Контролният разтвор на ацеталдехид се приготвя, както е описано в т. 6.2 за определяне на алдехиди.
4.6. Етанол при 96 об. %, химически чист, свободен от висши алкохоли и алдехиди.
5. Апаратура
5.1. UV-VIS-спектрофотометър, позволяващ да се определи абсорбирането на разтвори при 560 nm.
5.2. Кювети за спектрофотометри с дебелина 10, 20 и 50 mm.
5.3. Регулируема термостатична вана при температура 20 ± 0,5 градуса по Целзий.
5.4. Лабораторни съдове за колориметрия (от огнеупорно стъкло или друг подобен материал) от дебелостенно стъкло, снабдени с шлифована запушалка, с капацитет около 50 ml.
6. Начин на работа
6.1. Съдържание на алдехиди.
Определя се съдържанието на алдехиди в пробата, изразени като ацеталдехид, по метод 4 "Определяне на алдехиди (обикновен метод).
6.2. Контролна крива-метил-2-пропанол-1.
С пипета се отмерват 10 ml от всеки контролен разтвор на метил-2-пропанол-1 (т. 4.4) и се поставят в епруветки от 50 ml, снабдени със запушалки от шлифовано стъкло. С пипета се отмерва един милилитър от разтвора на салицилов алдехид (т. 4.1) и се поставя в съдовете; добавят се 20 ml сярна киселина (т. 4.2). Внимателно се cмесва съдържанието на съдовете чрез обръщане, като от време на време запушалката се повдига. Оставя се да престои при нормална стайна температура в продължение на 10 min, след това се поставя в термостатична вана (т. 5.3) при температура 20 ± 0,5 градуса по Целзий. След 20 min съдържанието на съдовете се изсипва в кюветите на спектрофотометъра. Точно 30 min след като е добавена сярна киселина се определя абсорбирането на разтворите при 560 nm. Сравняването се прави спрямо вода в контролната кювета. На графика се нанасят стойностите на абсорбирането в зависимост от концентрацията на метил-2-пропанол-1.
6.3. Контролна крива-алдехиди.
Повтаря се описаната в т. 6.2 операция, като 10-те ml от всеки от контролните разтвори на метил-2-пропанол-1 се заменят с 10 ml от контролните разтвори на ацеталдехид. Изобразяват се в графичен вид стойностите на абсорбирането при 560 nm в зависимост от концентрацията на ацеталдехид.
6.4. Определяне на пробата.
Повтаря се описаната в т. 6.2 операция, като 10-те ml от всеки от контролните разтвори на метил-2-пропанол-1 се заменят с 10 ml от пробата. Определя се абсорбирането на пробата.
7. Отчитане на резултатите
7.1. Формула и метод за изчисляване
7.1.1. Стойността на абсорбиране на пробата се коригира, като се извади стойността на абсорбиране, съответстваща на съдържанието на алдехиди на мострата (определено въз основа на контролната крива, съставена съобразно т. 6.3).
7.1.2. Съдържанието на висши алкохоли, изразени като метил-2-пропанол-1, в пробата се коригира с помощта на контролната крива, съставена съобразно т. 6.2, като се използва коригираната стойност (7.1.1).
7.1.3. Съдържанието на висши алкохоли, изразени като метил-2-пропанол-1 в грамове на хектолитър (g/hl) абсолютен алкохол, е
| 100А |
| ____, |
| Т |
където:
А е съдържание на висши алкохоли в пробата, изчислено съгласно т. 7.1.2;
Т - алкохолното съдържание на пробата, определено по метода "3. Определяне алкохолното съдържание" на приложение № 3.
7.2. Повторяемост
Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или непосредствено едно след друго, от един и същ анализатор, върху една и съща проба, при еднакви условия, не трябва да надвишава 0,2 g/hl абсолютен алкохол.
6. Определяне на общата киселинност
1. Цел на метода
Методът дава възможност за определяне на общата киселинност на неутрален алкохол, изразена като оцетна киселина.
2. Определение
Общата киселинност, изразена като оцетна киселина, се определя по описания метод.
3. Принцип
След отделяне на газовете пробата се титрува с помощта на еталонен разтвор на натриев хидроксид.
4. Реактиви
4.1. Разтвори на натриев хидроксид (0,01 и 0,1 mole/l), съхранявани при условия, позволяващи редуциране до минимум контакта с въглероден диоксид.
4.2. Разтвор на индигов кармин (А): претеглят се 0,2 g индигов кармин; разтварят се в 40 ml вода в колба с обем 100 ml и се допълват с етанол до марката.
Разтвор на фенолруж (Б): претеглят се 0,2 g фенолруж; разтварят се в 6 ml натриев хидроксид (0,1 mole/l) в мерителна колба с обем 100 ml. Разтворът се довежда до марката с вода.
5. Апаратура
5.1. Стъкленица или апарат за титруване.
5.2. Пипета 100 ml.
5.3. Облодънна колба с обем 250 ml с шлифована запушалка.
5.4. Обратен хладник с шлифована запушалка.
6. Начин на работа
В облодънна колба с обем 250 ml с пипета се поставят 100 ml от пробата; прибавят се стъклени перли, ускоряващи кипенето, и за кратко се подлага на кипене на обратен хладник; в топлия разтвор се добавя по една капка от всеки от разтворите А и Б. Титрува се с натриев хидроксид (0,01 mole/l) до момента на преминаване на зеленожълтия цвят във виолетов.
7. Отчитане на резултатите
7.1. Формула и метод за изчисляване
Общата киселинност, изразена като оцетна киселина в грамове на хектолитър абсолютен алкохол, е
| 60V |
| ____, |
| Т |
където:
V са милилитрите разтвор на натриев хидроксид при 0,01 mole/l, необходими за неутрализиране;
Т е алкохолното съдържание, определено по метода "3. Определяне алкохолното съдържание" към приложение № 3.
7.2. Повторяемост
Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или непосредствено едно след друго, от един и същ анализатор, върху една и съща проба, при еднакви условия, не трябва да надвишава 0,1 g/hl абсолютен алкохол.
7. Определяне на съдържанието на естери (обикновен метод)
1. Цел на метода
Методът се състои в определяне на съдържанието на естери в неутрален алкохол, изразено като етилацетат.
2. Определение
Количеството на естерите, изразени като етилацетат, се определя по описания метод.
3. Принцип
В присъствието на хидроксиламин хидрохлорид в алкален разтвор естерите реагират в количествено отношение, за да образуват хидроксаминови киселини, които в присъствието на железни йони в киселинен разтвор образуват оцветени съединения. Измерват се оптичните плътности на тези съединения при 525 nm.
4. Реактиви
4.1. Солна киселина при 4 mole/l.
4.2. Разтвор на ферихлорид 0,37 mole/l в солна киселина 1 mole/l.
4.3. Разтвор на хидроксиламин хидрохлорид (2 mole/l), който се съхранява в хладилна камера.
4.4. Разтвор на натриев хидроксид при 3,5 mole/l.
4.5. Контролни разтвори на етилов ацетат, съдържащи съответно 0,0, 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 и 1,0 g етил ацетат в хектолитър химически чист етанол при 96 об. %.
5. Апаратура - абсорбционен спектрофотометър, оборудван с кювети с дебелина 50 mm.
6. Начин на работа
6.1. Калибровъчна крива: С аналитична везна се отмерва един грам етилов ацетат; разтваря се в мерителна колба с обем 1000 ml с етанол, освободен от естери, и се допълва до марката при температура 20 градуса по Целзий; провеждат се серия от разреждания на два етапа, така че да се получат 20 контролни разтвора със съдържание от 0,1 до 2,0 mg етилов ацетат на 100 ml разтвор; с помощта на тези контролни разтвори се определят стойностите на екстинкциите съгласно т. 6.2 и се изготвя крива.
6.2. Определяне съдържанието на естер: С пипета се вземат 10 ml от пробата и се поставят в епруветка, снабдена с шлифована запушалка; добавят се 2 ml от разтвора на хидроксиламин хидрохлорида; едновременно се приготвя контрола с 10 ml химически чист етанол при 96 об. % с 2 ml хидроксиламин хидрохлорид; след това се добавят всеки път по 2 ml натриев хидроксид в епруветки с шлифована запушалка и се разклащат силно; държат се в термостатична вана при 20 градуса по Целзий в продължение на 15 min; добавят се по 2 ml солна киселина във всяка епруветка и се разклаща за кратко време; добавят се 2 ml разтвор на железен трихлорид и се размесва добре; съдържанието се излива в кювети и се определя стойността на екстинкцията при 525 nm.
7. Изразяване на резултатите
7.1. Изчисление
Построява се стандартна крива на оптичните плътности и концентрацията на еталонните разтвори. Съдържанието на естери, изразено като етилацетат=А, в зависимост от абсорбцията се отчита върху кривата и е
| 100А | |
| ____, | g/hl абсолютен алкохол, |
| Т |
където:
Т е алкохолното съдържание на пробата, определено по метод "3. Определяне на алкохолното съдържание" към приложение № 3.
7.2. Повторяемост
Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или непосредствено едно след друго, от един и същ анализатор, върху една и съща проба, при еднакви условия, не трябва да надвишава 0,1 g естери, изразени като етилацетат в хектолитър абсолютен алкохол.
8. Определяне съдържанието на летливи азотни вещества в спирт
1. Цел на метода
Методът се състои в определяне на съдържанието на летливи азотни вещества в неутрален алкохол, изразено като азот.
2. Определение
Съдържанието на летливи азотни вещества се изразява като азот, определен по описания метод.
3. Принцип на метода
Основава се на изпаряване на пробата до получаването на малък обем в присъствието на сярна киселина и след това се определя съдържанието на амоняк по метода на микродифузията на Conway.
4. Реактиви
4.1. Сярна киселина, един mole/l.
4.2. Разтвор индикатор на борна киселина:
В мерителна колба с обем 1000 ml се разтварят 10 g борна киселина, 8 mg зелен бромкрезол и 4 mg метил в пропанол-2 с концентрация 30 об. % и се допълва до 1000 ml чрез добавка на пропанол-2 с концентрация 30 об. %.
4.3. Разтвор на калиев хидроксид 500 g/l, свободен от карбонат.
4.4. Солна киселина, 0,02 mole/l.
5. Апаратура
5.1. Изпарителна капсула с достатъчен капацитет за получаване на проба 50 ml.
5.2. Водна баня.
5.3. Съд на Conway, оборудван с херметичен капак: вж. фигурата за описанието и препоръчителните размери.
5.4. Микробюрета с вместимост от 2 до 5 ml, градуирана през 0,01 ml.
6. Начин на работа
6.1. С пипета се вземат 50 ml от пробата (ако се предвижда съдържание на азот под 0,2 g/hl от мострата, се вземат 200 ml), които се поставят в стъклена капсула, добавя се един милилитър сярна киселина един мол на литър (т. 4.1), поставя се капсулата (т. 5.1) във водна баня (т. 5.2) и се изпарява до получаването на остатък от около един милилитър.
6.2. С пипета се взема един милилитър от разтвора индикатор на борна киселина (т. 4.2), поставя се във вътрешния съд на реактора на Conway (т. 5.3) и се изплаква течният остатък от изпаряването (т. 6.1) във външния съд. Леко се наклонява реакторът на Conway и се добавя около един милилитър разтвор на калиев хидроксид (т. 4.3) във външния съд, колкото се може по-бързо, но и възможно по-далече от цялата съдържаща се течност в този външен съд. Веднага се затваря съдът на Conway и се покрива с херметичен капак, намазан с вазелин.
6.3. Двата разтвора се смесват във външния съд, като се внимава да не проникне течност от единия съд в другия. Оставя се да престои в продължение на 2 h.
6.4. Амонякът се титрува във вътрешния съд с помощта на разтвор на солна киселина 0,02 mole/l (т. 4.4), като се използва малка стъкленица (т. 5.4) за неутрализацията. Обемът на използваната киселина трябва да бъде от порядъка от 0,2 до 0,9 ml - V1,l.
6.5. Извършва се повторно дозиране, като се повтарят описаните в т. 6.1 до 6.4 операции, като се заменят посочените в т. 6.1 50 ml от пробата със същия обем вода-V2, ml.
7. Отчитане на резултатите
7.1. Формула и метод за изчисляване
Съдържанието на летливи азотни вещества в грамове азот на хектолитър абсолютен алкохол е
| (V1-V2)2800 |
| ___________, |
| E•T |
където:
V1 е обемът на солната киселина, необходим за неутрализиране на пробата, ml;
V2 - обемът на солната киселина, използвана при празната проба, в ml;
Т - алкохолното съдържание, определено по метода "3. Определяне алкохолното съдържание" на приложение № 3;
Е - обемът на използваната проба, ml.
7.2. Повторяемост
Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или непосредствено едно след друго от един и същ анализатор, върху една и съща проба, при еднакви условия, не трябва да надвишава 0,05 g/hl абсолютен алкохол.
Фиг. 1 Реактор на Conway.
9. Определяне на съдържанието на метанол
1. Цел на метода
Методът се състои в определяне на съдържанието на метанол в неутралния алкохол.
2. Определение
Съдържанието на метанол се определя по описания метод.
3. Принцип
Концентрацията на метанол се определя чрез директно впръскване на пробата в хроматограф при газообразно състояние.
4. Начин на работа
Подходящ е всеки метод на газово-течна хроматография, при положение че хроматографската колона в газообразно състояние позволява да се получи, при възприетите условия на действие, ясно отделяне на различните съставки: метанол, ацеталдехид, етанол и етилов ацетат. Лимитът за наличие на метанол в етанола трябва да бъде под 2 g/hl.
5. Повторяемост
Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или непосредствено едно след друго, от един и същ анализатор, върху една и съща проба, при еднакви условия, не трябва да надвишава 2 g метанол на хектолитър абсолютен алкохол.
10. Определяне на сух екстракт
1. Цел на метода
Методът се състои в определяне на сухия екстракт в неутрален алкохол.
2. Определение
Съдържание на сух екстракт е съдържанието на сухо вещество, определено по описания метод.
3. Принцип
Част от пробата се изсушава при температура 103 градуса по Целзий и се определя концентрацията на остатъка по метода на гравиметрията.
4. Апаратура
4.1. Водна баня, вряща.
4.2. Изпарителна капсула с достатъчен капацитет.
4.3. Апарат за изсушаване, съдържащ прясно активиран силициев гел (или еквивалентен сикатив), съоръжен с хигрометричен индикатор.
4.4. Аналитична везна.
4.5. Камера за сушене, с регулираща се температура от 103 ± 2 градуса по Целзий.
5. Начин на работа
Чиста и суха изпарителна капсула (т. 4.2) се измерва с точност до една десета от милиграма (М0); с пипета се поставя неколкократно подходящ обем от пробата в капсулата (от 100 до 250 ml) (V0 ml); поставя се капсулата, съдържаща пробата, във вряща водна баня (т. 4.1) и се оставя да се изпари; поставя се в камерата за изсушаване (т. 4.5), регулирана при температура 103 ± 2 градуса по Целзий, в продължение на 30 min, после в апарат за изсушаване (т. 4.3) се поставя капсулата, съдържаща остатъка; капсулата се оставя да се охлади в продължение на 30 min в ексикатор, след което се измерва с точност до една десета от милиграма капсулата, съдържаща остатъка (М1).
6. Отчитане на резултатите
6.1. Формула и метод за изчисляване
Съдържанието на сух остатък, изразено в грамове на хектолитър етанол при 100 об. %, е
| (M1-M0)107 |
| __________, |
| V0 • T |
където:
M0 е масата на чистата и суха капсула, g;
M1 - масата на капсулата, съдържаща остатъка след изсушаване, g;
V0 - обемът на мострата, подложена на изсушаване;
T - алкохолното съдържание на пробата, определено по метода "3. Определяне алкохолно съдържание" на приложение № 3.
6.2. Повторяемост
Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или непосредствено едно след друго, от един и същ анализатор, върху една и съща проба, при еднакви условия, не трябва да надвишава 0,5 грама на хектолитър абсолютен алкохол.
11. Установяване на отсъствието на фурфурал в спирт
1. Цел на метода
Методът цели откриването на наличие на фурфурал в неутралния алкохол.
2. Определение
Граничната стойност на определения фурфурал е тази, определена по описания метод.
3. Принцип
Алкохолната проба се cмесва с анилин и ледена оцетна киселина. Появата на бледорозово оцветяване в рамките на 20 min след cмесването показва наличието на фурфурал.
4. Реактиви
4.1. Прясно дестилиран анилин.
4.2. Ледена оцетна киселина.
5. Апаратура-епруветки с шлифовани запушалки.
6. Начин на работа. В епруветка (т. 5) с пипета се вкарват 10 ml от пробата, добавят се 0,5 ml анилин и 2 ml ледена оцетна киселина; епруветката се разклаща, за да се cмесят реактивите.
7. Отчитане на резултатите
7.1. Интерпретиране на опита
Ако до 20 min се появи бледорозово оцветяване, опитът се счита за положителен, т.е. пробата съдържа фурфурал.
7.2. Повторяемост
Резултатите от два опита, извършени едновременно или непосредствено един след друг, от един и същ анализатор, върху една и съща проба, при еднакви условия, трябва да бъдат идентични.
12. Тест за абсорбиране на ултравиолетова светли на
1. Цел на метода
Този метод позволява да се определи оптичната пропускливост на неутралния алкохол.
2. Принцип
Оптичната пропускливост на пробата във вълновия обхват 220-270 nm се измерва по отношение на определено контролно вещество, притежаващо голяма оптична пропускливост.
3. Апаратура
3.1. Спектрофотометър UV-VIS.
3.2. Кювети от кварц с дебелина 10 mm за идентична спектрална транcмисия.
4. Реактиви-n-хексан за спектроскопия.
5. Начин на работа. Предварително се изплакват чистите кювети с разтвор на пробата, после се пълни пробата и кюветите се изсушават отвън; контролната кювета (n) се третира с n-хексан по същия начин и се напълва; определя се стойността на гасене и се построява графика.
6. Отчитане на резултатите
Стойностите на гасене, констатирани при 270, 240, 230 и 220 nm, не трябва да надвишават стойностите: 0,02, 0,08, 0,18 и 0,3. Кривата на гасенето трябва да има гладък и правилен контур.
13. Определяне на съдържанието на C14 в спирта
1. Процедура за определяне на естеството на алкохола
Определянето на съдържанието на C14 в етанола позволява да се направи разграничение между синтетичния алкохол и алкохола, получен чрез ферментация на суровини от земеделски произход.
2. Определение
Под съдържание на C14 в етанола се разбира съдържанието на C14, определено по описания метод.
Естественото съдържание в атмосферата на C14 (контролна стойност), който се асимилира от живите растения, не е постоянна величина. Поради това контролната стойност се определя на базата на етанола, получаван само от суровини в крайните фази на растеж. Тази контролна стойност, наречена годишна контролна стойност, се определя ежегодно чрез съвместни анализи, организирани от Бюрото за контрол на Общността и Изследователския център в Испра.
3. Принцип
Съдържанието на C14 се определя директно чрез броене посредством течна сцинтилация на пробите, съдържащи алкохол с най-малко 85 тегловни процента етанол.
4. Реактиви
4.1. Сцинтилатор с толуол-5,0 g 2,5-дифенилоксазол (РРО); 0,5 g p-bis [4-метил-5-фенилоксазол (2)]-бензен (диметил-РОРОР) в един литър чист толуол, химически чист за анализ.
Сцинтилатори с рафиниран толуол с този състав, предлагани в търговската мрежа и готови за употреба, също могат да бъдат използвани.
4.2. C14-еталон.
C14 n-хексадекан с активност около 1•106 dpm/g [около 1,67•106 сBq/g (стотни от бекерела на грам)] и с гарантирана точност на определената активност от ± 2 % отн.
4.3. Етанол, свободен от C14.
Синтетичен алкохол на база изкопаеми суровини с минимум 85 масови процента етанол за определяне на нулевия ефект.
4.4. Алкохол от земеделски произход, с минимум 85 тегловни процента етанол, в качеството му на сравнителен разтвор.
5. Апаратура
5.1. Спектрометър за течна сцинтилация с множество канали с компютър, автоматична външна стандартизация и показания на условията на канала външен стандарт (обикновена конструкция с три измервателни канала и два канала външни стандарти).
5.2. Флакони за броене със слабо съдържание на калий, пригодени за апаратурата, снабдени с тъмни винтови тапи с вътрешно защитно покритие от полиетилен.
5.3. Пипети за обемен анализ 10 ml.
5.4. Автоматичен дозатор 10 ml.
5.5. Облодънна колба 250 ml с шлифт.
5.6. Апаратура за дестилация на алкохол, оборудвана с купол, например от типа Micko.
5.7. Микролитрова спринцовка 50 ml.
5.8. Фуния за пикнометър, пикнометри 25 и 50 ml.
5.9. Термостат за постоянна температура с отклонение ± 0,01 градуса по Целзий.
5.10. Практически алкохолометрични таблици (метод "3. Определяне алкохолното съдържание" към приложение № 3).
6. Начин на работа
6.1. Настройване на апаратурата
Апаратурата трябва да се настройва съобразно инструкциите на производителя. Условията за измерване са оптимални, когато стойността E2/B, наречена значим фактор, е максимална.
Е е рандеман
B-шум от фона
Само два канала за измерване се поставят при оптимален режим. Третият измервателен канал остава напълно отворен с цел контрол.
6.2. Селекция на флаконите за контрол
По-голям брой флакони за контрол от тези, изисквани впоследствие, се напълват с по 10 ml синтетичен етанол, свободен от С14, и с по 10 ml сцинтилатор с рафиниран толуол и измерени най-малко 4 x 100 min. Флаконите, които с шум от фона се отклоняват с повече от ± 1 отн. % от средната стойност, трябва да се отстранят. При селекцията трябва да се използват единствено нови флакони за контрол, произхождащи от една и съща партида.
6.3. Определяне на съотношението канал-външен стандарт (RCSE)
При регулиране на канала, извършено съгласно т. 6.1, едновременно с изчисляването на коефициента за ефективност с помощта на съответна програма за изчисление се определя и съотношението канал-външен стандарт (RCSE). За външността е целесъобразно да се използва цезий 137, който вече е поставен от производителя.
6.4. Изготвяне на пробата
За целите на измерването се прибягва до проби със съдържание на етанол от минимум 85 тегловни %, без примеси и показващи абсорбиране под 450 nm. Незначителният остатък от алдехиди и естери не води до отклонения. След изхвърлянето на първите милилитри дестилат дестилацията се извършва директно в пикнометър, след което с помощта на пикнометър се измерва съдържанието на алкохол.Стойностите за определяне се вземат от официалните таблици за алкохола (т. 5.10).
7. Измерване на пробите с вътрешен стандарт
7.1. Пробите със слабо абсорбиране като тези, описани в т. 6.4, със стойност около 1,8 могат да бъдат измерени посредством съотношението канал-външен стандарт (RCSE), което съставлява мярка за коефициента на ефективност.
7.2. Начин на работа
Всеки път с помощта на пипета в подбрания флакон за броене, контролиран за шум на фона, се вкарват по 10 ml от пробата, изготвена съгласно т. 6.4, след което всеки път се добавят по 10 ml от сцинтилатора с рафиниран толуол с помощта на автоматичния дозатор. Пробите се хомогенизират в контролния флакон чрез въртене, като се внимава течността да не навлажни вътрешното защитно покритие от полиетилен на винтовата тапа. За да се определи шумът на фона, се приготвя по същия начин контролен флакон със синтетичен етанол, свободен от С14. За да се провери годишната стойност на С14, се приготвя двойна доза естествен етанол, произхождащ от суровини в крайна фаза на разви тие, като се cмеси един флакон за броене с вътрешен стандарт съгласно т. 8.
Контролните проби, както и пробите за шум от фона трябва да се поставят в началото на серията от измервания. Серията от измервания не трябва да включва повече от 10 проби за анализ. Общата продължителност на измерванията за всяка проба е 2 x100 min минимум, като измерванията на отделните проби се извършват на полуетапи от по 100 min всеки един, за да може да се идентифицира евентуално отклонение или друго cмущение. (По този начин един цикъл включва всеки път за всяка проба интервал 100 min.) Пробите за шум от фона или контролните проби се подновяват след 4 седмици.
Тази процедура за измерване изисква малко материали и време. Тя е подходяща за лаборатории с достатъчен опит, изследващи голям брой проби.
При пробите със слабо абсорбиране (съотношение канал-външен стандарт около 1,8) рандеманът е слабо повлиян от модифицирането на тази стойност. Когато това модифициране не надвишава ± 5 тегловни %, изчисляването може да се извърши със същия рандеман. При пробите с по-силно абсорбиране, като например при денатурираните алкохоли, рандеманът може да бъде изчислен чрез т.нар. крива за корекция на абсорбирането. Ако лабораторията не разполага с подходяща програма за изчисляване, трябва да се измерва с вътрешен стандарт, който ясно определя рандемана.
8. Измерване на пробите с вътрешен стандарт хексадекан С14
8.1. Начин на работа
Контролните проби и пробите за шум от фона (естествен и синтетичен етанол), както и неизвестният материал да бъдат измерени двойно. За целта да се приготви двойна проба в неподбран флакон, към който е добавено точно дозирано количество (30 микролитра) хексадекан С14 като вътрешен стандарт (допълнителна активност около 26 269 dpm/g С (около 43 782 сBq/g C). За подготовката на другите образци и времена за измервания е целесъобразно да се процедира, както е указано в т. 7.2, като пробите с вътрешен стандарт са с време за измерване, ограничено до около 5 min чрез предварително настройване с 105 импулса. Чрез серия измервания (10 проби) да се приготвят всеки път двойни контролни проби и проби за шума от фона, които да бъдат поставяни в началото на серията от анализи.
8.2. Използване на вътрешния стандарт и контролните флакони
При измерванията с вътрешен стандарт е необходимо с цел предотвратяване на замърсяването съхранението и манипулацията на тези стандарти да се осъществяват на друго място, различно от това на приготвянето и измерването на пробите за анализ. След измерването контролираните флакони за шум от фона могат да бъдат повторно използвани. Винтовите тапи и флаконите, съдържащи вътрешните стандарти, да бъдат изхвърлени.
9. Оценка
9.1. Мерната единица за активност на едно радиоактивно вещество е бекерелът:
един Bq = един разпад/сек.(един Bq = един desintegration/sec)
Специфичната радиоактивност се изразява в бекерели спрямо един грам въглерод = Bq/g C. За да се получат стойности, близки до действителните, препоръчително е да се отчете резултатът в стотни от бекерела-cBq/g C.
Обозначенията и формулите за изчисляване, посочени досега в публикациите и които са базирани на данните dpm, могат да бъдат запазени засега. За да се получи съответната стойност в стотни от бекерела, е достатъчно резултатът dpm да се умножи с коефициент
| 100 |
| ____. |
| 60 |
9.2. Оценка с външен стандарт
| (cpmpr-cpmNE)1,918•100 | |
| cBq/g C = | ________________________ . |
| 60V•F•Z |
9.3. Оценка с вътрешен стандарт
| (cpmpr-cpmNE)dpmIS1,918•100 | |
| cBq/g C = | ________________________ . |
| (cpmIS-cpmpr)60•V•F |
9.4. Означения:
- cpmpr - средната стойност на получените резултати при броене на пробите, изчислена през цялото времетраене на измерванията;
- cpmNE - средната стойност на получените резултати при броене на шума от фона, изчислена по същия начин;
- cpmIS - резултатът при броенето на пробите, с наличен вътрешен стандарт;
- dpmIS - количеството на добавения вътрешен стандарт (контролна радиоактивност dpm);
- V - обемът на използваните проби, ml;
- F - съдържанието чист алкохол, в зависимост от концентрацията му, g/ml;
- Z - коефициент за ефективност според стойността на съотношението канал - външен стандарт;
- 1,918 = грама алкохол/един грам въглерод.
10. Точност на метода
10.1. Повторяемост (r)
r = 0,632 cBq/g С; s(r) = ± 0,223 cBq/g C
10.2. Възпроизводимост (R)
R = 0,821 cBq/g С; s(R) = ± 0,290 cBq/g C
14. Определяне на обемното алкохолно съдържание на спиртни напитки (сравнителeн метод)
Въведение
Сравнителният метод е предмет на две приложения:
Приложение I - Подготовка на дестилата.
Приложение II - Измерване плътността на дестилата.
1. Област на приложение
Методът е подходящ за определяне на реалното обемно алкохолно съдържание на спиртни напитки.
2. Нормативи: БДС EN ISO 3696:2000 Лабораторна вода за приложение при анализи. Спецификация и пробни методи.
3. Термини и определения
3.1. Сравнителна температура
Сравнителната температура за определяне на обемното алкохолно съдържание на плътността и на относителната плътност на спиртните напитки е 20 градуса по Целзий.
Забележка 1. Запазва се изразът "при t градуса по Целзий" за определенията, изразени в температура, различна от сравнителната температура 20 градуса по Целзий.
3.2. Плътност
Плътността е масата на определен обем от спиртната напитка при 20 градуса по Целзий, разделена на обема на напитката. Тя се изразява в килограми на кубичен метър и символът й е "r20 градуса по Целзий" или "r20".
3.3. Относителна плътност
Относителната плътност (относителното тегло) е отношението, изразено като десетично число (отчита се до първия знак след запетаята) на плътността на спиртните напитки при 20 градуса по Целзий към плътността на водата при същата температура. Тя се обозначава със символа "d20 градуса по Целзий/20 градуса по Целзий " или само с "d20/20", ако това няма да доведе до объркване. Относителната плътност се изразява в анализните свидетелства само с един от двата символа.
Забележка 2. Възможно е да се получи относителна плътност от плътността r20 при 20 градуса по Целзий:
| r20 | |
| r20 = 998,203 d20/20, или d20/20 = | ________ , |
| 998,203 |
където 998,203 е плътността на водата при 20 градуса по Целзий.
3.4. Реално обемно алкохолно съдържание
Реалното обемно алкохолно съдържание на спирт ните напитки е равно на литрите етилов алкохол, съдържащи се в 100 литра водноалкохолна cмес, със същата плътност като спиртната напитка, след дестилация. Таблиците, даващи стойността на обемното алкохолно съдържание (об. %) при 20 градуса по Целзий като функция от плътността при 20 градуса по Целзий на водноалкохолни смеси, са таблици I, II и III на метод "3. Определяне алкохолното съдържание" на приложение № 3.
3.5. Общото уравнение, свързващо обемното алкохолно съдържание на водноалкохолните cмеси с определена температура, е посочено в метод "3. Определяне алкохолното съдържание" на приложение № 3 и в Сборник за методите за анализ на Международната организация по лозата и виното (1994).
Забележка 3. В случаите на ликьори и емулсионни спиртни напитки, за които е трудно да се измери точен обем, пробата се претегля и най-напред се изчислява алкохолното съдържание по маса.
Формула за превръщане:
| TAM(%)r20(проба) | |
| Обемно алкохолно съдържание (об.% ) = | ______________ , |
| r20 (алкохол) |
където:
ТАМ е тегловното алкохолно съдържание;
r20 (алкохол) = 789,24 kg/m3.
4. Принцип
След дестилация обемното алкохолно съдържание на дестилата се определя пикнометрично чрез електронна денсиметрия или чрез денсиметрия с хидростатична везна.
Приложение I: Подготовка на дестилата
1. Област на приложение
Методът е подходящ за подготовка на дестилати, използвани за определяне на реалното обемно алкохолно съдържание на спиртните напитки.
2. Принцип
Спиртните напитки се дестилират, за да се отделят "екстрактните материали" (компоненти, които не подлежат на дестилация) на етиловия алкохол и други летливи компоненти.
3. Реактиви и материали
3.1. Гранули (перли) против изпръскване.
3.2. Концентрирана емулсия против пенене (за емулсионните спиртни напитки).
4. Апаратура и материали
Стандартно лабораторно оборудване:
4.1. Водна баня с възможност да поддържа температура 10-15 градуса по Целзий. Водна баня с възможност да поддържа температура 20 градуса по Целзий ± 0,2 градуса по Целзий.
4.2. Мерителни колби клас А, 100 и 200 ml, сертифицирани съответно до ± 0,1 и 0,15 %.
4.3. Дестилационен апарат:
4.3.1. Общи изисквания: използваният дестилационен апарат трябва да отговаря на следните характеристики:
• ограничен брой връзки за осигуряване на водонепропускливост на системата;
• приспособление за избягване увличането на вода от парата при кипене и за регулиране дебита на дестилация на парите с високоалкохолно съдържание;
• бързо и пълно кондензиране на алкохолните пари;
• улавяне на първите фракции на дестилата във водна среда.
Източникът на топлина трябва да притежава способност за дифузия на топлината за избягване преминаването на пирогени с извличаните компоненти.
4.3.2. Подходящият примерен дестилационен апарат, показан на фигурата, отговарящ на посочените изисквания, включва: облодънна колба с обем 1 l, със стандартен шлиф; ректификационна колона с височина минимум 20 cm (например колона на Vigreux); извита връзка с около 10 cm прав хладник (хладник тип West), монтиран вертикално; охлаждаща серпентина с дължина 40 cm; тръбичка с изтеглен край, довеждаща дестилата на дъното на градуирана събирателна колба, напълнена с малко вода.
Забележка. Описаният апарат е предназначен за проби най-малко от 200 ml. По-малки проби (100 ml) могат да се дестилират, като се използва по-малка дестилационна колба, снабдена с устройство против изпръскване или друго устройство, предпазващо течността от увличане.
5. Съхраняване на пробите за изпитване-при стайна температура преди анализа.
6. Начин на работа
6.1. Проверка на дестилационния апарат
Използваният апарат за дестилация трябва да отговаря на изискването. При дестилацията на 200 ml водноалкохолен разтвор с известна концентрация, близо до 50 об. %, не трябва да има загуба на алкохол над 0,1 об. %.
6.2. Спиртни напитки с алкохолно съдържание, по-ниско от 50 об. %
Проба от спиртната напитка се отмерва в мерителна колба 200 ml. Отчита се температурата на течността или се поддържа стандартна температура (20 градуса по Целзий). Пробата се прехвърля количествено в дестилационната колба на апарата, като мерителната колба се промива с три обема дестилирана вода по около 20 ml всяка. Всяка промивка се добавя към съдържанието на дестилационната колба.
Забележка. Това разреждане от 60 ml е достатъчно за спиртни напитки, съдържащи по-малко от 250 g/l сух екстракт. В другия случай за избягване на пиролиза обемът на промивната вода е най-малко 70 ml, ако концентрацията на сухия екстракт е 300 g/l; 85 ml - за 400 g/l сух екстракт; 100 ml - за 500 g/l сух екстракт (някои плодови ликьори или емулсионни спиртни напитки). Тези обеми се определят пропорционално на обемите на отделните проби. Добавят се няколко стъклени перли и антипенител за емулсионните спиртни напитки и ликьори. В мерителната колба 200 ml, която ще се използва за приемане на дестилата, се прибавят 20 ml дестилирана вода, след това колбата се поставя в охлаждаща водна баня (4.1) (10-15 градуса по Целзий за анасонови спиртни напитки). Дестилира се внимателно, като колбата се разбърква от време на време, докато нивото на дестилата достигне няколко милиметра под марката на мерителната колба.
Когато температурата на този дестилат се намали до около ± 0,5 градуса по Целзий от началната температура на течността, колбата се долива до марката с дестилирана вода и се хомогенизира. Този дестилат се използва за определяне на обемното алкохолно съдържание (приложение II).
6.3 Спиртни напитки с алкохолно съдържание над 50 об. %
В мерителна колба 100 ml се отмерват 100 ml от спиртната напитка и се преливат в облодънната колба на дестилационния апарат. Мерителната колба се промива неколкократно с дестилирана вода за количествено прехвърляне, като съдържанието от промиването се добавя в колбата за дестилация на апарата. Използва се достатъчно количество промивна вода до довеждане на обема в дестилационната колба до около 230 ml.
В мерителната колба от 200 ml, която се използва за приемане на дестилата, се прибавят 20 ml дестилирана вода. Колбата се поставя след това в охлаждаща водна баня (4.1) (10-15 градуса по Целзий за анасонови спиртни напитки). Дестилира се, разклащайки от време на време съдържанието на колбата, докато нивото на дестилата достигне няколко милиметра под калибрационната марка на мерителната колба от 200 ml. Когато температурата на този дестилат се намали до около ± 0,5 градуса по Целзий от началната температура на течността, колбата се долива до марката с дестилирaна вода и се хомогенизира. Този дестилат се използва за определяне на обемното алкохолно съдържание (приложение II).
Забележка. Обемното алкохолно съдържание на спиртната напитка е два пъти по-високо от това на дестилата.
Приложение II:
измерване на плътността на дестилата
А.1. Принцип
Обемното алкохолно съдържание се получава на база на измерената с пикнометър плътност на дестилата.
А.2. Реактиви и материали
По време на анализа, освен ако не е предвидено друго, се използват реактиви с известна аналитична чистота и вода минимум от 3 клас, както е дефинирано в стандарт БДС EN ISO 3696:2000.
А.2.1. Разтвор на натриев хлорид [2 % (m/V)].
За приготвянето на един литър се претеглят 20 g натриев хлорид, които се разтварят до един литър във вода.
А.3. Апаратура и оборудване
Използва се обичайното лабораторно оборудване, както следва:
А.3.1. Аналитична везна с точност 0,1 mg.
A.3.2. Термометър с шлифт, градуиран в десети от градуса, в обхват 10-30 градуса по Целзий. Този термометър трябва да е със сертификат или да е проверен в сравнение със сертифициран такъв.
А.3.3. Стъклен пикнометър от стъкло PYREX с обем 100 ml, снабден с подвижен термометър с шлифт (A.3.2). Пикнометърът е снабден със странична тръбичка с дължина 25 mm и вътрешен диаметър 1mm (максимум), завършваща с конична шлифована част. Могат да се използват и други пикнометри, например от 50 ml, описани в стандарт БДС ISO 3507:1995.
А.3.4. Предварително претеглено шише със същия външен обем (до 1 ml разлика) в сравнение с обема на пикнометъра и с маса, равна на масата на пикнометъра, напълнен с течност с плътност 1,01 (разтвор на натриев хлорид А.2.1).
А.3.5. Водна риза, обхващаща точно тялото на пикнометъра.
Забележка 1. Методът за определяне на плътността на спиртните напитки във вакуум изисква двублюдна везна, пикнометър и тарирано шишенце със същия външен обем с оглед елиминиране въздушното течение във всеки момент. Тази проста техника може да се приложи, използвайки едноблюдна везна, като теглото на тарираното шише многократно се измерва и се усредняват промените от въздушното течение по време на измерването.
А.4. Начин на работа
Предварителни забележки
Следващата процедура се отнася до използването на пикнометър от 100 ml за определяне на алкохолното съдържание, даваща най-голяма прецизност. Възможно е използването и на пикнометър с по-малък размер, например 50 ml.
А.4.1. Еталониране на пикнометъра
Пикнометърът се еталонира чрез определяне на параметрите:
- тара на празния пикнометър;
- обем на пикнометъра при 20 градуса по Целзий;
- маса на пълния пикнометър с вода при 20 градуса по Целзий.
А.4.1.1. Еталониране с едноблюдна везна
Определят се:
- масата на чист и сух пикнометър P;
- масата на пълния с вода пикнометър при t градуса по Целзий, P1;
- масата на тарираното шише, Т0.
А.4.1.1.1. Претегля се чистият и сух пикнометър P.
А.4.1.1.2. Пикнометърът се пълни с дестилирана вода със стайна температура и се поставя термометърът. Пикнометърът се поставя във водната риза. Разклаща се чрез обръщане на балона до отчитане на постоянна температура. Нивото на пикнометъра се изравнява по горния ръб на страничната тръбичка. Отчита се температурата, t градуса по Целзий, и при неточност в температурната скала се коригира. Претегля се пикнометърът, напълнен с вода P1.
A.4.1.1.3. Претегля се тарираното шишенце (Т0).
А.4.1.1.4. Изчисление
- Тарата на празния пикнометър = P-m,
където m е масата на въздуха в пикнометъра.
m = 0,0012(P1-P)
Забележка 2. Плътността на сухия въздух при 20 градуса по Целзий при атмосферно налягане 760 mm Hg е 0,0012.
• Обемът на пикнометъра при 20 градуса по Целзий V 20 градуса по Целзий - (с точност до 0,001 ml) се определя по формулата
V20 градуса по Целзий = [P1-(P-m)]Ft,
където:
Ft е факторът, отнасящ се за температура t градуса по Целзий от таблица I на метод "1. Определяне плътността и относителната плътност при 20 градуса по Целзий" към приложение № 3.
• Масата (теглото) на водата в пикнометъра при 20 градуса по Целзий:
M20 градуса по Целзий = 0,998203 V20 градуса по Целзий,
където 0,998203 е плътността на водата при 20 градуса по Целзий.
Забележка 3. Ако е необходимо, се използват плътността във въздуха (0,99715) и изчисленото алкохолно съдържание спрямо плътността във въздуха, посочена в таблиците на митниците и акцизите на Обединеното кралство.
А.4.1.2. Еталониращ метод с използване на двублюдна везна.
А.4.1.2.1. Тарираното шишенце се поставя върху лявото блюдо, а сухият чист пикнометър със запушалката - на дясното блюдо. Везната се уравновесява чрез поставяне на теглилки от страната на пикнометъра - p, g.
А.4.1.2.2. Пикнометърът се напълва с дестилирана вода със стайна температура и се поставя термометърът. Пикнометърът се подсушава и се поставя във водната риза. Разклаща се чрез обръщане на балона до отчитане на постоянна температура.
Нивото на пикнометъра се изравнява точно по горния ръб на страничната тръбичка. Подсушава се страничната тръбичка, поставя се запушалката, отчита се температурата t градуса по Целзий и при неточност в температурната скала се коригира.
Пикнометърът се претегля пълен с вода; - р', g (теглото, с което се уравновесява везната).
А.4.1.2.3. Изчисление
• Тарата на празния пикнометър = p + m,
където m е масата на въздуха в пикнометъра
m = 0,0012 (p-p')
• Обемът на пикнометъра при 20 градуса по Целзий, който се изчислява с точност до 0,001 ml по формулата:
V20 градуса по Целзий = Ft(p + m-p'),
където Ft е факторът за t градуса по Целзий в таблица I на метод "1. Определяне плътността и относителната плътност при 20 градуса по Целзий" на приложение № 3.
• Масата на водата в пикнометъра при 20 градуса по Целзий:
M20 градуса по Целзий = 0,998203 V20 градуса по Целзий,
където 0,998203 е плътността на водата при 20 градуса по Целзий.
А.4.2. Определяне на алкохолното съдържание на пробата
А.4.2.1. С използване на едноблюдна везна
А.4.2.1.1. Претегля се тарираното шишенце - T1 (масата му).
А.4.2.1.2. Претегля се пълният с дестилат пикнометър (вж. приложение I)-P2 (масата му при t градуса по Целзий).
А.4.2.1.3. Изчисление
- dT = T1-T0
• Масата на празния пикнометър в момента на измерване = P-m + dT
• Масата на течността, съдържаща се в пикнометъра при t градуса по Целзий = P2 - (P-m + dT)
• Плътността при t градуса по Целзий, в g/ml
| [P2 -(P-m + dT)] | |
| rt °C = | |
| V20 °C |
- Плътността при t градуса по Целзий се изразява в kg/m3, като се умножи rt градуса по Целзий по 1000. Тази стойност се означава катo rt.
- rt се коригира с помощта на таблиците за плътностите rt на водноалкохолни cмеси (таблица II от приложение II на Сборника за методите за анализ на OIV-Международната организация за лозата и виното 1994, стр. 17 до 29). В хоризонталния ред на тази таблица, съответстващ на температурата Т (изразена като цяло число), непосредствено под температурата t градуса по Целзий, се на мира най-ниската плътност, по-голяма от rt. Отчита се табличната разлика, непосредствено под тази плътност, за да се изчисли плътността rt на спиртната напитка при тази температура, изразена в цели градуси. В реда на температурата Т се намира плътността r' непосредствено по-висока от rt, и се изчислява разликата между плътностите rt и r'. Тази разлика се разделя на табличната разлика, вдясно от плътността r'. Частното дава десетичната част от алкохолното съдържание, а цялата част на алкохолното съдържание е посочена отгоре на колоната, в която се намира плътността r' (алкохолното съдържание е Dt).
Забележка 4. Възможно е също така да се запази пикнометърът във водна баня при 20 градуса по Целзий ± 0,2 градуса по Целзий, за да се доведе до марката.
А.4.2.1.4. Резултат
С помощта на плътността r20 се изчислява действителното алкохолно съдържание, като се използват таблици I, II и III на метод "3. Определяне алкохолното съдържание" към приложение № 3, даващи стойността на обемното алкохолно съдържание (об. %) при 20 градуса по Целзий, като функция от плътността при 20 градуса по Целзий на водноалкохолни смеси.
А.4.2.2. Метод с използване на едноблюдна везна
А.4.2.2.1. Претегля се пикнометърът, пълен с приготвения дестилат (вж. част I) - р'' (масата при t градуса по Целзий).
А.4.2.2.2. Изчисление
• Масата на течността, съдържаща се в пикнометъра, при t градуса по Целзий = p + m-p''
• Плътността при t градуса по Целзий, в g/ml
| (p + m-p'') | |
| rt °C = | |
| V20 °C |
• Плътността при t градуса по Целзий се изразява в kg/m3 и температурата се коригира, за да се изчисли алкохолното съдържание при 20 градуса по Целзий при използване на едноблюдна везна.
А.5 Характеристики на точността на метода.
А.5.1 Статистически резултати от междулабораторни изпитвания
Посочените в таблицата данни са резултат от международно изпитване на точността на метода, проведено при съблюдаване на международно установените начини на работа (1) и (2).
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 20 |
| Брой проби | 6 |
| Проби | A | B | C | D | E | F |
| Брой избрани лаборато- | 19 | 20 | 17 | 19 | 19 | 17 |
| рии след елиминиране | ||||||
| на отклоняващите се | ||||||
| Брой на отклоняващи | 1 | - | 2 | 1 | 1 | 3 |
| се лаборатории | ||||||
| Брой приети резултати | 38 | 40 | 34 | 38 | 38 | 34 |
| Средна стойност (x_), | 23,77 | 40,04 | 40,29 | 39,20 | 42,24 | 57,03 |
| об. % | 26,51* | 42,93* | 45,73* | 65,03* | ||
| Станд. отклонение на | 0,106 | 0,176 | 0,072 | 0,103 | 0,171 | 0,190 |
| повторяемост (Sr), об. % | ||||||
| Отн. станд. отклонение на | 0,42 | 0,44 | 0,18 | 0,25 | 0,39 | 0,32 |
| повторяемост (RSDr)(%) | ||||||
| Граница на повторяе- | 0,30 | 0,49 | 0,20 | 0,29 | 0,48 | 0,53 |
| мост (r), об. % | ||||||
| Станд. отклонение за въз- | 0,131 | 0,236 | 0,154 | 0,233 | 0,238 | 0,322 |
| производимост (SR), об. % | ||||||
| Отн. станд. отклонение за | 0,52 | 0,59 | 0,38 | 0,57 | 0,54 | 0,53 |
| възпроизводимостта | ||||||
| (RSDR)(%) | ||||||
| Граница на възпроиз- | 0,37 | 0,66 | 0,43 | 0,65 | 0,67 | 0,90 |
| водимост (R), об. % |
Тип проби:
А - плодов ликьор; двойни с различно съдържание*
В - бренди; двойни произволни
C - уиски; двойни произволни
D - гроздова ракия; двойни с различно съдържание*
Е - ракия; двойни с различно съдържание*
F - ром; двойни с различно съдържание
Метод В: Определяне на действителното обемно алкохолно съдържание на спиртните напитки чрез определяне на плътността по електронен път (измерване на резонансната честота на осцилация на пробата в осцилираща кювета)
В.1. Принцип
Плътността на течността се определя чрез електронно измерване на трептенето на вибрираща U-образна тръбичка. За извършване на измерването пробата се поставя в осцилираща система, чиято специфична честота на осцилация се променя в резултат на прибавената маса.
В.2. Реактиви и материали
По време на анализа, ако не е посочено друго, се използват само реактиви с известна аналитична чистота и вода минимум от клас 3, както е дефинирано в стандарт БДС EN ISO 3696:2000.
В.2.1. Ацетон (или абсолютен алкохол).
В.2.2. Сух въздух.
В.3. Апаратура и оборудване
Обичайно лабораторно оборудване и в частност следното:
В.3.1. Електронен денсиметър, отчитащ резултата от измерването в g/ml до петия знак след десетичната запетая.
Забележка 1. Денсиметърът трябва да е поставен върху изключително стабилен постамент, изолиран от всякакви вибрации.
В.3.2. Регулиране на температурата
Оптималният режим на работа на денсиметъра се постига само при свързване на измервателната кювета към вграден регулатор на температурата, постигащ стабилност на температурата от ± 0,02 градуса по Целзий или по-добра.
Забележка 2. Прецизното установяване и контролът на температурата в измерващата кювета е много важно, тъй като грешка от 0,1 градуса по Целзий може да доведе до промяна в плътността от 0,1 kg/m3.
В.3.3. Спринцовки за инжектиране на проба или уред за автоматично въвеждане на проби.
В.4. Начин на работа
В.4.1. Еталониране на денсиметъра
Апаратът трябва да е еталониран в съответствие с инструкциите на производителя още при въвеждането му в експлоатация. Трябва да се рекалибрира редовно и да се проверява със сертифициран еталон или вътрешен лабораторен разтвор, приготвен на базата на сертифициран сравнителен стандарт.
В.4.2. Определяне на плътността на пробата
В.4.2.1. Преди измерването кюветата се почиства и подсушава с ацетон или абсолютен алкохол и сух въздух. Преди инжектиране кюветата се промива с пробата.
В.4.2.2. Пробата се инжектира в кюветата (като се използва спринцовка или уред за автоматично въвеждане на проби), така че тя да е изцяло запълнена. При пълненето се елиминират всякакви въздушни мехурчета. Пробата трябва да е хомогенна и да не съдържа твърди частици. Всякакви суспендирани частици преди анализа чрез филтруване се отстраняват.
В.4.2.3. След като се стабилизират показанията на денсиметъра, се отчитат плътността r20 или алкохолното съдържание.
В.4.3. Резултат
С помощта на плътността r20 се изчислява действи телното обемно алкохолно съдържание, като се използват таблици I, II и III на метод "3. Определяне алкохолното съдържание" към приложение № 3, даващи стойността на обемното алкохолно съдържание (об. %) при 20 градуса по Целзий, като функция от плътността при 20 градуса по Целзий на водоалкохолни cмеси.
В.5. Характеристики на възпроизводимостта (точността) на метода
В.5.1. Статистически резултати от междулабораторния тест
Данни, получени по международно разработен метод за пручване на точността, осъществени в съответствие с международно възприетите процедури (1) и (2).
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 16 |
| Брой проби | 6 |
| Проби | A | B | C | D | E | F |
| Брой избрани лаборато- | 11 | 13 | 15 | 16 | 14 | 13 |
| рии след елиминиране | ||||||
| на отклоняващите се | ||||||
| Брой на отклоняващи | 2 | 3 | 1 | - | 1 | 2 |
| се лаборатории | ||||||
| Брой приети резултати | 22 | 26 | 30 | 32 | 28 | 26 |
| Средна стойност | 23,81 | 40,12 | 40,35 | 39,27 | 42,39 | 56,99 |
| (x_), об. % | 26,52* | 43,10* | 45,91* | 63,31* | ||
| Станд. отклонение на | 0,044 | 0,046 | 0,027 | 0,079 | 0,172 | 0,144 |
| повторяемост(Sr), об % | ||||||
| Отн. станд. отклонение | 0,17 | 0,12 | 0,07 | 0,19 | 0,39 | 0,24 |
| на повторяемост | ||||||
| (RSDr), (%) | ||||||
| Граница на повторяе- | 0,12 | 0,13 | 0,08 | 0,22 | 0,48 | 0,40 |
| мост (r), об % | ||||||
| Станд. отклонение за | 0,054 | 0,069 | 0,083 | 0,141 | 0,197 | 0,205 |
| възпроизводимост | ||||||
| (SR), об % | ||||||
| Отн. станд. отклонение | 0,21 | 0,17 | 0,21 | 0,34 | 0,45 | 0,34 |
| за възпроизводимостта | ||||||
| (RSDR),(%) | ||||||
| Граница на възпроиз- | 0,15 | 0,19 | 0,23 | 0,40 | 0,55 | 0,58 |
| водимост (R), об % |
Тип проби:
А - плодов ликьор; двойни с различно съдържание*
В - бренди; двойни произволни
C - уиски; двойни произволни
D - гроздова ракия; двойни с различно съдържание*
Е - ракия; двойни с различно съдържание*
F - ром; двойни с различно съдържание*
Метод С: Определяне действителното обемно алкохолно съдържание на спиртните напитки чрез денсиметрия, използваща хидростатична везна
С.1. Принцип
Алкохолното съдържание на спиртните напитки може да бъде определено денсиметрично с помощта на хидростатична везна въз основа на принципа на Архимед, съгласно който всяко тяло, потопено в течност, е обект на противоналягане в посока отдолу нагоре, равно на теглото на изместената течност.
С.2. Реактиви и материали
По време на анализа, ако не е предписано друго, да се използват само реактиви с познато аналитично качество и вода, минимум от клас 3, както е определено в БДС EN ISO 3696:2000.
С 2.1. Разтвор за почистване на поплавъка (натриев хидроксид 30 % m/V).
За приготвяне на 100 ml разтвор се измерват 30 g натриев хидроксид и до марката се допълва с 96 % етанол.
С.3. Апаратура и оборудване
Обичайно лабораторно оборудване, в частност:
С.3.1. едноблюдна хидростатична везна с чувствителност един милиграм;
C.3.2. поплавък с обем най-малко 20 ml, специално пригоден за везната, снабден с нишка с диаметър непревишаващ 0,1 mm;
C.3.3. мерителен цилиндър, притежаващ марка, поплавъкът трябва да може да бъде напълно потопен в обема на цилиндъра, ограничен под марката; над нивото на течността може да е само нишката, мерителният цилиндър трябва да има вътрешен диаметър най-малко с 6 mm по-голям от този на поплавъка;
С.3.4. термометър (или температурен датчик), градуиран в градуси и десети от градуса, от 10 градуса по Целзий до 40 градуса по Целзий, калибриран до 0,05 градуса по Целзий;
С.3.5. теглилки, проверени от оторизиран сертифициращ орган.
Забележка 1. Използването на двублюдна везна е също възможно; начинът е описан в метод "1. Определяне плътността и относителната плътност при 20 градуса по Целзий" към приложение № 3.
С. 4. Начин на работа
Преди всяко измерване поплавъкът и мерителният цилиндър трябва да се почистват с дестилирана вода, да се подсушат с мека филтърна хартия, неоставяща влакна, и след това се промиват с разтвора, чието относително тегло ще бъде определяно. Измерванията трябва да се извършват максимално бързо, след като уредът влезе в стабилен режим на работа, за да се избегне в максимална степен загубата от изпарение на алкохол.
С.4.1. Калибриране на везната
Въпреки че по принцип везните са снабдени със система за вътрешно калибриране, хидростатичната везна да може да се калибрира с теглилки, проверени от оторизирания орган по сертификация и метрология.
С.4.2. Калибриране на поплавъка
С.4.2.1. Мерителният цилиндър се напълва до марката с бидестилирана вода [или вода с еквивалентна чистота, например вода, филтрирана през микропорест филтър с проводимост 18,2 (mS/cm)(микросименса на сантиметър)] с температура 15-25 градуса по Целзий, но за предпочитане е да бъде 20 градуса по Целзий.
С.4.2.2. Потапят се поплавъкът и термометърът, разбърква се, отчита се плътността на течността от апарата и ако е необходимо, отчитането се коригира, така че да бъде еднакво с това на водата при температурата на измерването.
С.4.3. Контрол с използване на водноалкохолен разтвор
С.4.3.1. С водноалкохолен разтвор с известно съдържание на алкохол, чиято температура е между 15-25 градуса по Целзий, като за предпочитане е да е 20 градуса по Целзий, мерителният цилиндър се напълва до марката.
С.4.3.2. Потапят се поплавъкът и термометърът, разбърква се, отчита се плътността на течността от апарата (или алкохолното съдържание, ако е възможно). Така определеното алкохолно съдържание трябва да бъде равно на определеното преди това.
Забележка 2. Този разтвор с известно алкохолно съдържание може да се използва и за калибриране на поплавъка вместо това да се извърши с бидестилирана вода.
С.4.4. Измерване на плътността на дестилат (или на алкохолното му съдържание, ако апаратурата го позволява).
С.4.4.1. Изпитваната проба се внася в мерителния цилиндър и се довежда до марката.
С.4.4.2. Потапят се поплавъкът и термометърът, разбърква се, отчита се плътността на течността от апарата (или алкохолното съдържание, ако е възможно). Отчита се температурата, ако плътността rt е измерена при t градуса по Целзий.
С.4.4.3. Коригира се rt с помощта на таблиците за определяне на плътностите rt на водноалкохолните cмеси (таблица II от приложение II на Сборника за методите за анализ на Международната организация за лозата и виното OIV, 1994).
С.4.5. Почистване на поплавъка и мерителния цилиндър
С.4.5.1. Потопя се поплавъкът в течността за почистване, налята в мерителния цилиндър.
С.4.5.2. Да се накисне за един час, като периодично се завъртва.
С.4.5.3. Да се промие обилно с чешмяна вода, след това с дестилирана вода.
С.4.5.4. Да се подсуши с мека филтърна хартия, неоставяща влакна.
Тази процедура да се направи преди първата употреба, след това редовно.
С.4.6. Резултати
С помощта на плътността r20 се изчислява действителното алкохолно съдържание, като се използват таблици I, II и III от метод "3. Определяне алкохолното съдържание" към приложение № 3, даващи стойността на обемното алкохолно съдържание (об. %) при 20 градуса по Целзий като функция от плътността при 20 градуса по Целзий на водноалкохолни смеси.
С.5. Характеристики на възпроизводимостта (точността) на метода
С.5.1. Статистически резултати от междулабораторния тест
Посочените резултати са получени от международно изпитване за определяне точността на метода в съответствие на международно утвърдените процедури.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 12 |
| Брой проби | 6 |
| Проби | A | B | C | D | E | F |
| Брой избрани лаборато- | 12 | 10 | 11 | 12 | 11 | 9 |
| рии след елиминиране на | ||||||
| отклоняващите се | ||||||
| Брой на отклоняващи | - | 2 | - | 1 | 2 | |
| се лаборатории | ||||||
| Брой приети резултати | 24 | 20 | 22 | 24 | 22 | 18 |
| Средна стойност | 23,80 | 40,09 | 40,29 | 39,26 | 42,38 | 57,16 |
| (x_), об. % | 26,51* | 43,09* | 45,89* | 63,44* | ||
| Станд. отклонение на | 0,048 | 0,065 | 0,042 | 0,099 | 0,094 | 0,106 |
| Отн. станд. отклонение | 0,19 | 0,16 | 0,10 | 0,24 | 0,21 | 0,18 |
| на повторяемост | ||||||
| (RSDr), (%) | ||||||
| Граница на повторяе- | 0,13 | 0,18 | 0,12 | 0,28 | 0,26 | 0,30 |
| мост (r), об. % | ||||||
| Станд. отклонение за | 0,060 | 0,076 | 0,073 | 0,118 | 0,103 | 0,125 |
| възпроизводимост | ||||||
| (SR), об. % | ||||||
| Отн. станд. отклонение | 0,24 | 0,19 | 0,18 | 0,29 | 0,23 | 0,21 |
| за възпроизводимостта | ||||||
| (RSDR),(%) | ||||||
| Граница на възпроизво- | 0,17 | 0,21 | 0,20 | 0,33 | 0,29 | 0,35 |
| димост (R), об. % |
Тип проби:
А - плодов ликьор; двойни с различно съдържание*
В - бренди; двойни произволни
C - уиски; двойни произволни
D - гроздова ракия; двойни с различно съдържание*
Е - ракия; двойни с различно съдържание*
F - ром; двойни с различно съдържание*
1. Еднолитрова колба с нормален сферичен шлиф
2. Ректификационна колона на Вигрьо с дължина 20 cm.
3. Хладник на West с прави стени с дължина 10 cm.
4. Хладник със серпентина-40 cm.
Фиг. Дестилационен апарат за определяне на обемния алкохолен градус на алкохолните напитки
15. Гравиметрично определяне на общия сух екстракт на спиртните напитки (сравнителен метод)
1. Поле на приложение
Този метод се прилага само в случаите, когато сухият екстракт е до 15 g/l.
2. Нормативи
БДС EN ISO 3696:2000. Вода за лабораторни аналитични анализи-спецификации и методи за изпитване
3. Определение
Общият сух екстракт или общото сухо вещество включва всички вещества, които при определени физически условия са нелетливи.
4. Принцип
Претегляне на утайката след изпаряване на спиртната напитка на кипяща водна баня и изсушаване на утайката в лабораторна сушилня.
5. Апаратура и оборудване
5.1. Цилиндрично изпарително блюдо с диаметър 55 mm
5.2. Кипяща водна баня
5.3. Пипета от 25 ml клас А
5.4. Сушилня
5.5. Ексикатор
5.6. Аналитична везна с точност 0,1 mg
6. Вземане на проби
Пробите се съхраняват при стайна температура до извършване на анализа.
7. Начин на работа
7.1. Отпипетират се 25 ml от спиртната напитка, съдържаща по-малко от 15 g/l сухо вещество, в предварително претегленото плоскодънно изпарително блюдо с диаметър 55 mm. По време на първия час от изпаряването блюдото се поставя върху капака на кипяща водна баня, така че течността да не кипи, което може да доведе до загуба вследствие на изкипяване. Оставя се още един час в директен контакт с парите от кипящата водна баня.
7.2. Изсушаването се завършва, като блюдото се постави в сушилня при 105 градуса по Целзий ± 3 градуса по Целзий за два часа. Оставя се блюдото да изстине в ексикатор, след което то се претегля със съдържанието.
8. Изчисление
Масата на утайката, умножена по 40, е равна на сухия екстракт, съдържащ се в спиртната напитка, който се изразява в грамове на литър. Закръглява се до първия знак след десетичната запетая.
9. Точност на метода
9.1. Статистически резултати от междулабораторен тест
9.2. Посочените данни са получени по международно разработен метод за проучване на точността, осъществени в съответствие с международно възприетите процедури (1)(2).
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 10 |
| Брой проби | 4 |
| Проби | A | B | C | D |
| Брой избрани лаборатории след | 9 | 9 | 8 | 9 |
| елиминиране на отклоняващите | ||||
| се резултати | ||||
| Брой на отклоняващи се | 1 | 1 | 2 | - |
| лаборатории | ||||
| Брой приети резултати | 18 | 18 | 16 | 18 |
| Средна стойност (x_), g/l | 9,0 | 9,1 | 10,0 | 11,8 |
| 7,8 | 9,4 | 11,1 | ||
| Станд. отклонение на повто- | 0,075 | 0,441 | 0,028 | 0,123 |
| ряемост (Sr), g/l | ||||
| Отн. станд. отклонение на | 0,8 | 5,2 | 0,3 | 1,1 |
| повторяемост (RSDr), (%) | ||||
| Граница на повторяемост (r), g/l | 0,2 | 1,2 | 0,1 | 0,3 |
| Станд. отклонение за | 0,148 | 0,451 | 0,058 | 0,210 |
| възпроизводимост (SR), g/l | ||||
| Отн. станд. отклонение за въз- | 1,6 | 5,3 | 0,6 | 1,8 |
| производимостта (RSDR),(%) | ||||
| Граница на възпроизводи- | 0,4 | 1,3 | 0,2 | 0,6 |
| мост (R), g/l |
Тип проби:
А - бренди; двойни произволни
В - ром; двойни с различно съдържание
С - гроздова ракия; двойни произволни
D - ракия; двойни с различно съдържание
16. Определяне съдържанието на летливи съединения и на метанол в спиртни напитки (сравнителни методи)
16.1 Общи бележки
1. Определения
Летливите съединения в спиртните напитки включват всички летливи компоненти с изключение на етанол и метанол. Обикновено това са:
• летливи киселини, изразени като оцетна киселина;
• алдехиди, изразени като етанал (ацеталдехид) и фракцията етанал, съдържаща се в 1,1-диетоксиетан (ацетал);
• следните висши алкохоли: пропан-1-ол, бутан-1-ол, бутан-2-ол, метилпропан-1-ол, изразени като индивидуален алкохол, и 2-метилбутан-1-ол и 3-метилбутан-1-ол, изразени като индивидуален алкохол или чрез сумата от двата алкохола;
• етилацетат.
Конвенционалните методи, позволяващи определянето на летливите съединения, са следните:
• летливи киселини, чрез определяне на летливата киселинност;
•алдехиди (етанал и ацетал), етилацетат и висши алкохоли посредством газова хроматография.
2. Газово-хроматографски анализ на летливи съединения
Чрез гaзово-хроматографския метод могат да се определят и летливи съединения, характеризиращи изходната суровина за дестилация, условията на самата дестилация и характерни ароматни компоненти на спиртните напитки.
16.2. Газово-хроматографско определяне на летливи съединения: алдехиди, висши алкохоли, етилацетат и метанол
1. Област на приложение
Този метод е приложим за определянето на:
1,1-диетоксиетан (ацетал), 2-метилбутан-1-ол (амилов алкохол), 3-метилбутан-1-ол(изоамилов алкохол), метанол (метилов алкохол), етил етаноат(етил ацетат), бутан-1-ол (n-бутанол), бутан-2-ол (сек бутанол), 2-метилпропан-1-ол (изобутилов алкохол), пропан-1-ол (n-пропанол) и етанал (ацеталдехид) в спиртните напитки посредством газова хроматография. Той използва вътрешен стандарт, например пентан-3-ол. Концентрациите на определяемия компонент са изразени в грамове на 100 l абсолютен алкохол; алкохолното съдържание на продукта се определя преди анализа. Спиртните напитки, които могат да бъдат изследвани по този метод, включват: уиски, бренди, ром, винена ракия, плодова ракия и гроздова ракия от джибри.
2. Нормативна справка
БДС EN ISO 3696:2000. Лабораторна вода за аналитични цели-спецификации и методи за изпитване
3. Определения
Производни съединения са летливите съединения, които се получават едновременно с етанола при ферментацията, дестилацията и зреенето (отлежаването) на спиртните напитки.
4. Принцип
Производните съединения в спиртните напитки се определят чрез директно впръскване в газово-хроматографска система на спиртната напитка или подходящо разредена спиртна напитка. Преди впръскването на спиртната напитка се добавя подходящ вътрешен стандарт. Производните съединения се разделят на подходяща колона чрез температурна програма и се детектират с помощта на пламъчно-йонизационен детектор (FID). Концентрацията на всяко едно от тях се определя спрямо вътрешен стандарт с помощта на риспонс-фактори, които се получават при калибриране при хроматографски условия, идентични с тези, при които е осъществен анализът на спиртната напитка.
5. Реактиви и материали
Ако няма други указания, следва да се използват само сертифицирани стандартни образци за гaзово-хроматографски анализ и вода от клас минимум 3, съгласно изискванията на БДС ЕN ISO 3696:2000. Използваните при газово-хроматографския анализ сертифицирани стандартни образци обикновено са:
5.1. абсолютен алкохол
5.2. метанол
5.3. пропан-1-ол
5.4. 2-метилпропан-1-ол
5.5. подходящи вътрешни стандарти: пентан-3-ол, пентан-1-ол, 4-метилпентан-1-ол
5.6. 2-метилбутан-1-ол
5.7. 3-метилбутан-1-ол
5.8. етилацетат
5.9. бутан-1-ол
5.10. бутан-2-ол
5.11. ацеталдехид
5.12. ацетал
Ацеталът и ацеталдехидът трябва да се съхраняват на тъмно и при температура, по-ниска от 5 градуса по Целзий. Всички други реактиви могат да се съхраняват при стайна температура.
5.13. За приготвяне на стандартните разтвори се използва 40 % (v/v) разтвор на етанол. За да се приготви разтвор на етанол с концентрация 400 ml/l, следва в мерителна колба с обем един литър да се прибавят 400 ml етанол (5.1), да се долее до марката с дестилирана вода и да се разбърка.
5.14. Приготвяне и съхранение на стандартните разтвори (процедура, използвана за валидиран метод).
Всички стандартни разтвори трябва да се съхраняват при температура, по-ниска от 5 градуса по Целзий, и да се подновяват всеки месец. Масата на компонентите и на разтворите трябва да бъде записвана с точност 0,1 mg.
5.14.1. Стандартен разтвор А
За да се сведе до минимум изпаряването на компонентите, в мерителна колба от 100 ml, съдържаща около 60 ml разтвор на етанол (5.13), се отпипетират посочените реактиви, допълва се до марката с етанолов разтвор (5.13) и се хомогенизира добре. Записват се теглото на колбата, теглото на всяко прибавено съединение, както и общото тегло на съдържанието.
| Компоненти (съединения) | Обем (ml) |
| Метанол (5.2) | 3,0 |
| Пропан-1-ол(5.3) | 3,0 |
| 2-метилпропан-1-ол (5.4) | 3,0 |
| 2-метилбутан-1-ол (5.6) | 3,0 |
| 3-метилбутан-1-ол (5.7) | 3,0 |
| Етилацетат (5.8) | 3,0 |
| Бутан-1-ол (5.9) | 3,0 |
| Бутан-2-ол (5.10) | 3,0 |
| Ацеталдехид (5.11) | 3,0 |
| Ацетал (5.12) | 3,0 |
Забележка 1. Препоръчва се да се добавя ацетал и ацеталдехид най-накрая, за да се сведат до минимум загубите при изпаряването.
5.14.2. Стандартен разтвор В
В мерителна колба от 100 ml, съдържаща около 80 ml разтвор на етанол (5.13), с пипета се прибавят 3 ml пентан-3-ол или друг подходящ вътрешен стандарт (5.5), добавя се етанолов разтвор до марката и се разбърква добре.
Записват се теглото на колбата и на пептан-3-ол или на добавения друг вътрешен стандарт, както и крайното общо тегло на съдържанието.
5.14.3. Стандартен разтвор С
Взема се с пипета 1 ml от разтвор А (5.14.1) и 1 ml от разтвор В (5.14.2) и се прибавят в мерителна колба от 100 ml, съдържаща около 80 ml разтвор на етанол (5.13), добавя се етанолов разтвор (5.13) до марката и се разбърква добре. Записват се теглото на колбата и на всяка добавена съставка, както и крайното общо тегло на съдържанието.
5.14.4. Стандартен разтвор D
За да се контролира последователността на процеса на анализ, се приготвя стандарт за контролиране на качеството с помощта на приготвения вече стандарт А (5.14.1). В мерителна колба 100 ml, съдържаща около 80 ml разтвор на етанол (5.13), с пипета се добавя един милилитър от разтвор А (5.14.1), добавя се разтвор на етанол (5.13) до марката и се разбърква добре. Записват се теглото на колбата и на всеки добавен компонент, както и на крайното общо тегло на съдържанието.
5.14.5. Стандартен разтвор Е
В мерителна колба 100 ml, съдържаща около 80 ml етанолов разтвор (5.13), с пипета се прибавят10 ml от разтвор А (5.14.2), долива се до марката с етанолов разтвор (5.13) и се разбърква добре. Записват се теглото на колбата и на всеки добавен компонент, както и на крайното общо тегло на съдържанието.
5.14.6. Стандартни разтвори за контрол върху линейността на отговор на FID
В отделни мерителни колби с обем 100 ml, съдържащи около 80 ml етанол (5.13), се прибавя с пипета съответно по 0, 0,1, 0,5, 1,0 и 2,0 ml разтвор А (5.14.1) и по един милилитър от разтвор В (5.14.2), долива се с етанолов разтвор (5.13) до марката и се разбърква добре. Записват се теглото на колбата и на всеки добавен компонент, както и на крайното общо тегло на съдържанието.
5.14.7. Стандартен разтвор за контрол на качеството CQ
В претеглена епруветка се прибавят с пипета 9 ml от стандартен разтвор D (5.14.4) и един милилитър от стандартен разтвор Е (5.14.5) и се разбърква добре. Записват се теглото на епруветката и на всеки добавен компонент, както и на крайното общо тегло на съдържанието.
6. Апаратура и оборудване
6.1. Апаратура за измерване на плътност и алкохолно съдържание
6.2. Аналитична везна с възможност за отчитане на резултата до 0,1 mg
6.3. Газов хроматограф с възможност за работа в температурно програмиран режим, снабден с пламъчно-йонизационен детектор и интегратор или друга система за обработка на данните, с възможности за измерване площта или височината на пиковете.
6.4. Хроматографска колона, позволяваща разделянето на определяемите компоненти, така че минималното разрешение между два компонента (освен 2-метилбутан-1-ол и 3-метилбутан-1-ол) да бъде най-малко 1,3.
Забележка 2. Посочените хроматографски колони и условия са подходящи примери:
• Предколона с дължина 1 m и вътрешен диаметър 0,32 mm, свързана с колона СР WAX-57 CB с дължина 50 m и вътрешен диаметър 0,32 mm, с дебелина на филма (стабилизиран полиетиленгликол) 0,2 mm, както и друга колона Carbowax (Карбовакс) 400 с дължина 50 m и вътрешен диаметър 0,32 mm с дебелина на филма 0,2 mm (колоните са свързани чрез връзки, без мъртъв обем).
| Носещ газ и налягане: | Хелий (135 kPa) |
| Температура на колоната- | начална температура 35 °С, |
| задържане 17 min, стъпка | |
| 12 °С/min до 70 °С, задър- | |
| жане при 70 °С за 25 min | |
| Температура на инжектора | -150 °С |
| Температура на детектора | -250 °С |
| Количество на пробата за | един микролитър......split 20 |
| инжектиране- | до 100:1 |
• Предколона с дължина 1 m и вътрешен диаметър 0,32 mm, свързана с колона CP- WAX 57 СВ с дължина 50 m и вътрешен диаметър 0,32 mm, дебелина на филма (стабилизиран полиетиленгликол) 2 mm (колоните са свързани чрез връзки, без мъртъв обем).
| Носещ газ и налягане- | Хелий(65 kPa) |
| Температура на колоната- | начална температура 35 °С, |
| задържане 10 min, стъпка: | |
| 5 °С/min до 110 °С, - 30 | |
| °С/min от 110 °С до 190 | |
| °С, задържане при 190 °С | |
| за 2 min | |
| Температура на инжектора | -260 °С |
| Температура на детектора | -300 °С |
| Количество на пробата | един микролитър......split 55:1 |
| за инжектиране |
• Колона с пълнеж [5 % CW 20 M,Carbopak B( Карбопак В)] с дължина 2 m и вътрешен диаметър 2 mm.
| Температура на колоната- | начална температура 65 °С, |
| задържане 4 min, от 65 до | |
| 140 °С стъпка10 °С/min, | |
| задържане при 140 °С - | |
| 5 min, от 140 °С до 150 | |
| °С, стъпка 5 °С/min, | |
| задържане - 3 min | |
| Температура на инжектора: | 65 °С |
| Температура на детектора: | 200 °С |
| Количество на пробата | един микролитър |
| за инжектиране |
7. Проби и вземане на проби
7.1. Лабораторна проба
Алкохолното съдържание на всяка проба се измерва още при получаването й (6.1).
8. Процедура (използвана за валидирания метод)
8.1. Вземане на проба за изпитване
8.1.1. Претегля се един затворен съд, подходящ за измерване, и се записва неговото тегло.
8.1.2. Добавят се 9 ml лабораторна проба в съда и се записва теглото на пробата (Mпроба).
8.1.3. Добавя се един милилитър стандартен разтвор E (5.14.5) и се записва теглото (MIS).
8.1.4. Разклаща се пробата (поне 20 пъти). Преди анализа пробите се съхраняват при температура, по-ниска от 5 °С, за да се избегнат до минимум загубите от изпарението.
8.2. Празна проба
8.2.1. С помощта на везна съгласно т.6.2 се претегля затворен съд, подходящ за теглене, и се отбелязва теглото с отчитане до четвъртия десетичен знак.
8.2.2. В съда с пипета се добавят 9 ml от разтвор на етанол (5.13) и се записва теглото.
8.2.3. Добавя се един милилитър стандартен разтвор Е (5.14.5) и се записва теглото.
8.2.4. Пробата се разклаща (поне 20 пъти). Преди анализа пробата се съхранява при температура, по-ниска от 5 °С, за да се избегнат до минимум загубите от изпарението.
8.3. Предварителен тест
Инжектира се стандартен разтвор С (5.14.3), за да се уверим, че всички вещества са добре разделени (с изключение на 2-метилбутан-1-ол и 3-метилбутан-1-ол).
8.4.Калибриране
Калибрирането се проверява чрез следната процедура. Извършва се трикратно инжектиране на всеки от стандартните разтвори, съдържащи вътрешен стандарт (IS). За всяко инжектиране от площите или височините на пиковете на интегратора се изчислява съотношението R за всеки компонент и графично се представя като функция от стойността на концентрацията на тези компоненти по отношение на вътрешния стандарт (IS). Получава се линейна графика с коефициент на корелация минимум 0,99.
| Площ или височина на пика на отделния компонент | |
| R = | |
| Площ или височина на пика на вътрешния стандарт (IS) | |
| Концентрация на отделния компонент (mg/g) | |
| С = | |
| Концентрация на вътрешния стандарт (IS)(mg/g) |
8.5. Определяне
В хроматографа се инжектира стандартен разтвор С (5.14.3) и два стнадартни разтвора CQ (5.14.7). След това се инжектира с неизвестните проби (подготвени съобразно точки 8.1 и 8.2), като се внася стандартният разтвор за контрол на качеството на всеки 10 проби, за да се осигури аналитична стабилност. На всеки 5 проби се инжектира стандартен разтвор С (5.14.3).
9. Изчисление
Възможно е да се прилага автоматизирана система за управление на данните с оглед те да могат да бъдат контролирани съгласно принципите на описания метод. Измерват се площта или височината на пиковете на отделните компоненти и на вътрешния стандарт.
9.1. Изчисление на риспонс фактора
От хроматограмата на инжектирания стандартен разтвор С (5.14.3) се изчисляват риспонс факторите за всеки отделен компонент чрез уравнението:
Риспонс фактор =
| Площ или височина на пика на (IS) | |
| = | _______________________________________________ x |
| Площ или височина на пика на отделния компонент | |
| Концентрация на отделния компонент (mg/g) | |
| (1) | |
| Концентрация на IS (mg/g) |
където:
IS е вътрешният стандарт;
концентрация на отделния компонент = концентрацията на отделния компонент в разтвор С (5.14.3);
концентрация IS-концентрацията на вътрешния стандарт в разтвор С (5.14.3).
9.1.2. Анализ на пробите
С помощта на уравнение (2) се изчислява концентрацията на всеки компонент в пробите.
Концентрации на отделните компоненти в mg/g =
| Площ или височина на пика на отделния компонент | |
| = | |
| Площ или височина на пика на вътрешния стандарт | |
| MIS (g) | |
| Концентрация IS (mg/g) • RF (2) | |
| Мпр (g) |
където:
Мпр e теглото на пробата (8.1.2);
МIS - теглото на вътрешния стандарт (8.1.3);
концентрация IS = концентрацията на вътрешния стандарт в разтвор Е (5.14.5);
RF = риспонс факторът, изчислен с уравнение (1).
9.1.3. Анализ на стандартен разтвор за контрол на качеството.
Аналитичният добив на търсената стойност за всеки отделен компонент, съдържащ се в стандартите CQ (5.14.7), се изчислява с формулата:
% аналитичен добив на отделните компоненти, съдържащи се в еталоните СQ =
| Концентрация на компонентa в стандартa CQ | ||
| = | • 100 (3) | |
| Концентрация на компонентa в разтвор D |
Концентрацията на анализирания компонент в стандартния разтвор CQ се изчислява чрез използване на уравнения (1) и (2).
9.2. Крайно представяне на резултатите
За пробите резултатите се превръщат от микрограма на грам в грама за 100 литра абсолютен алкохол с помощта на уравнението:
| Концентрация (mg/g)10•r | ||
| Концентрация, в g за | = | ________________________ (4) |
| 100 l абсолютен алкохол | Алкохолно съдържание | |
| (об. %)•1000 |
където:
r е плътността, kg/m3.
Резултатите се изразяват с три цифри и най-много с една цифра след десетичния знак, например 11,4 g/100 l абсолютен алкохол.
10. Осигуряване и контрол на качеството (използвани за валидиран метод)
Чрез уравнение (2) се изчислява концентрацията на всеки определяем компонент в стандартните разтвори за контрол на качеството, приготвени съгласно процедурата, описана в т.8.1.1 до т.8.1.4. За изчисляване на аналитичния добив на планираната стойност се използва уравнение (3). Ако получените резултати са в границите ± 10 % от теоретичните им стойности за всеки определяем компонент, анализът може да бъде извършен. В противен случай се препоръчва да се открие причината за неточността и да се предприемат необходимите коригиращи действия.
11. Характеристики на ефективността (точността) на метода.
Статистически резултати от междулабораторни сравнителни изпитвания: следващите таблици представляват стойности за следните анализирани съединения: етанал, етилацетат, ацетал, общ етанал, метанол, бутан-2-ол, пропан-1-ол, бутан-1-ол, 2-метилпропан-1-ол, 2-метилбутан-1-ол, 3-метилбутан-1-ол.
Данните са получени от международно проучване върху ефективността (точността) на метода, осъществени в съответствие с международно възприетите процедури.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 5 |
| Определяемо съединение | етанал |
| Проби | A | B | C | D | E |
| Брой избрани лаборатории | 28 | 26 | 27 | 27 | 28 |
| след елиминиране на | |||||
| отклоняващите се | |||||
| Брой на отклоняващи се | 2 | 4 | 3 | 3 | 2 |
| лаборатории | |||||
| Брой приети резултати | 56 | 52 | 54 | 54 | 56 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 63,4 | 71,67 | 130,4 | 38,4 | 28,6 |
| 13,8* | 52,2* | ||||
| Станд. отклонение на | 3,3 | 1,9 | 6,8 | 4,1 | 3,6 |
| повторяемост (Sr), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение на | 5,2 | 2,6 | 5,2 | 15,8 | 8,9 |
| повторяемост (RSDr), (%) | |||||
| Граница на повторяемост | 9,3 | 5,3 | 19,1 | 11,6 | 10,1 |
| (r), mg/g | |||||
| Станд. отклонение за | 12 | 14 | 22 | 6,8 | 8,9 |
| възпроизводимост (SR), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение за въз- | 18,9 | 19,4 | 17,1 | 26,2 | 22,2 |
| производимостта (RSDR),(%) | |||||
| Граница на възпроизво- | 33,5 | 38,9 | 62,4 | 19,1 | 25,1 |
| димост (R), mg/g |
Тип проби:
А - бренди; двойни произволни;
В - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова ракия; двойни произволни;
D - уиски; двойни с различно съдържание*;
E - ром; двойни с различно съдържание*;
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 5 |
| Определяемо съединение | етила- |
| цетат |
| Проби | A | B | C | D | E |
| Брой избрани лаборатории след | 24 | 24 | 25 | 24 | 24 |
| елиминиране на отклоняващите се | |||||
| Брой на отклоняващи се | 2 | 2 | 1 | 2 | 2 |
| лаборатории | |||||
| Брой приети резултати | 48 | 48 | 50 | 48 | 48 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 96,8 | 1046 | 120,3 | 112,5 | 99,1 |
| 91,8* | 117,0* | ||||
| Станд. отклонение на | 2,2 | 15 | 2,6 | 2,1 | 2,6 |
| повторяемост (Sr), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение на | 2,3 | 1,4 | 2,1 | 2,0 | 2,4 |
| повторяемост (RSDr), (%) | |||||
| Граница на повторяемост | 6,2 | 40,7 | 7,2 | 5,8 | 7,3 |
| (r), mg/g | |||||
| Станд. отклонение за въз- | 6,4 | 79 | 8,2 | 6,2 | 7,1 |
| производимост (SR), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение за | 6,6 | 7,6 | 6,8 | 6,2 | 6,6 |
| възпроизводимостта | |||||
| (RSDR), (%) | |||||
| Граница на възпроиз- | 17,9 | 221,9 | 22,9 | 17,5 | 20,0 |
| водимост (R), mg/g |
Тип проби:
A - бренди; двойни произволни;
B - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова ракия; двойни произволни;
D - уиски; двойни с различно съдържание*;
E - ром; двойни с различно съдържание*.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 5 |
| Определяемо съединение | ацетал |
| Проби | A | B | C | D | E |
| Брой избрани лаборатории | 20 | 21 | 22 | 17 | 21 |
| след елиминиране на | |||||
| отклоняващите се | |||||
| Брой на отклоняващи | 4 | 3 | 2 | 4 | 3 |
| се лаборатории | |||||
| Брой приети резултати | 40 | 42 | 44 | 34 | 42 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 35,04 | 36,46 | 68,5 | 20,36 | 15,1 |
| 6,60* | 28,3* | ||||
| Станд. отклонение на | 0,58 | 0,84 | 1,6 | 0,82 | 1,9 |
| повторяемост (Sr), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение на | 1,7 | 2,3 | 2,3 | 6,1 | 8,7 |
| повторяемост (RSDr), (%) | |||||
| Граница на повторяемост | 1,6 | 2,4 | 4,4 | 2,3 | 5,3 |
| (r), mg/g | |||||
| Станд. отклонение за въз- | 4,2 | 4,4 | 8,9 | 1,4 | 3,1 |
| производимост (SR), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение за | 12,1 | 12,0 | 13,0 | 10,7 | 14,2 |
| възпроизводимостта (RSDR),(%) | |||||
| Граница на възпроизводимост | 11,8 | 12,2 | 25,0 | 4,0 | 8,7 |
| (R), mg/g |
Тип проби:
A - бренди; двойни произволни;
B - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова ракия; двойни произволни;
D - уиски; двойни с различно съдържание*;
E - ром; двойни с различно съдържание*.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 5 |
| Определяемо съединение | oбщ |
| етанал |
| Проби | A | B | C | D | E |
| Брой избрани лаборатории | 23 | 19 | 22 | 21 | 22 |
| след елиминиране на | |||||
| отклоняващите се | |||||
| Брой на отклоняващи се | 1 | 5 | 2 | 3 | 2 |
| лаборатории | |||||
| Брой приети резултати | 46 | 38 | 44 | 42 | 44 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 76,5 | 85,3 | 156,5 | 45,4 | 32,7 |
| 15,8* | 61,8* | ||||
| Станд. отклонение на | 3,5 | 1,3 | 6,5 | 4,4 | 3,6 |
| повторяемост (Sr), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение на | 4,6 | 1,5 | 4,2 | 14,2 | 7,6 |
| повторяемост (RSDr), (%) | |||||
| Граница на повторяемост | 9,8 | 3,5 | 18,3 | 12,2 | 10,0 |
| (r), mg/g | |||||
| Станд. отклонение за въз- | 13 | 15 | 24,1 | 7,3 | 9,0 |
| производимост (SR), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение за | 16,4 | 17,5 | 15,4 | 23,7 | 19,1 |
| възпроизводимостта (RSDR),(%) | |||||
| Граница на възпроизводимост | 35,2 | 41,8 | 67,4 | 20,3 | 25,2 |
| (R), mg/g |
Тип проби:
A - бренди; двойни произволни;
B - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова ракия; двойни произволни;
D - уиски; двойни с различно съдържание*;
E - ром; двойни с различно съдържание*.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 5 |
| Определяемо съединение | метанол |
| Проби | A | B | C | D | E |
| Брой избрани лаборатории | 26 | 27 | 27 | 28 | 25 |
| след елиминиране на | |||||
| отклоняващите се | |||||
| Брой на отклоняващи се | 4 | 3 | 3 | 1 | 4 |
| лаборатории | |||||
| Брой приети резултати | 52 | 54 | 54 | 56 | 50 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 319,8 | 2245 | 1326 | 83,0 | 18,6 |
| 61,5* | 28,9* | ||||
| Станд. отклонение на | 4,4 | 27 | 22 | 1,5 | 1,3 |
| повторяемост (Sr), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение на | |||||
| повторяемост (RSDr), (%) | 1,4 | 1,2 | 1,7 | 2,1 | 5,6 |
| Граница на повторяемост | 12,3 | 74,4 | 62,5 | 4,3 | 3,8 |
| (r), mg/g | |||||
| Станд. отклонение за въз- | 13 | 99 | 60 | 4,5 | 2,8 |
| производимост (SR), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение за | 3,9 | 4,4 | 4,6 | 6,2 | 11,8 |
| възпроизводимостта (RSDR), (%) | |||||
| Граница на възпроизводимост | 35,2 | 278,3 | 169,1 | 12,5 | 7,9 |
| (R), mg/g |
Тип проби:
A - бренди; двойни произволни;
B - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова ракия; двойни произволни;
D - уиски; двойни с различно съдържание*;
E - ром; двойни с различно съдържание*.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 4 |
| Определяемо съединение | бутан |
| -2-ол |
| Проби | A | B | C | E |
| Брой избрани лаборатории след | 21 | 27 | 29 | 25 |
| елиминиране на отклоняващите се | ||||
| Брой на отклоняващи се лаборатории | 4 | 3 | 1 | 3 |
| Брой приети резултати | 42 | 54 | 58 | 44 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 5,88 | 250,2 | 27,57 | 5,38 |
| 14,12* | ||||
| Станд. отклонение на | 0,40 | 2,2 | 0,87 | 0,64 |
| повторяемост (Sr), mg/g | ||||
| Отн. станд. отклонение на | 6,8 | 0,9 | 3,2 | 6,4 |
| повторяемост (RSDr), (%) | ||||
| Граница на повторяемост (r), mg/g | 1,1 | 6,1 | 2,5 | 1,8 |
| Станд. отклонение за | 0,89 | 13 | 3,2 | 0,87 |
| възпроизводимост (SR), mg/g | ||||
| Отн. станд. отклонение за | 15,2 | 5,1 | 11,5 | 8,7 |
| възпроизводимостта (RSDR),(%) | ||||
| Граница на възпроизводимост | 2,5 | 35,5 | 8,9 | 2,4 |
| (R), mg/g |
Тип проби:
A - бренди; двойни произволни;
B - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова ракия; двойни произволни;
E - ром; двойни с различно съдържание*.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 5 |
| Определяемо съединение | пропан-1-ол |
| Проби | A | B | C | D | E |
| Брой избрани лаборатории след | 29 | 27 | 27 | 29 | 29 |
| елиминиране на отклоняващите се | |||||
| Брой на отклоняващи се | 2 | 4 | 3 | 2 | 2 |
| лаборатории | |||||
| Брой приети резултати | 58 | 54 | 54 | 58 | 58 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 86,4 | 3541 | 159,1 | 272,1 | 177,1 |
| 229,3* | 222,1* | ||||
| Станд. отклонение на | 3,0 | 24 | 3,6 | 2,3 | 3,3 |
| повторяемост (Sr), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение на | 3,4 | 0,7 | 2,3 | 0,9 | 1,6 |
| повторяемост (RSDr), (%) | |||||
| Граница на повторяемост | 8,3 | 68,5 | 10,0 | 6,4 | 9,1 |
| (r), mg/g | |||||
| Станд. отклонение за въз- | 5,3 | 150 | 6,5 | 9,0 | 8,1 |
| производимост (SR), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение за въз- | 6,1 | 4,1 | 4,1 | 3,6 | 4,1 |
| производимостта (RSDR),(%) | |||||
| Граница на възпроизводимост | 14,8 | 407,2 | 18,2 | 25,2 | 22,7 |
| (R), mg/g |
Тип проби:
A - бренди; двойни произволни;
B - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова ракия; двойни произволни;
D - уиски; двойни с различно съдържание*;
E - ром; двойни с различно съдържание*.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 5 |
| Определяемо съединение | бутан-1-ол |
| Проби | A | B | C |
| Брой избрани лаборатории след | 20 | 22 | 22 |
| елиминиране на отклоняващите се | |||
| Брой на отклоняващи се лаборатории | 4 | 4 | 6 |
| Брой приети резултати | 40 | 44 | 44 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 3,79 | 5,57 | 7,54 |
| Станд. отклонение на повторяемост | 0,43 | 0,20 | 0,43 |
| (Sr), mg/g | |||
| Отн. станд. отклонение на | 11,2 | 3,6 | 5,6 |
| повторяемост (RSDr), (%) | |||
| Граница на повторяемост (r), mg/g | 1,1 | 0,6 | 1,2 |
| Станд. отклонение за възпроизводимост | 0,59 | 0,55 | 0,82 |
| (SR), mg/g | |||
| Отн. станд. отклонение за | 15,7 | 9,8 | 10,8 |
| възпроизводимостта (RSDR),(%) | |||
| Граница на възпроизводимост (R), mg/g | 1,7 | 1,5 | 2,3 |
Тип проби:
A - бренди; двойни произволни;
B - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова ракия; двойни произволни.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 5 |
| Определяемо съединение | 2-метилпропан-1-ол |
| Проби | A | B | C | D | E |
| Брой избрани лаборатории след | 28 | 31 | 30 | 26 | 25 |
| елиминиране на | |||||
| отклоняващите се | |||||
| Брой на отклоняващи се | 3 | 0 | 1 | 5 | 6 |
| лаборатории | |||||
| Брой приети резултати | 56 | 62 | 60 | 52 | 50 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 174,2 | 111,7 | 185,0 | 291,0 | 115,99 |
| 246,8* | 133,87* | ||||
| Станд. отклонение на | 2,3 | 1,6 | 2,5 | 1,8 | 0,74 |
| повторяемост (Sr), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение на | 1,3 | 1,4 | 1,3 | 0,7 | 0,6 |
| повторяемост (RSDr), (%) | |||||
| Граница на повторяемост | 6,4 | 4,5 | 6,9 | 5,0 | 2,1 |
| (r), mg/g | |||||
| Станд. отклонение за въз- | 8,9 | 8,9 | 9,7 | 6,0 | 6,2 |
| производимост (SR), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение за въз- | 5,1 | 8,0 | 5,2 | 2,2 | 5,0 |
| производимостта (RSDR),(%) | |||||
| Граница на възпроизводимост | 24,9 | 24,9 | 27,2 | 16,9 | 17,4 |
| (R), mg/g |
Тип проби:
A - бренди; двойни произволни;
B - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова ракия; двойни произволни;
D - уиски; двойни с различно съдържание*;
E - ром; двойни с различно съдържание*.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 5 |
| Определяемо съединение | 2-метилбутан-1-ол |
| Проби | A | B | C | D | E |
| Брой избрани лаборатории | 25 | 26 | 25 | 27 | 25 |
| след елиминиране на | |||||
| отклоняващите се | |||||
| Брой на отклоняващи се | 3 | 2 | 3 | 1 | 2 |
| лаборатории | |||||
| Брой приети резултати | 50 | 52 | 50 | 54 | 50 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 113,0 | 48,3 | 91,6 | 72,1 | 39,5 |
| 45,2* | 61,5* | ||||
| Станд. отклонение на | 2,1 | 1,5 | 1,7 | 2,3 | 2,3 |
| повторяемост (Sr), mg/g | |||||
| Отн. станд.отклонение на | 1,9 | 3,1 | 1,8 | 3,9 | 4,5 |
| повторяемост (RSDr), (%) | |||||
| Граница на повторяемост | 6,0 | 4,2 | 4,7 | 6,4 | 6,3 |
| (r), mg/g | |||||
| Станд. отклонение за въз- | 7,4 | 3,8 | 6,6 | 4,7 | 4,5 |
| производимост (SR), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение за въз- | 6,6 | 7,9 | 7,2 | 8,1 | 8,8 |
| производимостта (RSDR),(%) | |||||
| Граница на възпроизводимост | 20,8 | 10,7 | 18,4 | 13,3 | 12,5 |
| (R), mg/g |
Тип проби:
A - бренди; двойни произволни;
B - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова ракия; двойни произволни;
D - уиски; двойни с различно съдържание*;
E - ром; двойни с различно съдържание*.
| Година на вземане на междулабораторни | 1997 |
| проби | |
| Брой лаборатории | 32 |
| Брой проби | 5 |
| Определяемо съединение | 3-метилбутан-1-ол |
| Проби | A | B | C | D | E |
| Брой избрани лаборатории | 23 | 23 | 24 | 27 | 21 |
| след елиминиране на | |||||
| отклоняващите се | |||||
| Брой на отклоняващи се | 5 | 5 | 4 | 1 | 6 |
| лаборатории | |||||
| Брой приети резултати | 46 | 46 | 48 | 54 | 42 |
| Средна стойност (x_), mg/g | 459,4 | 242,7 | 288,4 | 142,2 | 212,3 |
| 120,4* | 245,6* | ||||
| Станд. отклонение на | 5,0 | 2,4 | 3,4 | 2,4 | 3,2 |
| повторяемост (Sr), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение на | 1,1 | 1,0 | 1,2 | 1,8 | 1,4 |
| повторяемост (RSDr), (%) | |||||
| Граница на повторяемост | 13,9 | 6,6 | 9,6 | 6,6 | 9,1 |
| (r), mg/g | |||||
| Станд. отклонение за въз- | 29,8 | 13 | 21 | 8,5 | 6,7 |
| производимост (SR), mg/g | |||||
| Отн. станд. отклонение за въз- | 6,5 | 5,2 | 7,3 | 6,5 | 2,9 |
| производимостта (RSDR),(%) | |||||
| Граница на възпроизво- | 83,4 | 35,4 | 58,8 | 23,8 | 18,7 |
| димост (R), mg/g |
Тип проби:
A - бренди; двойни произволни;
B - вишновка; двойни произволни;
C - гроздова; двойни произволни;
D - уиски; двойни с различно съдържание*;
E - ром; двойни с различно съдържание*.
17. Определяне на захари
Захарите в спиртни напитки се определят след инверсия съгласно БДС 6410 (Вина и спиртни напитки. Методи за определяне на захарите).
